鞘内注射促皮质素抑制甲醛痛敏大鼠脊髓NOS阳性神经元增多

目的:研究鞘内注射促皮质素(Cor)对甲醛痛敏大鼠脊髓背角一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元增多的影响。方法:采用痛级均数(PIR)测定、NADPH-d组织化学法、Fos免疫组织化学法染色,观察鞘内注射(ith)Cor对甲醛痛敏大鼠脊髓背角NOS阳性神经元、Fos免疫反应神经元、NOS/Fos双标记神经元及痛敏的影响。结果:ith Cor(0.5-1.5U)均能显著抑制甲醛引起的大鼠脊髓背角NOS、Fos、NOS/Fos阳性神经元的增多和痛敏反应,其作用为ith NOS底物左旋精氨酸(Arg,5-15nmol)部分翻转。结论:Cor通过抑制大鼠脊髓背角NOS阳性神经元的增多抑制痛敏。     

NO介导吗啡戒断大鼠脊髓Fos蛋白和NMDA_(1A)受体mRNA表达的增加

目的:观察NO在纳洛酮催促吗啡戒断大鼠脊髓神经元活动变化中的作用。方法:采用Fos免疫组织化学、NADPH-d组织化学、Fos/NADPH-d双标、鞘内注射、反义寡核苷酸和RT-RCR技术。结果:急性应用纳洛酮和慢性应用吗啡对大鼠脊髓Fos蛋白及NADPH-d阳性神经元表达无明显影响,二者也无Fos/NADPH-d双标神经元表达;纳洛酮催促吗啡戒断大鼠脊髓Fos蛋白、NADPH-d阳性神经元、纤维和终末表达明显增加,且出现Fos/NADPH-d双标神经元表达。预先鞘内注射nNOS反义寡核苷酸明显降低吗啡戒断症状评分,减少吗啡戒断大鼠脊髓Fos蛋白及NMDA_(1A)R mRNA表达。结论:NO介导吗啡戒断大鼠脊髓Fos和NMD_(1A)R mRNA表达的增加。     

Spantide抑制甲醛炎性痛大鼠脊髓一氧化氮合酶表达和一氧化氮含量的增加(英文)

目的　观察鞘内注射P物质 (SP)拮抗剂spantide { [D Arg1,D Trp7,9,Leu11] substanceP}对炎性痛大鼠L5节段脊髓后角一氧化氮合酶 (NOS)表达和腰膨大一氧化氮 (NO)含量的影响 ,以探讨痛及痛过敏时脊髓NOS表达和NO生成增多的机制。方法　大鼠右后掌足底皮下注射 5 %甲醛 0 .2mL诱发炎性痛及痛过敏 ,NADPH d组化法观察脊髓后角NOS表达的变化 ,硝酸还原酶法测定NO含量的变化。结果　皮下注射甲醛 2 4h后 ,双侧L5节段脊髓后角NOS表达及腰膨大部位NO生成明显增加 ;注射甲醛前 5min鞘内注射spantide (5 μg ,10 μL) ,则明显抑制甲醛所致的NOS表达及NO生成增加。结论　初级传入末梢释放的SP在甲醛炎性痛及痛过敏时脊髓NOS表达及NO生成增多中发挥作用     

鞘内注射可乐定对甲醛致痛大鼠脊髓磷酸化cAMP反应结合蛋白表达影响

目的研究鞘内注射可乐定对大鼠甲醛炎性痛脊髓磷酸化cAMP反应结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法24只成年雄性SD大鼠,体质量230～270g,随机分为3组:空白对照组(NS组),致痛组(F组),可乐定组(CF组),每组8只鞘内注射可乐定或生理盐水后,在大鼠左足底部注射5%甲醛建立模型,记录大鼠1h内每5min的缩腿舔爪时间。待行为学观察结束,取脊髓L4~L5节段免疫组织化学染色,计数pCREB免疫反应阳性(pCREB-IR)神经细胞数量。结果CF组的缩腿舔爪时间显著短于F组(P<0.01)。F组pCREB-IR神经细胞数量多于NS组(P<0.01),CF组pCREB-IR神经细胞数量少于F组(P<0.01)。结论鞘内注射可乐定能明显抑制甲醛致痛大鼠的疼痛反应。甲醛致痛大鼠脊髓pCREB表达增加,可乐定可使甲醛致痛大鼠pCREB表达减少。pCREB可能是参与鞘内注射可乐定镇痛的重要分子物质。     

海马内注射MK-801对甲醛炎性痛大鼠海马NO含量的影响

目的观察海马内给予N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801对足底注射甲醛诱导的海马一氧化氮生成增加的影响。方法采用硝酸还原酶法测定海马组织NO含量。结果足底注射甲醛后大鼠即出现舔、咬注射侧脚掌等疼痛相关表现,注射甲醛后12h时,海马组织NO含量显著增加;预先海马内注射MK-801,可使甲醛炎性痛大鼠海马组织NO含量明显降低。结论海马内注射MK-801可逆转甲醛炎性痛诱导的海马NO产生的增加,海马内NO生成增加可能与NMDA受体的活动有关。     

一氧化氮合酶抑制剂抑制吗啡依赖及戒断大鼠脊髓神经元ERK的表达

目的探讨鞘内分别注射非选择性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME、选择性神经元型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲哚(7-NI)对吗啡戒断大鼠戒断症状和痛敏行为以及脊髓神经元p-ERK表达的影响。方法采用吗啡依赖及戒断模型,分为正常对照组、依赖组、戒断组、L-NAME组(L-NAME)、7-NI组(7-NI),分别作行为学评分(n=8)、免疫组织化学(n=6)和免疫印迹检测(n=4)。结果实验结果表明,①鞘内注射L-NAME、7-NI可明显减轻吗啡依赖大鼠戒断症状,戒断组戒断症状评分为28.6±4.89,L-NAME组、7-NI组分别为22.1±4.52(P<0.05)、16.2±3.99(P<0.01);戒断组促诱发痛评分(touch evoked agitationscores,TEA score)为13.5±2.55,L-NAME组、7-NI组分别为9.8±3.11(P<0.05)、7.5±2.56(P<0.01)。②鞘内注射L-NAME、7-NI可明显减少胸腰段脊髓背角Fos阳性神经元的数目,L-NAME组、7-NI组分别为293±47、267±52,均低于戒断组(380±71,P<0.05,P<0.01)。③L-NAME、7-NI组p-ERK阳性神经元的数目分别为46.8±11.58、40.5±8.55,均低于戒断组(66.6±11.6,P<0.05,P<0.01),两给药组脊髓p-ERK蛋白的表达也减少。④W estern b lot显示:鞘内注射NOS明显抑制吗啡戒断大鼠脊髓p-ERK蛋白表达增加。结论脊髓水平NO参与吗啡依赖和戒断反应,ERK信号通路可能介导NO的上述作用。     

甲醛足底致痛大鼠脊髓后角神经元内蛋白激酶C活性改变对一氧化氮合酶的影响

目的通过改变蛋白激酶C（protein kinaseC，PKC）的活性观察其对甲醛炎性痛及痛觉过敏时大鼠脊髓后角一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）尤其是对诱生型NOS（induciable NOS,iNOS）的影响，以探讨在该过程中PKC的作用机制。方法将实验动物54只分为9组，每组6只，分别为正常组、甲醛12h组、甲醛24h组、甲醛12h加0．9％氯化钠溶液组、甲醛24h加0．9％氯化钠溶液组、甲醛12h加佛波醇脂（PMA）组、甲醛24h加PMA组、甲醛12h加灯盏花素乙（CH）组和甲醛24h加CH组。先进行疼痛行为学检测，然后分别于注射甲醛后12,24h将大鼠麻醉后取材，采用免疫组织化学方法观察脊髓后角iNOS阳性神经元数目及染色深度，以探讨PKC对NOS的影响。结果与甲醛12h组比较。甲醛12h加PMA组iNOS阳性细胞数明显增加（P〈0．01），神经细胞及神经纤维染色也明显加深（P〈0．01）；甲醛12h加CH组iNOS阳性细胞数明显减少（P〈0．01），神经细胞及神经纤维染色明显变浅（P〈0．01）。同时产生相应的行为痛觉过敏变化。结论鞘内注射PKC兴奋剂PMA能显著增加L5脊髓后角神经元NOS的活性；鞘内注射PKC抑制剂CH能显著抑制L5脊髓后角神经元iNOS的活性。在甲醛炎性痛及痛觉过敏中，脊髓后角iNOS活性在一定程度上受PKC调控。     

鞘内注射哌唑嗪对氯胺酮抗伤害作用的影响

目的　探讨脊髓α1 受体和氯胺酮(Ket, 37. 5mg·kg-1,ip)抗伤害作用的关系。方法　用热水甩尾法观察大鼠鞘内预先注射α1 受体拮抗剂哌唑嗪(Pra, 10, 30μg)对Ket抗伤害作用的影响。并用c fos基因免疫组织化学技术,观察Ket对痛刺激诱发的大鼠脊髓c- fos表达的调节作用及鞘内预先注射Pra(30μg)对Ket调节作用的影响。结果　鞘内单独注射各剂量Pra对动物痛阈均无明显影响(P>0 .05), 鞘内预注Pra(10μg)对Ket抗伤害作用无明显影响(P>0 .05)。而鞘内预注Pra(30μg)则可明显减弱Ket抗伤害作用(P<0 .05)。痛刺激前给予Ket明显减少背角各层Fos免疫阳性神经元的数量(P<0 .05),Ket对痛刺激诱发的脊髓ⅠⅣ层c fos表达的抑制作用可被鞘内预注Pra所减弱(P<0 .05)。结论　脊髓α1 受体参与Ket抗伤害作用。     

鞘内注射ω-芋螺毒素SO3对神经痛大鼠脊髓Fos及Jun蛋白表达的影响

目的：ω-芋螺毒素SO3是从海洋生物线纹芋螺中提取的一种多肽,为新型、特异性N型电压敏感性钙离子通道阻滞剂.通过研究鞘内注射ω-芋螺毒素SO3对坐骨神经慢性挤压伤（CCI模型）大鼠脊髓Fos、Jun蛋白表达的影响,探讨N型钙通道在伤害性信息传递中的作用.方法：雄性SD大鼠72只,随机均分为9组,其中3组为假手术或单纯制作CCI模型后3、14 d;3组为单次鞘内注射生理盐水或不同剂量SO3;另3组为持续鞘内注射生理盐水或不同剂量SO3共 7 d.在预定时间点,经左心室灌注4%多聚甲醛,取L4-L6段脊髓制备石蜡切片.用相应抗体行免疫组织化学染色,检测各组动物脊髓标本中Fos样或Jun样免疫反应阳性细胞的数量.结果：大鼠CCI后脊髓背角Fos样或Jun样免疫反应阳性细胞数量显著升高;单次或持续鞘内注射生理盐水对其无明显影响;单次或持续鞘内注射SO3均可剂量依赖性抑制其上升.结论：神经损伤后脊髓Fos、Jun蛋白表达增加,鞘内注射SO3可以减轻此种反应,提示N型钙通道阻滞剂在脊髓水平可以部分阻断伤害性信息传递.     

鞘内注射促皮质素抑制甲醛痛敏大鼠脊髓NOS阳性神经元增多

目的：研究鞘内注射促皮质素（Ｃｏｒ）对甲醛痛敏大鼠脊髓北角一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性神经元增多的影响。方法：采用痛经均数（ＰＩＲ）测定、ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法、Ｆｏｓ免痛组织化学法梁 色,观察鞘内注射９ｉｔｈ）Ｃｏｒ对甲醛痛敏大鼠脊髓北角ＮＯＳ阳性神经元、Ｆｏｓ免疫反应神经元、ＮＯＳ／Ｆｏｓ双标记神经元及痛敏的影响。结果：ｉｔｈ Ｃｏｒ（０．５～１．５Ｕ）均能显著抑制甲醛引起的大鼠脊髓北角ＮＯＳ