乳癌组织TSLC1基因mRNA表达及启动子甲基化状态

目的探讨乳癌组织中非小细胞肺癌抑制因子（TSLC1）基因mRNA表达及其启动子甲基化状态。方法应用实时荧光定量PCR和甲基化特异性PCR,分别检测39例人乳癌组织及对应癌旁组织中TSLC1基因mRNA表达及其启动子甲基化状态,并探讨二者之间的关系。结果乳癌组织中TSLC1mRNA的表达量是癌旁组织的0.44倍。乳癌组织及癌旁组织中TSLC1基因甲基化率分别为56.4%、10.3%,乳癌组织中TSLC1基因甲基化率明显高于相应癌旁组织（χ2=16.673,P〈0.01）。甲基化的癌组织中TSLC1mRNA的表达量是非甲基化者的0.60倍,表达TSLC1mRNA的癌组织的甲基化率为50%,不表达者为100%,两者之间差异有显著性（P=0.046）。结论 TSLC1基因异常甲基化是其在乳癌组织中表达缺失或下调的原因之一,在乳癌的发生发展中起一定作用,可能成为乳癌的早期诊断及治疗靶点基因之一。     

探讨MUC1基因多态性与胃癌遗传易感性的关系

目的：探讨 MUC1基因多态性与胃癌遗传易感性的关系。方法采用病例对照研究对150例胃癌患者（胃癌组）和150名健康查体正常者（对照组）的MUC1基因rs2070803单核苷酸多态性进行检测,并分析其与胃癌易感性之间的关系。结果 MUC1基因rs2070803位点3种基因型GG、GA、AA在胃癌病例组中频率分别为80.7%、16.0%和3.3%,而在对照组中分别为64.7%、32.0%和3.3%。与GG型比较,GA/AA型基因型者胃癌发生的危险性降低,OR值为0.439（0.259～0.742）。结论 MUC1基因rs2070803位点GG、GA基因型降低汉族人群的胃癌易感性。     

湖北地区汉族变应性哮喘患儿Tim-3启动子区基因多态性研究

目的 探讨湖北地区汉族儿童T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白．3（Tim-3）启动子区1541位C〉T和574位G〉T单核苷酸变异及其与变应性哮喘易感性之间的关系。方法 分别采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）和引物特异PCR-核酸序列测定技术检测湖北143例哮喘患儿和72名健康儿童Tim-3启动子区1541位C〉T和574位G〉T单核苷酸变异，讣算基因型和等位基因频率。结果 湖北地区健康儿童Tim-3启动子区1541位C／C、C／T和T／T基因型频率分别是0．961、0．039和0，而哮喘患儿频率分别为0．935、0．065、0，其基因型频率与对照组差异无统计学意义（r=0．3825，P=0．5362）；湖北健康儿童中Tim-3启动子区574位G／G、G／T和T／T基因型频率分别为0．992、0．008和0，而哮喘患儿频率分别为0．941、0．059、0，两组基因型频率差异有统计学意义（χ^2=4．134，P=0．042）。结论 湖北汉族儿童Tim-3启动子区存在多态性变异，其中574位G〉T多态性可能与湖北汉族儿童变应性哮喘易感性有关。     

纤溶酶原激活物抑制因子1基因启动子区4G／5G多态性与妊娠糖尿病的相关性研究

目的研究妊娠妇女纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）基因启动子区4G／SG多态性的分布并探讨其在广西南宁地区汉族妇女妊娠糖尿病（GDM）发病中的作用。方法研究对象为60例GDM患者（GDM组）和60例正常孕妇（对照组）,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR—RFLP）法测定其PAI-1基因启动子区4G／5G基因,并用发色底物法测定血浆PAI-1活性。结果GDM组怀孕前体质量指数（BMI）和血浆PAI-1活性均显著高于对照组23．1±1．9VS21．6±1．6（P〈0．01）;（788．4±66．1）AU／LVS（713．4±35．4）AU／L（P〈0．01）。PAI-1基因4G／4G、4G／5G、5G／5G3种基因型和4G、5G2种等位基因在两组中的分布差异均有统计学意义（P〈0．05）,GDM组4G／4G基因型频率和4G等位基因频率高于对照组。4G／4G基因型孕妇的怀孕前BMI和血浆PAI-1活性显著高于4G／5G和5G／56基因型者（P〈0．01）;体质量过大孕妇PAI-1活性显著高于体质量正常者（P〈0．01）。多元逐步线性回归分析提示血浆PAI-1活性与基因分型高度相关（r=0．582,P〈0．001）。结论PAI-1基因启动子区4G／4G基因型频率在GDM孕妇显著增高,该基因型可能为广西南宁地区汉族人群GDM的易感基因。GDM妇女血浆PAI1活性增高可能与PAI-1基因启动子区4G等位基因频率增高有关。孕妇怀孕前BMI增高可能与PAI-1基因启动子区4G／4G基因型频率增高有关,并可能与GDM发生有关。     

RASSF1A基因甲基化在乳癌中的研究进展

随着人们对肿瘤的深入研究．发现多数实体肿瘤存在3号染色体短臂（3p）缺失，提示3p区域所含的基因对肿瘤发生发展起着重要作用，可能隐含肿瘤抑制基因。因此，人们从染色体3p上发现了BLU、FUS1、RASSF1A等抑癌基因。现将RASSF1A甲基化在乳癌中的研究进展综述如下。     

XRCC1基因单核苷酸多态性与肿瘤易感性

肿瘤的发生是一复杂的生物学过程,其中及时、有效的DNA损伤修复在一定程度上抑制了肿瘤的发生。X射线修复交叉互补基因(XRCC)是参与DNA修复的基因之一,DNA修复基因单核苷酸多态性导致个体DNA修复能力的差异,是肿瘤易感因素之一。本文对目前研究热点的XRCC1基因的单核苷酸多态性与肿瘤的易感性进行了综述。     

DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌的关系研究

目的探讨DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态与肝细胞癌发生的相关性。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测33例肝细胞癌及相应的癌旁组织和20例正常对照肝组织中DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化状态,分析上述组织中两种基因甲基化状态与临床资料的关系。结果DKK-3和WIF-1基因在癌组织中甲基化率明显高于癌旁组织和正常组织(P<0.05,P<0.05),而癌旁组织和正常组织中DKK-3和WIF-1基因甲基化率相比无明显差异;癌组织中DKK-3基因甲基化与临床资料中年龄及肝硬化有关;癌组织中WIF-1基因甲基化与临床资料中乙肝表面抗原、肝硬化有关。结论DKK-3和WIF-1基因启动子甲基化与HCC的发生相关;DKK-3和WIF-1基因致肝细胞癌的发生机制可能与肝硬化致肝细胞癌的发生机制不尽相同,两者是否有相互作用尚不清楚。     

BRCA1基因单核苷酸多态性与广东汉族女性散发性乳腺癌易感相关性研究

目的探讨BRCA1基因启动子区rs799906位点和编码区rs799917位点单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与广东汉族女性散发性乳腺癌易感性的关系。方法利用Sequenom Mass Array iPLEX GOLD系统对107例散发性乳腺癌患者及93例健康对照者的BRCA1基因两个SNP位点（rs799906,rs799917）进行检测,并对检测结果进行χ2检验和非条件Logistic回归分析。结果 rs799906位点TT、TC和CC三种基因型在病例组和对照组的分布频率有差异（χ2=8.407,P=0.018）。相对TT基因型而言,TC杂合型能增加乳腺癌发生的危险性（OR=2.566;95%CI：1.101～5.983;P〈0.05）,但等位基因T和C的频率分布无显著差异（χ2=2.169,P=0.141）。rs799917位点CC、CT和TT三种基因型的频率和等位基因C和T的频率在病例组和对照组的分布均无显著性差异（χ2=3.994,P=0.136;χ2=0.903,P=0.342）。结论 BRCA1多态性位点rs799906TC杂合型与散发性乳腺癌发病风险有相关性;而rs799917位点多态性与散发性乳腺癌发病风险无相关性。     

易感基因和单核苷酸多态性与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌作为女性健康的杀手,占各种恶性肿瘤的7%~10%,我国虽然是乳腺癌的低发地区,但仍稳居城市女性肿瘤首位,发病率为49.25/100 000,而且近年来呈现年轻化和病例数明显增加的趋势[1].随着细胞分子生物技术的发展,人们对乳腺癌发病的分子遗传机制的研究也越来越深入,乳腺癌的易感基因和单核苷酸多态性(single nuclectide polymorphism,SNP)易感位点成为了研究的热点和难点.     

FCER1A 启动子区基因多态性与儿童哮喘

目的 探讨FCER1A 启动子区基因多态性与儿童哮喘和血清总IgE 水平的关系.方法 基因组DNA 提取自286 例哮喘儿童和212 例健康体检并排除过敏性疾病史儿童血液标本,采用高温连接酶(LDR)反应检测FCER1A 启动子区位点rs2427827 和rs2251746 基因变异,分析两组样本基因型与等位基因分布状况,与GenBank 公布的FCER1A 基因序列(NT＿ 004487.19 GI:224514980 )比较.同时,检测病例组样本血清总IgE 水平,观察其在不同基因型患者中的分布差异.结果 FC-ER1A 启动子区位点rs2427827 和rs2251746 呈多态性,与儿童哮喘无显著关联(P ＝0.524,P ＝0.813 ),儿童哮喘组rs2251746 基因突变与血清总IgE 水平关系密切(P ＝0.041 ).结论 rs2251746 TC 基因型与血清总IgE 水平增高显著相关,可能增加患哮喘发生的风险.     

胃癌病人外周血XPD751基因多态性与奥沙利铂化疗敏感性的关系

目的探讨胃癌病人外周血白细胞中DNA修复基因XPD751基因多态性与奥沙利铂化疗效果的关系。方法收集经病理学检查确诊的胃癌128例,所有病例化疗前取静脉血,提取白细胞DNA,用TaqMan-MGB探针等位基因分型技术检测XPD751基因型。比较其基因型与接受奥沙利铂化疗病人临床疗效的关系。结果在128例胃癌病人中,XPD751A／A、A／C和C／C基因型分别为104（81．3％）、23（17．9％）和1例（0．8％）。经化疗后,63例病人有效,总有效率为49．2％。XPD751A／A、A／C＋C／C基因型有效率分别为53．3％（56／105）、30．4％（7／23）,两者相比差异有统计学意义（χ^2=3．958,P（O．05）。携带A／A基因型病人的腹泻程度高于A／C＋C／C基因型病人（χ^2=7．212,P〈O．05）。结论XPD751基因多态性可能与胃癌对奥沙利铂为基础的化疗敏感性相关。     

STK15在乳癌组织中的表达

目的探讨乳癌组织中癌基因STK15的表达情况。方法应用免疫组化SP法检测41例乳癌及30例乳腺纤维瘤组织中STK15蛋白的表达。结果 STK15蛋白在乳癌和乳腺纤维瘤组织中的阳性表达率分别为68.3%（28/41）、36.7%（11/30）,二者之间差异有显著性（χ^2=6.999,P〈0.05）。STK15蛋白表达与乳癌的TNM分期及组织学分级有关（χ^2=8.794、8.261,P〈0.05）,且STK15蛋白阳性表达强度与乳癌病人的TNM分期有关（χ^2=5.895,P〈0.05）。结论乳癌组织中存在STK15基因高表达,STK15基因可能是导致乳癌发生的因素之一。     

胃癌病人ERCC1和XPD基因多态性与奥沙利铂化疗预后关系

目的了解DNA损伤修复基因ERCC1 Asn118Asn和XPD Lys751Gln多态性与接受以奥沙利铂为基础化疗的晚期胃癌病人预后的关系。方法 90例晚期胃癌病人接受奥沙利铂化疗前抽取静脉血并提取DNA,应用real-ti me PCR法进行基因分型。比较病人不同基因型与生存期的关系。结果晚期胃癌病人ERCC1Asn118Asn基因型频率为C/C 47.78%,C/T42.22%,T/T10.00%;XPD基因型频率分别为A/A80.00%,A/C16.67%,C/C 3.33%。90例胃癌病人中位无疾病进展生存期（TTP）6.4个月,总生存期（OS）9.5个月。ERCC1C/C基因型病人中位TTP为6.6个月,OS为9.7个月;C/T＋T/T型病人中位TTP为6.1个月,OS为9.1个月,二者差异无统计学意义（P〉0.05）。XPD A/A基因型病人中位TTP为6.7个月,OS为9.7个月;A/C＋C/C基因型病人中位TTP为4.8个月,OS为7.8个月,二者差异有统计学意义（χ2=20.244、17.113,P〈0.05）。同时携带ERCC1 C/C及XPD A/A基因型、ERCC1 C/C及XPD A/C＋C/C基因型、ERCC1 C/T＋T/T及XPD A/A基因型、ERCC1 C/T＋T/T及XPD A/C＋C/C基因型的病人中位TTP分别为6.9、4.7、6.3和5.0个月,OS为9.9、7.7、9.3、8.0个月,4组差异有统计学意义（χ2=18.331、12.742,P〈0.05）。结论 XPD Lys751Gln基因多态性与以接受奥沙利铂为基础化疗的晚期胃癌病人的生存期有关,ERCC1 Asn118Asn基因多态性与接受奥沙利铂为基础化疗的晚期胃癌病人的生存期无关。     

人乳癌细胞小球藻CvFad3基因的表达和作用

目的构建真核表达载体pEGFP-C3-n-3,检测小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3在人乳癌MCF-7细胞中的表达和作用。方法通过RT-PCR法扩增得到CvFad3基因,将CvFad3基因cDNA插入到真核表达载体pEGFP-C3中,构建重组表达载体pEGFP-C3-n-3,并将其转染入MCF-7细胞中,设空载体pEGFP-C3为对照组。采用RT-PCR检测CvFad3基因的表达,MTT法分析CvFad3基因对MCF-7细胞增殖的影响,气相色谱检测CvFad3基因对MCF-7细胞n-3多不饱和脂肪酸含量的影响。结果构建的重组载体pEGFP-C3-n-3转染入乳癌MCF-7细胞48 h后可检测到CvFad3基因mRNA的条带,而转染pEGFP-C3的MCF-7细胞48 h后检测不到CvFad3基因mRNA的条带。与对照组比较,转染pEGFP-C3-n-3的细胞MTT吸光度明显降低（t=6.039,P〈0.01）;人乳癌细胞MCF-7细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量显著升高。结论重组载体pEGFP-C3-n-3构建成功,CvFad3基因能在MCF-7细胞内有效异源表达,且抑制了MCF-7细胞的增殖,增加了细胞膜n-3多不饱和脂肪酸的含量。     

晚期胃癌XPG及GSTP1基因多态性与奥沙利铂化疗效果的关系

目的探讨人着色性干皮病G组（XPG）及谷胱甘肽巯基转移酶P1（GSTP1）基因多态性与晚期胃癌以奥沙利铂为主的化疗敏感性的关系。方法 80例Ⅳ期胃癌病人化疗前采集外周静脉血,提取DNA,用实时荧光PCR技术检测XPG C46T及GSTP1 A105G基因的单核苷酸多态性（SNP）分型,比较不同基因型与化疗效果的关系。结果 80例病人XPG C46T基因C/C与T/T＋C/T及GSTP1 A105G基因A/A与A/G＋G/G基因型化疗有效率比较差异均有显著意义（χ^2=5.459、5.291,P〈0.05）。同时携带XPG C46T C/C和GSTP1 A105G A/G＋G/G基因型病人化疗敏感性是同时携带XPG C46T C/T＋T/T和GSTP1 A105G A/A基因型病人的4.886倍（OR=4.886,P〈0.05）。结论 XPG C46T、GSTP1 A105G基因多态性可能与晚期胃癌病人接受以奥沙利铂为主一线化疗药物化疗后的效果有关。     

乳腺癌组织中雌激素受体与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1表达

目的观察乳腺癌组织中雌激素受体(ER)与C-erbB-2基因、多药耐药基因MDR1(P-gp)蛋白表达并探讨其相互关系。方法用免疫组织化学法(S-P法)对162例乳腺癌手术切除标本进行ER、C-erbB-2、MDR1(P-gp)检测,结果作统计学分析。结果ER、C-erbB-2、MDR1(P-gp)的阳性表达率各为53.7%、37.0%和27.7%。ER在分化越高和无腋窝淋巴结转移者的乳腺癌中其阳性表达率高,C-erbB-2在分化越差的乳腺癌中其阳性表达率高,组间相比有显著差异(P<0.05)。在有腋窝淋巴结转移的乳腺癌中C-erbB-2、MDR1(P-gp)表达率明显升高。C-erbB-2与MDR1(P-gp)的阳性表达率间具有一定的正相关性,C-erbB-2表达与ER表达呈负相关。结论ER、C-erbB-2基因、MDR1(P-gp)在乳腺癌中有一定的内在联系,联合检测有助于乳腺癌预后的判断,为合理制定综合治疗方案提供依据。     

HPV16 E6和E7基因序列多态性与宫颈癌临床病理特征相关性

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6和E7转化基因序列多态性,及其与宫颈癌临床病理特征的相关性。方法从77例宫颈癌组织中筛选出51例HPV16阳性标本,扩增E6及E7基因,PCR产物进行序列测定。应用DNAStar生物软件进行核苷酸和氨基酸序列的分析。结果宫颈癌组织中HPV16 E6共测得6个突变位点,均为错义突变;最常见的突变位点为T178G/A（D29E）,突变频率为56.00%,T178G/A突变在不同分化程度、不同分期、不同肿瘤大小及有无淋巴结转移组的分布频率差异无显著性（P〉0.05）。宫颈癌组织中HPV16 E7共测得4个突变位点,2个为错义突变;最常见的突变位点为A647G（N29S）,突变频率为68.09%,A647G在中分化及低分化组的突变频率分别为56.67%、88.24%,两组间突变频率差异有显著性（χ2=4.98,P〈0.05）;A647G在不同分期、不同肿瘤大小、有无淋巴结转移组的分布频率差异无显著性（P〉0.05）。结论青岛地区HPV16 E6基因T178G/A突变与宫颈癌的发生发展无关,HPV16 E7基因A647G突变与宫颈癌的分化程度呈负相关,可以作为评估宫颈癌恶性程度的指标。     

XPG基因多态性与奥沙利铂对晚期胃癌疗效的相关性

目的研究人着色性干皮病G组（XPG）基因C46T与以奥沙利铂为主：的化疗方案对晚期胃癌疗效的相关性。方法用REAL—TIMEPCR技术检测92例晚期胃癌病人外周静脉血DNA的XPG基因的单核苷酸多态性（SNP）分型。比较3种基因型与病人的2周期化疗临床疗效的关系。结果92例病人的C／C、T／T、C／T基因型分别占51．09％、38．04％、10．87％。C／C与T／T＋C／T基因型化疗有效率分别为76．59％、53．33％,两组比较差异有显著意义（χ^2=5．484,P〈O．05,OR=2．942,95％CI=1．195～7．248）。结论XPG基因多态性与奥沙利铂疗效之间存在相关性,其检测结果可以作为胃癌选择奥沙利铂化疗的参考。     

XPD/ERCC2多态性与晚期结直肠癌对奥沙利铂敏感性关系

目的了解XPD/ERCC2 Lys751Gln（C→A,35931）多态性与晚期结直肠癌对奥沙利铂为主化疗敏感性的关系。方法70例Ⅳ期结直肠癌病人化疗前取静脉血并提取DNA,以real-time PCR法对XPD/ERCC2基因进行单核苷酸多态性（SNP）分型。对病人行奥沙利铂化疗,观察客观缓解率,比较不同基因型与化疗效果的关系。结果XPD/ERCC2 Lys751Gln基因位点在本研究人群中的突变类型及频率为：C/C55.72%,C/A35.71%,A/A8.57%。70例结直肠癌病人化疗有效率（CR＋PR＋SD）为54.29%,C/C与C/A＋A/A基因型在化疗有效组（CR＋PR＋SD）和无效组（PD）之间分布的差异有统计学意义（χ^2=7.926,P〈0.05）。结论XPD/ERCC2 Lys751Gln基因多态性与晚期结直肠癌病人接受奥沙利铂一线化疗后的临床疗效有关。