细辛脑联合布地奈德干预哮喘小鼠气道重塑以及炎症因子的表达

目的探讨骨桥蛋白(OPN)和血管内皮生长因子(VEGF)在哮喘小鼠模型中的表达和意义以及布地奈德联合细辛脑雾化吸入对模型小鼠气道重塑、细胞因子OPN和VEGF的干预作用。方法将40只BALB/C雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德组和细辛脑联合布地奈德组,每组10只。采用鸡卵白蛋白(OVA)诱导致敏建立哮喘模型。HE染色观察小鼠肺组织病理改变,运用医学图像分析软件测定支气管管腔内周长(Pbm)、支气管管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm)、支气管平滑肌细胞计数(N),将WAt、WAm、N用Pbm标准化;酶联免疫吸附法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中OPN和VEGF的含量。Western-blot分析小鼠肺组织中OPN和VEGF的含量。数据采用单因素方差分析(One-Way ANOVA),多组间两两比较采用LSD-t法,P<0.05为差异有统计学意义。结果哮喘组BALF中OPN和VEGF水平[(389.1±10.9)ng/ml、(62.3±10.3)pg/ml]高于布地奈德[(110.4±8.6)ng/ml、(38.1±7.2)pg/ml]和细辛脑联合布地奈德组[(97.6±7.9)ng/ml、(30.1±6.8)pg/ml],差异具有统计学意义(均P<0.05)。western-blot结果显示细辛脑联合布地奈德组小鼠肺组织中OPN和VEGF的阳性表达低于哮喘组和布地奈德组,差异有统计学意义(均P<0.05)。图像分析显示:哮喘组WAt/Pbm、WAm/Pbm分别高于C组(均P<0.05),细辛脑联合布地奈德组WAt/Pbm、WAm/Pbm及N/Pbm低于布地奈德组(均P<0.05)。结论哮喘疾病中OPN和VEGF含量明显升高,通过减少哮喘小鼠肺组织中OPN和VEGF的含量是细辛脑联合布地奈德减轻哮喘炎症以及改善哮喘早期气道重塑的机制之一。     

多西环素对哮喘大鼠气道炎症及气道重塑的影响

目的：探讨多西环素对哮喘大鼠气道炎症及重塑的预防作用及可能机制。方法将实验 SD 大鼠分为正常对照组、哮喘组、多西环素干预组。计数大鼠肺泡灌洗液中的细胞数并进行分类;检测血清中的白细胞介素5(IL-5)、白细胞介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;检测肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肌动蛋白α(α-SMA)的表达;测定支气管基底膜周径(Pbm)、总管壁面积(WAt)、平滑肌面积(WAm)等反映气道壁厚度的指标,分析多西环素的影响。结果哮喘组与多西环素干预组的肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸性粒细胞计数、支气管壁厚度、平滑肌厚度、血清 IL-5、IL-13及 TNF-α水平、肺组织 MMP-9、α-SMA 平均光度值均明显高于正常对照组,其中多西环素干预组均明显低于哮喘组(P <0.05)。结论多西环素可以影响炎症介质的生成及通过抑制 MMP-9的活性从而减轻哮喘的气道炎症及气道重塑。     

平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响

目的 探讨平喘固本合剂对哮喘小鼠气道急性炎症的影响及可能的机制。方法 健康雌性昆明小鼠40只,随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、平喘固本合剂治疗组（C组）。用卵清清蛋白致敏建立哮喘小鼠气道急性炎症模型,各组分别给予相应药物治疗10 d。对各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞进行分类与计数,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织的病理变化,同时应用ELISA法测定BALF中白细胞介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）水平的变化。结果 与A组比较,B组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞明显增多（F=85.70-127.69,P＜0.05）,哮喘模型制作成功;C组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞较B组均明显减少,但较A组升高,差异有显著性（q=2.15-10.08,P＜0.05）。与A组比较,B组中IL-4含量、IL-4/IFN-γ明显升高,IFN-γ明显降低,差异有统计学意义（F=186.17-378.06,q=17.02-21.46,P＜0.05）;与B组比较,C组IL-4、IL-4/IFN-γ降低,IFN-γ升高,差异有显著性（q=4.80-7.18,P＜0.05）。HE染色显示,C组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及肺组织黏膜水肿等炎症表现较B组明显减轻。 结论 平喘固本合剂对急性哮喘小鼠气道炎症有明显的抑制作用,其作用机制可能与其抑制IL-4的表达、抑制炎性细胞聚积及促进IFN-γ的表达有关。     

白细胞介素-25与支气管哮喘小鼠发病的关系

目的探讨IL-25与支气管哮喘发病的关系。方法将30只健康雌性Balb/c小鼠随机分为3组：分别为卵白蛋白（OVA）致敏并激发的哮喘模型组（A组）,OVA）致敏、激发并予糖皮质激素治疗组（B组）及正常对照组（C组）,每组10只。于末次激发后24h后各组小鼠摘眼球取血,ELISA法检测其血清IL-25、IFN-γ及IL-4水平。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行嗜酸性粒细胞（EOS）计数,HE染色观察各组肺组织病理改变。RT-PCR法检测各组肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达。结果 1、B组多数小鼠未见明显行为学异常反应,肺组织病理损害较A组明显减轻,BALF中EOS计数（126.2±10.8）×103/L亦显著低于A组（324.7±13.6）×103/L（P〈0.01）。2、A组小鼠血清IL-25、IL-4水平[（80.66±3.06）pg/ml,（124.7±4.13）pg/m]均高于C组[（46.25±1.90）pg/ml,（32.73±2.20）pg/ml],IFN-γ水平[（45.25±5.34）pg/ml]低于C组[（80.56±2.49）pg/ml]其差异均有统计学意义（P〈0.01）。3、A组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均高于C组（P〈0.01）,B组小鼠肺组织IL-25mRNA和IL-4mRNA表达均低于A组（P〈0.01）。A组小鼠肺组织IL-25mRNA表达量与BALF中EOS计数呈正相关（r=0.901,P〈0.01）。结论 IL-25参与了哮喘小鼠的发病,在哮喘的发病中起促炎作用,其促进哮喘发病的作用可以被激素抑制。     

雾化吸入细辛脑对哮喘小鼠中白细胞介素25水平的影响

目的观察细辛脑对哮喘小鼠血清、肺泡灌洗液和肺组织中IL-25浓度的影响,初步探讨细辛脑在哮喘小鼠治疗中的作用。方法取40只6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组、哮喘组、细辛脑组、地塞米松组,每组10只,采用鸡卵白蛋白(chicken ovalbumin)致敏和激发小鼠建立哮喘模型,对照组均以生理盐水代替;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;光学显微镜下计数小鼠外周血中嗜酸粒细胞及白细胞总数;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-25(IL-25)浓度;用免疫荧光实时定量方法(RT-PCR)检测小鼠肺组织中IL-25 m RNA的表达水平。结果 HE染色可见哮喘组小鼠肺组织炎性浸润,细辛脑及地塞米松组炎性浸润程度较哮喘组轻;哮喘组中嗜酸粒细胞总数高于对照组(P<0.05),而细辛脑组及地塞米松组中嗜酸粒细胞总数均低于哮喘组,且具有统计学差异(P<0.05);哮喘组血清及BALF中IL-25的浓度较对照明显增高(P<0.05),细辛脑组及地塞米松组中IL-25的浓度比哮喘组明显降低(P<0.05);哮喘组小鼠肺组织IL-25 m RNA相对表达量明显高于对照组(P<0.05),而细辛脑组及地塞米松组均低于哮喘组(P<0.05)。结论细辛脑能减少嗜酸粒细胞及IL-25的生成,从而抑制气道炎症,减轻气道炎性反应,对治疗哮喘有一定的作用。     

瘦素在肥胖哮喘小鼠气道重构中的作用

目的探讨脂肪因子瘦素在支气管哮喘气道重构中的作用。方法高脂饮食制造肥胖模型,经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白（OVA）制作慢性哮喘模型。45只雌性C57／6J小鼠随机分为对照组,单纯哮喘组,肥胖哮喘组,每组15只,于末次激发48h内处死小鼠;计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类。肺组织HE观察各组小鼠肺组织病理变化及ELISA法测定血清中瘦素水平。结果肥胖哮喘组小鼠BALF中自细胞总数及嗜酸性粒细胞比例以及气道管壁厚度和气道平滑肌厚度均较单纯哮喘组和对照组显著增加（P〈0．05）。对照组血清瘦素为（1438．54&#177;208．14）pg／mL,明显低于单纯哮喘和肥胖哮喘组[（1677,75&#177;214．36）pg／mL,（2114．20&#177;189．15）pg／mL,P〈0,05）],血清瘦素水平与气管壁厚度和气道平滑肌厚度呈正相关（P〈0．05）。结论肥胖通过瘦素参与了哮喘气道重构过程,纠正瘦素失衡有望成为肥胖哮喘患者治疗的新方向。     

瘦素在肥胖哮喘小鼠气道重构中的作用

目的探讨脂肪因子瘦素在支气管哮喘气道重构中的作用。方法高脂饮食制造肥胖模型,经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白(OVA)制作慢性哮喘模型。45只雌性C57/6J小鼠随机分为对照组,单纯哮喘组,肥胖哮喘组,每组15只,于末次激发48 h内处死小鼠;计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类,肺组织HE观察各组小鼠肺组织病理变化及ELISA法测定血清中瘦素水平。结果肥胖哮喘组小鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例以及气道管壁厚度和气道平滑肌厚度均较单纯哮喘组和对照组显著增加(P0.05)。对照组血清瘦素为(1 438.54±208.14)pg/mL,明显低于单纯哮喘和肥胖哮喘组[(1 677.75±214.36)pg/mL,(2 114.20±189.15)pg/mL,P0.05)],血清瘦素水平与气管壁厚度和气道平滑肌厚度呈正相关(P0.05)。结论肥胖通过瘦素参与了哮喘气道重构过程,纠正瘦素失衡有望成为肥胖哮喘患者治疗的新方向。     

下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响及信号通路的研究

目的:观察下呼吸道流感嗜血杆菌定植对哮喘小鼠气道炎症的影响,并研究其信号通路。方法:采用C57/B6和TLR4-/-小鼠,分别用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发制备慢性哮喘小鼠模型,用流感嗜血杆菌琼脂菌珠制作气道定植模型(注菌组为2组,注菌后第7天和第21天组),同时设置对应时间(第7天和第21天)的0.9%NaCl溶液注射组及单纯流感定植组、单纯哮喘组,每种小鼠各8组,共16组。在哮喘小鼠气道注菌之后的第7、21天处死小鼠,检测血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,采用免疫组织化学法检测小鼠肺组织髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)和核因子κB(nuclear factorκB, NF-κB)的表达,并分别与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射、单纯哮喘对照小鼠相比较;再将C57/B6与TLR4-/-小鼠的实验结果进行比较,同时比较各组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中的细胞总数。结果:与相同时间的单纯流感定植及0.9%NaCl溶液注射的对照小鼠相比,有流感嗜血杆菌呼吸道定植的C57/B6和TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均升高(P均0.05);与同时间对应组C57/B6小鼠相比,合并流感嗜血杆菌呼吸道定植的TLR4-/-哮喘小鼠血清中TNF-α含量、肺组织中MyD88和NF-κB的表达以及BALF中的细胞总数均降低P均0.05)。结论:流感嗜血杆菌在下呼吸道定植可以通过激活TLR4-MyD88通路,促进转录因子NF-κB的表达,加重哮喘的气道炎症,这可能是哮喘发病的重要机制之一。     

银杏叶提取物拮抗哮喘大鼠气道炎症的机制探讨

目的:探讨银杏叶提取物(Egb)拮抗哮喘大鼠气道炎症的可能机制.方法:30只SD大鼠随机分3组(每组10只),分别为对照组、哮喘组和治疗组.采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入激发法复制哮喘大鼠模型.对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及细胞分类计数;ELIA法检测大鼠血清白细胞介素13(IL-13)的浓度;免疫组化法测定肺组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达.结果:与对照组比较,哮喘组大鼠BALF中白细胞总数及细胞分类计数百分比、血清IL-13浓度均升高,肺组织ICAM-1表达增强(P＜0.05).Egb能够减少气道炎细胞浸润,降低血中IL-13水平,并抑制肺组织ICAM.1的表达(P＜0.05).结论:IL-13和ICAM-1在哮喘中发挥重要作用;Egb能够通过降低IL-13的水平,抑制肺组织ICAM-1的表达,减少气道炎细胞募集,从而减轻气道炎症.     

柴油车尾气对小鼠肺部氧化应激作用及气道炎症变化的研究

目的观察柴油车尾气对小鼠肺脏的氧化应激及气道炎症、病理变化的影响。 方法将36只6~8周龄的雄性小鼠随机分成三组：A组（对照组）、B组（小排量车尾气污染组）、C组（大排量车尾气污染组）,每组12只。柴油车尾气对小鼠染毒4周（B、C组小鼠分别吸入1.4 L、2.8 L排量的尾气）,A组正常饲养,观察所有小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞学、肺组织病理学变化,免疫组织化学检测核因子κB（NF-κB）的活化及硝基酪氨酸（3-NT）的表达。 结果B、C组小鼠BALF中的白细胞总数、淋巴细胞及中性粒细胞分类计数与A组比较,差异均有统计学意义（F=24.25、28.12、18.03,P均< 0.05）,且C组BALF中的淋巴细胞和中性粒细胞计数比B组更多（P均< 0. 05）。同样在小鼠肺组织中,B、C组淋巴细胞和中性粒细胞计数与A组相比,差异均有统计学意义（F=20.35、12.61,P均< 0. 05）,且C组肺组织中的淋巴细胞和中性粒细胞计数比B组更多（P均< 0.05）;另外B、C组肺组织内出现气道上皮细胞脱落、支气管周围炎性细胞浸润及基底膜纤维化等变化。免疫组织化学结果提示三组肺组织内NF-κB的活化[（6.5 ± 2.4）%、（12.9 ± 4.1）%、（19.4 ± 6.4）%]及3-NT的表达（2.2 ± 0.7、3.7 ± 1.1、5.6 ± 1.6）比较,差异均有统计学意义（F=23.90、24.35,P均< 0. 05）,且C组表达都高于B组（P均< 0.05）。进一步相关性分析显示,小鼠肺组织中3-NT蛋白表达与NF-κB的蛋白表达、BALF中淋巴细胞数量都具有正相关性（r=0.659、0.633,P均< 0. 05）。 结论柴油车尾气可促进小鼠肺组织的氧化应激,产生更多3-NT,从而激活NF-κB,产生更严重的气道炎症和病理改变。     

血必净注射液对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的研究血必净注射液对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨干预气道黏液高分泌的机制。方法卵蛋白腹腔注射致敏小鼠,32只小鼠随机分组为：对照组、哮喘组、地塞米松治疗组和血必净治疗组,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达变化。结果 （1）与对照组小鼠气道MUC5A mRNA表达（0.377±0.021）相比,哮喘组（1.103±0.087）明显增多（P〈0.01）;地塞米松治疗组（0.403±0.038）及血必净治疗组（0.437±0.031）小鼠气道MUC5A mRNA表达较哮喘组明显降低（P〈0.01）;（2）与对照组小鼠BALF表达IL-4[（22.812±1.978）ng/L]及IFN-γ[（101.232±9.664）ng/L]比较,哮喘组BALF表达IL-4[（87.234±6.901）ng/L]水平升高（P〈0.01）,而IFN-γ表达[（47.231±3.887）ng/L]明显降低（P〈0.01）;与哮喘组比较,地塞米松治疗组（[36.289±3.012）ng/L]及血必净治疗组IL-4水平[（38.112±2.761）ng/L]均显著降低（P〈0.01）;结论血必净注射液降低IL-4和MUC5AC的表达,提示在抑制气道黏液高分泌及控制哮喘方面具有意义。     

哮喘小鼠下呼吸道流感嗜血杆菌定植的研究

目的：建立哮喘合并下呼吸道流感嗜血杆菌定植小鼠模型,并进行评价。方法：将80只小鼠按随机数字表法分为正常组、正常注菌（流感嗜血杆菌）组 、哮喘组 、哮喘注菌（流感嗜血杆菌）组。哮喘组、哮喘注菌组用卵清蛋白（ovalbumin, OVA）致敏和激发小鼠制作哮喘模型,正常注菌组、哮喘注菌组小鼠气管内滴注琼脂包被的流感嗜血杆菌,每组各取一半小鼠分别在气道滴注之后的第7天和第21天处死,取肺组织进行病理观察,行气管细菌培养,测定肺泡灌洗液（broncheoalveolar lavage fluid,BALF）的细胞计数,检测血清和BALF中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）水平。结果：与正常注菌组及哮喘组（未注菌）相比,哮喘注菌组小鼠有明显的哮喘和感染表现;病理学结果显示其气道管壁增厚、黏膜水肿,管腔内有黏液分泌,且有大量炎症细胞浸润;气道形态学参数分析显示,其气管壁及气管平滑肌增厚;BALF中白细胞总数和中性粒细胞计数增多;血清和BALF中TNF-α水平升高;注菌后第7天和第21天气管细菌培养可见流感嗜血杆菌。结论：用OVA制备哮喘动物模型,并在气道内注入琼脂包被的流感嗜血杆菌,可以建立哮喘合并呼吸道流感嗜血杆菌定植的动物模型,造成肺部气道重塑和炎症反应。     

平喘固本合剂对哮喘小鼠气道慢性炎症及重塑的影响及其作用机制

目的 探讨平喘固本合剂对哮喘小鼠的气道慢性炎症及重塑的作用及其相关作用机制.方法 24只昆系小鼠建立哮喘小鼠模型,按随机数字表法分为3组：正常对照组、哮喘模型组、平喘固本合剂治疗组,每组各8只.对各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中各种细胞进行分类并计数,肺组织病理切片行HE染色后观察气道重塑情况并检测气道管壁厚度,采用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子（VEGF）、核转录因子κB（NF-κB）的表达情况.结果 （1）肺组织形态学变化：HE染色显示平喘固本合剂治疗组较哮喘模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜气道组织水肿、上皮细胞脱落等表现明显减轻.（2）各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞分类计数：哮喘模型组嗜酸性粒细胞计数[（2.15 ±0.44）×108/L]、气管壁厚度[（16.66±1.52） μm2/μm]、气道上皮组织中NF-κB、VEGF表达水平（36.01±4.78、35.87±4.92）明显高于正常对照组嗜酸性粒细胞计数[（0.03 ±0.03）×108/L]、气管壁厚度[（6.61±1.14） μm2/μm]、气道上皮组织中NF-κB、VEGF表达水平（12.78±1.47、11.57±1.64）,两组比较差异有统计学意义（P均＜0.01）.平喘固本合剂治疗组BALF中嗜酸性粒细胞数[（0.35±0.12）×108/L]、气管壁厚度[（11.57±1.26） μm2/μm]及NF-κB（29.13±1.92）、VEGF （28.28±2.02）明显低于哮喘模型组,两组比较差异有统计学意义（P均＜0.01）.结论 平喘固本合剂可以下调哮喘模型小鼠气道组织中NF-κB和VEGF的表达,达到抑制哮喘气道慢性炎症及重塑的作用.     

半乳凝素-3对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的：探讨半乳凝素-3对哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法：36只豚鼠随机分为哮喘组、治疗组及对照组,每组12只。哮喘组及治疗组用卵白蛋白致敏和激发制作哮喘模型,对照组同期予生理盐水。于致敏第15～21日激发前1h治疗组豚鼠予半乳凝素-3腹腔注射,剂量0.5mg/kg,每日1次,连续7d。测定3组豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-5含量、嗜酸性粒细胞计数,苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化,TUNEL法检测肺组织嗜酸性粒细胞的凋亡,免疫组织化学检测肺组织Bcl-2蛋白的表达。结果：治疗组豚鼠BALF中IL-5含量和嗜酸性粒细胞计数均低于哮喘组（P〈0.05）;其肺组织炎症反应明显轻于哮喘组,肺组织嗜酸性粒细胞计数低于哮喘组,嗜酸性粒细胞凋亡指数高于哮喘组;肺组织Bcl-2蛋白表达低于哮喘组（P〈0.05）。与对照组比较,治疗组BALF中白细胞计数、嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞占白细胞的比例、IL-5水平均升高（P〈0.05或0.01）;肺组织嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞凋亡指数均显著升高（P均〈0.01）;肺组织Bcl-2蛋白表达比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：半乳凝素-3可促进哮喘豚鼠BALF中嗜酸性粒细胞凋亡,减轻肺组织炎症反应,这可能与其降低哮喘豚鼠BALF中IL-5含量、下调肺组织Bcl-2蛋白表达有关。     

重组鼠白细胞介素-12腺病毒载体对哮喘小鼠模型IL-4、IFN-γ表达的影响

目的探讨重组鼠白细胞介素-12(IL-12)基因的腺病毒载体(AdCMVIL-12)对小鼠支气管哮喘模型IL-4、IFN-γ表达的影响。方法雌性BALB/c小鼠50只,按数字随机表法分为5组,每组10只:哮喘模型组、AdCMVIL-12组、AdCMVLacZ组、激素治疗组和正常对照组。并于第20天分别鼻内吸入50μL生理盐水和5×108 PFU AdC-MVIL-12。第28天收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),检测IL-4、IFN-γ的变化,RT-PCR方法检测各组肺组织中IL-4、IFN-γmRNA的表达水平。结果哮喘模型组与对照组、AdCMVIL-12组相比较,BALF中的IL-4表达水平明显升高,而IFN-γ在AdCMVIL-12组中的表达水平显著上升。RT-PCR结果显示,哮喘模型组小鼠肺组织IL-4mRNA的表达与AdCMVIL-12组、激素治疗组及正常对照组相比较明显升高;而IFN-γmRNA的表达水平明显下降。结论 AdCMVIL-12对哮喘小鼠的气道及肺组织内的IL-4表达有明显的抑制作用,其机制可能与AdCMVIL-12阻断IL-4的表达,调节Th1/Th2类细胞因子的平衡有关。     

T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1（TIM-1）对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨气道黏液高分泌的机制.方法 OVA腹腔注射致敏小鼠,随机分组为：正常对照组（A组）、哮喘组（B组）和哮喘＋ TIM-1抗体处理组（C组）,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALD中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测外周血单个核细胞（PBMCs） TIM-1 mRNA及气道MUC5AC mRNA表达.结果 （1）与A组小鼠外周血PBMCs表达TIM-1 mRNA（0.618±0.043）相比,B组（1.129±1.101）及C组（0.898±0.071）TIM-1 mRNA表达明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;（2）B组和C组小鼠BALF中IL-4表达分别为（67.123±3.341） ng/L和（44.217±2.201）ng/L,较A组[（23.211±2.142） ng/L]明显增多（P＜0.01）,且C组明显低于B组（P＜0.01）;B组及C组小鼠BALF表达IFN1分别为（53.475±4.776） ng/L和（87.116±5.611）ng/L,均低于A组[（124.624±9.292） ng/L] （P ＜0.01）,而C组与B组相比,有所增加（P＜0.01）;（3）B组（1.004±0.081）及C组（0.673±0.029）小鼠气道MUC5A mRNA表达与A组（0.314±0.027）相比,明显增加（P＜0.01）,且C组低于B组（P＜0.01）;（4）小鼠外周血PBMCs TIM-1 mRNA表达与IL-4、MUC5AC表达呈正相关,而与IFN-γ表达呈负相关.结论 抑制TIM-1表达可减少IL-4和MUC5AC的分泌,提高IFN-γ表达,提示在调节黏液高分泌及哮喘治疗中具有意义.     

特应性皮炎增强卵白蛋白诱导小鼠气道炎症的实验研究

目的观察特应性皮炎（AD）的病理变化及其对呼吸道过敏性炎症产生的影响,探讨其形成机制。方法BALB／c小鼠20只,随机分为AD组和丙酮对照组各10只;AD组以7％二硝基氯苯（DNCB）致敏小鼠腹部皮肤,0．5％二硝基氯苯及40恤g鸡卵清蛋白（OVA）激发小鼠背部皮肤;对照组相同时间相同部位涂以丙酮;两组均以1％OVA雾化吸入诱导小鼠气道炎症。观察两组小鼠皮肤及肺部病理改变,收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）,对BALF进行细胞计数,并用ELISA方法测试BALF及血清中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、干扰素-γ（IFN-γ）和卵清蛋白IgE（OVA—IgE）含量变化。结果AD组小鼠皮肤病理表现为表皮真皮层增厚,炎症细胞浸润;而对照组皮肤正常。AD组肺部组织炎性细胞较对照组明显增多。BALF中细胞数AD组白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞增多明显,IL4、IL-5、IFN-γ和OVA—IgE含量均较对照组增高;血清中IL-4、IL-5与OVA．IgE含量较对照组增高。结论特应性皮炎因皮肤受到过敏原刺激能导致全身过敏反应,当吸入同种可溶性抗原时,能使气道炎症加重;其机制可能与Th1／Th2比例失衡,嗜酸性粒细胞、特定性IgE和Th2细胞浸润相关。     

卡介苗不同给药途径对哮喘小鼠气道组织的影响

目的探讨卡介苗不同给药途径对小鼠哮喘模型气道内外各种组织的影响。方法28只BALB／c小鼠分为正常对照组、哮喘对照组、卡介苗鼻腔内和皮下给药组4组各7只。正常对照组用生理盐水致敏,哮喘模型用尘螨致敏激发,给药组在尘螨致敏同时鼻腔内或皮下给予1×10^5CFUs卡介苗1次,1个月后计数肺泡灌洗液及肺组织嗜酸性粒细胞计数、淋巴细胞计数,检测气道组织杯状细胞增殖程度和平滑肌厚度。结果肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞百分比正常对照组（（0．34±0．12）％）和给药组（鼻腔给药组（0．43士0．21）％和皮下给药组（0．58±0．18）％）均低于哮喘对照组（（5．54±1．02）％）（P〈0．05）,4组间淋巴细胞百分比比较差异无统计学意义（P〉0．05）;肺气道组织中嗜酸性粒细胞计数和淋巴细胞计数正常对照组和卡介苗给药组均低于哮喘对照组（P〈0．05）,卡介苗皮下给药组嗜酸性粒细胞数（（17．40±3．20）个／mm^2）低于卡介苗鼻腔给药组（（36．96±5．86）个／mm^2）（P〈0．05）;正常对照组和卡介苗给药组杯状细胞增殖程度低于哮喘对照组（P〈0．05）,卡介苗皮下给药组抑制杯状细胞增殖作用较卡介苗鼻腔给药组强（P〈0．05）;卡介苗鼻腔给药组平滑肌厚度（（32．89±5．02）×10^-1μm）较哮喘对照组（（54．41±8．32）×10^-1μm）减低（P〈0．05）。结论卡介苗鼻腔内及皮下给药均可抑制气道组织的哮喘反应,且皮下给药作用更强。