系统性红斑狼疮患者外周血miR-7的表达及其意义

目的研究microRNA-7(miR-7)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血的表达及其意义。方法 20例SLE患者和20例性别年龄匹配的健康对照者,荧光定量PCR检测PBMC、B细胞、T细胞和单核细胞中miR-7的表达以及靶基因PTEN的mRNA水平,通过电转染方法将miR-7的前体Pre-miRTM-miR-7 Precursor/抑制剂antimiRTM-miR-7抑制剂转染至SLE患者B细胞中,流式细胞检测B细胞增值功能。应用生物信息学方法及双荧光素酶报告基因系统预测并验证miR-7的靶基因。结果 SLE患者PBMC及B细胞中miR-7的表达显著高于健康对照(P0.01)。PTEN是miR-7的一个靶基因,转染miR-7的前体至SLE患者B细胞可抑制PTEN表达(P0.05),促进B细胞增殖(P0.05),转染miR-7抑制体则可以促进PTEN表达(P0.05),抑制B细胞增值(P0.05)。结论 miR-7参与了SLE的发病机制,调控PTEN的表达,并介导了SLE患者B细胞的增殖,是SLE潜在的治疗靶点。     

系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD L2分子的表达及其临床意义

目的：分析系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其与疾病活动程度的相关性。方法：收集26例系统性红斑狼疮患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后,TRIZOL抽提总RNA,定量PCR分析PD-L2基因的表达,流式细胞仪检测CD14、PD-L2分子的表达。统计学分析其相关性及与疾病活动程度之间的关联。结果：定量PCR结果提示系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2基因表达高于健康对照组(P<0.05),流式发现单核细胞上PD-L2高表达(P<0.05),且活动期患者表达高于稳定期,并且与疾病的评分(SLEDAI)呈正相关(P<0.05)。结论：免疫分子PD-L2可能参与系统性红斑狼疮疾病的进程并可能成为疾病预防及治疗的潜在分子。     

bel-2家族与系统性红斑狼疮

凋亡缺陷(defective apoptosis)在系统性红斑狼疮(systematic erythematosus lupus，SLE)的发病机制中扮演重要角色。bcl-2家族是调控线粒体介导凋亡的主要因子，有研究表明bcl-2家族的某些成员异常与SLE之间存在一定联系。然而关于其具体特征和机制的实验结果并不一致。本文将就此领域的研究进行综述。     

系统性红斑狼疮病人外周血白细胞TNFRSFl2mRNA表达的研究

目的：了解肿瘤坏死因子受体超家族成员12(TNFRSFl2)mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)外周血白细胞中的表达是否异常，初步判断TNFRSFl2是否为SLE的易感基因。方法：采用TaqMan one-step RT-PCR方法。分别对SLE病人、正常人和类风湿性关节炎(RA)病人外周血白细胞TNFRSFl2 mRNA的表达进行检测。结果：SLE病人TNFRSFl2 mRNA的表达形式与表达量和正常人相比均存在差异，SLE病人白细胞存在TNFRSFl2 mRNA的两类形式剪切体。分别为编码膜结合蛋白形式和分泌形式的TNFRSF12，而正常人只有后者，在PHA刺激后才开始同时表达前者。并且TNFRSFl2 mRNA在SLE病人中的表达量与病情活动度和肾脏累及相关。结论：提示TNFRSFl2在SLE的发病机制中起一定作用,因此可能是SLE的易感基因。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞miR-125b及miR-145的表达及临床意义

目的探讨miR-125b及miR-145在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其临床意义。方法选取海南省人民医院收治的136例SLE患者,采用SLE病情活动指数(SLEDAI)评分将其分为低活动组(n=75)和高活动组(n=61),另选取60例健康体检者作为对照组。采用实时定量PCR(RT-PCR)法检测各组PBMC中miR-125b及miR-145水平,分析其对SLE患者的诊断价值。Pearson相关分析SLE患者miR-125b及miR-145水平与抗双链DNA(dsDNA)抗体、C3、C4、IgG、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)及SLEDAI评分的相关性。结果 SLE组、高活动组和低活动组抗dsDNA抗体、ESR、IgG及CRP水平均明显高于对照组(P<0.05),而C3及C4水平均明显低于对照组(P<0.05)。SLE组、高活动组和低活动组PBMC中miR-125b(0.84±0.23、0.42±0.09和1.53±0.28 vs 6.12±1.83)及miR-145(0.68±0.17、0.35±0.06和1.12±0.20 vs 2.15±0.64)表达水平均明显低于对照组(P<0.01),且高活动组PBMC中miR-125b(0.42±0.09 vs 1.53±0.28)及miR-145(0.35±0.06 vs1.12±0.20)表达水平明显低于低活动组(P<0.01)。SLE患者治疗后miR-125b(2.60±0.71 vs 0.84±0.23)及miR-145(1.96±0.58 vs 0.68±0.17)表达水平明显高于治疗前(P<0.01),SLE患者治疗后抗dsDNA抗体(96.24±17.20 vs 272.36±64.35)水平明显低于治疗前(P<0.01)。ROC曲线分析显示,miR-125b、miR-145及抗dsDNA抗体三项联合诊断SLE的AUC(95%CI)为0.928(0.871～0.986),其敏感度(90.4%)和特异度(85.0%)较好。相关分析显示,SLE患者miR-125b、miR-145与抗dsDNA抗体、IgG、SLEDAI评分均呈负相关(P<0.05),miR-125b与miR-145呈明显正相关(r=0.805,P<0.05)。结论 miR-125b及miR-145水平在SLE患者PBMC中明显降低,且与SLE病情活动相关,联合抗dsDNA抗体检测对SLE诊断具有一定价值。     

系统性红斑狼疮患者中miR-146a表达缺陷与I型干扰素通路过度活化相关

Ι型干扰素(IFN)通路过度活化与固有免疫反应异常在系统性红斑狼疮(SLE)发病中起重要作用。miR-146a作为一个负调控因子,在固有免疫应答中发挥重要作用。为探索miR-146a在SLE发病中的作用,通过实时荧光定量聚合酶链反应技术检测18例SLE患者和11例正常对照miR-146a的表达,发现同正常对照组相比,miR-146a表达水平在SLE患者中明显降低,SLE活动组中下降则更加明显;同时检测miR-146a的靶基因IRAK1和TRAF6 mRNA表达,发现在SLE患者中其水平显著高于正常对照组;进一步分析miR-146a与IFN诱导基因表达之间的关系,结果显示两者之间存在负相关,体外实验也证实miR-146a能够负向调节I型干扰素通路。综上所述,我们的研究结果提示miR-146a可能作为一个新的生物标志物,SLE患者中miR-146a表达水平下降,导致I型干扰素通路负调控作用被削弱,从而参与疾病的发生发展。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞CD1c的表达

目的 :研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋血细胞CD1c的表达情况及与疾病活动性之间的关系。方法 :用流式细胞仪检测了 4 7例SLE患者外周血淋巴细胞CD1c的表达及淋巴细胞表型分析 ,并评价与疾病活动性的关系。结果 :SLE活动组病人CD1c 细胞百分率显著增高 (P <0 0 5 ) ,CD4 细胞百分率显著降低 (P <0 0 1) ,CD3 、CD8 细胞百分率正常 ,CD2 0 细胞数增高 (P <0 0 1)。稳定期病人CD1c 细胞百分率正常 ,CD4 、CD8 、CD2 0 细胞百分率均正常。SLE患者CD1c细胞阳性率与患者SLEDAI的评分有显著的相关性 (r=0 6 8,P <0 0 1) ,与抗dsDNA抗体的表达有显著相关性 (r =0 36 ,P <0 0 5 ) ,与抗心磷脂抗体的表达有显著的相关性 (r=0 6 4 ,P <0 0 1) ,与血清C3水平有显著相关性 (r =- 0 35 ,P <0 0 5 )。活动期病人经治疗后CD1c的表达明显下降。结论 :系统性红斑狼疮患者外周血CD1c表达与疾病的活动性明显相关 ,CD1c可能在SLE脂类抗原及核酸类抗原的递呈及抗双链DNA抗体、抗磷脂抗体的产生中起重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血NK细胞TIM-3表达和意义

目的探讨TIM-3在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血NK细胞上的表达及临床意义,以阐明其在SLE发生和发展中的作用。方法应用流式细胞仪检测44例SLE患者和34例健康对照者外周血NK细胞表面TIM-3表达水平,比较SLE组和健康对照组之间NK细胞表面TIM-3表达水平,并分析其与实验室检查数据及治疗的相关性。2组间比较采用t检验、配对t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson相关分析。结果 1)SLE患者NK细胞TIM-3表达的平均荧光强度(MFI)显著高于健康对照组(P=0.033);SLE患者NK细胞TIM-3表达百分率显著高于健康对照组(P<0.001)。2)SLE患者外周血NK细胞上TIM-3表达的MFI与C3、C4呈负相关(r=0.32,P=0.037;r=0.30,P=0.049);SLE患者外周血TIM-3+NK细胞百分率与单核细胞数量呈负相关(r=0.32,P=0.033)。3)抗ds-DNA抗体阳性的SLE患者NK细胞TIM-3表达的MFI显著高于抗ds-DNA抗体阴性的SLE患者(P=0.050);SLE患者外周血TIM-3+NK细胞百分率与抗...     

系统性红斑狼疮病人环孢素A受体mRNA的表达

目的 探讨静止期、活动期系统性红斑狼疮病人（SLE）外周血单个核细胞（PBMC）环孢素A受体（CyP）mRNA表达及糖皮质激素对其表达的影响,为临床应用环孢素A辅助治疗该病提供理论依据。方法 采用逆转录PCR方法,经凝胶图像半定量分析,检测患者外周血单个核细胞CyP mRNA的表达。结果 SLE病人外周血单个核细胞存在有CyPmRNA的表达,静止期较正常人差异无显著性（P＞0．05）意义,但在活动期CyPmRNA的表达较正常人和静止期病人明显降低（P＜0．01）,地塞米松处理后,活动期病人CyPmRNA的表达水平显著上升（P＜0．01）。结论 SLE病人有CyPmRNA的表达,但活动期明显下降,糖皮质激素可改善CyP mRNA的表达。     

bcl-2家族与系统性红斑狼疮

凋亡缺陷(defective apoptosis)在系统性红斑狼疮(systematic erythematosus lupus,SLE)的发病机制中扮演重要角色。bcl-2家族是调控线粒体介导凋亡的主要因子,有研究表明bcl-2家族的某些成员异常与SLE之间存在一定联系。然而关于其具体特征和机制的实验结果并不一致。本文将就此领域的研究进行综述。     

系统性红斑狼疮病人血T,B淋巴细胞Bcl—2的表达

目的：探讨Ｂｃｌ－２在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）发病机制中作用。方法：采用流式细胞仪双标记法检测３１例ＳＬＥ病人外周血Ｔ、Ｂ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达。结果：发现活动期ＳＬＥ病人活动期ＳＬＤ病人ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于非活动期ＳＬＥ病人、其他疾病组和正常对照组。ＣＤ１９＾＋Ｂ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达在各组之间并无统计学差异。ＣＤ３＾＋Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达的平均     

系统性红斑狼疮合并弥漫肺泡出血一例

报道1例系统性红斑狼疮合并弥漫肺泡出血及严重免疫缺陷病例,以期提高对危重病例的诊治水平。     

白介素17A受体在系统性红斑狼疮患者外周血B淋巴细胞的表达及意义

目的:研究白介素17A受体(IL-17AR)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B淋巴细胞内的表达情况及其临床意义。方法:流式细胞术检测60例SLE患者及33例健康人外周血B细胞上IL-17AR的表达水平。并将其与有关临床及实验室指标进行相关性分析。结果:SLE患者组的IL-17AR+细胞表达比例为(47.58±17.20)%,高于正常对照组(40.71±11.82)%(P<0.05)。在SLE患者中:口腔溃疡组、有浆膜炎组、有肾脏病变组、有免疫异常组分别高于相应的无症状组(P<0.05)。在抗Sm-D1抗体阳性组及抗核小体抗体阳性组分别高于相应的抗体阴性组(P<0.05)。IL-17AR+细胞比例与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、C反应蛋白(CRP)、甘油三酯呈正相关;与间接胆红素、血清白蛋白的表达负相关(P<0.05)。B淋巴细胞比例与血清IgG、ALT、直接胆红素的表达呈正相关;与胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论:IL-17AR在SLE患者B细胞上表达上调,且与病情有一定的相关性。提示IL-17/IL-17AR可能在SLE发病中起着重要作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血内皮祖细胞的实验研究

目的探讨系统性红斑狼疮患者外周血内皮祖细胞（EPC）数量、功能是否改变。方法连续选入33例系统性红斑狼疮（SLE）患者做为SLE组,33名门诊健康体检者为对照组。流式细胞分析计量外周血CD34和KDR双阳性细胞,同时原代培养EPC,培养7 d后MTT法检测增殖能力,改良boydon小室法检测迁移能力。结果SLE组外周血EPC数量较对照组显著减少,P〈0.01;SLE组的增殖、迁移能力均较对照组减弱,P〈0.01。结论系统性红斑狼疮患者外周血EPC数量减少,增殖、迁移功能降低,可能是SLE促动脉粥样硬化发生的机制之一。     

Genetic polymorphisms of CYP2D6 oxidation in patients with systemic lupus erythematosus

Introduction

Systemic lupus erythematosus (SLE) is a complex, multifactor autoimmune disease. The studies on aetiopathogenesis of autoimmune diseases focus on the impact the genetically conditioned impairment of xenobiotic metabolism may exert. The knowledge of oxidation polymorphism in the course of SLE may be helpful in choosing more efficient and safer therapy. We determined whether there was an association between susceptibility to SLE and particularly to CYP2D6 genotypes.

Material and methods

The study was carried out in 60 patients with SLE and 129 healthy volunteers and all the subjects were of Polish origin. The samples were analysed for two major defective alles for CYP2D6 – CYP2D6*3 and CYP2D6*4 and one wild -type allele CYP2D6*1-by the polymerase chain reaction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) metod with DNA extracted from peripheral blood.

Results

No statistically significant differences in the incidence of CYP2D6 genotypes between the studied groups were found (p = 0.615). Risk (OR) of SLE development was 1.03 for the carriers of CYP2D6*3 allele and 1.48 for the subjects with CYP2D6*4 allele; but it was not statistically significant.

Conclusions

Increased occurrence of mutant alleles of the CYP2D6 gene in SLE patients and the calculated OR values could suggest the effect of these mutations on increased SLE development.     

Increased serum levels of soluble interleukin-2 receptor in patients with systemic lupus erythematosus and rheumatoid arthritis

In this study we investigated the serum levels of a released soluble form of the interleukin-2 receptor (sIL-2R) in 42 patients with rheumatoid arthritis and in 12 cases of systemic lupus erythematosus. Data were evaluated in relationship to the clinical phase and compared with those observed in normal controls (N=56) and in osteoarthritis (N = 7). Increased levels were observed in both rheumatoid arthritis (mean ± SE, 604±49 U/ml) and systemic lupus erythematosus (1438±481 U/ml). These values were significantly higher than in control (256±15 U/ml;P<0.001) and in osteoarthritis (298±33 U/ml;P<0.001) groups. In addition, the highest values were associated with the active phases of both rheumatoid arthritis (active vs inactive, 771±78 vs 451±39 U/ml;P<0.001) and systemic lupus erythematosus (active vs inactive, 2108±489 vs 499±75 U/ml;P<0.001). Our findings suggest that the detection of sIL-2R in rheumatoid arthritis and in systemic lupus erythematosus may represent a good marker of disease activity, which indirectly indicates the ongoing activation and/or proliferation of immunoreactive cells which are involved in the pathogenetic events of these autoimmune conditions.     

Expression of cytokine- and chemokine-related genes in peripheral blood mononuclear cells from lupus patients by cDNA array

Systemic lupus erythematosus (SLE) is characterized by diverse and complex immune abnormalities. In an effort to begin to characterize the full complexity of immune abnormalities, the expression pattern of 375 potentially relevant genes was analyzed using peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from 21 SLE patients and 12 controls by cDNA arrays. When mean gene expression for patients was compared to controls, 50 genes were identified that exhibited more than 2.5-fold difference in expression level. By the Mann-Whitney U test, 20 genes were significantly different (P < 0.05) between patients and controls. Most of these genes have not been previously associated with SLE and belong to a variety of families such as TNF/death receptor, IL-1 cytokine family, and IL-8 and its receptors. Hierarchical clustering of samples and differentially expressed genes revealed that with few exceptions, patients clustered separately from controls. These results highlight the potential use of the microarray data in identifying genes associated with SLE, which could become candidate molecular markers or future therapeutic targets.     

B细胞活化因子与系统性红斑狼疮

B细胞活化因子(BAFF)是近年来发现的对B细胞生存分化具有重要作用的因子,通过结合于三种不同受体发挥促B细胞分化成熟、类别转换、促进体液免疫应答及参与T细胞活化等功能。BAFF过表达时可在小鼠模型引发严重的自身免疫疾病,使用BAFF拮抗剂可使动物模型的自身免疫病得到一定程度的缓解。部分系统性红斑狼疮(SLE)患者中BAFF的水平有不同程度增高,并与抗dsDNA抗体滴度相关。抗BAFF单克隆抗体治疗SLE临床研究初步结果显示安全性好,疾病活动度下降。BAFF拮抗剂有望成为有效的治疗SLE的新型药物。     

Impaired T-cell activation in patients with systemic lupus erythematosus

Interleukin-2 (IL-2) production was studied in T lymphocytes from 32 patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and 27 healthy volunteers. The IL-2 production by phytohemagglutinin (PHA)-stimulated cells from SLE patients was significantly depressed compared to control values, with a correlation between degree of depression and disease activity. The depressed IL-2 production by SLE T cells are largely reversed by the addition of either phorbol ester (PMA) or partially by a calcium ionophore. SLE T cells had significantly lower peak increases in intracellular free calcium ([Ca²⁺]_i) than controls after stimulation by PHA or by a monoclonal antibody against the CD3 antigen. This abnormality was found even in T cells from patients with mild disease activity or in those whose T cells produced normal amounts of IL-2. Calcium ionophore produced similar increases in [Ca²⁺]_i in SLE patients as in normals. These results suggest that a major component of the defect responsible for decreased IL-2 production by SLE lymphocytes is proximal to protein kinase C activation and may involve impaired signal transduction after activation of the antigen receptor complex.     

系统性红斑狼疮患者血清乳铁蛋白的分析

目的 比较健康人和系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中乳铁蛋白(LF)的水平,分析SLE患者LF降低的影响因素.方法 采用ELISA检测健康儿童(n=38)、健康成人(n=46)、SLE儿童患者(n=38)、SLE成人患者(n=46)、1～80岁不同年龄段健康人(n=80)、IgA肾病患者(n=29)及其他肾病患者(n=19)血清中LF的含量.BCA法检测血清中总蛋白的含量.非配对t检验分析不同组间LF水平的差异,Spearman's相关性分析研究血清中LF与总蛋白含量间的关系.结果 SLE儿童及成人患者血清中LF水平均显著低于年龄和性别匹配的健康儿童及成人(P＜0.001),也低于IgA肾病和其他肾病患者(P ＜0.001).51～ 80岁健康人血清LF含量低于1～50岁健康人.结论 SLE患者血清中LF水平显著降低,此降低不是由于血清中总蛋白含量变化引起的.