2013年～2016年3719株大肠埃希菌的临床分布及耐药性分析

目的:了解大肠埃希菌的临床分布,比较尿液分离菌株与痰液分离菌株的耐药率,为合理使用抗菌药物提供依据.方法:收集某院2013-2016年临床分离的大肠埃希菌,共3719株,比较分析尿液中分离的大肠埃希菌(尿液分离菌株)与痰液中分离的大肠埃希菌(痰液分离菌株)对各种抗菌药物的耐药率的差异性.结果:大肠埃希菌主要分离自尿液(1972株,占53.03％),痰液分离菌株相对较少(196株,占5.27％),痰液分离菌株对阿米卡星、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、妥布霉素、头孢曲松与头孢哌酮/舒巴坦的耐药率显著高于尿液分离菌株(P＜0.05).结论:痰液分离菌株耐药性强于尿液分离菌株.     

兔骨髓间充质干细胞分离方法的比较

目的:比较3种兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)分离方法的效率。方法:以12只3个月龄新西兰大白兔为实验对象,每只骨髓血平分3份,以全血细胞培养法、不连续Percoll分离液密度梯度离心法和Ficoll分离液密度梯度离心法进行分离,对克隆形成率、首次传代时间、16 d培养细胞数量等指标进行比较。结果:不连续Percoll分离液密度梯度离心法在各项指标中均优于Ficoll分离液密度梯度离心法及全血细胞培养法,且成功率最高。结论:不连续Percoll分离液密度梯度离心法是成年兔穿刺获取BMSCs最合适的分离方法。     

一种新型全白细胞分离液的研制

目的：为了有效地允离、提取外周血全白细胞，研制一种新型的细胞分离液。方法：右旋糖苷（聚蔗糖）和泛影葡胺按不同比例混合配制成四种比重、五种渗透压的分离液。通过对50例正常外周血的分离摸索出最佳全白细胞分离液的比重和渗透压。结果：最佳全白细胞分离液的比重为1．112g/ml，渗透压为520mOsm／L。结论：我们自制的全白细胞分离液提取细胞浓度及细胞纯度高，细胞组分全，细胞比例正常，细胞形态及细胞活性保持良好。同时全白细胞分离液还可以进行其他细胞分离，为相关学科的研究提供了一种有效的细胞分离新方法。     

泡沫分离绞股蓝粗提液中绞股蓝皂苷的工艺研究

目的 研究泡沫分离法分离绞股蓝粗提液中皂苷的工艺.方法 利用泡沫分离法对绞股蓝粗提液中的皂苷进行分离,以回收率和富集比为指标确定最佳分离工艺.结果 最佳分离工艺为粗提液皂苷质量浓度为3.21μg/mL、气体流速30 mL/min、塔装液量110 mL、pH值9.0时,皂苷回收率为49.20%,富集比可达4.511.结论 泡沫分离法是分离绞股蓝粗提液中皂苷的简单、有效方法.     

骨髓间充质干细胞分离方法的实验研究

目的 以不同方法分离骨髓间充质干细胞(MSCs),探讨原代培养MSCs的分离方法间的优劣.方法 用Percoll、Ficoll分离液分离法及直接种植法分离骨髓中的单个核细胞,在含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液中培养,观察原代培养MSCs形态学间的差异.结果 采用Percoll分离液分离MSCs,可以获得形态均一性较好的同源细胞群.Ficoll分离液分离法和直接种植法获得的细胞均一性较差,含有较多杂细胞.结论 采用Percoll分离液分离骨髓成分,可以获得同源性良好的MSCs.     

液—液重力分离自动排放装置的设计

在医药、石油、化工生产过程中,常常要用到液—液分离操作。液—液分离器是利用被分离的二种液体的重度不同来实现分离的。轻重相间的重度差是实现该过程的推动力。分离器中两液相分层液面的控制,通常是根据分离器的液面计依靠人工间歇排放来实现的。排放时间占了操作的大部分时间,且液面稳定性差,影响分离效果;另外,如果液面计装置安装不当会造成     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞,经细胞裂解液处理,上清提取RNA,沉淀提取DNA,用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液。经对抽提物质量进行评价,发现3种提取物质量均高。本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白,高效易操作,值得推广。     

外周血细胞DNA、RNA及血红蛋白同时提取法

采用淋巴细胞分离液分离外周血中的有核细胞。经细胞裂解液处理，上清提取RNA，沉淀提取DNA，用分离液分离所得红细胞沉淀制备血红蛋白溶液，经对抽提物质量进行评价，发现3种提取物质量均高，本法能从少量外周血中同时分离DNA、RNA及血红蛋白，高效易操作，值得推广。     

分离液渗透压对淋巴细胞分离纯度的影响

密度梯度离心是目前各实验室普遍使用的分离外周血淋巴细胞的方法。该法分离淋巴细胞的纯度不仅与分离液的比重有关,而且在相当大程度上受分离液渗透压的影响。我们用聚蔗糖和泛影葡胺配制分离液,并以氯化钠调整其渗透压,使淋巴细胞分离纯度明显上升。现     

连续液—液重力分离设备的设计与选型

在化工与医药生产过程中经常会遇到重度不同且不互溶的混合液体的分离。液一液分离器不失为一种简捷而有效的分离设备。液—液分离器是利用两种液体的不同重度来实现分离的。影响分离的因素除与混合物自身的特性(重度、粘度、结构及分散度等)有关外,还与温度有关,而轻重相间的重度差为实现该过程的推动力。例如:萃取过程,某些特殊蒸馏     

脂质体液膜萃取新技术分离左金丸水提液活性成分

目的 探讨脂质体液膜萃取新技术分离左金丸水提液活性组分的可行性.方法 制备普通脂质体、硫酸铵梯度脂质体、柠檬酸梯度脂质体和谷氨酸钠梯度脂质体,采用液膜萃取技术以上述脂质体为分离介质对左金丸、黄连和吴茱萸水提液进行萃取分离,采用HPLC测定脂质体萃取物中已知活性成分的含量.结果 左金丸、黄连和吴茱萸水提液中的代表性有效成分小檗碱、巴马汀、吴茱萸碱和吴茱萸次碱均能被脂质体萃取,脂质体的种类、脂质体与中药水提液用量比、萃取温度和萃取时间等因素对中药成分的萃取率有较大影响;脂质体液膜萃取分离黄连水提液小檗碱的优化工艺为:硫酸铵梯度脂质体与黄连水提液的用量比20:1,萃取温度37℃,萃取时间60min.结论 脂质体液膜萃取技术分离中药水提液活性组分的思路是科学可行的.     

纸层先导设计法(摘要)

1.在中草药整理提高工作中,经常遇到的问题是如何分离未知混合成分。“纸层先导设计法”可为总成分的分离工作(液、液萃取)设计出较精确的方案。做到:想要分离哪些成分或组分,实践结果就能较好地分出这些成分或组分。而且分离纯度也将按予先的设计要求给以实现。 2.纸层先导设计法的基本原理和设计步骤:“纸层先导设计法”,就是先进行纸层析实验,并以纸层析结果及其计算数据作指导,设计液、液萃取的实验方案。本设计法依据的基本原理是:纸层析在本质上属于分配层析,它和液、液萃取法分离物质的机理是相同的。     

适用于GMP的新型离心机研制

1前言目前，籍于离心力来进行固一液、液一液、液一液一固进行分离的离心机械已广泛用于化工、医药、食品、纺织、环保、军工、船舶及生物工程等领域。且离心机在结构、品种及其应用方面亦得到了迅速发展，然而由于工业发展的需要，特别是有些被分离的物料由于其工艺的特殊性，     

基于非对称流场流分离系统优化脂蛋白的分离条件

目的：使用自组装非对称流场流分离（asymmetrical flow field-flow fractionation, AF4）仪器对脂蛋白的分离条件进行优化,分析仪器的分离性能并验证载液黏度对分离效果的影响。方法：使用2种标准蛋白（碳酸酐酶和甲状腺球蛋白）初步验证自组装非对称流场流分离仪器的性能,标定分离通道相关参数（压制后的分离通道实际高度）, 进而通过四水平五因素的正交设计试验进行脂蛋白的分离条件优化,通过直观分析和方差分析评价差异具有统计学意义的影响因素,并对这些影响因素进行深入验证分析。结果：通过调节流速条件及载液条件得到碳酸酐酶和甲状腺球蛋白混合样品的分离图,根据流体动力学原理及Stoke’s公式计算得到分离通道高度为164 μm。使用正交设计试验得到优化后的分离条件可实现高密度脂蛋白与低密度脂蛋白大于1.50的分离度（分离度为1.61和1.58）,所选取的5种主要影响因素及其水平分别为分离总流速（3.00, 3.50, 4.00, 4.50 mL/min）、聚焦时间（3.00, 3.50, 4.00, 4.50 min）、过渡时间（0.5, 1.0, 1.5, 2.0 min）、载液pH（6.8, 7.00, 7.20, 7.40）、载液黏度（使用不同浓度的羟丙基甲基纤维素调节载液黏度,其浓度分别为0.00%, 0.03%, 0.06%, 1.00%）, 正交设计试验结果显示,5种主要因素中载液黏度对分离度影响最大,结果差异具有统计学意义。进一步分析载液黏度的影响,发现增大黏度可有效提高分离度,但会带来增大负峰的作用。结论：自组装非对称流场流分离仪器可根据颗粒的粒径差异对脂蛋白进行有效分离,在优化的条件下可实现高、低密度脂蛋白的基线分离,载液黏度对分离度的影响差异具有统计学意义。     

不同淋巴细胞分离液对小鼠骨髓单个核细胞生物学活性的影响

目的:探讨不同淋巴细胞分离液对小鼠骨髓单个核细胞生物学活性的影响.方法:使用Ficoll、Percoll和小鼠淋巴细胞分离液分离小鼠骨髓单个核细胞,分别在显微镜下观察细胞形态,胎盘蓝染色法计数细胞数量并检测细胞活力,MTT法检测细胞增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞周期,并分别计数三种淋巴细胞分离液分离出的小鼠骨髓单个核...     

高密度淋巴细胞分离液的配制及其应用

报告了高密度淋巴细胞分离液(p=1.089g/ml)的配制方法及其在小鼠脾淋巴细胞分离中的应用。用高密度分离液,淋巴细胞收获量比用市售分离液提高2.16倍,细胞存活率和纯度符合实验要求。所得淋巴细胞中T细胞比例增加,对ConA反应能力增强。     

不同分离液和培养基对骨髓间充质干细胞原代培养的影响研究

目的：试图分剐用不同抽取骨髓方法、不同分离液和培养基，来筛选提高收集骨髓MSCs数量的因素。方法：取大鼠左、右肢长骨近端红骨髓为实验材料，分两组。用穿抽骨髓同时破坏部分红骨髓、Ficoll-paque分离液和IMDM培养基为实验组：穿抽骨髓不再破坏红骨髓，Percoll分离液和DMEM培养基为对照组。分别计数不同抽取骨髓方法的单个核细胞数量。计算不同分离液细胞密度，以及不同培养基的细胞贴壁率、铺展面积的平均值。结果：实验组的各项检测指标明显优于时照组。结论：穿抽破坏骨髓结构的内容物，Ficoll-paque分离液以及IMDM培养基的原代培养，都能分剐提高收集单个核细胞数量。     

1467株临床分离菌及常见菌药敏分析

现将我院临床分离所得1467株细菌及常见菌属对30种抗生素的敏感性测定结果统计分析如下,供治疗和选用时参考。1　材料和方法本文所分离的全部菌株均来自我院1994～1998年门诊和住院患者的粪、尿、血、咽拭子、分泌物(包括脓)、前列腺液及各种穿刺液等标本中。粪经ＳＳ和伊红美蓝培养基分离、血经增菌汤增菌后,血平板分离,分泌物、前列腺液及各种穿刺液均经血平板分离,然后经生化反应鉴别或诊断血清分型,用纸片法测定细菌的药物敏感度,药敏平板选用ＭＨ平板,链球菌选用血平板。2　结果21　培养结果　1467株临床分离菌共25属。其中革兰氏阳性…     

中性粒细胞和淋巴细胞的一步分离法

我们参照English等(J ImmunolMethods 1974 5:249)方法,用不连续密度梯度离心一步法分离中性粒细胞(PMN)和淋巴细胞。试验取自15例正常献血员外周血,分离细胞并作PMN分离效果的检查。细胞分离方法:向试管加入约2ml分层液Ⅱ(比重1.115),然后再叠加2ml分层液Ⅰ(比重1.077)。取2ml肝素抗凝血(20μ/ml)加等量Hank＇s液稀释后,小心叠加在分层液Ⅰ上,2200rpm离心20分钟。结果在分层液Ⅰ界面上为单个核细胞层,在分层液Ⅰ、Ⅱ交界处及分层     

固液分离技术及其新型固液分离设备

本文介绍了固液分离的三种基本方法,提出了各种新型固液分离设备的结构、参数及应用为设计者和使用者提供了有力的依据和参考。