不同基原秦皮、香豆素单体以及不同指纹区样品对内毒素刺激单核-巨噬细胞株分泌炎症因子的影响

目的 :研究4种秦皮提取物、5种香豆素单体、5种单体混合物、苦枥白蜡树已知香豆素指纹区样品和未知成分指纹区样品对内毒素(LPS)刺激小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响。 方法 :以 LPS 10 mg·L^-1刺激RAW264.7细胞, 加入不同浓度的待测样品,24h后,取培养液上清测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1α(IL-1α)含量。 结果 :①4种基原秦皮提取物能显著抑制由LPS诱导巨噬细胞分泌TNF-α(P<0.05)。②5种香豆素单体均能显著抑制由LPS诱导巨噬细胞分泌IL-1α;除秦皮苷外其余4种单体,能显著抑制由LPS诱导巨噬细胞分泌TNF-α,其中秦皮甲素、秦皮素具有量效关系。③苦枥白蜡树提取物,5种香豆素单体混合物,苦枥白蜡树已知香豆素指纹区样品和未知成分指纹区样品能显著抑制由LPS诱导巨噬细胞分泌TNF-α(P<0.05),5种香豆素单体混合物能显著抑制LPS诱导巨噬细胞产生IL-1α,其他样品的作用没有显著性。 结论 :在该测试系统中4种基原秦皮中尖叶白蜡树抗炎活性最强,其他3个品种抗炎活性相近,抗炎作用与素皮已知香豆素含量没有直接的量效关系,说明素皮除已知香豆素外,未知成分对炎症因子也有一定抑制作用;5种香豆素单体中秦皮乙素,6,7-二甲氧基-8-羟基香豆素抗炎活性最强。     

秦皮总香豆素超声辅助提取工艺优化

目的:优化秦皮总香豆素的超声醇提工艺。方法:采用单因素试验方法研究超声辅助提取过程中乙醇体积分数、料液比、提取温度、提取时间和超声频率对秦皮总香豆素提取率的影响,并采用正交试验确定最佳提取工艺条件。结果:秦皮总香豆素超声辅助提取的最佳提取工艺为:按1∶10(质量-体积比)的料液比加入60%乙醇,于50℃条件下用175 W超声辅助提取50 min,秦皮总香豆素提取率可达到6.283%。结论:与传统索氏提取相比,该工艺具有耗时少、耗能少和提取率高等优点。     

HPLC法测定秦皮中香豆素类成分的含量

秦皮为常用中药，《神农本草经》列为上品。《中华人民共和国药典》2000年版一部规定秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance、白蜡树F．chinensis Roxb．、尖叶白蜡树F．szaboana Lingelsh．或宿柱白蜡树F．stylosa Lingelsh．的干燥枝皮或干皮。本实验对苦枥白蜡树树皮进行了研究，从中分离到5种香豆素类成分，并进行了结构鉴定，它们是秦皮乙素(I)、秦皮素(Ⅱ)、6，7-二甲氧基-8-羟基香豆素(Ⅲ)、秦皮苷(IV)、秦皮甲素(V)，化合物Ⅱ～IV为首次从该植物中获得。对上述成分的提取、分离、鉴定已在秦皮化     

秦皮总香豆素大孔树脂纯化工艺研究

目的优化大孔树脂对秦皮总香豆素的纯化工艺。方法以秦皮总香豆素及秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素4种香豆素的吸附率、解析率、转移率为考察指标,采用单因素方法,考察纯化秦皮总香豆素的树脂类型,树脂吸附、解吸附性能及纯化效果。结果所选择的7种大孔树脂中ADS-5最适合秦皮总香豆素的纯化。吸附参数:吸附容量为生药量-树脂0.8 g/g,上样药液质量浓度为生药0.75 g/m L,上样药液p H值为4.0~4.3(原药液),上样体积流量为2~4 BV/h;洗脱参数:水清洗杂质1 BV,洗脱溶剂25%乙醇,洗脱体积流量2 BV/h,洗脱体积3 BV。经纯化,秦皮总香豆素转移率达74.27%,4种香豆素成分转移率达83.06%,秦皮总香豆素提取物出膏率为7.35%,除杂率达14.00%,其中总香豆素的量为54.72%,4种香豆素成分的量之和为36.01%,总香豆素提取率为4.02%。结论 ADS-5对秦皮总香豆素纯化效果较好,该纯化工艺稳定,提取物量符合中药5类新药的要求。     

紫花地丁中秦皮乙素、总香豆素大孔树脂纯化工艺研究

目的优选紫花地丁中秦皮乙素、总香豆素的大孔树脂纯化工艺条件。方法以秦皮乙素、总香豆素为评价指标,通过7种大孔树脂(AB-8、D101、HPD-100、HPD-450、HPD-750、DM130、HPD-600)的静态吸附、动态解吸试验,确定HPD-100为最佳树脂,经L_9(3~4)正交及单因素试验进行纯化工艺研究。结果最佳纯化条件为HPD-100大孔树脂,上样液pH值为5.0、柱径高比为1∶9、上样液浓度为1.0 g/g、上样体积流量为0.5 BV/h、洗涤用水量为4 BV、解吸溶剂为4 BV 50%乙醇、洗脱体积流速为2 BV/h,纯化后,秦皮乙素、总香豆素含量分别提高5.4倍、5.5倍。结论 HPD-100大孔树脂分离纯化紫花地丁效果良好,工艺稳定可行。     

秦皮总香豆素降低小鼠慢性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究

目的：研究秦皮总香豆素对慢性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,并初步探讨其作用机理。方法：采用黄嘌呤600mg/kg（ig.）＋氧嗪酸钾100mg/kg（sc.）建立小鼠慢性高尿酸血症模型,给予不同剂量秦皮总香豆素（440mg/kg、220mg/kg、110mg/kg）,观察高尿酸血症小鼠血清尿酸、尿尿酸、黄嘌呤氧化酶、血清肌酐及尿素氮水平。结果：秦皮总香豆素组小鼠的血清尿酸及尿尿酸值明显低于模型组,有效抑制黄嘌呤氧化酶活性,血清肌酐及尿素氮值显著低于阳性对照组,均以大、中剂量组为佳。结论：秦皮总香豆素能明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸及尿尿酸水平,对肾功能损害较小,其机理可能与有效抑制黄嘌呤氧化酶活性有关。     

秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究

目的分别建立秦皮提取物总香豆素和4种主要香豆素成分紫外分光光度法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)含量测定方法。方法采用UV,以秦皮甲素为对照品,在334 nm测定秦皮提取物总香豆素的含量;采用HPLC,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,在334 nm测定秦皮提取物中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素4种主要香豆素成分的含量。结果秦皮甲素的质量浓度在5.76~23.04μg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.6%(RSD=1.8%);4种香豆素成分秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的质量分别在0.055 0~3.850 0μg(r=0.999 7)、0.053 9~3.773 0μg(r=0.999 8)、0.060 0~0.660 0μg(r=0.999 9)、0.056 2~0.618 2μg(r=0.999 9)范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.97%(RSD=1.26%)、100.80%(RSD=2.22%)、99.04%(RSD=2.47%)、98.77%(RSD=1.94%)。结论 2种含量测定方法简便、准确、可靠,可用于秦皮提取物总香豆素和主要香豆素成分的质量控制。     

秦皮总香豆素对实验性痛风性关节炎及尿酸代谢的影响

 目的观察秦皮总香豆素对实验性痛风性关节炎及尿酸代谢的影响。方法用微晶型尿酸钠诱导大鼠足跖肿胀和家兔急性关节炎模型,观察灌胃给予秦皮总香豆素对足跖肿胀程度、关节液及滑膜组织的影响。用正常小鼠以及腹腔注射黄嘌呤造成的高血尿酸模型小鼠,观察灌胃给予秦皮总香豆素对血尿酸代谢的影响。结果微晶型尿酸钠(MSU)混悬液局部注射诱发大鼠急性足爪肿胀1～8 h,秦皮总香豆素40,80,160,320 mg·kg^-1剂量组的肿胀率与对照组肿胀率经统计学处理具有差异显著性。秦皮总香豆素20,40,80,160 mg·kg^-1剂量组可以显著抑制微晶型尿酸钠混悬液局部注射诱发急性关节肿胀和减少关节腔积液量,关节囊组织病理学观察可见,模型组滑膜组织表层可见明显充血水肿,滑膜细胞可见变性、甚至坏死,伴有淋巴细胞、中性白细胞浸润,秦皮总香豆素所试剂量范围可以显著减轻上述病理改变。秦皮总香豆素对正常小鼠血尿酸以及高尿酸小鼠血尿酸均有显著降低作用。结论秦皮总香豆素对微晶型尿酸钠混悬液局部注射诱发的大鼠足爪肿胀以及家兔急性痛风性关节炎均有对抗作用,降低正常小鼠血尿酸以及高尿酸小鼠血尿酸。     

HPLC测定不同品种秦皮药材中香豆素类成分

秦皮为常用中药，《神农本草经》列为上品。药典(2005年版)规定秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance.、白蜡树F. chinensis Roxb.、尖叶白蜡树F. szaboana Lingelsh.、宿柱白蜡树F. stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮。苦、涩、寒。归肝、胆、大肠经。具有清热燥湿，收涩，明目的功能［1］。现代药理实验表明，秦皮具有抗菌、消炎、镇静、利尿、镇咳、祛痰和平喘等作用［2］。本研究从苦枥白蜡树皮中分离到5种香豆素成分，分别为秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷、6,7-二甲氧基-8-羟基香豆素，并对其进行了结构鉴定。以往研究曾采用HPLC对部分品种药材中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素、秦皮苷进行含量测定［3］。在此基础上，本研究运用HPLC对药典收载的4个品种秦皮药材中5种香豆素类成分进行了含量测定，用5个成分共同标定秦皮药材的质量，结果表明该方法操作简单，精密度好，准确可靠。为建立秦皮药材科学合理的质量控制方法提供了依据。     

秦皮总香豆素对急性痛风性关节炎大鼠模型IL-1β、IL-8、TNF-α的影响

目的：研究秦皮总香豆素对急性痛风性关节炎模型大鼠血清IL-1β、IL-8、TNF-α的影响,探讨秦皮总香豆素其治疗急性痛风性关节炎的作用机理。方法：将雄性Wistar大鼠90只随机分为6组,正常对照组、模型组、阳性组（秋水仙碱组）、秦皮高剂量、秦皮中剂量、秦皮小剂量组,采用先给干预性药物4d,然后尿酸钠关节内注射造模法致痛风性关节炎模型,72h后取大鼠血清,应用ELISA法测定IL-1β、IL-8、TNF-α的含量。结果：模型组IL-1β、IL-8和TNF-α的水平明显高于正常组（P〈0.01）;秦皮总香豆素能够显著抑制急性痛风性关节炎大鼠血清IL-1β、IL-8和TNF-α的表达,与秋水仙碱作用相近。结论：秦皮总香豆素对急性痛风性关节炎具有良好的治疗作用,其作用机制与抑制血清IL-1β、IL-8和TNF-α的产生有关。     

秦皮直肠给药的研究

以血清中秦皮甲素薄层斑点扫描积分值为指标,采用正交设计,找出秦皮直肠给药的最佳条件。再以秦皮口服和直肠给药后生物利用度比较,表明直肠给药更优。应用改良离体外翻肠囊法进行秦皮直肠给药的体外实验,结果与体内实验一致。     

乌桕根皮水提物抗菌活性的初步研究

目的探讨乌桕根皮水提物的抗菌活性以及不同温度条件下的提取物抗菌活性差异。方法采集乌桕根皮,在3种不同温度(60,80,100℃)下用水回流提取,提取物浓缩后进行抗菌测试,受试菌:枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和志贺氏杆菌。结果水提物对大肠杆菌和志贺氏杆菌具有抑制作用,对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌没有活性;不同温度下的提取物对大肠杆菌和志贺氏杆菌的影响较大,提取温度为100℃时,提取物对这两种细菌的抑制作用最强,抑菌圈直径分别为(9.67±1.32)mm和(11.67±1.00)mm。结论乌桕根皮在湖南和广西民间治疗由大肠杆菌引起的腹泻和志贺氏杆菌引起的痢疾确有很好的疗效。     

牡丹皮镇痛抗炎作用的实验研究

目的：以牡丹皮为研究对象,观察其高、中、低剂量的镇痛抗炎作用.方法：采用热板法和扭体法,观察牡丹皮对小鼠的镇痛作用;以腹腔毛细血管通透性变化和二甲苯所致耳廓肿胀度和抑制率为指标,分析牡丹皮的抗炎作用.结果：牡丹皮使小鼠痛阈延长,醋酸刺激所致的小鼠扭体反应次数减少,抑制醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高及二甲苯所引起的耳廓肿胀.结论：牡丹皮具有明显的镇痛抗炎作用,以高剂量最佳.     

中药及单体对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验研究进展

目的：探讨中药及中药单体对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外抑菌试验的研究结果。方法：通过文献法分析归纳有关对MRSA体外抑菌试验有效的中药及中药单体的文献报道。结果：中药及单体对MRSA具有不同程度的抑制作用,能有效减少抗生素的使用。结论：中药及单体对MRSA的体外抑菌试验的研究尚不多,尤其对中药单体的抗MRSA的作用机制研究不充分,尚待系统、深入、规范化的研究。     

棉根皮中棉酚的提取及其工艺条件优化

目的建立棉花根皮中棉酚的提取工艺并对工艺进行了优化。方法利用乙醚超声萃取法提取棉花根皮中的棉酚,洗涤、浓缩得到棉酚粗产品;研究了各种实验条件对棉酚产率的影响,采用分光光度法测定该成分含量,作为评价指标。结果最佳工艺为超声提取法。冷浸1 h,料液比(g.cm-3)1∶2.5,超声提取3次,料液比1∶1,15 min/次,温度为15℃以下。结论超声提取工艺具有节能、省时、效率高的优点。     

HPLC测定不同商品规格桂枝中香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛的含量

目的:建立高效液相色谱法比较桂枝不同商品规格化学成分差别,探讨中药材商品规格与药材化学成分的相关性.方法:采用Waters-Symmetry-RP-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-,检测波长275 nm,柱温30℃.结果:香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛线性范围分别为0.001 32 ～0.132 μg(r =0.999 5),0.001 08～0.108μg(r=0.999 6),0.002 57～0.257 μg(r=0.999 6),0.141 4 ～ 1.448 μg(r=0.999 7);平均加样回收率分别为97.8％ (RSD 1.5％),97.2％ (RSD 1.1％),100.6％ (RSD 1.3％),99.6％ (RSD 1.7％).不同规格桂枝药材中香豆素、肉桂醇、肉桂酸与桂皮醛含量差别较大.结论:方法准确,重复性好,简便易行,可有效地评价桂枝药材的质量,为桂枝药材的商品流通和开发研究提供可靠的依据.     

不同切制法对楤木根皮中皂苷类成分的影响

目的:研究不同切制法对楤木根皮中皂苷类成分的影响。方法:采用鲜切法和干切法对楤木根皮进行切制,以属性较强的显色法进行总皂苷含量测定,并以HPLC测定皂苷元齐墩果酸的含量。结果:齐墩果酸在2.08～10.4 mg.L-1线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率98.33%,RSD 0.83%。鲜切与传统切制根皮总皂苷平均质量分数分别为8.26%,6.59%;鲜切与传统切制根皮齐墩果酸质量分数分别为5.26%,5.23%。结论:楤木根皮采用鲜切法优于传统切制法,能有效降低皂苷类成分的损失,为今后将楤木开发应用提供参考。     

不同产地木通的电化学指纹图谱研究

目的:研究中药木通的电化学指纹图谱,考察反应温度、药材加入量等影响因素,并用电化学指纹图谱对不同产地中药木通进行鉴别。方法:采用B-Z震荡技术,将木通粉末加入以丙二酸为耗散物的BrO~(3-)+H~++Ce~(4+)+丙二酸振荡体系中,用电化学工作站记录数据,用Origin软件绘制电位(E)随时间(t)变化的曲线,计算数据,分析图谱。结果:考察了不同条件对B-Z振荡图谱的影响,获得了不同产地木通的电化学指纹图谱,并对其电化学指纹图谱进行了探讨。确定最佳实验条件为:温度310 K、转速400 r·min~(-1)、药材加入量为0.200 0 g。结论:电化学指纹图谱简便、快速、直观,可方便地用于不同产地木通的区分和鉴别。