CXCR4及其配体SDF-1在宫颈癌转移中的作用及其机制研究

背景与目的:趋化凶子CXCR4[chemokine(C-X-C)receptor 4]受体及其配体基质细胞衍乍因子l(stromal cell dedved factor-1,SDF-1)可能与某些恶性肿瘤的迁移、侵袭和转移有关.本研究拟探讨CXCR4受体及其配体SDF-1(CXCR4/SDF-1轴)通过激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路在官颈癌转移中的作用及其机制.方法:采用激光共聚焦显微镜检测宫颈癌HeLa细胞内钙离子波动,Western blot法分析CXCR4/SDF-1对宫颈癌HeLa细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)(包括ERK1和ERK2)磷酸化的影响;分别通过粘附实验、明胶酶谱法检测CXCR4/SDF-1对宫颈癌细胞粘附能力、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)分泌的影响.结果:SDF-1α与CXCR4相互结合后诱导了HeLa细胞胞内钙的迅速动员,其荧光强度(fluorescent intensity,FI)平均基础值与峰值差异有统计学意义(P＜0.01);诱导了HeLa细胞ERK1/2快速磷酸化,作用后30min时磷酸化程度最强:增加了HeLa细胞粘附能力,不同浓度的SDF-1α与CXCR4结合后不同程度地增加了HeLa细胞粘附于纤维连接蛋白(fibronetin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)的粘附细胞数,与对照组比较其差异均有统计学意义(P＜0.05);加入ERK1/2信号通路抑制剂PD98059后,粘附于FN和LN的细胞数下降,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05);促进宫颈癌HeLa细胞分泌活性的MMP-2,这一作用随SDF-1α浓度升高而增强,SDF-1α在800 ng/mL浓度处分泌达高峰,以后开始下降.结论:CXCR4/SDF-1通过激活MAPK通路调控宫颈癌细胞的粘附能力,促进活性MMP-2分泌,进而参与宫颈癌侵袭和转移.     

RNAi阻断CXCR4基因对胰腺癌AsPC-1细胞肺转移能力的影响

目的:观察针对CXCR4基因的RNAi(RNA interference)转染AsPC-1细胞后肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭的情况及在裸鼠肺内血行转移的情况,探讨SDF-1/CXCR4在胰腺癌转移中的作用.方法:利用小发夹结构RNA作为载体设计针对人CXCR4基因的RNA干扰,利用慢病毒成功转染人胰腺癌细胞系AsPC-1细胞,然后分为转染组(LV-siCXCR4-1)、阴性对照组(AsPC-1-LV-con)和空白对照组(AsPC-1细胞),三组加入SDF-1α后采用MTT法检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移,体外侵袭实验检测细胞的体外侵袭能力,并将三组细胞注入已建立急性血行转移模型的裸鼠尾静脉,45天后观察裸鼠肺部转移结节和肺脏组织,计数肿瘤转移结节的数目并进行HE染色.结果:SDF-1α可促进阴性对照组和空白对照组细胞增殖、迁移和体外侵袭.空白对照组和阴性对照组裸鼠可见大量肺转移结节,而转染组裸鼠未见明显肺转移结节.结论:CXCR4基因RNAi可显著抑制AsPC-1细胞增殖、体外迁移和侵袭及肺血行转移.CXCR4/SDF-1受体配体系统参与了胰腺癌的转移,通过RNAi干扰技术可抑制胰腺癌细胞的转移.     

Lewis肺癌细胞趋化因子受体CXCR4表达的研究

目的:观察趋化因子受体CXCR4在Lewis肺癌细胞和肿瘤组织中的表达,为探讨CXCR4与肿瘤转移的关系提供研究基础。方法:体外培养Lewis肺癌细胞,并建立Lewis肺癌细胞皮下种植瘤模型与自发性转移模型,采用RT-PCR和蛋白质印迹法分析培养细胞和肿瘤组织中CXCR4 mRNA及蛋白质表达水平;应用免疫组化方法分析Lewis肺癌原发瘤和转移瘤中CXCR4表达,并通过迁移实验观察CXCR4特异性配体SDF-1α对Lewis肺癌细胞的趋化作用。结果:培养Lewis肺癌细胞及肿瘤组织中均功能性地表达趋化因子受体CXCR4,且其表达水平与细胞所处氧环境有关;低氧能够促使Lewis肺癌细胞CXCR4蛋白表达增高,与对照组相比差异有统计学意义,t=4.051,P=0.009。12h细胞趋化运动实验显示,CXCR4特异性配体SDF-1α可剂量依赖性诱导Lewis肺癌细胞的趋化运动,在低氧条件下,同对照组相比SDF-1α质量浓度为25ng/mL时开始促进细胞迁移,t=3.053,P=0.031;SDF-1α质量浓度为50ng/mL时可明显提高细胞迁移率,t=4.521,P=0.004。结论:Lewis肺癌细胞功能性表达趋化因子受体CX-CR4,可能与肿瘤细胞迁移和转移有关。     

诺帝抑制人恶性胶质瘤细胞CXCR4表达及功能活性

背景与目的:抑制血管生成将为胶质瘤的治疗提供新的希望,本研究观测我室自行合成的化合物诺帝(Nordy)对人恶性胶质瘤细胞系U87细胞CXCR4表达及其功能活性的影响。方法:通过免疫荧光标记,激光共聚焦扫描显微术观测诺帝对U87细胞CXCR4表达的影响;采用鬼笔环肽(Phalloidin)-FITC标记丝状肌动蛋白(F-actin),并通过激光共聚焦扫描显微术观察诺帝对CXCR4活化引起的F-actin聚合的影响;分别采用趋化试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测诺帝对CXCR4活化引起的细胞迁移活性增加和血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响。结果:25～100μmol/L诺帝处理12h可明显降低U87细胞中CXCR4的表达;用诺帝预处理细胞后,再加入间质细胞衍生因子(SDF-1α),结果发现诺帝可显著抑制CXCR4活化引起的U87细胞迁移活性增加、肌动蛋白聚合和促血管生成因子VEGF分泌。结论:抑制人恶性胶质瘤CXCR4的表达及功能活性可能是诺帝抗癌效应的机制之一。     

miR-206抑制 SDF-1/CXCR4信号活化诱导的乳腺癌细胞迁移和增殖

目的：研究 miR-206在乳腺癌细胞中的作用及其机制。方法 MDA-MB-231细胞分别转染miRNA-NC和 miR-206 mimic 后,荧光显微镜观察转染效率。同时,细胞添加不同剂量（20 ng·mL -1和40 ng·mL -1）基质细胞衍生因子1（SDF-1）处理,利用 Transwell 法检测细胞迁移,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,qRT-PCR 法检测细胞中 CXC 趋化因子受体4（ CXCR4）mRNA 表达水平,Western blot 检测细胞中CXCR4蛋白表达水平。结果 miRNA-NC 组和 miR-206 mimic 组细胞转染效率分别为（83.4±6.3）％和（87.6±8.3）％。与对照组比较,SDF-1显著促进细胞迁移和增殖（P ﹤0.05）。miR-206 mimic 转染明显抑制细胞迁移和增殖（ P ﹤0.05）。SDF-1处理促进细胞中 CXCR4 mRNA 和蛋白的表达水平（ P ﹤0.05）。miR-206 mimic 转染则抑制 CXCR4蛋白表达水平（P ﹤0.05）,但不影响 CXCR4 mRNA 表达（P ﹥0.05）。结论 miR-206通过抑制 CXCR4表达拮抗 SDF-1诱导乳腺癌细胞迁移和增殖作用。     

SDF-1／CXCR4与肿瘤研究进展

基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其受体CXCR4在促进肿瘤细胞增殖、定向迁移、黏附、降解细胞外基质、血管形成及诱导免疫耐受中发挥着重要作用。文章就SDF-1／CXCR4轴在肿瘤生物学行为中的作用进行简要综述。     

低氧刺激对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响及其机制的探讨

目的:探讨模拟低氧环境对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及低氧诱导因子(HIF-1α)、基质衍生因子-1(SDF-1)和趋化因子受体4(CXCR4)表达的影响。方法:常规复苏、传代培养MCF-7细胞,待细胞对数期生长后分别用50、100、150和200μmol/L CoCl2处理细胞,并于12、24和48h收集细胞进行以下指标检测。MTT比色法检测细胞增殖抑制率;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1和CXCR4的mRNA表达;蛋白质印迹法检测HIF-1α和CXCR4在蛋白水平的表达;免疫荧光法测定150μmol/L CoCl2经不同时间处理后MCF-7细胞中SDF-1的表达。结果:低氧模拟微环境中,应用CoCl2处理MCF-7细胞后有较明显抑制作用,实验中以CoCl2(50、100、150和200μmol/L)处理MCF-7细胞24h后抑制率分别为(54.62±0.07)%、(65.21±0.03)%、(80.15±0.01)%和(94.51±0.01)%;以CoCl2150μmol/L浓度处理细胞12、24和48h后,抑制率分别为(70.83±0.03)%、(80.15±0.01)%和(89.27±0.03)%;RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,HIF-1α、SDF-1和CXCR4的mRNA的表达及HIF-1α和CXCR4蛋白的表达与低氧时间和CoCl2浓度有关,以低氧处理细胞24h及CoCl2浓度150μmol/L时最明显;免疫荧光结果表明CoCl2150μmol/L时MCF-7细胞SDF-1蛋白的表达随时间延长有增加。结论:CoCl2模拟低氧后,细胞生长受抑制呈时间和浓度依赖性;CoCl2浓度在50～150μmol/L时,HIF-1α、SDF-1和CXCR4在mRNA和蛋白水平表达上调并呈现时间和浓度依赖性。     

霞草苷Ⅱ通过PI3K/AKT和ERK/MAPK通路下调CXCR4表达抑制DU145细胞侵袭

目的 观察霞草苷Ⅱ(OldhamianosideⅡ)对前列腺癌DU145细胞侵袭性的影响,检测器官特异性转移相关蛋白CXC趋化因子受体4(CXC-chemokine receptor4,CXCR4)表达的变化,并探讨其可能作用通路.方法 应用细胞划痕实验,观察霞草苷Ⅱ对DU145细胞迁移的影响;Transwell小室法,观察霞草苷Ⅱ对DU145细胞体外侵袭性的影响;免疫细胞化学方法观察DU145细胞CXCR4表达变化;Western blot检测CXCR4表达及AKT、ERK1/2的磷酸化水平.结果 细胞划痕实验显示,1 mg/L霞草苷Ⅱ处理的DU145细胞和对照组比较,细胞迁移明显减慢;体外侵袭实验结果显示,基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)可明显增加DU145细胞的穿膜数量,霞草苷Ⅱ可抑制SDF-1诱导的DU145细胞侵袭;免疫细胞化学结果显示,经霞草苷Ⅱ处理后CXCR4表达下调;Western blot结果表明,霞草苷Ⅱ下调CXCR4表达,降低AKT、ERK1/2的磷酸化水平.结论 霞草苷Ⅱ通过PI3 K/AKT和ERK/MAPK通路下调CXCR4表达,影响SDF-1/CXCR4反应轴,进而抑制细胞的迁移和侵袭.     

CXCR4单克隆抗体抑制乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)单克隆抗体(CXCR4 mAb)对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨CXCR4 mAb抗肿瘤的作用机制.方法 采用8周龄Balb/c雌性裸鼠,建立乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤模型.运用CXCR4 mAb进行干预,从整体水平观察CXCR4 mAb对肿瘤生长的影响,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况.结果 CXCR4 mAb可明显抑制移植瘤的生长,瘤体抑制率达到71.4%;CXCR4 mAb治疗后的肿瘤组织中PCNA和VEGF表达明显下降,而Caspase-3表达上升.结论 CXCR4 mAb可能是通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管形成而发挥抗肿瘤生长的作用.     

c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:免疫组化和qRT-PCR检测胃癌组织及其癌旁组织中c-Myc的表达;qRT-PCR和Western blot检测人胃黏膜细胞GES-1和人胃癌细胞HGC-27、AGS、SGC-7901中c-Myc的表达;HGC-27细胞转染siRNA-NC和siRNA-c-Myc。48 h后,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、CXC亚家族受体4（cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4）和基质细胞衍生因子（stromal cell derived factor-1,SDF-1）蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中c-Myc mRNA表达和免疫组化评分升高（P＜0.05）。与GES-1组相比,HGC-27组、SGC-7901组和AGS组中c-Myc mRNA和蛋白表达均升高（P＜0.05）。与siRNA-NC组相比,siRNA-c-Myc组细胞在24 h、48 h和72 h增殖能力减弱（P＜0.05）,G0/G1期细胞比例升高（P＜0.05）,G2/M和S期细胞比例降低（P＜0.05）,迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P＜0.05）,HIF-1α、CXCR4和SDF-1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论:敲低c-Myc可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期阻滞,该作用可能是通过抑制HIF-1α/CXCR4通路实现的。     

Stathmin蛋白的研究进展

目的: 探讨趋化因子受体CXCR4表达水平对人肺癌细胞转移潜能的影响.方法: 采用RT-PCR,FACS检测趋化因子受体CXCR4在肺癌细胞株95C,95D细胞的表达.构建CXCR4正义和反义真核表达质粒,用脂质体法转染至95C和95D细胞内,通过G418筛选出稳定转染株.通过趋化和趋化侵袭实验测定转染前后细胞对基质衍生因子(SDF-1α)的迁移能力,通过明胶酶谱法检测MMP-2活性,通过FACS检测细胞对血管内皮细胞的黏附能力.结果: CXCR4正义和反义真核表达质粒pcDNA3-X4和pcDNA3-ASX4能明显上调或下调肺癌细胞表面CXCR4的表达,上调95C细胞表面CXCR4的表达可以增强其对SDF-1α的趋化反应性、MMP-2活性及其对血管内皮细胞的黏附能力.相反,下调95D细胞表面CXCR4的表达抑制了其对SDF-1α的趋化反应性、MMP-2活性及其对血管内皮细胞的黏附能力.结论: 上调或下调肺癌细胞表面CXCR4表达可以显著增强或抑制其转移潜能,提示CXCR4表达水平与肺癌细胞转移潜能有关.     

CXCR4 单克隆抗体对新生血管形成的影响

目的：探讨CXC趋化因子受体4（CXCchemokinereceptor4，CXCR4）单克隆抗体（CXCR4mAb）对新生血管形成的影响及其作用机制。方法：以鸡胚绒毛尿囊膜（chorioallantoicmembrane，CAM）血管抑制实验检测CXCR4单克隆抗体对新生血管形成的影响，WesternBlot免疫印迹法检测血管内皮细胞SDF-1蛋白的表达。结果：CXCR4单克隆抗体可明显抑制新生血管的形成，并且使培养的血管内皮细胞SDF-1蛋白表达明显降低：结论：CXCR4mAb可通过SDF-1／CXCR4生物轴抑制新生血管的形成。     

截短型LEF-1 对 HeLa细胞系生物学行为的影响及其相关机制

 目的 探讨淋巴细胞增强因子（LEF-1）截短亚型对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响及其分子机制。方法 利用PCR方法从人淋巴结cDNA文库中克隆LEF-1截短型的编码基因,将其插入pCDNA3.1/V5-His载体中构建截短型LEF-1的真核表达质粒,脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-Δ-LEF-1转染HeLa细胞,G418筛选稳定表达目的基因的细胞株,Western blot鉴定目的基因的表达,流式细胞术分析转染后细胞的增殖,凋亡和胞周期变化,以及CXCR4的表达情况;细胞外基质实验检测细胞的黏附能力;Transwell检测细胞的迁移能力。结果成功构建截短型LEF 1真核表达质粒,获得稳定表达LF-1截短亚型的HeLa细胞株,目的基因稳定表达,转染后的细胞增殖速度减慢,凋亡增加,细胞阻滞在G0/G1期,迁移能力降低,CXCR4的表达降低。结论LEF-1截短亚型可以抑制HeLa细胞增殖和迁移,而这种调控作用可能和CXCR4的表达有关。     

CXCR4及其配体SDF-1α在卵巢癌SKOV3细胞黏附和侵袭中的作用

目的:探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)与其配体基质细胞衍生因子-1α(stromal derived factor-1α,SDF-1α)通过激活丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen-activated protein kinase,MAPK) 信号通路在卵巢癌黏附和侵袭中的作用及其机制.方法:采用激光共聚焦显微镜观察SDF-1α处理前、后卵巢癌SKOV3细胞中钙离子的波动;Western 印迹法检测SDF-1α对SKOV3 细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)-1和-2磷酸化的影响;通过黏附实验、明胶酶谱法检测SDF-1α/CXCR4对卵巢癌细胞黏附能力以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9活性的调控.结果:SDF-1α诱导卵巢癌细胞内钙的迅速动员及ERK1和ERK2的快速磷酸化;增加卵巢癌细胞黏附于纤维连接蛋白(fibronectin, FN)和Ⅳ型胶原的能力;加入ERK1/2信号通路的抑制剂PD98059后,可降低SDF-1α促进卵巢癌细胞黏附于细胞外基质(extracellular matrix , ECM)的能力;同时SDF-1α可促进卵巢癌细胞分泌活性MMP-2和MMP-9. 结论:SDF-1α/CXCR4通过激活MAPK信号通路调控卵巢癌细胞的黏附能力,促进活性MMP-2和MMP-9的分泌,进而参与卵巢癌的侵袭和转移.     

骨髓增生异常综合征中CD34+细胞CXCR4的表达及其与细胞迁移的相关性

  目的  探讨不同危险度骨髓增生异常综合征（myelodysplasticsymdromes,MDS）中骨髓CD34+细胞CXCR4的表达情况及其与细胞迁移率的相关性。   方法  收集40例骨髓增生异常综合征患者的骨髓标本,根据IPSS积分系统进行危险度分组。低危组20例:IPSS积分0~1.5分;高危组20例:IPSS积分≥1.5分;同时采集10例健康者的骨髓标本作为对照。分离纯化骨髓CD34+细胞,通过流式细胞术检测CXCR4膜蛋白的表达;研究SDF-1α趋化作用下CD34+细胞的迁移率及CD34+细胞对骨髓基质细胞的迁移率。   结果  高危组MDS患者CD34+细胞CXCR4的表达率明显高于低危组和正常对照组（P < 0.000 1）;低危组和正常对照组之间CXCR4的表达率无显著性差异（P>0.05）。高危组CD34+细胞对SDF-1α及骨髓基质细胞的迁移率显著高于低危组及正常组（均P < 0.000 1）,且其对骨髓基质细胞的迁移率与CXCR4的表达呈正相关（P=0.000 1）。   结论  高危组MDS患者CD34+细胞CXCR4的表达量及其对骨髓基质细胞的迁移率均明显高于低危组患者,且其迁移率随CXCR4表达量的增加而升高,不同风险组的MDS患者存在SDF-1及其受体CXCR4表达和功能上的差异,SDF-1及其受体CXCR4在MDS发病中具有重要作用。      

与羊膜上皮细胞共培养对羊膜间充质干细胞生物学特性的影响

[摘要] 目的：研究与羊膜上皮细胞（amniotic epithelial cells,AEC）共培养对羊膜间充质干细胞（amniotic mesenchymal stem cells,AMSC）生物学特性的影响,并探讨基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1, SDF-1）/CXCR4 轴在AMSC 归巢、迁移过程中的作用。方法：从人羊膜中分别分离、培养AMSC和AEC,进行扩增及鉴定。实验设AMSC与AEC共培养组、无血清AMSC培养组以及血清AMSC培养组,培养24、48、72 h 后,通过CCK-8 及锥虫蓝实验检测AMSC细胞增殖活性,免疫荧光流式细胞术和Real-time PCR检测CXCR4 mRNA的表达水平,细胞迁移实验检测AMSC细胞体外迁移能力。结果：48、72 h 共培养组及血清培养组细胞增殖活性及增殖率均高于无血清培养组(P<0.05);共培养组与无血清培养组AMSC细胞的CXCR4 mRNA和蛋白表达明显高于血清培养组(P<0.05),两组AMSC细胞依赖迁移能力明显高于血清培养组(P<0.05)。结论：与AEC共培养的AMSC细胞仍具备间充质干细胞的基本生物学特性,且能保持良好的增殖活性,共培养能上调AMSC表面CXCR4,并在体外增强其迁移能力。     

Lewis肺癌细胞趋化因子受体OXOR4表达的研究

目的：观察趋化因子受体CXCR4在Lewis肺癌细胞和肿瘤组织中的表达，为探讨CXCR4与肿瘤转移的关系提供研究基础。方法：体外培养Lewis肺癌细胞，并建立Lewis肺癌细胞皮下种植瘤模型与自发性转移模型，采用RTPCR和蛋白质印迹法分析培养细胞和肿瘤组织中CXCR4mRNA及蛋白质表达水平；应用免疫组化方法分析Lewis肺癌原发瘤和转移瘤中CXCR4表达，并通过迁移实验观察CXCR4特异性配体SDFla对Lewis肺癌细胞的趋化作用。结果：培养Lewis肺癌细胞及肿瘤组织中均功能性地表达趋化因子受体CXCR4，且其表达水平与细胞所处氧环境有关；低氧能够促使Lewis肺癌细胞CXCR4蛋白表达增高，与对照组相比差异有统计学意义，t=4．051，P=0．009。12h细胞趋化运动实验显示，CXCR4特异性配体SDF-1α可剂量依赖性诱导Lewis肺癌细胞的趋化运动，在低氧条件下，同对照组相比SDF-1α质量浓度为25ng／mL时开始促进细胞迁移，t=3．053，P=0．031；SDF-1α质量浓度为50ng／mL时可明显提高细胞迁移率，t=4．521，P=0．004。结论：Lewis肺癌细胞功能性表达趋化因子受体CX—CR4，可能与肿瘤细胞迁移和转移有关。     

G-CSF对白血病细胞表面CXCR4表达及其趋化功能的影响

目的:观察G-CSF对U937细胞及WEHI-3细胞表面CXCR4表达水平及细胞趋化性的影响,探讨G-CSF对白血病细胞免疫微环境的影响。方法:U937细胞及WEHI-3细胞分别与G-CSF共培养,应用流式细胞仪检测细胞CXCR4的表达,微孔细胞转移试验观察细胞的迁移能力。结果:U937细胞及WEHI-3细胞表面CXCR4表达随G-CSF作用时间的延长可明显降低（P＜0.05）。U937细胞及WEHI-3细胞与G-CSF共培养后迁移至下室的细胞数较未与G-CSF共培养的细胞明显减少（P＜0.05）。未与G-CSF共培养的U937和WEHI-3细胞具有向SDF-1迁移的能力（P＜0.05）。结论:G-CSF不仅可以降低白血病细胞表面CXCR4的表达,同时可以降低白血病细胞向SDF-1的迁移能力,G-CSF可能通过改变白血病细胞免疫微环境,从而打破白血病细胞免疫逃逸。     

CXCR4单克隆抗体抑制乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的实验研究

目的：研究CXC趋化因子受体4（CXC chemokine receptor 4,CXCR4）单克隆抗体（CXCR4 mAb）对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨CXCR4 mAb抗肿瘤的作用机制。方法：采用8周龄Balb/c雌性裸鼠,建立乳腺癌MCF-7细胞裸鼠皮下移植瘤模型。运用CXCR4 mAb进行干预,从整体水平观察CXCR4 mAb对肿瘤生长的影响,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、半胱氨酸天冬氨酸酶3（Caspase-3）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达情况。结果：CXCR4 mAb可明显抑制移植瘤的生长,瘤体抑制率达到71.4%;CXCR4 mAb治疗后的肿瘤组织中PCNA和VEGF表达明显下降,而Caspase-3表达上升。结论：CXCR4 mAb可能是通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管形成而发挥抗肿瘤生长的作用。     

SDF-1/CXCR4轴在白血病患者骨髓中的表达及与血管新生的关系

目的：探讨SDF-1/CXCR4轴在白血病患者骨髓中的表达及与血管新生的关系。方法:采用 CD45/SSC设门四色流式细胞仪检测55例白血病患者骨髓的CXCR4表达。采用ELISA法检测SDF-1/VEGF;采用Envinson二步法检测骨髓组织MVD;多重PCR法检测白血病患者IgH、TCRγ链V区和J区,采用G-显带技术进行细胞遗传学核型分析。结果:AML组SDF-1(2145.21±329.45)pg/ml、CXCR4阳性表达率 (60.01±18.5)％;ALL组SDF-1(2549.02±303.4）pg/ml、 CXCR4阳性表达率（70.22±12.73）％;CML组SDF-1(1929.72±253.81)pg/ml、CXCR4阳性表达率（40.05±16.69）％;CRAL组SDF-1(2070.98±159.98)pg/mL、CXCR4阳性表达率(58.4±11.8)％;与对照组相比均明显增高,P<0.05。急淋SDF-1/CXCR4表达率高于其他白血病组;白血病SDF-1/CXCR4表达与相关因素的分析中发现,ALL与外周血WBC数量有相关性(r=0.534、 0.567, P<0.01),与急性白血病伴髓外浸润者有意义(P<0.05）;SDF-1/CXCR4 表达与白血病患者血小板计数、年龄、性别差异、骨髓增生程度、染色体改变、急性白血病骨髓细胞CD34+表达、ALL的IgH和TCRγ链V区和J区基因重排等因素无明显关系。白血病患者骨髓SDF-1、CXCR4、VEGF的相关系数为0.552, 0.553, 0.531,P<0.05。三者具有显著相关性。结论:白血病骨髓液中SDF-1含量及各群细胞CXCR4高表达,其中ALL表达最高;急性白血病缓解后依然高表达;SDF-1/CXCR4表达与ALL的外周血白细胞数量、有髓外浸润者有关,白血病中SDF-1/CXCR4、VEGF高表达并且相互之间存在有相关性,与白血病血管新生有关联。