三氧化二砷增强TRAIL对肺癌移植瘤抑制作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL）联合三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用及可能机制。方法:将裸鼠肺癌移植瘤模型随机分为生理盐水组、TRAIL组、ATO组及TRAIL+ATO组,称瘤重并计算抑瘤率,用RT-PCR检测NF-κB、Caspase-3、Survivin基因表达变化。结果:与生理盐水组比较,ATO组对裸鼠肺癌移植瘤具有抑制作用,联合用药具有协同增效作用,抑制NF-κB 表达,下调Survivin mRNA,上调Caspase-3的表达。结论:ATO可能通过NF-κB通路,下调Survivin,上调Caspase-3增强TRAIL对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。     

槐耳颗粒联合沙利度胺抑制鼠肝癌H22细胞种植瘤的实验

目的探讨槐耳颗粒和沙利度胺治疗肿瘤的作用机制。方法将雄性昆明小鼠(每组10只)分为对照组（A组）、槐耳颗粒组(B组)、沙利度胺组(C组)和槐耳颗粒+沙利度胺组(D组)。用H22细胞给小鼠皮下注射,复制皮下瘤模型。观察各组移植瘤质量和抑瘤率,采用免疫组织化学法检测各组瘤组织VEGF、CD31蛋白表达。结果与对照组比较,3个用药组小鼠的移植瘤重和瘤组织CD31阳性率显著低于对照组(P＜0.01),槐耳颗粒+沙利度胺组VEGF表达显著低于对照组VEGF表达(P＜0.01);与沙利度胺组和槐耳颗粒组比较,槐耳颗粒+沙利度胺组小鼠瘤质量和瘤组织CD31阳性率显著降低 (P＜0.05)。结论槐耳颗粒和沙利度胺联合用药有明显抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过下调VEGF蛋白表达和降低微血管密度,促进肿瘤细胞凋亡;并且两者有协同作用。     

三氧化二砷、沙利度胺对人类骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1体外生长的影响

 目的　探讨沙利度胺和三氧化二砷对人类骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1的影响及其作用机制。方法　采用CCK-8法检测三氧化二砷、沙利度胺以及二者联合用药对MUTZ-1细胞株增生是否有抑制作用。采用半定量RT-PCR方法分别检测三氧化二砷、沙利度胺以及二者联合对MUTZ-1的Bmi-1基因是否有抑制作用,并用流式细胞术对细胞株行凋亡检测。结果　沙利度胺体外对MUTZ-1细胞无明显生长抑制作用（P >0.05）,三氧化二砷对MUTZ-1细胞有明显生长抑制作用（P＜0.05）,联合用药组的抑制作用明显高于三氧化二砷、沙利度胺单独用药组（CDI＜0.7）;三氧化二砷组的细胞凋亡率随着药物浓度增加而升高,呈剂量依赖（r＝0.627,P＜0.05）;沙利度胺组细胞凋亡率随着药物浓度增加无明显升高（r＝0.313,P＞0.05）,联合用药组随着药物浓度增加表达亦升高（P＜0.05）;三氧化二砷组Bmi-1／β-actin随着药物浓度增加表达下降,呈剂量依赖性（r＝-0.912,P＜0.05）,沙利度胺组Bmi-1／β-actin随着药物浓度增加表达无明显下降（r＝0.594,P＞0.05）,联合用药组对Bmi-1的抑制作用明显高于三氧化二砷、沙利度胺单独用药组（CDI＜0.7）。结论　沙利度胺体外对MUTZ-1细胞无明显生长抑制作用,三氧化二砷对MUTZ-1细胞有明显生长抑制作用,联合用药组的抑制作用明显提高。     

紫杉醇节律化疗抗Lewis肺癌血管生成作用的实验研究

目的 观察紫杉醇节律化疗对C57BL/6小鼠Lewis肺癌(LLC)肿瘤生长及血管生成的影响并探讨其可能的机制.方法 建立小鼠LLC模型,随机分组后分别给予紫杉醇节律化疗和生理盐水腹腔注射,隔天测量小鼠体重及肿瘤体积.小鼠处死后称瘤重,应用免疫组化观察小鼠肿瘤组织中微血管和巨噬细胞、NF-κB蛋白的表达.结果 节律化疗组小鼠移植瘤的生长速度减慢,对照组皮下瘤重及体积明显大于节律化疗组(P＜0.05),节律化疗组微血管和巨噬细胞减少(P＜0.05),NF-κB蛋白表达亦减少(P＜0.05).巨噬细胞计数与微血管计数有相关关系.结论 紫杉醇节律化疗可明显抑制小鼠LLC的生长及血管生成,其可能机制之一是节律化疗可以下调小鼠肿瘤组织中的NF-κB蛋白表达,从而减少肿瘤新生血管生成.     

塞来昔布联合奥沙利铂对人肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用及其作用机制的研究

目的：研究COX-2抑制剂与化疗药物奥沙利铂对人肺癌裸鼠移植瘤生长、Survivin表达和微血管生成的影响。方法：人肺癌A549细胞接种于裸鼠背部皮下,随机分为四组（对照组;奥沙利铂组;塞来昔布组;奥沙利铂和塞来昔布联合用药组）并给予相应的药物。测量肿瘤体积,42天后处死裸鼠,切取移植瘤组织检测COX-2,VEGF,Sur-vivin表达和微血管密度（MVD）。结果：塞来昔布组和奥沙利铂组抑瘤率分别为34.60%和46.70%,奥沙利铂和塞来昔布联合应用组抑瘤率为66.09%。免疫组织化学染色和RT-PCR结果分析显示：奥沙利铂组COX-2,VEGF表达显著高于对照组（P〈0.05）。微血管密度与对照组比较无显著性差异（P〉0.05）。奥沙利铂组Survivin表达低于对照组,塞来昔布组和联合用药组COX-2,VEGF表达和MVD低于对照组（P〈0.05）。结论：塞来昔布可抑制人肺癌裸鼠移植瘤的生长、Survivin表达和血管生成。塞来昔布与奥沙利铂联合应用提高了奥沙利铂的抗肿瘤效果。     

NF-κB、COX-2在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16感染的关系

背景与目的:探讨宫颈癌组织中NF-κB、COX-2的表达及其与HPV16感染的关系.材料与方法:采用免疫组织化学PowerVision TM二步法对46例宫颈癌和31例正常宫颈组织进行NF-κB、COX-2蛋白检测,用PCR技术对组织标本的HPV16 DNA进行检测.结果:NF-κB、COX-2在宫颈癌组织中的表达率显著高于正常对照组(P＜0.01),NF-κB、COX-2的表达与HPV16型的感染具有相关性(P＜0.05).结论:宫颈癌组织中NF-κB、COX-2呈高表达.NF-κB的活化及COX-2的高表达可能与HPV16感染有关.     

舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901 细胞增殖及COX-2 、NF-κB 表达的抑制作用

 目的 探讨舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖及COX-2、NF-κB表达的影响. 方法 对人胃癌SGC-7901细胞采用细胞培养,MTT法检测不同浓度舒林酸、尼美舒利对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用,免疫组化、western blot方法检测药物对COX-2、NF-κB表达的影响. 结果 舒林酸、尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞生长并具有浓度、时间依赖性;与阴性对照组相比,药物作用48h后尼美舒利100、200μmol/L组,舒林酸0.6、1.2mmol/L组COX-2、NF-κB蛋白表达明显减弱并具有剂量依赖性（P＜0.05）,COX-2、NF-κB之间正相关（P＜0.05）. 结论 舒林酸、尼美舒利可以抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,抑制NF-κB, COX-2的蛋白表达在二者抑制肿瘤机制中可能具有一定作用.     

Survivin、NF-κB、VEGFR-2在食管小细胞癌中的表达及其与甲磺酸阿帕替尼疗效的相关性

目的 探讨食管小细胞癌Survivin、NF-κB和血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)的表达及其与甲磺酸阿帕替尼疗效的相关性.方法 采用免疫组化SABC法检测36例食管小细胞癌Survivin、NF-κB、VEGFR-2的表达,并计数微血管密度(microvascular density,MVD)和微淋巴管密度(micro-lymphatic vessel density,MLVD),分析各指标与MVD、MLVD计数及甲磺酸阿帕替尼疗效的关系.结果 Survivin、NF-κB和VEGFR-2在食管小细胞癌中的阳性表达率分别为22.22％、66.67％和80.56％.Survivin、MLVD与食管小细胞癌淋巴结转移和浸润深度均无相关性(P＞0.05).VEGFR-2、NF-κB表达及MVD与淋巴结转移密切相关(P＜0.05),与浸润深度无关(P＞0.05).NF-κB、VEGFR-2表达阳性者MVD明显高于阴性表达者(P＜0.05).NF-κB、VEGFR-2阳性组患者口服甲磺酸阿帕替尼治疗的疗效优于阴性组,而Survivin阳性、阴性组疗效差异无统计学意义(P＞0.05).结论 食管小细胞癌中的VEGFR-2、NF-κB表达及MVD均与淋巴结转移密切相关,NF-κB、VEGFR-2阳性表达可作为口服甲磺酸阿帕替尼靶向治疗的生物学参考靶标.     

NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨核转录因子κB(NF-κB)、环氧化酶2(COX-2)、肝激酶基因B1(LKB1)在不同子宫内膜组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测60例正常子宫内膜、31例非典型增生子宫内膜和60例子宫内膜癌组织中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的表达,并分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系.结果 NF-κB、COX-2、LKB1在子宫内膜癌组织、非典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中的阳性表达率分别为63.3％、70.0％、35.0％,41.9％、64.5％、61.3％和35.0％、51.7％、93.3％,NF-κB、LKB1在3组间的表达差异有统计学意义(P＜0.05),而COX-2的表达差异无统计学意义(P＞0.05).子宫内膜癌中NF-κB、COX-2、LKB1蛋白的阳性表达与病理类型、FIGO分期、淋巴结转移均无关(P＞0.05).LKB1蛋白表达与肌层浸润深度和组织学分级相关(P＜0.05),NF-κB蛋白表达与组织学分级亦相关(P＜0.05).结论 NF-κB在子宫内膜癌组织中高表达、LKB1低表达,其表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关.     

NF-κB、cyclin D1和p27在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)、细胞周期素D1(cyclin D1)和p27在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化S-P法检测58例非小细胞肺癌(NSCLC)和15例正常肺组织中NF-κBp65、cyclin D1、p27的表达.结果:NSCLC组织中NF-κBp65和cyclin D1的表达明显高于正常肺组织中的表达(P＜0.01),p27表达则明显低于正常肺组织(P＜0.01).NF-κBp65表达与NSCLC瘤体大小、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05);cyclin D1表达与瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.05);p27表达与瘤体大小、肿瘤分化密切相关(P＜0.05).NF-κBp65与cyclin D1在NSCLC组织中的表达呈正相关(P＜0.05),cyclin D1与027的表达呈负相关(P＜0.05),NF-κBp65与p27的表达无相关性(P＞O.05).结论:NF-κB、cyclin D1、p27与非小细胞肺癌的发生、发展有关,检测三种蛋白的表达可以间接判断NSCLC的生物学行为.     

细胞核因子-κBp65、环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-9在下咽癌中表达的临床意义

目的 研究细胞核因子-κB p65(NF-κB p65)、环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在下咽癌中的表达及内在相关性.方法 应用流式细胞术(FCM)对原发下咽癌新鲜癌组织及相应癌旁组织各48例,进行NF-κB p65、COX-2和MMP-9表达的蛋白定量分析,以荧光指数(FI)表示三种蛋白表达的相对含量.结果 NF-κB p65、COX-2和MMP-9在下咽癌组织中的表达量分别为1.16、1.32和1.26,均明显高于癌旁组织的1.03、1.04和1.04.三种蛋白在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组(P＜0.05).下咽癌组织中NF-κB p65和COX-2的表达呈正相关(P＜0.05).结论 NF-κB p65、COX-2和MMP-9的高表达与下咽癌的发生、发展及淋巴结转移密切相关,NF-κB p65可能促进COX-2的表达.     

抑制NF-κB 对人肺癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响

 目的 探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)对肺癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 人肺癌A549细胞接种于裸鼠皮下，建立肺癌裸鼠移植瘤模型，分为对照组和PDTC组，比较移植瘤重量，计算抑瘤率；RT—PCR检测移植瘤环氧化酶-2(COX-2)基因表达，免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)和FⅧ蛋白表达，并计数微血管密度(MVD)。结果 PDTC组移植瘤重量显著低于对照组(P<0．01)，抑瘤率为41．03％；COX-2、VEGF表达及MVD计数均显著低于对照组(P<0．01，P<0．01，P<0．05)。结论 PDTC可抑制肺癌裸鼠移植瘤的生长，该作用可能与其抑制COX-2、VEGF表达，从而抑制血管生成有关。     

沙利度胺联合放射治疗对结肠癌小鼠移植瘤生长及放射敏感性的影响

背景与目的：沙利度胺能有效增强肿瘤对放射的敏感性,但作用机制尚不清楚。本研究探讨沙利度胺对人结肠癌小鼠移植瘤放射敏感性的影响,并探讨其协同抑制效应的机制。方法：建立colon26结肠癌移植瘤模型,将32只小鼠随机分为对照组;单纯沙利度胺组(T组);单纯放疗组(R组);沙利度胺+放疗组(T+R组);从治疗当天开始,隔日测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,治疗结束时测量肿瘤体积,计算抑瘤率,处死小鼠后剥离瘤体,采用免疫组化法测定各组肿瘤组织微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果：治疗第22天,对照组、T组、R组和T+R组移植瘤平均体积分别为(4.97±1.20)cm3、(2.90±0.92)cm3、(2.66±0.88)cm3和(1.89±0.76)cm3;肿瘤生长抑制率分别为41.7%、46.5%和61.9%,T+R组移植肿瘤抑瘤率明显高于其他各组(P＜0.05);与R组比较,T+R组的放射增敏率为2.27;沙利度胺联合放射治疗能显著抑制肿瘤组织MVD生成：T+R组的平均MVD较对照组下降了46.8%,下降程度明显高于T组(40.7%)和R组(37.7%,P＜0.05);且T+R组肿瘤组织中出现较多的坏死,坏死细胞数明显高于对照组(P＜0.05)。结论：沙利度胺可以增强结肠癌小鼠移植瘤的放射敏感性,其机制可能与抑制移植瘤血管的生成有关。     

低剂量紫杉醇联合沙利度胺抑制小鼠S-180肉瘤血管生成的研究

目的:探讨低剂量紫杉醇联合沙利度胺对小鼠S-180肉瘤血管生成的作用。方法:建立S-180移植瘤小鼠模型,将40只荷瘤小鼠随机分为4组。A组:生理盐水组(对照组);B组:紫杉醇组,腹腔内注射20 mg/kg,每周3次,连续2周;C组:沙利度胺组,200 mg/kg灌胃,每周3次,连续2周;D组:紫杉醇+沙利度胺组,腹腔内注射紫杉醇(20 mg/kg)和沙利度胺(200 mg/kg)灌胃,每周3次,连续2周。观察瘤重、抑瘤率、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达和微血管密度(microvessel density,MVD)计数。结果:与对照组比较,B、C、D组均能降低瘤重、减少VEGF的表达、降低MVD计数(P<0.05);D组分别与B、C组比较,VEGF的表达及MVD计数均低于B、C组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:小剂量紫杉醇联合沙利度胺能一定程度上抑制S180肉瘤血管的生长,两者具有协同作用。     

胃癌细胞中COX-2通过NF-κB/Snail调控E-cadherin表达的机制

目的 探讨COX-2调控E-cadherin表达的相关信号通路及分子机制,揭示COX-2与胃癌侵袭转移的关系及作用机制.方法 采用不同浓度的选择性COX-2抑制剂塞来昔布干预人胃癌细胞株SGC-7901不同时间后,应用实时荧光定量RT-PCR法和Western blot法检测SGC-7901细胞中COX-2、NF-κB、Snail及E-cadherin mRNA和蛋白的表达情况.结果 随着塞来昔布作用剂量的增大和干预时间的延长,COX-2、NF-κB和Snail mRNA及蛋白的表达量均显著下降(P＜0.05),呈剂量和时间依赖性降低;E-cadherin mRNA及蛋白的表达量上升(P＜0.05),呈剂量和时间依赖性升高.采用Spearman相关分析,显示COX-2与NF-κB及COX-2与Snail蛋白表达呈正相关性(r =0.881,P＜0.01;r =0.839,P＜0.01);COX-2与E-cadherin蛋白表达呈负相关性(r=-0.814,P＜0.01).结论 COX-2可能通过NF-κB/Snail信号通路调控E-cadherin的表达,进而参与胃癌的浸润转移过程.     

塞来昔布联合氟尿嘧啶对MFC细胞615小鼠原位移植瘤COX-2、Fas表达的影响及意义

[目的]通过测定在塞来昔布及氟尿嘧啶干预下的小鼠前胃癌细胞(MFC)615小鼠原位移植瘤中环氧合酶(COX-2)、Fas的表达,对COX-2抑制剂联合氟尿嘧啶对胃癌的影响及意义进行探讨.[方法]制备MFC细胞615小鼠原位移植胃癌模型.造模成功后分为塞来昔布组、联合用药组及对照组,其中塞来昔布25mg/kg灌胃,氟尿嘧啶50mg/kg腹腔注射.观察各组小鼠一般情况.干预3周后处死小鼠,计算抑瘤率.SP免疫组织化学法检测各组肿瘤COX-2、Fas表达.[结果]造模成功率100.00％(30/30).联合用药组、塞来昔布组的小鼠一般情况优于对照组.实验结束后3组比较,塞来昔布组、联合用药组比对照组肿瘤体积和瘤重的抑制率均明显升高(P＜0.05).与塞来昔布组相比,联合用药组肿瘤体积更小、瘤重减轻(P＜0.05).COX-2蛋白在塞来昔布组、联合用药组表达阳性率明显低于对照组,而Fas蛋白的表达则明显高于对照组(P＜0.05).[结论]塞来昔布及氟尿嘧啶对胃癌有抑制作用,其机制与调节COX-2、Fas蛋白表达有关.     

CDX2 COX-2和NF-κB在胃癌和癌前病变中的表达和意义

  目的  探讨CDX2、COX-2和NF-κB在胃癌和癌前病变中的表达以及相互之间的关系。   方法  采用免疫组织化学染色法（SP法和SABC法）检测正常胃黏膜组20例、胃癌癌前病变组38例及胃癌组48例中CDX2、COX-2和NF-κB的表达情况。   结果  NF-κB和COX-2在胃癌组中的表达明显增强,其阳性率显著高于正常胃黏膜组（P < 0.01）和癌前病变组（P < 0.01）;CDX2在正常胃黏膜组中低表达,癌前病变组CDX2的表达阳性率高于胃癌组（P < 0.01）;CDX2与胃癌分化程度、胃癌的病灶大小和浸润深度相关（P < 0.05）;COX-2和NF-κB与胃癌病灶大小、浸润深度和淋巴结转移相关（P < 0.05）;NF-κB与COX-2在胃癌组织中表达呈正相关;CDX2与COX-2、NF-κB的表达呈负相关。   结论  CDX2、COX-2和NF-κB可能相互作用参与了胃癌的发生发展和侵袭转移。      

榄香烯对恶性淋巴瘤细胞多药耐药性影响及机制的研究

目的:研究榄香烯对恶性淋巴细胞瘤细胞多药耐药性的影响及相关机制。方法:以不同浓度榄香烯作用于恶性淋巴瘤Raji细胞,并设空白对照组。通过RT-PCR以及蛋白质印迹方法检测加药后Raji细胞环氧化酶-2(COX-2)、核因子-κB(NF-κB)的mRNA及COX-2、NF-κB 56蛋白表达情况。结果:24h后,RT-PCR产物经电泳分析,COX-2mRNA、NF-κB mRNA各扩增产物在其相应位置上可见清晰的条带,特异性好。COX-2mRNA、NF-κB mRNA灰度值,各浓度榄香烯处理组与阴性对照组相比差异有统计学意义,P<0.01。各浓度榄香烯处理组与阴性对照组不同程度地表达COX-2、NF-κB p65蛋白,各浓度榄香烯处理组COX-2、NF-κB p65蛋白表达量与阴性对照组相比均下降,呈浓度依赖性,P<0.01。结论:榄香烯可能通过对COX-2和NF-κB的调控影响恶性淋巴细胞瘤细胞多药耐药性。     

COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨COX-2及NF-κB p65在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义.方法 选择正常子宫内膜组织者60例(对照组),子宫内膜癌60例(观察组),两组都进行COX-2及NF-κB p65的表达检测,同时进行了相关性分析.结果 对照组COX-2阳性表达率为3.3%,观察组为55.0%.对照组NF-κB p65阳性表达率为23.3%,观察组为63.3%,对比差异都有统计学意义(P<0.05).在观察组中,随着子宫内膜癌的病理分期增加、分化程度的减少、淋巴结转移的发生,COX-2、NF-κB p65的阳性表达率都呈现增高的趋势,对比差异都有统计学意义(P<0.05).Spearman等级相关分析结果显示COX-2与NF-κB p65的表达呈正相关(γ=0.307,P<0.05).结论 COX-2、NF-κB p65在子宫内膜癌中呈现高表达状况,且分化程度低、分期晚、发生转移者高于分化程度高、分期早、未发生转移者,两者在子宫内膜癌发生发展中起共同促进作用.     

多发性骨髓瘤患者Survivin、VEGF表达及其相关性

目的:研究多发性骨髓瘤（MM）患者血清及骨髓Survivin、VEGF表达及意义。方法:酶联免疫法（ELASA）检测60例初诊多发性骨髓瘤患者及30例对照组患者血清Survivin、VEGF表达情况;免疫细胞化学法（SABC法）检测骨髓单个核细胞中Survivin、VEGF阳性率。酶联免疫法（ELASA）检测VAD联合沙利度胺治疗4周期后患者血清Survivin、VEGF水平,与治疗前比较。结果:初诊多发性骨髓瘤患者血清Survivin、VEGF表达水平较对照组明显升高;初诊骨髓瘤患者骨髓单个核细胞Survivin、VEGF阳性率较对照组明显提高;经统计学分析,P＜0.05,差异有统计学意义。治疗后患者,血清Survivin、VEGF在不同疗效组有差异,疗效良好组与疗效较差组差异比较,P＜0.05。骨髓中Survivin与VEGF表达阳性率呈正相关,与疾病疗效呈负相关。结论:Survivin及VEGF在多发性骨髓瘤患者中表达增加,二者表达水平与疾病疗效密切相关。二者存在协同关系,可作为评估疗效、预后指标。