系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞中Th1型细胞因子的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中Ｔｈ１型细胞因子表达的情况。方法 用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ表达（４１例）和γ干扰素（ＩＦＮ－γ）ｍＲＮＡ表达（３１例）的水平。结果 与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者中ＩＬ－２表达水平降低者占７８．０％,ＩＦＮ－γ表达水平降低者占８３．９％。活动期ＳＬＥ组ＰＢＭＣ中ＩＬ－２和     

SLE患者外周血单个核细胞中IL—10与γ干扰素的表达

为了探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中ＴＨ２／ＴＨ１型细胞因子自然表达的趋势,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０名正常人和１５例活动期ＳＬＥ患外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素１０（ＩＬ－１０）和γ干扰素（ＩＦＮγ）ｍＲＮＡ表达的水平。结果,与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达水平增高,而ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达水平降低（均Ｐ〈０．０１）,表明活动性ＳＬＥ     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-6与TNF-α的表达

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）中某些具炎症介质作用细胞因子的自然表达。方法：用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测了１０例正常人和１５例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中白介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｍＲＮＡ表达的水平。结果：与正常人相比,活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ中ＩＬ－６和ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达水平均增高（均Ｐ〈０．０１）。结论：ＳＬＥ患者中ＩＬ－６与ＴＮＦ－α的表达上调,可能在发病机制中起一定作用。     

活动性系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞白介素6信使RNA（IL－6mRNA）表达水平的研究

应用反转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）方法检测了２１例ＳＬＥ患者及１４例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）中白介素６信使ＲＮＡ（ＩＬ－６ｍＲＮＡ）表达水平，结果表明活动性ＳＬＥＰＢＭＣｓ中ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达明显高于非活动性患者及正常对照，而非活动期ＳＬＥ与正常组比较无显著统计学差异，提示ＩＬ－６可能参与活动性ＳＬＥ的发病机制。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞bcl-2的表达及临床意义

目的 为了探讨ｂｃｌ－２基因在系统红斑狼疮（ＳＬＥ）发病机制中的作用及临床意义。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３１例ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平和流式细胞仪双标记法分析其Ｔ、Ｂ细胞ｂｃｌ－２蛋白表达。结果 活动期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣｂｃｌ－２ｍＲＮＡ表达水平明显升高,占５５．６％,且活动期ＳＬＥ患者ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞亚群Ｐ     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD23的表达

为了揭示Ｂ细胞中ＣＤ２３的表达与ＳＬＥ发生发展的关系及在ＳＬＥ发病机理中可能的作用，我们应用ＡＢＣ免疫组化法和斑点核酸杂交技术对ＳＬＥ患者外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达进行了检测。结果显示：３０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３蛋白表达显著增高（Ｐ＜０．０１），且与疾病活动呈正相关关系（ｒｓ＝０．３８１４，Ｐ＜０．０５）；具有不同ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体水平，有无伴肾损、脑损的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达均无显著性差异（Ｐ均＞０．０５）；单纯使用皮质类固醇激素治疗或和其它免疫抑制剂联合治疗的ＳＬＥ患者，ＰＢＭＣＣＤ２３表达亦无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。２０例ＳＬＥ患者ＰＢＭＣＣＤ２３ｍＲＮＡ表达较正常人显著增高（Ｐ＜０．０１）。经治疗病情稳定后，ＣＤ２３蛋白和ｍＲＮＡ表达均降至正常（Ｐ均＞０．０５）。提示在ＳＬＥ活动期Ｂ细胞高度激活、增殖并大量表达ＣＤ２３，且该种表达与ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体产生水平无直接关系     

白介素6基因给药对BXSB狼疮小鼠发病的影响

目的 为了进一步观察白介素６（ＩＬ－６）在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）发病中的作用。方法 采用基因工程方法构建了真核表达载体ｐｃＤＮＡＷ３－ＩＬ－６，并经体内和体外实验检验到被其转染的高效表达ＩＬ－６和ＩＬ－６ｍＲＮＡ。先后２次（第六１，第２０天）将这种质粒多点肌注于１２只３．５月龄雄性ＢＸＳＢ狼疮小鼠，每次每只１００μｇ，同时用等量空载体质粒（ＰｃＤＮＡ３）肌注于１０只同龄雄性ＢＸＳＢ狼疮小鼠作对照     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞产生白细胞介素2活性测定

我们检测了５０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生白细胞介素２（ＩＬ－２）的活性，发现活动期ＳＬＥ患者产生ＩＬ－２活性低于正常对照（Ｐ＜０．０５），而缓解期患者与正常对照比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５），同时还观察了离体环境对ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２活性的影响，并对结果进行了分析。     

SLE患者外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子αmRNA的表达

为探讨系统性红斑狼疮患者中肿瘤坏死因子α表达情况,用逆转录－多聚酶链反应法检测了１５例活动期ＳＬＥ患者和１０例正常人外周血单个核细胞中ＴＮＦαｍＲＮＡ表达的水平。结果与正常人相比,活动ＳＬＥ患者ＰＢＭＣαＭｒｎａＧＥ ＤＰ ＩＩＧＵＦＵ ＹＭ 。ＧＥ α的表达上调。     

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞mIL－2R表达及sIL－2R水平的影响

采用ＩＩＦ和ＥＬＩＳＡ法分别检测了２２例尖锐湿疣（ＣＡ）患者和１６例正常对照者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）上膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达水平及其培养上清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的含量，同时观察了卡介菌多糖核酸（ＢＣＧ－ＰＳＮ）在体外对这两项指标的影响。结果发现，患者ＰＢＬ上ｍＩＬ－２Ｒ表达下降，而培养上清中ｓＩＬ－２Ｒ含量明显增高；一定浓度的ＢＣＧ－ＰＳＮ能在体外使患者淋巴细胞ｍＩＬ－２Ｒ表达增强，以及降低培养上清中ｓＩＬ－２Ｒ的含量。这表明ＣＡ患者存在细胞免疫缺陷，ＢＣＧ－ＰＳＮ能在体外调节患者细胞免疫功能。     

Th17在SLE的组织定位和外周血单一核细胞中的比例

目的 探讨产生IL-17的CD4+T细胞(Th17)在SLE患者组织中的定位,以及与狼疮活动的关系.方法 共聚焦显微镜、免疫荧光双标技术、免疫组化和HE染色,分析Th17细胞业群在4例活动期SLE患者和2例正常人外周血单一核细胞中、皮损组织和肺组织中的定位.流式细胞仪检测50例SLE患者和15例正常人对照外周血Th17的比例,RT-PCR检测相关细胞因子基因表达,用ELISA检测血清中IL-17的分泌水平.结果 在活动期狼疮患者外周血单一核细胞中可见有Th17细胞,其IL-17的荧光强度为(127.6±20.5),明显高于正常人IL-17荧光强度,其值为(40.6±11.1),P＜0.001.在活动期SLE患者受损的皮肤组织和肺组织中可见有Th17细胞的浸润,而正常人皮肤未见有Th17细胞的浸润.活动期SLE患者外周血中Th17比例明显增加,且与SLE活动指数(SLEDAI)呈正相关.相关细胞因子IL-17A和IL-17F mRNA表达明显增加,血清中的不IL-17水平分泌增加,活动期SLE患者中Th17增加与血管炎的发病呈正相关,经过治疗后Th17随病情缓减而减少.结论 Th17细胞亚群在活动期SLE患者体内扩增,其扩增与SLE活动密切相关,可能参与SLE 血管炎的发生.     

SLE患者PBMC中IL-6mRNA和IL-10mRNA的表达

为了进一步了解TH2型细胞因子IL-6和IL-10在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单核细胞（PBMC）中的基因表达情况，对7例SLE患者和4例年龄相匹配对照PBMC中IL-6mRNA和IL-10MRNA表达进行了原位杂交检测，并对检测结果进行计算机图象灰度扫描分析、结果SLE患者PBMC中IL-6mRNA和IL-10mRNA均明显高表达，并与患者ANA滴度及抗（ISDNA抗体有一定的相关性尤以IL-6为著。提示IL-6和IL-10作为B细胞刺激因子在SLE发病中具有重要病理性作用，阻止或减少其分泌可能有助于SIE治疗。     

催乳素与促生长素对体外培养系统性红斑狼疮患者单一核细胞产生细胞因子的影响

目的 研究催乳素、促生长素对系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1/Th2型细胞因子的影响。方法 对SLE患者和正常人对照的淋巴细胞进行体外培养,并测定细胞因子。结果 在自分泌情况下,SLE活动期患者白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)的分泌量显著增高,而干扰素γ(IFN-γ)的分泌量低于静止期和正常人,但差异无统计学意义。经促生长素和催乳素干预后,活动期SLE患者IL-6、IL-10分泌量显著高于自分泌量和正常人对照组。IFN-γ分泌量经促生长素和催乳素干预后,与自分泌量相比,活动期患者无显著升高。促生长素对SLE患者IL-6、IL-10、IFN-γ分泌量的影响与催乳素的影响差异无统计学意义。结论 SLE患者不但存在Th2型细胞因子增高,而且促生长素和催乳素均能刺激Th2型细胞因子进一步增高,且刺激能力相当,并呈正相关。     

辅助性T17细胞功能异常在系统性红斑狼疮中的意义

目的 探讨辅助性T（Th）17细胞介导的炎症损伤与系统性红斑狼疮（SLE）的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测102例SLE患者及68例健康对照血清白介素17A（IL-17A）水平;实时荧光定量聚合酶链反应方法相对定量分析27例SLE患者及13例健康对照外周血单一核细胞（PBMC）中孤核受体γt（RORγt）基因表达水平;分析血清IL-17A水平与RORγt基因表达之间及其分别与SLE疾病活动度（SLEDAI）、SLE是否合并肾脏病变的关系。结果 102例SLE患者血清IL-17A 水平 ［14.75 （5.12 ～ 69.76） ng/L］较68例健康对照组 ［5.77 （2.22 ～ 9.60） ng/L］显著升高（P ＜ 0.01）。102例SLE患者血清IL-17A与血清C反应蛋白、血浆肌酐、尿管型呈正相关（分别为r = 0.33、P ＜ 0.01,r = 0.26、P ＜ 0.05,r = 0.27、P ＜ 0.05）;与SLEDAI无显著相关（P ＞ 0.05）。27例SLE患者RORγt基因表达水平较13例健康对照组显著升高 ［1 （0.40 ～ 2.62） 和0.19 （0.15 ～ 0.75）,P ＜ 0.01］。27例SLE患者RORγt基因表达水平与血清IL-17A水平呈正相关（r = 0.47,P ＜ 0.01）,与血清补体3之间呈负相关（r = －0.46,P ＜ 0.05）。SLE病情高活动组与低活动组、SLE合并肾脏病变与SLE无合并肾脏病变组间血清IL-17A、RORγt基因表达水平差异均无统计学意义（P值均 ＞ 0.05）。结论 Th17细胞介导的炎症损伤可能参与了SLE的发病,与SLE肾脏病变可能有关,但其可能不是SLE病情活动惟一的影响因素,在SLE及SLE肾脏受累中可能均不是主导因素。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞及白介素12、18及其受体mRNA的表达

目的 探讨未经药物治疗的初发系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞亚群分布,白介素12、白介素18及其受体的基因表达.方法 运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发SLE患者、10例正常人Th1/Th2细胞亚群分布;ABI7700Real-TimePCR法同时检测38例患者和28例正常人IL-12、IL-18及其受体mRNA表达水平.结果 ①初发狼疮患者Th1较正常人明显减低(P<0.05),但Th1/Th2无显着性改变.②与正常人组相比,SLE组患者IL-12、IL-18mRNA及其受体表达较正常人明显降低(P值均<0.05);③面部红斑组患者Th1/Th2、IL-12P35较正常人组降低(P均<0.05);④RNP阳性组患者IL-12P40较正常人组升高,IL-12P35、IL-18较正常人组降低(P均<0.05).结论 SLE是一种以Th1细胞下降,Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病,源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致.     

糖皮质激素对系统性红斑狼疮Th1和Th2类细胞因子的影响

目的:观察糖皮质激素(以下简称激素)治疗对系统性红斑狼疮(SLE)患者Th1和Th2细胞因子表达的影响.方法:采用反转录-聚合酶链反虚(RT-PCR)法,检测SLE患者在激素治疗前、后,外周血单个核细胞(PBMC)中Th1类细胞因子γ干扰索(IFN-γ)和Th2类细胞因子白介素(IL)-4、IL-10 mRNA水平,并与正常人群比较.结果:激素治疗前SLE患者外周血内Th1和Th2类细胞凶子均高于正常人(P＜0.05),以Th2类细胞因子增高显著;治疗后两类细胞因子均明显下降(P＞0.05),但以Th1类细胞因子下降显著.结论:SLE患者存在T辅助细胞亚群失衡,激素治疗可部分纠正分泌失衡的细胞因子.     

银屑病患者外周血单个核细胞Th_1/Th_2细胞因子表达研究

目的　探讨Th1/Th2 细胞因子在银屑病发病机理中的作用。方法　应用逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)半定量分析 19例正常对照和 2 2例银屑病患者外周血单个核细胞中TNFα、IFN γ和IL 4、IL 10mRNA的表达。结果　银屑病患者TNFα和IFN γ表达显著上调 (P <0 .0 1) ,而IL 4显著降低 (P <0 .0 1) ,IL 10较正常降低但无显著差异(P >0 .0 5 )。结论　Th1型细胞因子在银屑病患者中过度表达 ,可能提示银屑病免疫病理机理中的T淋巴细胞活化模式。     

SLE患者外周血单个核细胞中Aiolos mRNA的表达

目的观察系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子Aiolo smRNA的表达情况。方法采用SYBR Green实时定量PCR法检测20例SLE患者PBMCs中Aiolos mRNA的表达情况,并与20例正常人作比较。结果 SLE患者的PBMCs中Aiolos mRNA的表达明显低于正常对照组;SLE活动期组和稳定期组也均低于正常对照组;而且活动期组低于稳定期组;以上差异均有统计学意义(P均<0.01)。另外,SLE患者PBMCs中Aiolos mRNA的表达与SLEDAI评分呈负相关(P<0.01)。结论 SLE患者Aiolos基因表达降低,且与SLE活动指数呈一定相关性。     

SLE患者雌激素受体-α与相关细胞因子的表达及临床相关性研究

目的 探讨SLE患者雌激素受体(ER)对T、B淋巴细胞的作用机制以及T、B淋巴细胞在SLE发病中的协同作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测40例SLE患者与40例正常人外周血单核细胞(PBMC)ER-α、IL-10、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)mRNA表达水平;分析ER-α、IL-10和BLyS mRNA表达与临床及实验室指标的相关性.结果 SLE组ER-α、IL-10、BLyS mRNA相对表达量显著高于正常人对照组(P＜0.05或P＜0.01),SLE活动期较静止期明显增高(P＜0.05或P＜0.01),且其表达水平与肾损害、蛋白尿、关节炎等临床及实验室指标有相关性.男女SLE组以及男女正常对照组的表达比较差异无统计学意义.结论 IL-10和BLyS与SLE的病情活动性和严重程度相关,ER-α可能在SLE T、B淋巴细胞的作用机制中有重要作用.

Abstract：

Objective To study the mechanism of effects of estrogen receptor (ER) on T and B lymphocytes in patients with SLE and synergistic effect of T and B lymphocytes in the pathogenesis of SLE.Methods Real-time fluorescence quantitative PCR was performed to detect the mRNA expressions of ER-α,interleukin 10 (IL-10) and B lymphocyte stimulator (BLyS) in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)from 40 SLE patients and 40 normal human controls. The clinical and laboratory correlation with the levels of these parameters was analyzed. Results A significant increase was observed in the relative expression levels of ER-α, IL-10 and BLyS mRNA in SLE patients compared with the normal human controls (P ＜ 0.05 or 0.01 ), in active SLE patients compared with inactive SLE patients (P ＜ 0.05 or 0.01 ). Additionally, the mRNA expression levels of the 3 parameters were significantly correlated with the presence of renal damage, proteinuria, arthritis, etc. No statistical difference was observed in the mRNA expression levels of these parameters between female and male patients or between female and male normal controls. Conclusions IL-10 and BLyS appear to be correlated with the disease activity and severity of SLE, and ER-α may play an important role in the action mechanism of T and B lymphocytes in SLE.