芩丹胶囊对成纤维细胞增殖与迁移的影响

目的 探讨芩丹胶囊(QC)含药血清对血管外膜成纤维细胞(AF)增殖和迁移的影响。方法 组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉成纤维细胞,MTT和Transwell法观察小RNA干扰(siRNA)技术沉默Smad2及大剂量［750㎎/(㎏·d)］、小剂量［150㎎/(㎏·d)］ QC含药血清对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导AF增殖和迁移的影响;实时定量PCR及Western blot检测Smad2和Smad7的基因和蛋白表达情况。结果 siRNA-Smad2及大、小剂量QC含药血清均能显著抑制AF的增殖和迁移(P＜0.05);用药组Smad2基因及蛋白的表达较单纯刺激组显著降低,Smad7则显著升高(P均＜0.01)。结论 QC含药血清能显著抑制AF增殖和迁移,其机制可能与Smads信号转导通路有关。     

保护素对原代肺成纤维细胞炎症及纤维化增殖的影响

目的：探讨保护素（PDX）对脂多糖（LPS）诱导的原代肺成纤维细胞环氧合酶-2（COX-2）表达的影响及对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导其纤维化增殖转化的影响。方法：分离、纯化、鉴定得到小鼠肺成纤维细胞,用LPS诱导建立成纤维细胞体外炎症模型,用TGF-β1诱导建立体外纤维化增殖模型。PDX分别作用于经过LPS或TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞。采用细胞浓度试剂盒测定细胞增殖,采用实时定量PCR测定基因表达,采用ELISA法检测细胞上清液前列腺素E2（PGE2）水平,应用Western blot检测COX-2蛋白的表达。结果：采用10 ng/mL TGF-β1刺激诱导体外培养的原代肺成纤维细胞48 h能建立较为合理的体外纤维化增殖模型。PDX抑制LPS诱导的原代肺成纤维细胞COX-2蛋白的表达及上清液PGE2水平,同时可能通过剂量依赖方式抑制TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞的增殖。PDX抑制TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞collagen 1α1、collagen 1α2的合成以及α-SMA、纤连蛋白的基因表达。结论：PDX能抑制LPS诱导的小鼠原代肺成纤维细胞COX-2表达及PGE2水平,同时能抑制TGF-β1诱导的小鼠原代肺成纤维细胞纤维化增殖、胶原蛋白合成及向肌成纤维细胞转化。     

转化生长因子-β1通过产生活性氧诱导骨髓间充质干细胞分化为肌成纤维细胞

目的：研究转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）向肌成纤维细胞分化的机制。方法：采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代BMSCs,将对数生长期的P3~P5代BMSCs作为实验细胞,使用不同浓度的TGF-β1诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化,并在此基础上观察加入自由基清除剂N-乙酰 半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）对其分化的影响。采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测BMSCs分化指标α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、Ⅰ 型胶原［collagen α1(Ⅰ),Col α1(Ⅰ)］和Ⅲ 型胶原［collagen α1(Ⅲ), Col α1(Ⅲ)］的表达情况。使用2’,7’-dichlorohydrofluorescein diacetate（DCFH-DA）预孵育BMSCs 15 min,然后加入TGF-β1处理不同时间,检测TGF-β1刺激下BMSCs中活性氧（reactive oxygen species,ROS）的产生,并使用高内涵方法对BMSCs中产生的ROS进行统计分析。结果：TGF-β1可以剂量依赖地诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化,上调α-SMA、Col α1(Ⅰ)和Col α1(Ⅲ)的表达。TGF-β1诱导BMSCs分化的作用可以被NAC阻断。TGF-β1在BMSCs中能够引起ROS的产生,且该过程迅速而短暂,当TGF-β1作用30 min时,其在BMSCs中诱发的ROS达到峰值。结论：TGF-β1通过产生ROS介导BMSCs向肌成纤维细胞分化。     

丹酚酸B对人肺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达的影响及其机制

目的：观察丹酚酸B（Sal B）对人肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1) / Smad信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其抑制TGF-β1活化肺成纤维细胞作用的信号机制。方法：体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,随机分为对照组（未加入TGF-β1或Sal B）、 Sal B(10 μmol•L^-1)组、 TGF-β1(10 μg•L^-1)组和TGF-β1（10 μg•L^-1）+ Sal B（10μmol•L^-1）组。Western blotting 法检测各组细胞内p-Smad2、p-Smad3、TGF-βⅠ型受体（TβRⅠ）和Smad7蛋白表达。结果：与对照组比较,TGF-β1组细胞内p-Smad2、p-Smad3和TβRⅠ蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,Smad7蛋白表达水平明显下降（P<0.05）;与对照组比较, Sal B组细胞内p-Smad2、p-Smad3、TβRⅠ和 Smad7蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）;与TGF-β1组比较,TGF-β1 + Sal B组细胞内p-Smad2、p-Smad3和TβRⅠ蛋白表达水平均下降（P<0.05）,Smad7蛋白表达水平升高（P<0.05）。结论：Sal B能够通过抑制肺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路,从而发挥其抑制TGF-β1活化肺成纤维细胞的作用。     

温阳消癥方对5/6肾切除小鼠肾纤维化的作用及其机制

目的：观察温阳消癥方对5/6肾切除小鼠残肾功能及肾脏纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法：随机从32只小鼠中取24只制作5/6肾切除慢性肾功能衰竭肾纤维化模型,2周后根据血清肌酐值将24只小鼠分为5/6肾切除组、代文组和温阳消癥方组,另8只作为假手术组。治疗8周后,Western blot检测各组小鼠肾组织JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3、I型胶原蛋白（Col-I）、III型胶原蛋白（Col-III）、α-SMA蛋白表达水平,免疫组织化学染色法测定小鼠肾组织Col-I、Col-III、α-SMA水平,用RT-qPCR法测定TGF-β1、Smad3 mRNA水平。结果：治疗8周后,模型组小鼠肾组织JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1、Smad3、Col-I、Col-III、α-SMA蛋白表达均较假手术组上调（P＜0.01）,模型组小鼠肾组织TGF-β1、Smad3 mRNA表达较假手术组上调（P＜0.01）;与模型组比较,代文组、温阳消癥方组JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1、Smad3、Col-I、Col-III、α-SMA蛋白表达和TGF-β1、Smad3 mRNA表达均下调（P＜0.01）;与代文组比较,除TGF-β1、α-SMA外,温阳消癥方组其余指标均下调（P＜0.01）。结论：温阳消癥方能够保护5/6肾切除小鼠残肾功能,减轻肾纤维化病变程度,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3、JAK2/STAT3通路相关。     

Smad泛素化调节因子2在转化生长因子β1诱导人肺成纤维细胞活化中的作用及其分子机制

目的:观察Smad泛素化调节因子2(Smurf2)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞活化中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,10 μg·L^-1 TGF-β1作用1、2和6 h(分别为TGF-β1 1 h组、TGF-β1 2 h组和TGF-β1 6 h组),并设对照组(不加TGF-β1), RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smurf1和Smurf2 mRNA和蛋白的表达水平。MRC-5细胞随机分为对照组(未加入TGF-β1或siRNA)、TGF-β1组 (10 μg·L^-1 TGF-β1)、Control siRNA转染组(10 μg·L^-1TG F-β1+Control siRNA)和Smurf2 siRNA转染组(10 μg·L^-1 TGF-β1+Smurf2 siRNA)。Western blotting法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1(COL1A1)的表达水平;RT-PCR和Western blotting法分别检测各组细胞中Smad7、核转录共抑制因子SnoN、TGF-β Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Smad2和Smad3 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且随着TGF-β1作用时间的延长,其表达水平呈逐渐增加的趋势;与对照组比较,各TGF-β1组细胞中Smurf1表达水平无明显变化(P>0.05)。与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中Smurf2蛋白表达水平下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中α-SMA和COL1A1蛋白表达水平均下降(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2 siRNA组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平均升高(P<0.05),而Smurf2 siRNA组和TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。与对照组比较,TGF-β1组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平均明显下降(P<0.05);与TGF-β1组比较,Smurf2 siRNA组细胞中Smad7和SnoN蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β1组和Smurf2 siRNA组细胞中TβRⅠ mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Smurf2 siRNA组和TGF-β1组细胞中TβRⅠ mRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组细胞中Smad2和Smad3 mRNA和蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论: Smurf2可能通过泛素化降解Smad7和SnoN,参与调控TGF-β1/Smads信号通路,从而发挥其促进TGF-β1活化肺成纤维细胞的作用。     

番茄红素对小鼠肝纤维化的保护作用

［摘要］目的: 探讨番茄红素对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的小鼠肝纤维化的干预作用。方法: 24只小鼠随机均分为3组,对照组、模型组及预防组。模型组小鼠予以腹腔注射Con A(20 mg/kg),每周1次,对照组腹腔注射等量PBS溶液,预防组在注射Con A的同时予番茄红素灌胃(20 mg/kg),每天1次,8周后处死小鼠。收集血液检测肝纤维化指标,测定肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛水平,病理学及半定量计分系统(semi-quantitative scoring system, SSS) 观察肝纤维化程度,免疫印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、Smad3蛋白、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达。结果： 与对照组比较,模型组血清透明质酸(hyaluronic acid, HA)、层黏连蛋白(laminin, LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen type Ⅲ, PC Ⅲ)水平,SSS计分,丙二醛,α-SMA、TGF-β1、Smad3的表达明显增加,SOD表达明显降低;与模型组相比,预防组HA、LN、PCⅢ水平,SSS计分,丙二醛,α-SMA、TGF-β1、Smad3的表达明显降低,SOD表达明显升高(P<0.01)。结论： 番茄红素通过减轻过氧化损伤,保护肝细胞,减少胶原生成,抑制α-SMA、TGF-β1及Smad3等致纤维化因子的表达,从而抵抗Con A诱导的肝纤维化作用。     

芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的：观察芝麻素含药血清对血管紧张素Ⅱ（ Ang Ⅱ）诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响,探讨其可能机制。方法应用血清药理学方法制备大鼠含药血清,采用复合酶消化和差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞,MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响, ELISA法测定Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与转化生长因子β1（ TGF－β1）水平,比色法测定细胞总抗氧化能力（ T－AOC）及丙二醛（ MDA）含量,Western blot法测定Smad3活化水平。结果芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原分泌（ P＜0.05,P＜0.01）,降低TGF－β1含量及Smad3活化水平（P＜0.05,P＜0.01）。此外,芝麻素含药血清可明显提高成纤维细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA生成（ P＜0.05,P＜0.01）。对照血清对上述各项指标均无明显影响。结论芝麻素含药血清可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖与胶原分泌,其机制可能与改善氧化应激状态、调节TGF－β1／Smad信号通路有关。     

大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞的培养方法初探

目的：建立大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞组织贴块法培养模型。方法：分离大鼠胸主动脉外膜,切成1 mm×1 mm×1 mm大小组织块,均匀贴于细胞培养瓶壁上,加入含20%血清的细胞培养液DMEM,置入细胞培养箱于37℃,5%CO2条件下传代培养。结果：第3～4 d,少量细胞从组织块周边游出,第6～8 d后,细胞围绕组织块生长至亚融合状态,0.25%胰酶消化后传代,可得到较纯成纤维细胞。结论：利用组织贴块法培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞存活率高,操作简单,结果稳定,在血管重塑、血管纤维化、细胞凋亡、细胞表型转变等研究领域具有应用价值。     

粉防己碱对心肌成纤维细胞增殖、活化的影响

目的： 探讨粉防己碱（tetrandrine,Tet）对大鼠心肌成纤维细胞增殖、活化的影响。方法： 采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8C,CCK-8）的方法检测不同浓度Tet对心肌成纤维细胞增殖的抑制作用;采用蛋白质印迹（Western blot）法检测Tet对由转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β）诱导的心肌成纤维细胞 β-链蛋白（β-catenin）、波形蛋白（vimentin,Vm）、纤连蛋白（fibronectin,Fn）及平滑肌α 肌动蛋白（smooth muscle α-actin,SMA）的表达上调的影响作用;采用实时荧光定量PCR的方法检测Tet作用下,TGF-β诱导的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原（collagen-1,Col-1）和Ⅲ型胶原（collagen-3,Col 3）的表达上调的变化。结果：CCK-8检测结果显示,分别用0.5、1、2、4、8 μmol/L的Tet处理心肌成纤维细胞,其增殖活力分别下降至对照组的94.4%、84.9%、74.9%、63.8%、50.3%,差异有统计学意义（所有P值<0.05;1、2、4、8 μmol/L处理组P值<0.001）。Western blot检测结果显示：5 μg/L 的TGF-β显著上调β-catenin、Vm、Fn及SMA的表达（P值分别为0.001、0.008、0.010、0.001）,而用0.5 μmol/L的Tet预处理心肌成纤维细胞后,可以阻断由TGF-β诱导的β-catenin、Fn、SMA的表达上调（P值分别为0.009、0.005、0.019）,但不改变Vm的表达变化（P>0.05）。荧光定量PCR检测结果表明：用0.5 μmol/L的Tet预处理心肌成纤维细胞,可以减弱由TGF β诱导的Ⅰ型及Ⅲ型胶原的表达上调,差异有统计学意义（P<0.001）。结论：Tet可以显著抑制心肌成纤维细胞的增殖,并阻断由TGF-β诱导的心肌成纤维细胞活化,据此推断,Tet可能具有抗心肌纤维化的作用,进而阻断心肌重塑。     

葡萄子原花青素对糖尿病肾病大鼠非酶糖基化终产物和骨形态蛋白7表达的影响

   目的   研究葡萄子原花青素（GSPE）对糖尿病大鼠非酶糖基化终产物（AGEs）、肾组织结缔组织生长因子（CTGF）及骨形态蛋白7（BMP 7）表达的影响。  方法   将45只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组（DM组,n=15只）、GSPE小剂量［250mg/（kg·d）］治疗组（T1组,n=15只）和大剂量［500mg/（kg·d）］治疗组（T2组,n=15只）,另以15只正常大鼠作为对照组（C组）,15只正常大鼠给予GSPE 250mg/（kg·d）作为正常治疗组（CT组）。于24周末检测各组大鼠血糖、血清AGEs、血压、24?h尿蛋白定量、血肌酐（Scr）、尿肌酐（Ucr）、肾重/体重水平。以光镜PAS染色及电镜观察肾脏病理改变。用RT PCR、Western blot方法及免疫组化方法检测肾组织中CTGF、BMP-7mRNA及蛋白表达水平的改变。  结果   与C组相比,DM组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、内生肌酐清除率（Ccr）、肾重/体重均显著升高（P＜0.01）,肾病理改变加重,肾组织CTGF mRNA及蛋白表达增加（P＜0.01）,而BMP-7mRNA及蛋白降低（P＜0.05）。与DM组相比,T1组和T2组血清AGEs、血压、24h尿蛋白定量、Ccr和肾重/体重显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,病理改变减轻, BMP-7mRNA及蛋白表达水平升高(P＜0.05或P＜0.01）,而CTGF mRNA及蛋白显著降低（P＜0.01）。T1组与T2组之间相比,Ccr、肾重/体重水平、CTGF mRNA及蛋白差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。   结论    GSPE可以减轻糖尿病大鼠蛋白尿、改善肾脏病理,对其肾脏有明显保护作用,其机制与降低血清AGEs、抑制肾组织CTGF过高表达、上调BMP-7表达有关。     

脂肪间充质干细胞对博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型的治疗作用

目的：研究脂肪间充质干细胞（adipose tissue derived stem cells,ADSCs)对博来霉素（bleomycin,BLM）诱导的硬皮病小鼠的治疗效果及其可能的作用机制。方法： 选取 C57BL/6J 雌性小鼠 24 只,采用皮下注射 BLM ［2 mg/(kg·d)］建立硬皮病小鼠模型,随机分为正常对照组、BLM 组、ADSCs(皮下)组 和 ADSCs（静脉）组,每组6只,正常对照组给予生理盐水2 mL/(kg·d)皮下注射,其余3组分别给予BLM皮下注射,连续3周,然后,ADSCs皮下和尾静脉注射组分别给予皮下和尾静脉注射 ADSCs（2×105个细胞）治疗,每4天1次,共3次。流式细胞术检测小鼠脾细胞中的辅助T细胞17（T-helper 17,TH17）及 调节性T细胞（regulatory T cell ,Treg）,实时荧光定量聚合酶联反应（ polymerase chain reaction,PCR）法检测小鼠肺组织中相关细胞因子的表达水平,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA） 检测小鼠血清中白介素（interleukin,IL)-6、转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β） 的含量, 苏木精-伊红染色(hematoxylin eosin staining,HE ）观察小鼠的皮肤和肺组织病理学改变。结果： 流式细胞术结果显示,BLM 组较正常对照组小鼠脾细胞中 TH17 和 Treg所占比例升高(15.30%±1.29 % vs. 4.32%±0.79%;9.90%±1.95% vs. 5.18%±1.35%,P均<0.05),经 ADSCs 治疗后,TH17 所占比例降低(5.02%±0.83%,6.00%±0.82% vs.15.30%±1.29%, P均<0.05),而 Treg所占比例升高(14.32%±1.59%,11.09%±4.31%vs. 9.90%±1.95%, P均<0.05)。与正常对照组相比,BLM 组小鼠肺组织中 IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的 mRNA 表达水平及血清中 IL-6 的含量均升高［3.54±0.30,10.65±0.66, 5.37±0.52 vs. 1.00±0.00; (21.2±1.74) ng/L vs. (16.87±1.09) ng/L, P均<0.05］,ADSCs 治疗后,其表达量下降［1.63±0.45,1.50±0.29 vs.3.54±0.30;3.11±0.85,2.98±0.76 vs.10.65±0.66;1.45±0.47,1.59±0.41 vs. 5.37±0.52; （17.87±1.45） ng/L, (17.61±1.16) ng/L vs. (21.2±1.74) ng/L, P均<0.05］,ADSCs(皮下)组和ADSCs（静脉）组比较差异无统计学意义（P>0.05)。BLM 组小鼠血清中 TGF-β 的含量较正常对照组升高［(33.95±2.49) ng/L vs. (28.8±2.29) ng/L, P<0.05］,但小鼠肺组织中 TGF-β mRNA 的表达水平与正常对照组之间差异无统计学意义( 1.17±0.11 vs.1.00±0.00, P>0.05),经 ADSCs 治疗后 TGF-β基因和蛋白的表达无明显变化［1.25±0.11,1.26±0.12 vs.1.17±0.11; (31.84±2.04) ng/L, (31.25±2.36) ng/L vs. (33.95±2.49) ng/L,P>0.05］。HE 染色结果显示,BLM组与正常对照组相比,肺组织有大量炎性细胞浸润,肺泡间隔断裂或消失;皮肤真皮层增厚,有大量的胶原纤维积聚,经ADSCs治疗后小鼠肺组织炎症有所改善,皮肤的真皮层变薄,胶原纤维积聚减少。结论： ADSCs 可以有效缓解硬皮病小鼠肺的炎症和皮肤的纤维化症状,其抗炎和抗纤维化作用与其免疫调节功能有关。     

高同型半胱氨酸血症孕鼠与其仔鼠发生先天性心脏病的关系

目的:探讨同型半胱氨酸与哺乳动物先天性心脏病发生的关系,观察不同剂量同型半胱氨酸对哺乳动物心脏发育的毒性作用.方法:将30只SD孕鼠随机分为3组:高剂量组、低剂量组、对照组(每组10只).从妊娠第7天起,高剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸200 mg/(kg·d),低剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸100 mg/(kg·d),...     

胃癌患者血清可溶性B7 H4的检测及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中可溶性B7 H4（sB7 H4）的水平并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）夹心法检测61例胃癌患者与51例正常人血清sB7 H4水平,分析其与病理类型、治疗前后、胃癌其他血清标志物的相关性。结果胃癌患者血清sB7 H4水平（49.14±16.16）μg/L明显高于正常人（32.67±12.28）μg/L,P＜0.01。低分化腺癌患者sB7 H4水平（64.51±20.67）μg/L高于高分化腺癌（36.78±13.39）μg/L、粘液腺癌（42.79±12.31）μg/L和印戒细胞癌（44.62±12.27）μg/L,P＜0.05。手术前胃癌患者血清sB7 H4水平（58.09±15.28）μg/L明显高于术后（38.58±9.49）μg/L,P＜0.01。胃癌患者血清sB7 H4水平与CEA、CA19 9水平呈正相关（P＜0.01）。结论胃癌患者血清中高水平的sB7 H4及其与病理类型、治疗情况、及其他肿瘤标志物相关,提示sB7 H4可能在胃癌的发生发展中有重要作用,可为胃癌的诊断和治疗提供一种新的靶位点。     

阿托伐他汀抑制RhoA/Rho激酶活性逆转低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉高压和肺血管重构

目的:探讨阿托伐他汀是否通过抑制肺动脉RhoA/Rho激酶通路的激活而逆转低氧所致的大鼠肺动脉高压及肺血管重构.方法:32只成年雄性Westar大鼠随机分成4组:A组为正常对照组;B,C,D组建立常压低氧性肺动脉高压大鼠模型,自低氧干预第1天起C组每日给予1 mg/mL阿托伐他汀溶液10 mg/kg灌胃,D组以生理盐水...     

拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的HBV转基因小鼠肝纤维化相关因子的影响

目的：观察在肝损伤早期,拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基 因小鼠肝组织保护作用,并通过检测肝纤维化相关因子探讨其机制。方法：将40只1.3拷贝HBV转基因BALB/C小鼠 随机分为4组。对照组以生理盐水灌胃;模型组以体积分数为50%的白酒5 mL/kg灌胃,1 次/d;拉米夫定组在模型组 处理基础上以拉米夫定溶液(100 mg/kg)灌胃,1 次/d;水飞蓟素组在模型组处理基础上以水飞蓟素溶液(200 mg/kg) 灌胃,1 次/d。10周后荧光定量PCR检测各组小鼠血清HBV-DNA载量,全自动生化仪检测血清ALT和AST水平。HE 染色,Masson染色镜检观察肝组织病理变化,荧光实时定量PCR检测肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7,结缔组织生长 因子(connective tissue growth factor,CTGF) mRNA表达水平,免疫组织化学检测肝组织TGF-β1,CTGF,α-平滑肌肌 动蛋白(α-SMA)表达水平。结果：与对照组相比,模型组肝组织病理损伤加重,血清HBV病毒载量,ALT和AST水平 明显增高,肝组织内TGF-β1,Smad3,Smad7,CTGF mRNA及TGF-β1,CTGF,α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。与模 型组相比,拉米夫定组和水飞蓟素组肝组织病理损伤均减轻,肝组织内TGF-β1,Smad3,CTGF mRNA及TGF-β1, CTGF,α-SMA蛋白表达减少(P<0.05),Smad7 mRNA的表达进一步增加(P<0.05),水飞蓟素组血清ALT和AST水平降低 (P<0.05)。结论：拉米夫定和水飞蓟素可通过调节TGF-β1/Smads信号通路,减少CTGF表达,抑制肝星状细胞活化等 机制阻断酒精刺激的HBV转基因小鼠肝组织纤维化的发生和进展。     

低分子肝素对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型的影响

目的 观察低分子量肝素对长期摄入高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪性肝炎的干预作用,探讨其机制。方法 雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组（n=10）及模型组（n=10）,模型组喂以高脂饮食共8周;其余20只在高脂饮食8周后分为低分子肝素低剂量治疗组（n=10）,在继续高脂饲料喂养的基础上,加用低分子量肝素治疗［50IU/(kg·d）］;低分子肝素高剂量治疗组（n=10）,在继续高脂饲料喂养基础上,加用低分子量肝素治疗［200IU/(kg·d）］,共治疗2周。结果 低分子肝素高剂量组［200IU/(kg·d）］在抑制肝脏慢性炎症、防止肝脏脂质堆积方面较模型组有统计学差异,而低剂量组［50IU/(kg·d）］作用不如高剂量组作用明显。结论 低分子量肝素能够抑制肝脏慢性炎症的发生,调节脂质在肝脏中的堆积,有治疗非酒精性脂肪性肝炎的作用,且其作用效果与剂量相关。其作用机制可能是调节血脂,降低血清中TNF-α的水平。     

HBV在HK-2细胞内的表达及对其转分化的影响

目的   研究乙型肝炎病毒（HBV）在人近端肾小管上皮细胞（HK-2）的表达及对其转分化的影响。方法   体外培养HK-2细胞,分为HK-2组、HK-2-PHY106组（空质粒PHY106转染组）、HK-2-PHY106-HBV组（PHY106-HBV质粒转染组）。用脂质体lipofectamineTM2000转染HK 2细胞。用ELISA法检测各组细胞培养上清液中HBsAg与HBeAg的含量。免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测转染72h后E-钙黏素（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。RT-PCR法检测转染72h后转化生长因子-1（TGF-β1）的mRNA。结果   HK-2-PHY106-HBV组细胞培养上清液中可检测到HBsAg和HBeAg的高表达;免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测均显示HK-2-PHY106-HBV组E-cadherin表达显著下调（P＜0.05）,而α-SMA表达与其他两组相比明显上调（P＜0.05）;RT-PCR显示HK-2-PHY106-HBV组TGF-β1的mRNA表达上调（P＜0.05）。结论   HBV可在HK-2细胞内高效复制,并能够导致HK-2转分化,其机制可能是通过上调TGF-β1来实现的。