hCG单克隆抗体的蛋白A亲和色谱纯化

建立了亲和色谱法从小鼠腹水中纯化人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体.将含hCG单克隆抗体的小鼠腹水经离心、过滤预处理后,采用蛋白A亲和色谱柱纯化,考察了上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液的pH和流速对抗体纯度及回收率的影响.用间接ELISA法测定纯化后单克隆抗体生物学活性.结果显示,以20 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0,含3 mol/L氯化钠)为上样缓冲液,0.1 mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 3.0)为洗脱液,流速为5 ml/min时,hCG单抗的纯度大于98%,回收率为75%.纯化后的单抗效价没有下降.     

应用疏水层析法纯化hCG单克隆抗体

建立一种良好的纯化hCG单克隆抗体方法。将hCG单克隆抗体的实验小鼠腹水经离心、过滤预处理后,用疏水层析法进行纯化,并探讨了洗脱方式、不同上样缓冲液离子强度、洗脱体积对抗体纯度的影响。以20 mmol/mL磷酸缓冲液+1.5 mmol/L硫酸铵为上样缓冲液,15 CV的洗脱体积进行洗脱,单抗纯度为70%,回收率20%。纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立的疏水层析法纯化hCG单克隆抗体的方法,操作简便、快速而且效果良好。     

不同包被缓冲液对单克隆抗体在ELISA中灵敏度和区别的影响

本文应用不同pH和离子强度的包被缓冲液测定抗原在微孔板中的吸附情况,并用单克隆和多克隆抗体分别测定了牛瘟病毒(RPV)和口蹄疫病毒(FMDV)在ELISA中的包被率。作者测定了pH5.0～8.0的0.01M磷酸缓冲液和不同离子强度(0～3M)时的包被情况。当用多克隆抗体测定包被RPV抗原时,最大OD值依赖于包被缓冲液的离子强度,当增     

溶栓素的分离纯化及特性测定

目的研究一种高效分离纯化溶栓素的方法并测定其pI和相对分子质量(Mr)。方法采用阴、阳离子交换色谱等技术分离纯化溶栓素并通过对缓冲体系的pH值、离子强度的调节及对初始供试品pH值的调节来优化纯化过程,以等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶电泳(IEF PAGE)和SDS PHGE方法分别测定纯品的pI和Mr。结果溶栓素达到简捷、高效分离纯化的目的,电泳鉴定为一条蛋白质带,并测定溶栓素的pI为4 .5 0、Mr 为35 10 0。结论溶栓素的纯化工艺达到高纯度纯化程度,为进一步研究溶栓素奠定了基础     

壳聚糖固定化胰蛋白酶亲和层析抑肽酶的条件及影响因素

利用壳聚糖固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂从牛肺中直接分离纯化抑防酶。该方法在适当的温度（35℃）、pH值（pH1．5）、离子强度（1．0mol／LKCI）以及吸附条件（176FIP／g）下，纯化的抑肽酶活性回收率达83％，比活可达5000kIU／mg以上。     

蛋白A亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体

建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体的一步层析法。将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCl浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定。结果显示,以pH7.0,20mmol/LPB+3.0mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1mol/LGly-HCl为洗脱液,体积流量为5.0ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好。     

4种氟喹诺酮液体制剂降解析因试验

模拟4种喹诺酮输液剂及滴眼剂在不同pH和离子强度的条件下,考察了光、pH以及离子强度分别对诺氟沙星(NFX)、氧氟沙星(OFX)、环丙沙星(CPX)、洛美沙星(LEMX)降解程度的影响,应用2³析因试验方法,经F检验确证:NFX,OFX,CPX,LEMX离子强度影响均不显著,光影响均极显著;pH对NFX和LEMX影响不显著,对OFX和CPX影响极显著;OFX和CPX由光及pH二因素交互作用影响极显著,NFX和LEMX由光及pH二因素交互作用影响不显著。     

多级超滤及亲和超滤法分离纯化NADH工艺的研究

研究出一种经济、高效、简便且容易放大的提取、分离和纯化辅酶NADH的工艺条件并进行优化.使用化学渗透法处理啤酒酵母细胞Saccharomyces cerevisiae粗提NADH,多级超滤及亲和超滤法进一步分离和纯化NADH.选用酵母醇脱氢酶（YADH）作为亲和配体,在pH值8.0,离子强度为0.1 mol/L时,用YADH和细胞渗透液中的NADH亲和.使用MWCO=30 000的滤膜超滤.结果：NADH YADH复合物留在截留液中,从而与其它小分子物质分离.改变pH值和离子强度,NADH-YADH复合物解离,通过MWCO=1 000的滤膜超滤,NADH分离到滤过液中,YADH作为截留而回收,回收率达93%,活性损失15%.试验表明使用化学渗透法处理酵母细胞,用亲和超滤纯化可获得高的NADH产率.和以前的方法相比具有简单、经济、省时、高效等特点,且容易放大.     

离子导入对卡托普利透皮吸收的促进作用(英文)

目的:研究离子导入技术对卡托普利透皮吸收的促进作用。方法:应用离子导入技术研究了卡托普利体外透过大鼠离体皮肤的影响因素,并进行了卡托普利水凝胶贴片大鼠在体的试验,测定了血药浓度的变化。结果:离子导入技术可以有效地促进卡托普利的透皮吸收,透皮速率增加约7倍。药物贮库中的各种因素如pH,离子强度,药物浓度和电流强度均影响药物的透皮速率。随着pH的增加,离子强度的减小,药物浓度的增加及电流强度的增加,透皮速率也增加。大鼠在体试验也表明用药1h后血药浓度即可达到坪值(约0.9μg/mL),并在整个试验阶段维持稳定。结论:离子导入可以有效地促进卡托普利的透皮吸收。     

HPLC法测定阿奇霉素在水溶液中的降解动力学

目的研究阿奇霉素在水溶液中的降解动力学,为阿奇霉素液体制剂的开发提供参考。方法通过经典恒温试验,应用HPLC法测定阿奇霉素在不同pH值、不同温度、不同离子强度、不同缓冲液条件下的降解动力学参数。结果阿奇霉素在水溶液中的降解呈现一级动力学特征,其最稳定pH值(pHm)为6.41;随着离子强度和温度的增加,阿奇霉素的降解加快;阿奇霉素在磷酸盐缓冲液中比在醋酸盐、枸橼酸盐缓冲液中相对稳定。结论阿奇霉素降解速率与溶液pH值、缓冲液种类、离子强度以及温度有关;溶液pH值与温度对阿奇霉素降解作用的影响较为明显。     

盐酸阿莫罗芬在水溶液中的降解动力学研究

目的：研究盐酸阿莫罗芬在水溶液中的降解动力学。方法：建立HPLC法,测定盐酸阿莫罗芬在不同pH值、不同温度、不同离子强度的缓冲液中的降解动力学参数。结果：盐酸阿莫罗芬在水溶液中的降解呈现伪一级动力学特征,随着温度的增加,其降解速率增大;在37和60℃时,随着PH的增加,盐酸阿莫罗芬的降解速率明显增大（P〈0．05）,其半衰期和有效期明显减小（P〈0．05）,而随着离子强度的增大,其降解速率有所减小（P〉0．05）;在4和25℃时,盐酸阿莫罗芬在不同pH和不同离子强度的缓冲液中相对稳定;盐酸阿莫罗芬降解活化能随着pH的增大而增大。结论：盐酸阿莫罗芬在水溶液中的降解速率与温度、pH值和离子强度有关,其中温度对盐酸阿莫罗芬降解的影响较为明显。     

小鼠颌下腺神经生长因子的提取及活性鉴定的初步研究

对神经生长因子（Nerve Growth Factor,NGF）提取纯化、活性鉴定进行了研究。将小鼠颌下腺组织匀浆、离心,取其上清,在不同pH和离子强度,依次通过两个离子交换纤维素层析柱,制得 2.5 S NGF纯品。其分子量约43.5 kD,3种主要组分的等电点分别为8.85、9.10和9.20。用鸡胚背根培养法证明其具有刺激神经生长的作用。     

降纤酶生产过程中测活方法探讨

降纤酶是从尖吻蝮蛇毒纯化的蛋白水解酶。酶的活力是衡量酶制剂水平的一个重要指标,它所处环境的酸碱性、离子强度、温度、金属离子等对其活性有很大的影响。部颁标准的降纤酶测活方法是针对原料药及制剂的,它们纯度高,一般为冻干品且含盐分少,可用合适pH及离子浓度的缓冲液溶解,因而能在降纤酶最适测活环境中进行测定。然而,在从尖吻蝮蛇毒纯化降纤酶的过程中,由于工艺的需要[1],所用的各种层析缓冲液中含有不同浓度的盐,酸碱度也与测活系统不一样。高浓度的盐与偏酸、偏碱都影响降纤酶的活性测定,甚至出现与客观事实相反的结果,给纯化工…     

不同因素对N-琥珀酰壳聚糖特性黏度的影响

目的探讨不同因素对N-琥珀酰壳聚糖特性黏度的影响。方法利用乌氏黏度计测量N-琥珀酰壳聚糖在不同离子强度、pH值、热、光照和表面活性剂作用下特性黏度的变化,并与玻璃酸进行比较。结果随离子强度和pH值的增加、加热和光照时间的延长,N-琥珀酰壳聚糖的特性黏度随之降低,能与阴离子和非离子表面活性剂相容。结论在相同的实验条件下,N-琥珀酰壳聚糖的特性黏度受多种因素的影响小于玻璃酸。     

单克隆抗体的纯化与IgG亚类鉴定

本文报告了以SPA亲和层析、pH梯度洗脱技术纯化McAb的效果,纯化物以SDS—聚丙烯酰胺电泳、ELISA及中和试验检测。也报告了以免疫双扩散沉淀技术对脊髓灰质炎(polio)Sabin—1,IS—11株McAb之IgG亚类,轻链型别鉴定的结果。     

盐酸青藤碱水溶液的降解动力学研究

目的:研究盐酸青藤碱水溶液的降解动力学特征。方法:应用比色法确定盐酸青藤碱在不同pH值、不同离子强度、不同介电常数水溶液中经80℃恒温加速试验所得的降解动力学参数。结果:经过线性拟合对比分析,盐酸青藤碱水溶液的降解反应级数为n=1。降解速率常数(k)值随pH值的上升而增高,在pH<3的低pH值区域降解十分缓慢;而进入pH3.9～5的区域趋于稳定,出现一个较低的平台;当pH>5时,k值随pH值的上升而迅速增高。盐酸青藤碱水溶液随离子强度的增加,降解速率增加;溶液的介电常数增加,其降解速率也增加。结论:盐酸青藤碱水溶液的降解属于近似1级动力学过程,降解速率受溶液pH影响显著;降解速率与溶液离子强度成正相关,与溶液介电常数亦成正相关。     

温敏/pH敏共聚物瓜耳胶-异丙基丙烯酰氨的制备及其水凝胶性质研究

目的:合成了新型温敏/pH敏感型高分子材料异丙基丙烯酰氨-g-瓜耳胶(PNIAAr-g-GG),并对其性质进行研究.方法:采用链引发法制备了异丙基丙烯酰氨-g-瓜耳胶共聚物,以戊二醛为交联剂制备了聚合物凝胶及其温敏游离膜,并用红外光谱与热重分析对聚合物结构进行确证;采用黏度法测定了聚合物的低温溶解温度(lower critical solution temperature,LCST);考察了离子强度对聚合物LCST的影响,温度对温敏膜药物透过性的影响,同时考察了温度、离子强度及pH值对聚合物凝胶释药的影响.结果:聚合物的LCST为37.5℃,且随溶液中离子强度的增高而线性降低;当温度高于聚合物LCST时,凝胶中药物释放速率减慢,药物经膜的透过性增加;凝胶释药速率随溶出介质中离子强度的增高而降低,随介质pH值降低而加快.结论:异丙基丙烯酰氨-g-瓜耳胶凝胶骨架片具有明显的温度敏感性及pH敏感性.     

唐松草新碱水溶液的氧化降解动力学研究

本文研究了唐松草新碱在水溶液中的氧化降解动力学。考查了pH值、离子强度、温度和氧含量的影响,水溶液中的氧化降解速率常数由荧光法测定。结果表明,唐松草新碱在过量氧存在下,其氧化降解反应服从假一级反应动力学方程式,速率常数可由下式表示:其速率常数主要受介质的pH值和氧含量的影响,在pH 7.2条件下没有观测到原盐效应。     

还原型谷胱甘肽的金属螯合亲和色谱纯化

制备了以壳聚糖为载体的金属螯合亲和色谱分离纯化还原犁谷胱甘肽（GSH）。研究了pH、铵离子浓度等对GSH洗脱的影响。根据试验结果确定洗脱液为pH4．2、0．02mol／L磷酸盐缓冲液（含0．5mol／L NH4Cl），所得GSH纯度可达49．8％，平均提取率为67．9％。     

草乌甲素的降解动力学

目的研究草乌甲素的降解动力学,考察影响草乌甲素降解的因素。方法采用经典恒温法进行实验,以高效液相色谱法测定草乌甲素的含量。结果草乌甲素的降解呈伪一级动力学,主要受OH-催化。温度升高,草乌甲素降解速率增加。草乌甲素的最稳pH值范围为3~5。草乌甲素在pH 7~9时的降解反应活化能分别为148.04、137.65和102.36 kJ.mol-1,室温(25℃)时的t0.9分别为1 054.00、95.82、7.42 h。碱性条件下,离子强度增加,表观降解速率常数减小。结论草乌甲素的降解反应为伪一级反应。温度、pH值和离子强度显著影响草乌甲素的降解反应。