上皮性卵巢癌组织中EGFR、KRAS的表达变化及意义

目的观察表皮生长因子受体（EGFR）、鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因（KRAS）蛋白在上皮性卵巢癌（下称卵巢癌）组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测45例卵巢癌组织中的EGFR、KRAS蛋白,另选18例卵巢良性肿瘤组织和30例正常卵巢组织为对照。结果卵巢癌组织中EGFR、KRAS蛋白表达明显高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织（P均〈0．05）。EGFR阳性表达率与卵巢癌临床分期有关（P〈0．05）,KRAS蛋白阳性表达率与卵巢癌临床分期、分化程度有关（P〈0．05）;卵巢癌组织中EGFR与KRAS蛋白表达呈正相关（r=0．613,P〈0．05）。结论卵巢癌组织中EGFR、KRAS蛋白表达明显上调,且两者呈正相关关系,在卵巢癌的发生、发展中起重要作用;KRAS蛋白可能为卵巢癌发生发展的始动因素,可作为卵巢癌的早期诊断指标之一。     

卵巢肿瘤组织中EGFR、CK20表达及意义

目的探讨细胞角质蛋白20（CK20）和表皮生长因子受体（EGFR）mRNA在卵巢上皮性肿瘤发生中的作用。方法应用RT-PCR法检测12份正常卵巢（对照组）、18份卵巢良性肿瘤（良性组）、33份卵巢恶性肿瘤（恶性组）和14份胃肠道转移性卵巢肿瘤（转移组）组织中CK20、EGFR mRNA的表达。结果恶性组中CK20、EGFR mRNA阳性率显著高于对照组及良性组（P〈0.05）,与转移组比较无明显差异;恶性组CK20 mRNA表达与手术病理分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）,EGFR mRNA表达与手术病理分期有关（P〈0.05）。结论CK20、EG-FR高表达可促进卵巢恶性肿瘤的发生、转移;其检测对判断预后有一定价值。     

ERα、EGFR 及 CyclinD1在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的：探讨雌激素受体α（ ERα）、表皮生长因子受体（ EGFR）及细胞周期蛋白D1（ CyclinD1）在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法观察ERα、EGFR及CyclinD1在上皮性卵巢癌组织58份（浆液性卵巢癌组织38份、非浆液性卵巢癌组织20份）、正常卵巢组织18份、卵巢良性肿瘤组织20份中的表达情况。结果 ERα、EGFR及CyclinD1在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率分别为74．13％、68．97％、51．72％,显著高于正常卵巢组织（33．33％、16．67％、0）及卵巢良性肿瘤组织（30．0％、25．0％、10．0％）（P均＜0．05）;但ERα、EGFR及CyclinD1在卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率比较P均＞0．05。 ERα、EGFR及CyclinD1在上皮性卵巢癌中的表达与临床分期及细胞分化程度有关（P均＜0．05）。结论 ERα、EGFR及CyclinD1在上皮性卵巢癌中过表达,并在一定程度上反映其恶性程度及预后状况。     

卵巢上皮性肿瘤组织中p27kipl和cyclin E的表达及意义

目的探讨p27^（kip1）、细胞周期素（cydin）E在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与卵巢癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性肿瘤组织中的p27^（kip1）、cyclin E。结果p27^（kip1）蛋白在卵巢上皮性癌和交界性肿瘤中的阳性表达率分别为37.5%、42.11%,显著低于良性肿瘤的78.05%（P均〈0.05）;cyclin E在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤、良性肿瘤的阳性表达率分别为72.22%、47.37%,29.27%,三者相比,P均〈0.01。p27^（kip1）、cyclin E在卵巢上皮性癌中的表达与组织分化程度、临床分期有关（P均〈0.05）。结论卵巢上皮性癌组织中p27^（kip1）表达下降,cyclin E表达上调,二者在卵巢癌的发生发展过程中发挥重要作用。     

卵巢上皮性肿瘤组织中泛素与Cyclin B1的表达及意义

采用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例上皮性良性卵巢肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中的泛素和细胞周期蛋白B1（Cyclin B1）,分别与上皮性卵巢癌的组织学类型、病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。结果显示,泛素在上皮性卵巢癌、正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤中的阳性表达率分别为34%（17/50）、5%（1/20）、10%（2/20）,Cyclin B1的阳性表达率分别为42%（21/50）、5%（1/20）、15%（3/20）,两者在卵巢癌中的阳性表达率均显著高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤（P均〈0.05）;泛素和Cyclin B1在上皮性卵巢癌中的阳性表达率随细胞分化程度的降低、临床分期增加而增高（P均〈0.05）,伴区域淋巴结转移者,其表达增高（P〈0.05）;泛素和Cyclin B1在上皮性卵巢癌中的表达呈正相关（r=0.301,P〈0.05）。认为泛素、Cyclin B1与上皮性卵巢癌的发生发展密切相关,有可能成为评估上皮性卵巢癌恶性程度及判定预后的重要指标。     

卵巢上皮性癌组织中HER-2、TOPO-Ⅱα的表达及意义

目的观察卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中HER-2、TOPO-Ⅱα的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP方法检测58例卵巢癌、20例良性卵巢肿瘤及10例正常卵巢组织中的HER-2及TOPO-Ⅱα。结果卵巢癌组织中HER-2、TOPO-Ⅱα的阳性表达率为分别为46.6%、53.4%,显著高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤组织（P均〈0.05）;良性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织相比P均〉0.05。HER-2和TOPO-Ⅱα的表达与卵巢癌临床分期、分化程度有关（P均〈0.05）,而与年龄、组织学类型无关（P均〉0.05）;卵巢组织中HER-2和TOPO-Ⅱα的蛋白表达呈正相关（r=0.247,P〈0.05）。结论卵巢癌组织中HER-2与TOPO-Ⅱα表达升高。二者与卵巢癌的发生发展有关。     

卵巢上皮性癌组织中β-catenin、E-cadherin表达变化及意义

目的观察卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中-βcatenin、E-cadherin的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SABC法检测49例上皮性卵巢癌、10例交界性囊腺瘤及16例良性卵巢肿瘤患者肿瘤组织中的β-catenin、E-cadherin。结果卵巢癌组织中-βcatenin、E-cadherin的异常表达率分别为79.59%（39/49）、67.35%（33/49）,明显高于良性卵巢肿瘤组织的25%（4/16）、0和交界性卵巢囊腺瘤组织的30.00%（3/10）、20.00%（2/10）,P均〈0.01。良性卵巢肿瘤与卵巢交界性囊腺瘤组织中β-catenin、E-cadherin的异常表达率相比P均〉0.05。β-catenin与卵巢癌病理类型、病理分级和腹腔转移有关（P均〈0.05）。E-cadherin与卵巢癌病理类型、临床分期、腹腔转移和术后有无残余瘤有关（P均〈0.05）。卵巢癌组织中的β-catenin、E-cadherin的异常表达呈正相关（r=0.525 8,P〈0.05）。结论卵巢癌组织中-βcatenin、E-cadherin表达下调。二者在卵巢肿瘤发生、发展过程中起重要作用。     

卵巢癌组织中P-糖蛋白、肺耐药蛋白的表达变化及意义

目的探讨原发性上皮性卵巢癌（POEC）组织中P-糖蛋自（P—gP）及肺耐药蛋白（LRP）的表达及意义。方法采用免疫组化法检测56例POEC、15例卵巢良性肿瘤、12例正常卵巢组织中的P—gP、HIP,并分析其与POEC患者临床病理参数的关系。结果P-gp、LRP在POEC组织中的阳性表达率显著高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织（P均〈0．01）;LRP的表达与POEC患者腹腔积液有关（P〈0．01）;术前化疗的POEC患者P-gp、LRP阳性表达率高于初治者（P〈0．01）,P-gp、LRP表达阳性的POEC对化疗反应差。结论P-gp、LRP在POEC组织中的阳性表达率高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织;化疗可使POEC组织P-gp、LRP的阳性表达率升高;P-gp及LRP的表达可预测POEC对铂类药物化疗的疗效。     

上皮性卵巢癌组织中KAI1与Casepase-3表达变化及意义

目的 观察上皮性卵巢癌（简称卵巢癌）组织中抑癌基因KAI1（CD82）和Caspase-3的表达变化,并探讨其临床意义.方法 采用免疫组化法检测50例卵巢癌（A组）、20例卵巢良性肿瘤（B组）和15例正常卵巢组织中（C组）的KAI1与Casepase-3.结果 A组KAI1、Caspase-3蛋白阳性分别为24、28例,B组分别为17、5例,C组分别为0、5例;A组与B、C组比较,P均＜0.05.KAI1蛋白表达与卵巢癌的临床分期、组织学分级、有无腹水及有无淋巴结转移有关（P均＜0.05）,Caspase-3蛋白表达与卵巢癌的临床分期、组织学分级有关（P均＜0.05）.结论 卵巢癌组织中KAI1、Caspase-3表达增加,二者在卵巢癌发生、发展中起重要作用.     

APC基因异常甲基化在上皮性卵巢癌中的检测及临床意义

目的探讨结肠腺瘤性息、肉病基因（APC）异常甲基化在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及临床意义。方法采用甲基化特异性PCR法检测63例上皮性卵巢癌组织原发灶、41例相应的盆腹腔转移灶、10例癌旁卵巢组织及20例正常卵巢组织中APC基因启动子区甲基化状态。结果上皮性卵巢癌组织原发灶及相应的盆腹腔转移灶中APC基因启动子区异常甲基化发生率分别显著高于正常卵巢组织（P〈0．05）。APC基因启动子区甲基化与上皮性卵巢癌临床分期、分化程度及病理类型无关。结论APC基因启动子区异常甲基化与上皮性卵巢癌发生、发展密切相关。     

大肠癌组织中VEGF—C、STAT3的表达变化及意义

目的观察大肠癌组织中血管内皮生长因子C（VEGF—C）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）mRNA及其蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法分别采用荧光实时定量PCR法和免疫组化法检测60例大肠癌组织及远癌切端大肠组织中的VEGF—C、STAT3mRNA及其蛋白。结果大肠癌组织组织中VEGF—C、STAT3mRNA表达量分别为0．81±0．33、1．33±0．48,VEGF-C、STAT3蛋白阳性表达者分别为39例、42例;远癌切端大肠组织中分别为0．62±0．28、1．04±0．30、15例、4例。两者比较,P均〈0．05。大肠癌组织中,VEGF—C、STAT3mRNA及其蛋白表达呈正相关（r分别为0．982、0．892,P均〈0．01）。VEGF—C、STAT3mRNA及其蛋白表达水平与大肠癌肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关（P均〈0．05）。结论大肠癌组织中STAT3、VEGF—CmRNA及其蛋白高表达。二者在大肠癌的淋巴结转移中发挥重要作用。     

应用表达载体介导siRNA抑制胰腺癌STAT3基因表达的研究

目的探讨表达载体介导小干扰RNA（siRNA）对人胰腺癌细胞系SW1990转录激活因子-3（STAT3）表达的抑制作用。方法设计合成3种可编码后形成小发夹结构针对STAT3基因的siRNA的DNA序列，将其连入pRNAT—U6．1／Neo质粒中，构建STAT3siRNA表达载体。表达载体进行PCR及测序鉴定，并分别转染SW1990细胞，实时定量PCR和Western blot观察SW1990细胞转染后STAT3 mRNA和蛋白表达的改变。结果PCR和DNA测序证实携带3种STAT3 siRNA表达载体构建成功，分别转染SW1990细胞后，STAT3基因的mRNA和蛋白表达量与空质粒转染相比均明显下降（P〈0．05），其中，第二种STAT3 siRNA作用明显，可使mRNA和蛋白表达水平分别下降63％和60％。结论本研究构建的STAT3．siRNA表达载体可有效抑制SW1990细胞STAT3的mRNA和蛋白表达，为下一步以STAT3为靶点的胰腺癌基因治疗实验研究奠定了基础．     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号转导和转录活化因子3表达的影响

目的探讨氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号转导和转录活化因子3(STAT3)及STAT3 mRNA表达的影响。方法30只大鼠随机分成正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组(每日灌胃给予氯沙坦40mg／kg，共2周)。腹腔注射STZ诱发糖尿病大鼠模型，采用免疫组化和Western印迹检测磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达，Western印迹检测STAT3蛋白表达，半定量RT—PCR检测STAT3 mRNA的表达。结果糖尿病组肾小球STAT3、p-STAT3及STAT3 mRNA表达较正常对照组明显增强；氯沙坦治疗组p-STAT3表达较糖尿病组降低，但对STAT3蛋白及STAT3 mRNA的表达无明显影响。结论氯沙坦的肾脏保护作用可能是部分通过影响STAT3磷酸化，抑制信号通道而发挥作用。     

不分型流感嗜血杆菌上调人类MUC5AC黏液素的基因表达

目的 探索不分型流感嗜血杆菌(NTHi)上调人类MUC5AC黏液素基因表达的细胞分子机制.方法 通过反转录套式-PCR及实时荧光定量PCR分析NTHi所诱导的MUC5AC mRNA的表达,免疫沉淀及Western印迹法检测NTHi对表皮生长因子受体(EGFR)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的激活,采用p38 MAPK或EGFR特异性抑制剂,共转染EGFR显性失活质粒,判断在转录水平对NTHi所诱导的MUC5AC表达的影响,并研究EGFR特异性抑制剂对NTHi所诱导p38MAPK激活的影响.结果 在人结肠上皮细胞株(HM3)细胞中,NTHi在mRNA及转录水平上调人类MUC5AC黏液素基因的表达,NTHi能使EGFR或p38MAPK磷酸化.p38MAPK、EGFR特异性抑制剂或共转染EGFR显性失活质粒,可显著抑制NTHi所诱导的MUC5AC的表达,EGFR特异性抑制剂对NTHi所诱导p38MAPK磷酸化有抑制作用.结论 不分型流感嗜血杆菌可通过EGFR-p38MAPK信号通路,上调人类MUC5AC黏液素基因表达.