IL-10和TGF-β1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨IL-10和TGF-β1在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与患者临床病理参数、预后的相关性。方法运用免疫组化方法检测47例NSCLC组织中IL-10和TGF-β1的表达,分析其与患者各项临床指标及预后的关系。结果 IL-10在肺癌细胞阳性表达率为70.21%（33/47）,TGF-β1阳性间质细胞在癌组织内阳性率为48.93%（23/47）,二者表达水平均与肿瘤临床分期呈正相关（P〈0.05）,与患者预后呈负相关（P〈0.05）。IL-10表达与肿瘤内TGF-β1表达呈正相关（P〈0.05）。结论 NSCLC中IL-10和TGF-β1表达水平与临床病理因素及预后密切相关,两者可以作为判断预后的指标。     

非小细胞肺癌肿瘤组织中CD＋163巨噬细胞表达水平变化

目的观察非小细胞肺癌中CD＋163巨噬细胞表达水平变化。方法收集经病理证实的非小细胞肺癌组织47例,采用免疫组化法检测癌巢、癌内间质、癌与正常肺交界区的CD＋163巨噬细胞。结果非小细胞肺癌组织中癌内间质及癌与正常交界区CD＋163巨噬细胞高表达患者的比例为72％、65％,均高于癌巢中的43％,P均〈0．05。癌与正常交界区CD＋163巨噬细胞高表达与非小细胞肺癌临床分期及淋巴结受累有关,P均〈0．05;交界区CD＋163巨噬细胞高表达者平均生存时间（767d）明显少于低表达者（1385d）,P〈0．05;Cox风险回归多因素分析显示,交界区CD＋163,巨噬细胞表达、临床分期是非小细胞肺癌患者预后的独立预测指标（HR4．22,95％CI1．55～11．53,P〈0．05）。结论非小细胞肺癌癌巢组织、癌内间质及癌正常交界区均存在CD＋163,巨噬细胞表达。     

非小细胞肺癌中HIF-1α、MMP-2的表达及其相互关系探讨

目的 探讨HIF-1α、MMP-2在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测120例NSCLC和癌旁正常肺组织中HIF-1α、MMP-2的表达.结果 HIF-1α、MMP-2在NSCLC组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织（P〈0.05）.HIF-1α在NSCLC中的表达与肿瘤直径、组织学分化、TNM分期和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）.MMP-2在NSCLC中的表达与组织学分化、TNM分期和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）.120例NSCLC中,HIF-1α和MMP-2的表达呈正相关性（r=5.139,P＜0.05）.结论 NSCLC组织中HIF-1α、MMP-2呈过表达,两者均与NSCLC的浸润和转移有关,且两者存在相互协调的关系.     

BAG-1、UGRP-1在非小细胞肺癌中的表达及其在临床预后预测中的价值

目的研究BAG-1、UGRP-1在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达,分析其与NSCLC患者临床病理特征、预后的关系。方法采用SP法检测130例NSCLC组织与30例癌旁正常肺组织的BAG-1、UGRP-1蛋白表达情况,并随访进行患者生存预后分析。结果 BAG-1蛋白在NSCLC和癌旁正常肺组织阳性表达率分别为76.15%和23.33%（P〈0.01）,BAG-1蛋白在NSCLC内表达水平与组织学分化程度相关（P〈0.05）,BAG-1蛋白阳性表达患者5 a生存率高于阴性表达患者（P〈0.05）。UGRP-1蛋白在NSCLC和癌旁正常肺组织阳性表达率分别为47.69%和86.67%（P〈0.01）,UGRP-1蛋白在NSCLC内表达水平与组织学分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.05）,UGRP1蛋白阳性表达患者5 a生存率高于阴性表达患者（P〈0.05）。BAG-1与UGRP-1蛋白表达无明显相关性（P〈0.05）。结论 BAG-1、UGRP-1蛋白表达与NSCLC的发生、发展存在一定的关系,可作为NSCLC早期筛选的一项指标,并对疾病的预后有着重要意义。     

IKKα对缺血再灌注损伤小鼠的保护作用及其对M1与M2型巨噬细胞的影响

目的探讨IκB激酶复合物(IKKα)对缺血再灌注(IR)损伤小鼠的保护作用及其对M1与M2型巨噬细胞的影响。方法 C57BL/6-IKKα条件性基因敲除小鼠(mIKKα~(-/-))及同窝出生的年龄性别匹配的对照组小鼠各9只,各自分为MIRI模型组(6只)和假手术组(3只),以上各组小鼠分别于IR3 d及7 d后进行心脏超声及血流动力学检测;IR模型组于IR3 d及7 d后分别处死(3只),HE及Masson染色进行心肌病理学观察,免疫组织化学法检测心肌组织中炎性因子白细胞介素-12A(IL-12A)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、CD68相对表达量,Western Blot法检测心肌组织中M1/M2型巨噬细胞表型标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、表型标记物(Arg1)蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测心肌组织中M1型巨噬细胞表型标记物(iNOS、TNF-α、IL-1β)mRNA的表达量以及促M2巨噬细胞因子[肿瘤坏死因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)]、M2巨噬细胞Arg1mRNA的表达量。结果与IKKα~(flox/flox)模型组比较,mIKKα~(-/-)模型组IR 3 d及7 d的左心室舒张末期内径(LVIDd)、心肌梗死面积及胶原附着面积、炎性因子IL-12A、IL-10、CD68阳性区域评分、M1型巨噬细胞表型标记物iNOS蛋白量及iNOS、TNF-α和IL-1βRNA的表达量均增加(P0.05);左室射血分数(EF)、左室室壁心肌纤维缩短率(FS)、M2型巨噬细胞表型标记物Arg1蛋白量和Arg1mRNA的表达量均降低(P0.05);促M2巨噬细胞极化因子(TGF-β、IL-10)mRNA表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 IKKα对缺血再灌注损伤小鼠的炎症反应具有保护作用,该作用可能与IKKα调节心肌巨噬细胞聚集并向M1型巨噬细胞活化有关。     

M2型巨噬细胞对大肠癌SW620上皮—间质转化的影响

目的探讨M2型巨噬细胞对大肠癌细胞上皮—间质转化的影响。方法采用人单核细胞白血病细胞株（THP-1）诱导成M2型巨噬细胞，用流式细胞术鉴定后与大肠癌细胞株SW620非接触式共培养（实验组），以其单独培养为对照（对照组）。分别在培养24、48、72h时用ELISA法测细胞液中TNF-α、TGF-β，用Western blot法测细胞中E—Cadherin、Vimentin蛋白。结果与对照组比较，观察组TNF-α、TGF-β水平及Vimentin蛋白表达明显上调，并随着培养时间的延长而增加；E—cadherin表达下调，并随着培养时间的延长而降低（P均〈0．05）。结论M2型巨噬细胞对SW620的上皮-间质转化有促进作用。     

直肠癌组织中肿瘤相关巨噬细胞、炎性因子的表达变化及意义

目的 观察直肠癌组织中肿瘤相关巨噬细胞（TAM）计数及TGF-β、TNF-α、IL-6表达变化,并探讨其意义.方法 采用免疫组化法检测40例直肠癌和癌旁正常组织中的TAM、TGF-β、TNF-α、IL-6.结果 癌组织TAM计数为（4.88±5.44）个/HP,与癌旁正常组织的（1.80±2.38）个/HP相比,P＜0.01;癌细胞浸及浆膜层者TAM计数为（4.28±6.22）个/HP,与未浸及浆膜层者的（2.50±2.17）个/HP相比,P＜0.01;淋巴结转移者TAM计数为（6.10±3.25）个/HP,与无淋巴结转移者的（3.13±2.77）个/HP相比,P＜0.01.癌组织中TGF-β、TNF-α、IL-6阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P均＜0.01）;肿块最大径＞5 cm、癌细胞浸润浆膜层、有淋巴结转移者TGF-β、TNF-α、IL-6表达阳性率均明显高于肿块最大径≤5 cm、未浸及浆膜层及无淋巴结转移者（P均＜0.01）.癌组织TAM计数与TGF-β、TNF-α、IL-6表达呈正相关（r分别为0.892、0.971、0.962,P均＜0.05）.结论 直肠癌组织中TAM计数及TGF-β、TNF-α、IL-6表达升高,在直肠癌的发生发展及侵袭转移中可能发挥重要作用.     

早期非小细胞肺癌组织中miR-106a的表达变化及意义

目的观察早期非小细胞肺癌（NSCLC）组织中微小RNA-106a（miR-106a）的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用实时定量PCR（qRT-PCR）检测52例早期NSCLC患者肿瘤组织及癌旁正常肺组织中的miR-106a。结果早期NSCLC组织中miR-106a的表达量明显高于癌旁正常肺组织（P〈0.001）,早期NSCLC组织中miR-106a的表达与术后复发和死亡显著相关（P均〈0.05）。结论早期NSCLC组织中miR-106a高表达。miR-106a检测有助于早期NSCLC的诊断和预后判断。     

CD68+巨噬细胞表达与肺腺癌侵袭性及临床病理分期相关性分析

目的通过肺腺癌肿瘤实质中CD68~+巨噬细胞浸润情况的分析,及肿瘤实质中Ki67指数表达情况,探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与肺腺癌临床病理分期及肿瘤侵袭能力相关性。方法选取南京市胸科医院2017年间130例肺腺癌组织切片,应用免疫组织化学技术观察并计数CD68~+巨噬细胞在肺腺癌肿瘤实质及间质浸润情况及Ki67指数表达情况分析其相关性。结果 (1)肺腺癌肿瘤实质内TAMs表达低于肿瘤癌旁间质内TAMs表达(P0.05)。(2)肺腺癌肿瘤实质及间质内TAMs表达与Ki67表达有相关性(P=0.0416)。(3)Ⅲ～Ⅳ期NSCLC肿瘤实质组织中CD68~+阳性TAMs表达显著高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义(P0.05)。结论结果显示CD68~+巨噬细胞浸润情况与肿瘤TNM分期、及Ki67表达有一定相关性。肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)浸润肿瘤实质及间质导致肺内炎症微环境,与肿瘤侵袭能力正相关。     

大肠癌组织转化生长因子-β1、缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的探究大肠癌组织中转化生长因子(TGF)-β1、缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义。方法随机选取2010年5月至2012年5月住院治疗的大肠癌患者的癌组织(大肠癌组)和癌旁组织(癌旁组)各102例,对比分析两组TGF-β1、HIF-1α和VEGF的表达情况及其与临床病理参数和预后的相关性。结果大肠癌组TGF-β1、HIF-1α和VEGF总表达阳性率均显著高于癌旁组(P0.05);不同TNM分期和浸润深度的TGF-β1表达阳性率差异显著(P0.05),不同TNM分期、分化程度、浸润深度、是否存在淋巴结转移和远处转移的HIF-1α和VEGF表达阳性率差异显著(P0.05);TGF-β1、HIF-1α均与VEGF表达呈正相关(r=0.231、0.462,P0.05);HIF-1α和VEGF表达与患者预后密切相关,且HIF-1α和VEGF阳性表达者的生存时间显著低于阴性者(P0.05)。结论大肠癌组织中TGF-β1、HIF-1α和VEGF的表达有所上升,且表达水平与肿瘤的临床病理参数以及后期预后密切相关,三者联合检测对判断肿瘤侵袭转移和预测预后有一定的临床指导意义。     

肝内CD68阳性细胞及TNF-α在慢加急性乙型肝炎肝衰竭发病机制中的作用

目的通过研究肝内CD68＋和TNF-α阳性细胞的表达,来探讨它们在乙型肝炎慢加急性肝衰竭（ACLF）发病机制中的作用。方法采用免疫组化法检测乙型肝炎ACLF患者、慢性乙型肝炎（CHB）患者及正常对照人群肝内TNF-α的表达以及其分泌细胞CD68＋细胞的数量。结果ACLF患者肝内TNF-α阳性分泌细胞平均数为90/高倍视野（hpf）,明显高于CHB患者及正常对照组（分别为12/hpf和5/hpf）,差异均非常显著（P〈0.001）;ACLF患者肝内CD68＋细胞平均数为94/hpf,明显高于CHB患者及正常对照组（分别为48/hpf和15/hpf）,差异均非常显著（P〈0.001）;TNF-α阳性分泌细胞与CD68阳性细胞数量具有显著的正相关（r=0.866,P〈0.001）。结论乙型肝炎ACLF患者肝内CD68＋细胞数量明显增加,其分泌的TNF-α也明显增加,推测TNF-α可能参与了乙型肝炎ACLF的发病过程。     

CCR9在非小细胞肺癌患者外周血CD4+ T淋巴细胞中的表达及其对趋化活性的影响

目的：探讨CC族趋化因子受体9（ CCR9）在非小细胞肺癌（ NSCLC ）肿瘤免疫机制中的作用。方法采用流式细胞术检测42例NSCLC患者和30名健康人手术前后T细胞亚群以及外周血中CD4＋T淋巴细胞表面CCR9的表达情况,计数各组细胞表达的百分率。免疫磁珠分选外周血CD4＋T淋巴细胞,采用transwell实验检测并分析CCL25/CCR9对CD4＋T淋巴细胞迁移的影响。结果 NSCLC患者外周血T淋巴细胞亚群均降低,术后外周血CD4＋T淋巴细胞、CD4＋/CD8＋比值均明显高于术前[（49.11±8.32） vs （46.17±8.71）,P＝0.031和（1.66±0.09） vs （1.44±0.06）,P＝0.001];术前CD4＋CCR9＋T淋巴细胞的百分率低于术后[（3.33±1.11） vs （6.57±1.92）,P＜0.05]和健康对照组[（3.33±1.11） vs （11.06±1.37）,P＜0.05]。在CCL25诱导下,NSCLC患者外周血CD4＋T淋巴细胞趋化指数（CI）为3.14,明显低于健康对照组的3.83（ P＜0.05）。经过anti-CCR9单抗处理后,CD4＋T淋巴细胞的CI为0.62,与未经anti-CCR9 mAb处理者相比明显降低（ P＜0.05）。结论 NSCLC患者外周血T淋巴细胞调节机制紊乱,CL25/CCR9相互作用可介导外周血CD4＋T淋巴细胞迁移,NSCLC患者外周血淋巴细胞中CCR9低表达,影响淋巴细胞迁移,可能与肿瘤逃避免疫监视的机制有关。手术可以逆转CD4＋T淋巴细胞表面CCR9的表达变化, CCR9可能作为评价肺癌治疗后免疫重建的指标。     

阿托伐他汀通过PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌TNF-α表达的研究

目的：观察阿托伐他汀下调老年大鼠心肌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的作用及其与过氧化物酶体增殖物激活型受体β／δ（PPARβ／δ）信号通路之间的关系。方法：分离培养24个月龄大鼠的心肌细胞,将心肌细胞分为空白对照组、溶剂对照组、阿托伐他汀组、阿托伐他汀＋PPARβ／δ拮抗剂GSK0660组。各组细胞分别加入细胞培养液、二甲基亚砜（DMSO）、阿托伐他汀、阿托伐他汀＋GSK0660处理。用RT—PCR方法检测各组大鼠衰老心肌细胞的TNF-αmRNA表达水平,用westernblot方法检测各组TNF-α蛋白含量。结果：（1）与空白对照组相比,溶剂对照组大鼠衰老心肌细胞的TNF-α mRNA和蛋白水平均无显著差异;（2）与空白对照组相比,阿托伐他汀组的TNF-α mRNA和蛋白水平含量均显著降低（P〈0．01）;（3）阿托伐他汀＋GSK0660组的TNF-α mRNA表达水平及蛋白含量均显著高于阿托伐他汀组,但仍低于空白对照组（P〈0．05）。结论：阿托伐他汀可通过激活PPARβ／δ信号通路下调衰老心肌细胞TNF—d的表达。     

肺腺癌细胞系H114的建立

目的建立国人男性肺腺癌细胞系,为肺癌的防治研究提供理想的体外实验模型。方法以经组织学和／或细胞学确诊的标本进行原代培养,通过光镜观察、细胞苏木精．伊红（HE）染色、细胞生长曲线、异体移植实验及组织HE染色等对其进行分析鉴定,建立细胞系。结果细胞经液氮罐或-80℃低温冰箱反复冻存复苏后仍保持良好的增殖活性,复苏细胞经0．4％胎盘蓝染色,活细胞比率均保持在85％以上。在整个168h的观察时间里,肺腺癌H114细胞始终处于持续增殖状态,可见潜伏期和指数生长期,由于本细胞系传代次数较少,生长活跃,7d还没出现平顶期和退化衰亡期;体外培养细胞生长稳定,细胞形态学及浸润性生长结果表明该细胞系符合恶性细胞特性,裸鼠接种成功致瘤,瘤细胞形态与原患者的病理切片相似,命名为H114细胞系。结论该细胞系符合建系标准,是一株新建的人肺腺癌细胞系。     

肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响

目的观察肺表面活性物质（PS）对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4＋、CD8＋T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4＋、CD8＋T细胞的细胞周期分布和CD4＋、CD8＋T细胞内细胞周期调节蛋白p27kip1、cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平。结果哮喘患者CD4＋、CD8＋T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G0/G1期的CD4＋T细胞比例显著高于对照组（P〈0.01）。加PS组的S期CD8＋T比例显著低于对照组（P〈0.01）;G2期的CD8＋T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;G0/G1期的CD8＋T细胞比例高于对照组（P〈0.05）。CD4＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD4＋T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组（P〈0.01）;CD4＋T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组（P〈0.05）。CD8＋T细胞内p27kip1的表达水平高于对照组（P〈0.05）;CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组（P〈0.01）;CD8＋T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 PS通过抑制CD4＋T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27kip1的表达,抑制CD4＋T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4＋T细胞增殖;通过下调CD8＋T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kip1的表达,抑制CD8＋T细胞DNA合成。     

缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子和生存素在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和生存素(survivin)在非小细胞肺癌中的表达及相关性。方法:收集我院收治的病理确诊为非小细胞肺癌患者20例,并分别取其癌组织与癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测癌组织与癌旁组织中HIF-1α、VEGF和生存素的表达。结果:HIF-1α、VEGF和生存素在非小细胞肺癌癌组织中的表达均高于其癌旁组织(P0.05);在癌组织中,HIF-1α与VEGF和生存素表达呈正相关,Spearman相关系数分别为0.519、0.643;而VEGF与生存素表达亦呈正相关,Spearman相关系数为0.643(P0.05)。结论:在非小细胞肺癌癌组织中HIF-1α、VEGF和生存素表达明显高于癌旁组织;HIF-1α可以调节VEFG和生存素的表达,且VEGF和生存素在肿瘤发生、发展过程中可能有一定的协同作用。     

HIF-1α 与非小细胞肺癌增殖、血管生成及预后的关系简

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）增殖、血管生成及其对预后的影响.方法 采用免疫组化染色方法检测40例NSCLC及6例正常肺组织手术切除标本中HIF-1α及Ki-67、VEGF的表达情况.结果 NSCLC组织中HIF-1α高表达率（67.5%）高于正常肺组织（33.33%）（P〈0.05）,NSCLC组织中HIF-1α表达水平与肿瘤直径、分化程度、淋巴结转移及TMN分期密切相关（P〈0.05）,而在HIF-1α高表达组,相应Ki-67、VEGF的阳性表达率增高（P〈0.05）.Kaplan-Meier单因素生存分析和COX多因素回归分析均显示HIF-1α高表达为NSCLC患者预后的不良因素.结论 HIF-1α在NSCLC的增殖及转移中起到重要作用,可反映肿瘤恶性程度及疾病预后.     

非小细胞肺癌组织中KiSS-1的表达及意义

目的探讨KiSS-1基因在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法采用免疫组化sP法检测61例NSCLC组织（观察g1）和20例正常肺组织（对照组）中的KiSS-1表达，并分析与NSCLC临床病理参数的关系。结果观察组中KiSS-1阳性表达率为50．8％，明显低于对照组的80．0％（P〈0．05）；KiSS-1表达与NSCLC临床分期、肿瘤体积、淋巴结转移、4a生存率密切相关。结论KiSS-1在NSCLC的发生、发展中发挥重要作用，可作为预测NSCLC发生及侵袭转移的参考指标之一。     

Treg及IL-4对重症急性胰腺炎时枯否细胞M2极化状态的调节作用

目的探讨雨蛙肽联合脂多糖诱导小鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的方法和Treg(CD4+CD25+FoxP3+T调节淋巴细胞)及IL-4(白介素-4)对SAP时枯否细胞(Kupffer cells)M2极化状态的调节作用的比较。方法 (1)正常组予腹腔注射生理盐水(NS);SAP组予腹腔注射雨蛙肽联合脂多糖。SAP组细分为3组:造模后9 h、12 h和24 h组,比较胰腺病理情况。(2)比较正常组与模型组(SAP 8 h+NS组)肝脏炎症因子的基因表达水平。(3)模型组分3组:SAP生理盐水对照组(SAP16 h+NS组)、SAP IL-4治疗组(SAP 16 h+IL-4组)、SAP Treg治疗组(SAP 16 h+Treg组)。RT-PCR检测肝脏炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-10 mRNA表达水平;免疫荧光技术检测肝脏CD163、CCR7的表达。结果 (1)HE病理结果造模后24 h可见胰腺片状坏死。(2)模型组IL-1βmRNA的表达显著高于正常组(P0.05)。(3)SAP Treg治疗组IL-1β、TNF-αmRNA的表达显著低于SAP生理盐水对照组(P0.05);SAP Treg治疗组IL-1βmRNA的表达显著低于SAP IL-4治疗组(P0.05)。结论雨蛙肽联合脂多糖成功诱导小鼠SAP。IL-4和Treg对SAP具有一定的治疗作用。