超高效液相色谱-串联质谱法测定新生儿血浆中氟康唑的浓度

目的建立快速测定新生儿血浆中氟康唑浓度的方法。方法以非那西丁为内标,用乙腈沉淀蛋白处理血浆。色谱柱:Eclipse Plus C18RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相:0.1%甲酸-甲醇梯度洗脱;流速:0.3 ml/min;进样量:1μl。采用电化学喷雾离子源正离子模式电离,多反应监测模式检测,定量分析离子对分别为质核比(m/z)307.1→220.0(氟康唑),m/z 180.1→110.0(非那西丁)。结果该方法氟康唑在0.1001～60.0600μg/ml范围内有良好线性关系,定量下限为0.01μg/ml,准确度为82.5%～101.2%,提取回收率为85.0%～109.0%。结论该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,适用于新生儿血浆中氟康唑浓度的测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素

目的探讨液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4种霉菌毒素的可行性。方法样品采用加入乙腈提取,过Mycosep~(TM)226多功能净化柱净化后,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离负离子(ESI~-),以多离子反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。结果 4种霉菌毒素的线性范围为5.0μg/L~206.0μg/L,线性相关系数在0.9952~0.9998之间,检出限在0.1~0.2μg/kg之间;低中高3个水平的平均加标回收率在80.6%~91.4%之间;相对标准偏差(RSD)均6.3%。结论结果提示该方法具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,为检测此类毒素提供了一种新的潜在的方法。研究具有潜在的应用价值。     

超高效/高分离度快速/超快速液相色谱在中药及其制剂研究中的应用

超高效液相色谱(UPLC)、高分离度快速液相色谱(RRLC)和超快速液相色谱(UFLC)是近几年来推出的一种新的液相色谱技术,峰容量、分析效率、灵敏度和分辨率较常规HPLC有了很大的提高。其主要用于中药成分分析、中药指纹图谱、中药及其复方定量测定。此外,与TOF-MS、MS/MS联用还可用于中药代谢产物、中药复方血清化学成分和药动学等复杂体系的生物分析,以及药物的研究与开发,是复杂体系中药分离分析的重要手段。着重就其在中药及其复方研究中的应用进行介绍。     

液液萃取-超高效液相色谱-串联质谱法定量测定污水中10种毒品

建立一种基于液液萃取-超高效液相色谱-串联质谱法（LLE-UPLC-MS/MS）同时测定污水中10种毒品的氘代内标定量分析方法。污水样品经二氯甲烷-乙酸乙酯（1∶1）液液萃取浓缩,采用C₁₈色谱柱,流动相为0.1%甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液和乙腈,线性梯度洗脱分离,ESI正离子化多反应监测进行定量分析。10种待测物在各自的标准曲线范围内线性关系良好（r≥0.995 7）,定量限为1 ng/L（除苯丙胺为2.5 ng/L）,相对回收率范围为96.36% ~ 106.43%,日内与日间精密度均小于4.70%。该方法准确可靠、重复性好,适用于污水中10种毒品的定量检测,对影响固相萃取富集的复杂基质污水同样适用,为实时监测药品滥用提供了新的分析手段。     

血浆中尼莫地平的反相高效液相色谱测定法

为准确测定血浆中尼莫地平浓度，本文建立了离子抑制性反相高效液相色谱法。血浆样品碱后以乙醚－氯仿混合溶剂提取，提取液挥干，甲醇溶解后进样分析。采用μ－Ｂｏｕｄａｐａｋ Ｃ１８径向加压柱系统，甲醇－磷酸盐缓冲液为流动相，紫外检测波长２３６ｎｍ。选择尼群地平为内标峰面积定量。     

超高效液相色谱串联质谱法检测血液中的氨曲南及甲硝唑

 目的 建立同时检测血液中氨曲南及甲硝唑的超高效液相色谱串联质谱分析方法。方法 以头孢拉定和氯霉素为内标,血液样品经乙腈沉淀蛋白后通过高效液相色谱分离,电喷雾离子源进行离子化,采用多反应监测方式(multiple reaction monitoring mode,MRM)对各化合物进行监测。结果 所建立的方法可同时检测血液中的氨曲南和甲硝唑成分,氨曲南在10～5 000 ng/mL、甲硝唑在1～1 000 ng/mL的线性范围内具有良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.995;血液中氨曲南和甲硝唑的检出限分别为5和0.5 ng/mL (S/N=3∶1);定量限分别为10和1 ng/mL (S/N=10∶1);方法的日间及日内精密度均小于10%,准确度为 89.6%～97.5%。将此方法应用于1例医疗纠纷案件的鉴定,在涉案死者的血液中同时检出氨曲南及甲硝唑成分,血液中氨曲南及甲硝唑的质量浓度分别为438 ng/mL和15 μg/mL。结论 本研究所建立的分析方法灵敏度高、简便快速、专属性强、可靠性高,为司法鉴定实践中涉及氨曲南和甲硝唑的案件提供了技术支持和基础数据。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子对创面愈合的作用

目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对创面愈合的影响,探讨rhaFGF在组织修复中的作用机制。方法:利用大鼠创伤模型,采用HE染色观察不同时间点创面愈合情况;采用免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)的表达情况;采用羟脯氨酸测试法检测伤口中胶原纤维的含量,并对照观察创面应用rhaFGF后以上各项指标的变化。结果:外用rhaFGF后创面组织中伤后第8天毛细血管胚芽与成纤维数量显著多于单纯创伤组,伤后第14天,经rhaFGF治疗的大鼠创面的再上皮化明显强于单纯创伤组。创面组织中caspase-3的表达量逐渐增加,外用rhaFGF后第14天和第21天的caspase-3表达量显著高于单纯创伤组。伤口中羟脯氨酸的含量逐渐增加,外用rhaFGF后第8天和第14天的羟脯氨酸含量显著高于单纯创伤组。结论:外用rhaFGF在创伤愈合的前期可以促进肉芽组织生长使得愈合周期缩短。在创伤愈合的后期可以直接或间接的促进成纤维细胞的凋亡,维持了细胞增殖与凋亡的平衡。     

Determination of mycophenolic acid in human plasma by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry

A simple, sensitive and high throughput ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method has been developed for the determination of mycophenolic acid in human plasma. The method involved simple protein precipitation of MPA along with its deuterated analog as an internal standard (IS) from 50 µL of human plasma. The chromatographic analysis was done on Acquity UPLC C18 (100 mm×2.1 mm, 1.7 µm) column under isocratic conditions using acetonitrile and 10 mM ammonium formate, pH 3.00 (75:25, v/v) as the mobile phase. A triple quadrupole mass spectrometer operating in the positive ionization mode was used for quantitation. In-source conversion of mycophenolic glucuronide metabolite to the parent drug was selectively controlled by suitable optimization of cone voltage, cone gas flow and desolvation temperature. The method was validated over a wide concentration range of 15–15000 ng/mL. The mean extraction recovery for the analyte and IS was >95%. Matrix effect expressed as matrix factors ranged from 0.97 to 1.02. The method was successfully applied to support a bioequivalence study of 500 mg mycophenolate mofetil tablet in 72 healthy subjects.     

高效液相色谱-质谱法测定左卡尼汀的药动学及生物利用度

目的建立测定人血浆中左卡尼汀(L-carnitine,LC)浓度的方法,并研究其药动学特性及生物利用度。方法采用双周期随机交叉试验设计[1]。运用高效液相色谱-质谱法(LCMS)检测血浆中药物血药浓度[2]。采用DAS Ver 2.0药动学软件对血药浓度时间数据进行处理,计算药代动力学参数。Tmax:Cmax、AUC 0-24 h及AUC 0-∞经对数转换后进行方差分析及双单侧t检验,进行生物利用度评价。结果参比制剂的主要药动学参数T1/2α为(2.06±1.20)h;T1/2β为(59.80±10.50)h;T max为(3.23±0.42)h,;AUC(0-∞)为(2518.3±310.65)μmol/(L.h);AUC(0-t)为(1311.54±218.32)μmol/(L.h);Cmax为(83.5±23.40)μmol/L。试验制剂的相对生物利用度为(98.1±11.6)%。结论该检测方法准确、灵敏、简便。符合血浆样品的测定要求,可以应用于血药浓度的测定和药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中依地普仑浓度

目的 建立测定人血浆中依地普仑浓度的HPLC-MS/MS检测法.方法 以右美沙芬为内标,血浆样品用乙醚进行提取,在Agilent ZORBAX SB-C18柱(3.5μm,2.1 mmx150 mm),以乙腈(0.1%L酸胺-0.4%乙酸)缓冲溶液(70:30,v/v)为流动相,流速为O.3ml/min,在三级四极杆串联质谱中经ESI源离子化后,以多反应离子监测方式测定依地普仑的浓度.结果 依地普仑血药浓度在0.0866～64.13μg/L范围内线性良好(γ=0.9965),样品绝对回收率为64.98%～78.72%,批内和批间精密度RSD均<10%.结论 该方法灵敏、准确、快速,专属性强,可适用于依地普仑人体药代动力学特征的研究.     

HPLC-MS法测定人体血浆中的奥美沙坦

目的 建立测定人体内血浆中奥美沙坦浓度的HPLC-MS方法.方法 采用三氟乙酸沉淀法处理血浆,HyPurity C18柱(150 mm 2.1 mm,5μm),柱温40℃,流动相为水-甲醇-乙腈(14:60:26),流速为0.22 mL·min-1,质谱条件采用正离子检测的电喷雾电离方式,喷雾电压4.5 kV,正离子模式,用于定量分析的离子(m/z)分别为447(奥美沙坦),376(内标,加替沙星).结果 奥美沙坦检测下限为25 μg·L-1,线性范围25～3200 μg·L-1(r=0.9998),日内和日间RSD均低于15%.结论 该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于奥美沙坦的药代动力学及生物等效性研究.     

LC-MS法快速测定大鼠血浆五味子乙素及其药代动力学分析

目的 建立LC-MS联用测定血浆五味子乙素的方法,观察五味子乙素在Wistar大鼠体内的药代动力学作用.方法 提取五味子果实中的有效成分,给予大鼠一次性灌胃,其后在不同时间收集大鼠血液样品,通过LC-MS方法测定大鼠血浆中五味子乙素的浓度,分析大鼠血浆中五味子乙素的浓度-时间数据,应用3p97药代动力学分析软件计算大鼠体内五味子乙素的药代动力学参数.结果 本法简单快速,可应用于不同样品中五味子乙素含量的测定.五味子乙素的保留时间为2.96 min,血浆平均最大浓度为1.01 μg/mL,灌胃后达峰时间为5.65 hr,浓度时间曲线下的平均面积为15.98 mg/h·L,平均清除率为0.94 μg/h.结论 本方法可应用于不同样本中五味子乙素的检测和实验动物体内五味子乙素的药代动力学分析.     

胆红素IXα及其异构体的HPLC快速测定方法

目的：建立一种快速测定胆红素ＩＸα及其异构体的相对含量的方法．方法：采用高效液相色谱法，以ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）为分析柱，以乙腈∶甲醇∶醋酸铵－醋酸ｐＨ＝４．７（１∶７∶２Ｖ／Ｖ／Ｖ）为流动相，检测波长λ：４５０ｎｍ；流速：２．０ｍｌ／ｍｉｎ，可直接分离测定３个胆红素异构体．结果：对４批胆红素样品中３个异构体的相对含量用归一法处理进行了测定，胆红素ＩＸαｔＲ＝１３．１８ｍｉｎ，胆红素ＸⅢαｔＲ＝９．６５ｍｉｎ，胆红素ⅢαｔＲ＝１７．３５ｍｉｎ，胆红素异构体的分离度（Ｒ）分别为Ｒ１＝１．８０，Ｒ２＝２．０４．结论：本法快速、准确、灵敏、重现性好，可适用于胆红素对照品、胆红素的制备纯度鉴定及中药中胆红素的质量控制，对血清及胆汁中胆红素的测定也具有实际应用价值．     

超高效液相色谱-质谱串联法测定牦牛肉中11种喹诺酮类药物残留

目的建立牦牛肉中11种喹诺酮类农药残留的超高效液相色谱-串联质谱监测分析方法。方法样品经20ml,0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲液(pH=4.0)匀浆后采用2.5 ml酸性乙腈(含0.2%甲酸)沉淀蛋白,上清液经HLB固相萃取柱净化,用Thermo C18小柱(100 mm×2.1 mm,2.2μm),以甲醇-乙腈溶液(40+60)-0.2%甲酸水溶液为流动相、多反应监测(MRM)正离子扫描方式进行质谱检测,内标法定量。结果添加浓度在1.5~10.0μg/kg时,11种喹诺酮药物在牦牛肉中的平均回收率为84.2%~97.7%,RSD为5.2%~12.1%,在2.5~100.0μg/L范围内线性良好,11种喹诺酮药物的相关系数r≥0.995。结论该方法简单、灵敏、特异性强,适用于牦牛肉中喹诺酮类药物多残留的检测。     

高效液相色谱-质谱法测定伏格列波糖片中伏格列波糖含量

目的：建立高效液相色谱-质谱法测定伏格列波糖片中伏格列波糖的含量。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1 mm×150 mm, 3.2 μm)色谱柱,柱温40 ℃,流速为0.25 ml/min,甲醇-水（2∶3）为流动相,流速为0.25 ml/min,质谱检测中采用电喷雾离子源多反应检测扫描（MRM）模式。结果：伏格列波糖浓度在1.5804~2.6340 μg/ml范围内线性关系良好,其中离子对268.2/74.2（r=0.9990）平均回收率为100.2%,相对标准偏差为1.37%（n=6）;离子对268.2/92.2（r=0.9976）平均回收率为99.3%,相对标准偏差为1.78%（n=6）。结论：高效液相色谱-质谱法准确性、重复性均好,可用于伏格列波糖片的质量控制。