参麦注射液对大鼠膈肌细胞L型钙通道的影响

目的：探讨参麦注射液对大鼠膈肌细胞L型钙通道电流(Ica-L)的影响。方法：采用急性酶消化分离法,获取单个大鼠膈肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,记录7只大鼠膈肌细胞Ica-L的峰值及电流-电压关系曲线,并观察不同浓度的参麦注射液对其影响。结果：当维持电位为-80mV,刺激频率为0．5Hz,钳制时间为300ms,步进电压为10mV,去极到+60mV时,10μl/ml的参麦注射液仅使大鼠腑肌细胞的平均内向峰值Ica-L由(-6．9±0．6)pA／pF增加到(-7．5±0．7)pA／pF,增加的幅度为(9．2±2．8)％,用药前后差异无显著性(P>0．05)。50μl/ml、100μl／ml的参麦注射液使大鼠膈肌细胞的平均内向峰值Ica-L由(-6．9±0.6)pA／pF分别增加到(-8．4±0．6)pA／pF和(-9．2±0．6)pA／pF,其增加的幅度分别为(22．4±1．7)％和(34．6±4．6)％,与用药前比较,差异均有显著性(均P<0．05)。给药前后Ica-L的最大激活电位和翻转电位均不变。结论：参麦注射液可激活大鼠膈肌细胞膜的钙通道,增加Ca^2+内流,而使膈肌细胞的收缩力增强,该作用可能是参麦注射液在临床上用于治疗膈肌疲劳的离子通道机制之一。     

冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙离子浓度及L-型钙电流的影响

目的　研究冬虫夏草 (Codycepssinensis,CS)水提液对豚鼠单个心室肌细胞胞浆内钙离子浓度 ([Ca2 ]i)及L 型钙电流 (ICa L)的影响。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测定豚鼠心室肌细胞 [Ca2 ]i以及ICa L的变化。结果　应用 0 1mg/mL (生药浓度 )冬虫夏草水提液 ,在静息状态下对 [Ca2 ]i 无影响 ;对 6 0mmol/LKCl诱导的胞浆 [Ca2 ]i升高有促进作用 ,峰值荧光强度在 12 0s时由12 0 4 3± 2 38 4增加至 185 5 2± 32 1 0 (n =6 ,P <0 0 5 )。膜片钳研究结果表明 ,冬虫夏草水提液可明显促进ICa L,使ICa L从 (- 15 1± 2 3)pA/ pF增加到 (- 19 7± 3 2 ) pA/pF (刺激电压为 10mV ,n =8,P <0 0 1)。 结论　冬虫夏草水提液促进心肌细胞钙内流 ,是该药治疗缓慢型心律失常的机制之一。     

尾加压素Ⅱ对大鼠心功能的影响及电生理机制探讨

目的探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠心功能的影响及可能的电生理机制。方法在Langendorff离体心脏灌注的模型上,观察给予不同浓度的UⅡ后大鼠心功能的变化;利用全细胞膜片钳技术,观察给予不同浓度的UⅡ灌流5min后,大鼠心肌细胞L-型钙电流（ICa-L）密度的变化。结果给予不同浓度的UⅡ（10-9 mol/L～10-6 mol/L）灌注大鼠心脏后,左心室压最大上升速率（＋dp/dtmax）分别降低25.60%、31.48%、34.36%、37.47%,左心室压最大下降速率（-dp/dtmax）分别降低33.61%、46.10%、51.76%、58.32%。运用全细胞膜片钳技术,在单个心肌细胞上给予不同浓度的UⅡ（10-9 mol/L～10-5 mol/L）灌流5min后,ICa-L峰值分别下降为（6.70±1.78）pA/pF、（5.93±2.02）pA/pF、（5.40±2.15）pA/pF、（4.54±2.00）pA/pF、（3.80±1.82）pA/pF,与对照组（8.03±1.20）pA/pF相比,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论 UⅡ呈浓度依赖性的抑制大鼠心功能并减弱心肌细胞L-型钙电流强度;UⅡ可能通过抑制心肌细胞L-型钙电流而发挥其心功能抑制作用。     

三七皂甙单体Rg1对心肌细胞膜钙离子通道的影响

目的 :探讨Rg1对豚鼠心肌细胞膜L 型电压依赖性钙通道的影响。方法 :采用标准全细胞膜片钳技术。结果 :在保持电位 -40mV ,细胞去极化至 4 0mV ,刺激频率 0 .5Hz,时程 1 5 0ms条件下Rg11 0 μmol·L- 1和 30 μmol·L- 1对BayK86 4 4和Nifedipine敏感的钙内向电流均无明显影响 (P >0 .0 5 ,n =5 )。结论 :Rg1对L 型钙通道无抑制作用     

Effect of didrovaltrate on I-calcium current in rabbit ventricular myocytes

Objective

To investigate the effect of didrovaltrate on L-type calcium current (I_ca-L) in rabbit ventricular myocytes.

Methods

We used the whole cell patch clamp recording technique.

Results

Didrovaltrate at concentrations of 30 μg/L and 100 μg/L significantly decreased peak ICa-L (ICa-Lmax) from (6.01 ± 0.48) pA/pF to (3.45±0.27) pA/pF and (2.16 ± 0.19) pA/pF (42.6% and 64.1%, n=8, P<0.01), respectively. Didrovaltrate shifted upwards the current-voltage curves of ICa-L without changing their active, peak and reverse potentials. Didrovaltrate affected the steady-state inactivation of ICa-L. The half activation potential (V_1/2) was significantly shifted from (−26 ± 2) to (−36 ± 3) mV (n=6, P<0.05), with a significant change in the slope factor (k) (from 8.8 ± 0.8 to 11.1 ± 0.9, n=6, P<0.05). Didrovaltrate did not affect the activation curve.

Conclusion

Didrovaltrate blocks ICa-L in a concentration-dependent manner and probably inhibits ICa-L in its inactive state, which may contribute to its cardiovascular effect.     

海葵素对大鼠和豚鼠心室肌细胞钾电流的影响

  目的 研究海葵素 -Q （ AP-Q ）对心室肌细胞钾电流的作用。 方法 采用酶解法制备豚鼠和大鼠单个心室肌单细胞,应用全细胞膜片钳记录方法记录 心室肌细胞钾电流（ <> I _to , <> I _K 和 <> I _K1 ）。 结果 AP-Q 3 ~ 100 nmol L^-1 浓度依赖性地阻滞 <> I _to , EC₅₀ 分别为 10.5 nmol L^-1 ,去极化至 +50 mV 时, AP-Q 10 nmol L^-1 使 <> I _to 从给药前的（ 13.3 ± 3.4 ） pA pF^-1 升至（ 19.46 ± 4.3 ） pA pF^-1 。 AP-Q 0.1~100 nmol L^-1 浓度依赖性地增大 <> I _K 和尾电流 (<>I_{K tail} ) , EC₅₀ 分别为 4.7 和 5.0 nmol L^-1 。 AP-Q 1 pmol L^-1~100 nmol L^-1 浓度依赖性地增大 <> I _K1 , EC₅₀ 值为 0.2 nmol L^-1 。 结论 AP-Q 增大 <> I _K , <> I _to 和 <> I _K1 的作用可能是其缩短 APD ,增大 RP 的原因。     

三氧化二砷对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响

 目的研究三氧化二砷(arsen ic trioxide,As₂O₃)对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨As₂O₃诱导QT间期延长的离子靶点。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术深入研究As₂O₃对豚鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(I_K1)的影响。结果As₂O₃50和100μmol·L^-1分别使APD50从对照组的(273±78)m s增加到(456±35)m s(P<0.01)和(513±41)m s(P<0.01),使APD90从对照组的(286±82)m s增加到(468±36)m s(P<0.01)和(524±40)m s(P<0.01);实验电压为+70 mV时,50和100μmol·L^-1As₂O₃分别使I_K从对照组的(6.7±1.7)pA/pF减少至(4.9±1.6)pA/pF(P<0.05)和(4.5±1.8)pA/pF(P<0.05);在实验电压为-120 mV时,As₂O₃50和100μmol·L^-1分别使IK1从对照组的(-20±5)pA/pF减少至(-13±3)pA/pF(P<0.05)和(-11±2)pA/pF(P<0.05)。结论As₂O₃诱导QT间期延长的离子机制可能与其扰乱了心肌细胞膜离子通道间的平衡,抑制I_K和I_K1,从而导致APD延长有关。     

高二氧化碳可增强家兔心室肌细胞持续性钠电流

目的：研究心室肌细胞持续性钠电流（INap）在不同浓度高二氧化碳时的变化,探讨其在此病理条件下的作用及意义。方法：运用全细胞膜片钳技术记录持续性钠电流,观察其在不同浓度高二氧化碳条件下的变化．结果：INap在5％、10％和20％CO2浓度范围内呈浓度依赖性增大,其电流密度分别为（-0．42416±0．045248）pA／pF,（-0．49266±0．025087）pA／pF和（-0．59906±0．062256）pA／pF（P〈0．01,n=10）;加入2μM TTX后INap密度回复到（-0．39502±0．048958）pA／pF（P〈0．01,n=10）。结论：以上特性提示INap在缺血缺氧和高碳酸血症过程中心律失常的产生及钙超载引起心肌损伤的机制中起重要作用。     

清心安神方含药血清对离体心室肌细胞内向钾电流（Ik1）的影响

目的：观察清心安神方含药血清对豚鼠离体心室肌细胞内向钾电流（Ik1）。方法：分离豚鼠的心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术电流钳模式记录动作电位,观察含40%的空白血清及含药血清的细胞外液灌流对 Ik1的影响。结果：清心安神方含药血清对豚鼠心室肌细胞内向钾电流（Ik1）影响：40%含药血清组对IKl内向电流成分影响为：40%含药血清组从（-30.68±10.39）pA/pF抑制为（-21.03±3.47）pA/pF（n=7 P〈0.05）。结论：清心安神方含药血清对大鼠心室肌细胞IKl内向成份有抑制作用,呈浓度依赖性。     

参附注射液对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的：观察参附注射液对大鼠心室肌细胞L型钙通道的作用。方法：采用急性酶解法获得单个心肌细胞,全细胞膜片钳技术记录钙电流。结果：参附注射液浓度依赖性阻断L型钙通道电流,其IC50为原液2.5%稀释。参附注射液（0.3%,3%）能够上移I-U曲线,但不改变峰电位和反转电位;3%参附注射液对L型钙通道激活曲线失活曲线无明显影响,但可使通道电流从失活中恢复的时间明显延长,时间常数由给药前的82ms增至给药后的139ms。结论：参附注射液对心肌细胞L型钙通道电流有抑制作用。     

超极化激活阳离子电流的电生理特性及其在DRG神经元中的分布

运用全细胞膜片电压钳和电流钳技术研究超极化激活阳离子电流 (ｈｙｐｅｒｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄｃｕｒｒｅｎｔ,Ｉｈ)的电生理学特性及其在背根神经节 (ｄｏｒｓａｌｒｏｏｔｇａｎｇｌｉｏｎ ,ＤＲＧ)细胞上的分布 ,结果发现 :①当膜电位超极化时可以记录到一种内向的电压依赖性电流———Ｉｈ ,电流的反转电位为- 32 .34± 2 .56ｍＶ (ｎ =4) ,半激活电位 (ｐｏｔｅｎｔｉａｌａｔｈａｌｆａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ,Ｖ1 / 2 )为 -1 0 0 .6 (ｎ =8) ;Ｉｈ可特异地被胞外Ｃｓ2 (2ｍＭ)阻断 ,而不受胞外Ｂａ2 (1 .0ｍ…     

中药治疗原发性肺癌的药味频率分析

检索1989—2007年维普数据库,查阅中药治疗中晚期肺癌的临床报道1109篇,筛选出文献67篇,方剂98首,进行用药频率的统计分析,结果显示:中晚期肺癌的治疗中所用中药以益气健脾、养阴润肺、清热解毒、止咳化痰、补肾益精类较为常用。气阴两虚证常用中药依次为:麦冬、黄芪、沙参、五味子、太子参、白术、党参、茯苓、生地。肺阴虚证常用中药依次为:麦冬、沙参、生地、百合。气滞血瘀证的常用中药依次为:枳壳、当归、桃仁、延胡索、赤芍、川芎、丹参。痰湿阻肺证常用中药依次为:半夏、陈皮、茯苓、薏苡仁、杏仁、白芥子、苏子。脾虚痰湿证常用中药依次为:半夏、茯苓、白术、陈皮、党参、薏苡仁、天南星。肺脾气虚证常用中药依次为:白术、半夏、薏苡仁、陈皮、党参、黄芪、茯苓、山药、砂仁。     

Effect of Gnaphalium conoideum HBK on guinea pig airway smooth muscle: role of L-type Ca2+ channels

Plants from the Gnaphalium genus have been used in the Mexican traditional medicine for digestive and respiratory complaints. In the present study, the effect of methanolic extract from Gnaphalium conoideum HBK on the responses to contractile agonists was assessed in guinea pig tracheas, and the possible role of L-type Ca2+ channels was explored in tracheal guinea pig isolated myocytes. Cumulative concentration-response curves to carbachol or histamine, as well as contractile responses to 60 mM KCl were evaluated with or without 30 min preincubation with 20 or 100 microg ml(-1) Gnaphalium conoideum. Likewise, intracellular Ca2+ concentrations were measured by microfluorometric method (fura-2 AM) in isolated tracheal myocytes with or without preincubation with 0.1, 0.31 or 1 microg ml(-1)Gnaphalium conoideum. We found that methanolic extract from Gnaphalium conoideum significantly diminished the contractile responses to histamine, but not to carbachol or KCl. In isolated myocytes, Gnaphalium conoideum significantly reduced the intracellular Ca2+ rise induced by 60 mM KCl. Because histamine contractile responses are largely dependent on extracellular Ca2+, and KCl responses are mainly mediated through L-type Ca2+ channels, our results suggested that methanolic extract from Gnaphalium conoideum might be acting as a partial blocker of these Ca2+ channels.     

福辛普利对缺氧复氧豚鼠心室肌细胞动作电位及其离子通道的影响

 目的观察福辛普利预处理对缺氧复氧豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)、L-型钙通道电流(ICa-L)和ATP敏感钾通道电流(I_K-ATP)的影响,探讨其抗再灌注性心律失常的电生理机制。方法采用全细胞电流钳和膜片钳技术分别记录AP和ICa-L,I_K-ATP。结果缺氧复氧使心室肌细胞AP时程(APD₅₀,APD₉₀)缩短;ICa-L峰值降低,I-V曲线上移,激活曲线右移,半数激活电压(V_1/2)增大,失活曲线左移,失活V_1/2减低;ATP敏感钾通道由正常关闭状态到完全开放。与缺氧复氧组相比,福辛普利预处理使APD₅₀,APD₉₀相对延长;ICa-L峰值增加,I-V曲线上移幅度减小,激活曲线左移,失活曲线右移,激活与失活V_1/2均接近正常,ATP敏感钾通道进一步开放,电流明显增加。结论福辛普利预处理能显著改善缺氧复氧状态下L-钙通道的抑制状态,促进动作电位参数的恢复,减少有效不应期的离散度及折返形成;通过药物预适应机制,进一步开放ATP敏感钾通道,增加ATP敏感钾电流,而发挥抗再灌注心律失常的作用。     

葛根素对大鼠心肌细胞L型钙离子通道的影响

目的 :观察葛根素对大鼠L型钙离子通道的作用。方法 :恒流Langendorff灌流 ,I型胶原酶解分离 ,全细胞膜片钳技术记录离子电流。结果 :2.4 mmol·L^-1葛根素可以抑制单个大鼠心室肌细胞L型钙离子通道电流 ,且成时间依赖性 ;葛根素可以促进L型钙通道电流 电压 (I-V)曲线的上移。结论 :葛根素可以抑制大鼠心室肌细胞的L型钙离子通道电流 ,并提示葛根素的抗心肌缺血和抗心律失常作用可能与抑制L型钙离子通道电流有关。     

抗疲劳1号对游泳小鼠运动能力的影响

目的观察抗疲劳1号的抗疲劳效果,探讨其生化机制。方法抗疲劳1号由人参、麦冬、五味子、枸杞、远志、黄芪等组成,按低、中、高剂量灌胃小鼠2周,以负重游泳的方法制备疲劳模型,观察力竭性游泳时间及血糖、乳酸、尿素氮和肝糖原变化。结果与游泳对照组相比,抗疲劳1号高剂量组动物力竭性游泳时间显著延长(P<0.05),中、高剂量组血糖((9.98±1.44)mmol/L(、10.04±1.60)mmol/L)明显高于游泳对照组((8.44±1.33)mmol/L),肝糖原水平有所回升,血尿素氮水平下降,血乳酸水平略有升高。结论抗疲劳1号能有效维持游泳动物血糖、肝糖原水平,抑制蛋白质分解,从而发挥抗疲劳作用。     

安心汤治疗过早搏动的临床研究

在“心主神志”与“心主血脉”之间的协调关系理论指导下 ,用安心汤 (生地黄、丹皮、知母、黄柏、玉竹、麦冬、黄连、竹叶、枣仁等 )治疗经心电图 (EKG)或 2 4小时遥测动态心电图(DCG)明确的过早搏动患者 1 72例 ,并与炙甘草汤治疗 30例对比观察 ,结果有效率达 88 37% ,其疗效优于对照组 (P <0 0 1 ) ,证实安心汤有较好地纠正过早搏动的疗效。     

Hypericin activates L-type Ca2+ channels in cardiac myocytes

The effects and the mode of action of hypericin (1) were studied, in the dark, on the action potential (AP) and the L-type Ca2+ channel of frog atrial heart muscle, using intracellular microelectrode and patch-clamp techniques, respectively. In the presence of Ca2+ in Ringer solution, hypericin (1 to 4 microM) did not markedly modify the AP. Total replacement of Ca2+ by Sr2+ in the solution (Ringer Sr2+) revealed that hypericin (4 microM) prolonged the AP duration (APD). Hypericin dose-dependently increased the magnitude of the Sr2+current, which develops through L-type Ca2+ channels in the Ringer solution containing tetrodotoxin (0.7 microM) and tetraethylammonium (10 mM), but did not modify the kinetics of activation and inactivation. This revealed that hypericin increased L-type Ca2+ channel conductance, which accounted for the APD lengthening. The hypericin-induced APD lengthening recorded in the Ringer Sr2+ was not prevented by (i) a blockade of alpha- and beta-adrenoceptors by yohimbine (1 microM), urapidil (1 microM), and propanolol (50 microM), respectively, and (ii) PKC blockade by staurosporine (1 microM). The hypericin-induced APD lengthening recorded in the Ringer Sr2+ was prevented by blocking soluble guanylate cyclase (sGC) activity by 1H-[1,2,4]-oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one (13 microM), which mimicked the effects of hypericin. Hypericin decreased the cellular cGMP level by 69% in atrial myocytes. The compound also decreased the cellular cGMP level by inhibiting sGC, thus cancelling the nucleotide inhibitory effect on the cardiac L-type Ca2+ channel.     

多柔比星对大鼠心肌Na+-K+泵活性及α亚基的影响

 目的 探讨心衰后大鼠心肌的Na+-K+泵活性及其α亚基的变化。方法 建立大鼠多柔比星（adriamycin,ADM心衰模型。以酶解法急性分离大鼠左室心肌细胞,以膜片钳技术记录Na+-K+泵电流,并以Western blot技术检测Na+-K+泵α亚基的表达。结果 ADM致大鼠心衰后Na+-K+泵电流密度显著下降,由（0.507 0 ±0.062 97 pA/pF降到（0.210 6±0.048 90 pA/pF,且拟合曲线显示主要为高亲和力泵发生了改变,其K值由6.74×10-8 mol·L-1升至2.97×10-7 mol·L-1;Western blot检测结果也进一步表明低亲和力α1亚基蛋白表达无明显改变,而高亲和力α2亚基蛋白表达则明显下降。结论 心衰可通过减少Na+-K+泵高亲和力α2亚基表达而降低大鼠心肌Na+-K+泵活性。     

Effects of Total Flavones from Acanthopanax senticosus on L‐type Calcium Channels,Calcium Transient and Contractility in Rat Ventricular Myocytes

Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms (AS), a traditional herbal medicine, has been widely used to treat ischemic heart disease. However, the underlying cellular mechanisms of its benefits to cardiac function remain unclear. The present study examined the effects of total flavones from AS (TFAS) on L‐type Ca²⁺ channel currents (I_Ca‐L) using the whole cell patch‐clamp technique and on intracellular calcium ([Ca²⁺]_i) handling and cell contractility in rat ventricular myocytes with the aid of a video‐based edge‐detection system. Exposure to TFAS resulted in a concentration‐ and voltage‐dependent blockade of I_Ca‐L, with the half‐maximal inhibitory concentration (IC₅₀) of 283.12 µg/mL and the maximal inhibitory effect of 36.49 ± 1.95%. Moreover, TFAS not only increased the maximum current in the current–voltage relationship but also shifted the activation and inactivation curves of I_Ca‐L toward the hyperpolarizing direction. Meanwhile, TFAS significantly reduced amplitudes of myocyte shortening and [Ca²⁺]_i with an increase in the time to 10% of the peak (Tp) and a decrease in the time to 10% of the baseline (Tr). Thus, the cardioprotective effects of TFAS may be attributed mainly to the attenuation of [Ca²⁺]_i through the direct inhibition of I_Ca‐L in rat ventricular myocytes and consequent negative effect on myocardial contractility. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.