核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区变异的研究

目的分析核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药相关变异位点、变异位点组合模式、HBV DNA水平和HBeAg等特征,为临床应用核苷(酸)类似物抗乙肝病毒治疗提供参考。方法纳入研究的141例慢性乙型肝炎患者,使用NAs治疗的107例为治疗组,未使用药物抗病毒治疗的34例为对照组。采用线性探针反向杂交法(PCRRLP)检测HBV逆转录酶区耐药相关变异位点,实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒DNA水平,酶联免疫吸附试验检测乙肝免疫标记物,并对耐药相关变异的特点和研究病例的临床资料进行统计学分析。结果核苷(酸)类似物治疗效果不佳组耐药相关变异检出率(82.5%)明显高于未治疗的对照组(5.9%)和抗病毒治疗有效组(有效组10例未检出耐药相关变异)(P0.01)。97例核苷(酸)类似物抗病毒效果不佳的病例中80例检出140个耐药相关变异位点,包括rtM204I 45个、rtM204V 32个、rtA181V 28个、rtL180M 25个、rtN236T 10个;变异位点组合模式主要有:rtL180M+rtM204I、rtM204V、rtM204I+rtM204V、rtA181V+rtM204V、rtM204I、rtA181V+rtN236T等;51个对NAs应答不佳病例耐药变异检出率70.59%,46个病毒学突破病例耐药变异检出率95.65%,差异明显(P0.01)。NAs单药治疗病例早于多药治疗病例检出耐药相关位点(P0.01);NAs治疗时间越长,耐药变异检出率越高(P0.01);病例HBV-DNA水平等级越高,耐药变异检出率也越高(P0.01)。结论⑴NAs治疗慢性乙型肝炎可导致HBV逆转录酶区变异,NAs抗乙型肝炎病毒效果不佳与HBV逆转录酶区变异密切相关;⑵不同NAs药物导致慢性乙肝患者HBV逆转录酶区变异位点、变异模式特点不同;⑶NAs治疗慢性乙型肝炎的用药种类与方式、治疗时长,患者HBV-DNA水平等对HBV逆转录酶区发生耐药变异均可能产生重要影响。提示在NAs治疗前、治疗过程合适时间点检测NAs耐药相关变异位点和HBV DNA水平,可为临床慢性乙型肝炎的抗病毒治疗提供重要参考。     

桂林地区乙肝患者HBV核苷类似物耐药位点分析

检测桂林地区乙型肝炎患者体内HBV逆转录酶基因的耐药突变情况,为制订合理的治疗方案提供依据.方法:提取乙肝患者血清中HBV DNA,巢式PCR扩增其逆转录酶基因后测序,Vector NTI Suite 8.0及chromaslite201分析测序结果,Mega4.0进行基因分型.结果:171例患者测序结果中18例发现有基因耐药突变,其中rtA181位点突变7例,占突变总数的38.9％.多药耐药基因突变12例,点突变总数的66.7％.B基因型患者耐药突变率为10.4％,C基因型患者耐药突变率为10.8％,两基因型分布比率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:桂林乙肝患者HBV逆转录酶基因耐药突变组合较为复杂,多药耐药基因突变比率较高.耐药突变的HBV基因型分布比率在所检测患者中无明显差异.     

慢性乙型肝炎核苷类似物抗病毒治疗应答的影响因素

我国乙型肝炎病毒感染率高,慢性乙型肝炎的治疗目标是最大限度地长期抑制乙型肝炎病毒,延缓和减少疾病进展及肝脏失代偿、肝硬化、肝细胞癌等的发生,从而改善生活质量和延长存活时间。随着干扰素及核苷类似物两大类抗病毒治疗的进展,发现不同的患者在治疗疗效上有很大差异,研究认为,核苷类似物抗乙型肝炎病毒治疗的疗效主要受药物、病毒及宿主3个方面因素的影响。     

拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者HBVP区基因突变模式与临床特征

目的分析慢性乙型肝炎患者在拉米夫定（LAM）治疗过程中出现耐药后,HBVP区基因突变模式及临床特征。方法对2009年4月～2009年12月在石家庄市第五医院就诊的116例临床诊断为LAM耐药慢性乙型肝炎患者进行HBVP区基因序列测定。结果116例临床诊断为LAM耐药患者血清HBVDNA水平为（5．34±1．21）log10拷贝／mL,ALT为（135±89）U／L,60．7％（70／116）的患者出现ALT升高。116例患者均出现基因耐药突变,共有7种突变模式,94．8％（110／116）发生YMDD基序突变,其中单纯YMDD突变占22．4％（26／116）,YMDD联合rtLl80M突变占72．4％（84／116）,5．2％（6／116）发生单纯rtLl80M突变。rtM204V联合rtLl80M突变的发生率为87．5％（56／64）,rtM204I联合rtLl80M突变的发生率为69．4％（50／72）,差异有显著统计学意义（P=0．04）。LAM耐药时,4种突变类型即rtM204I、rtLl80M＋rtM204V、rtLl80M＋rtM2041和rtLl80M＋r[IⅥ204V／I患者血清HBeAg、HBVDNA、ALT水平之间差异无统计学意义,P值分别为0．63,O．72,0．82。结论YMDD基序突变是LAM耐药后HBVP区基因突变的主要模式,rtM204V多以联合rtLl80M突变的形式存在,LAM耐药后患者肝组织损伤程度以及病毒复制水平可能与HBVP区突变类型无关。     

HBV核苷(酸)类似物耐药突变及其检测技术的临床应用

目前,可供临床应用的抗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogs,NAs]包括拉米夫定(lamivudine,LAM)、替比夫定(telbivudine,LdT)、阿德福韦酯(adefovir,ADV)、恩替卡韦(entecavir,ETV)及替诺福韦酯(tenofovir,TDF),NAs作为病毒逆转录酶抑制剂,可抑制HBV DNA复制扩增.由于HBV属于高基因变异率病毒,NAs长期治疗后,选择压力下使耐药病毒株成为优势株,影响治疗效果.因此,为防治CHB抗病毒治疗中耐药的发生,弄清楚其耐药机制及变异的监测及诊断十分必要.本文总结了近年来发现的常见突变位点,并比较了几种临床应用的突变监控及检测技术,对耐药突变进行早期、快速检测具有重要临床意义,使慢性HBV感染的监测达到最优化.     

慢性乙型肝炎核苷类似物抗病毒治疗的中医护理

目的:通过对慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物抗病毒治疗中的患者实施中医护理干预,观察临床疗效。方法:对86例患者采取中医情志、艾灸、按摩推拿、食疗等中医护理措施。结果:83例患者都不同程度达到临床疗效,并有着较好的生活质量,其中4例HbsAg阴转。结论:慢性乙型肝炎患者在实施核苷(酸)类似物抗病毒治疗中恰当的护理措施能提升临床疗效。     

核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎73例临床护理

目的:探讨核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎的护理方法。方法:对73例核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎患者的护理资料进行回顾总结。结果:除1例患者自愿放弃核苷(酸)类似物治疗外,其余72例患者均进行正规疗程治疗,用药依从性良好。结论:对慢性乙肝患者加强心理护理、健康指导、用药护理、定期随访、复查可有助于提高其治疗疗效。     

208例经核苷酸类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV耐药变异分析

核苷（酸）类似物（ nucleos （t） ide analogue,NA）类药物是目前临床治疗慢性乙型肝炎（chronic hepatitisB,CHB）的重要药物。该类药物凭借其强大的病毒复制抑制能力、服用简便和副作用小等优势得到广泛应用,在控制疾病向终末期肝病进展方面发挥积极有效的作用。然而,随着该类药物的长期使用,乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）发生耐药变异的危险性也随之增加,目前认为发生耐药变异是引起NAs治疗失败的最重要的影响因素之一。     

强化教育对慢性乙型肝炎患者口服核苷(酸)类似物治疗依从性的影响

目的研究强化教育对提高慢性乙型肝炎患者口服核苷(酸)类似物抗病毒治疗依从性的作用。方法将198例服用核苷(酸)类似物抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者随机分为强化教育组(100例)和对照组(98例)。第一次处方药物时,对所有患者均进行关于口服抗病毒治疗依从性的教育,在上述基础上,对强化教育组患者每2周左右通过电话、手机短信或电子邮件等方式进行口服抗病毒治疗依从性的强化教育。在4、12、24和48周时,对两组患者的治疗依从性进行比较。结果在4、12、24和48周内,强化教育组患者的自行停药率分别为0、1.0%、3.0%以及3.0%,连续服药(无漏服)率分别为98.0%、97.0%、97.0%和96.0%;相应的时间点内,对照组患者的自行停药率分别为1.0%、3.1%、7.1%和9.2%,连续服药率分别为96.9%、94.9%、91.8%和88.8%,强化教育组患者24、48周时的治疗依从性优于对照组患者。结论对口服核苷(酸)类似物抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者进行强化教育,有助于提高他们的治疗依从性。     

治疗慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物的药物选择

近年来慢性乙型肝炎的抗病毒治疗进展迅速．尤其是核苷(酸)类似物的研究开发和临床应用使治疗慢性乙型肝炎进入一个新时代。随着新药不断出现,临床医师面临的新课题之一就是在对慢性乙型肝炎抗病毒治疗中如何在诸多核苷(酸)类似物中选择更为适合的药物。     

乙型肝炎病毒核苷类似物交叉耐药株RT区变异分析

目的研究多种核苷类似物(NAs)序贯治疗产生交叉耐药的患者体内乙型肝炎病毒(HBV)RT区变异位点和变异类型。方法筛选6例临床上对两种或两种以上NAs产生交叉耐药的患者,并从患者血清中获取HBV交叉耐药株DNA,进行全基因克隆和测序,从而分析其变异特点和规律。结果经测序鉴定,6位患者体内HBV基因型均为C型,产生交叉耐药的相关性变异以rtM204V/I(YMDD)变异为主(50%),部分YMDD变异株伴有rtL180M变异(16.7%)、其他伴随变异包括rtV173L(16.7%),rtL80I(16.7%)。此外,还发现RT区次要变异伴随位点rtL269I(40%)、rtQ333K(56.7%)、rtH337N(56.7%)。结论RT区次要变异伴随位点rtL269I、rtQ333K、rtH337N的出现可能增强了HBV YMDD变异株在体内的复制能力,并对交叉耐药准种所占比例起到了放大的效果,从而导致本研究中6例患者出现对拉米夫定、恩替卡韦、阿德福韦和替比夫定产生多重耐药。     

Efficacy of interferon alfa and lamivudine combination therapy versus interferon alfa monotherapy in Turkish patients with chronic hepatitis B: A double-blind, randomized, comparative study

Background: Interferon (IFN) alfa and lamivudine are the most effective agents used in the treatment of chronic hepatitis B virus (HBV). Monotherapy with IFN alfa or lamivudine provides significant benefit, but the combination of these drugs is still under investigation. It has been suggested that combination therapy has some advantages over monotherapy.Objective: The purpose of this study was to evaluate the efficacy of concurrent combination therapy with lamivudine and IFN alfa versus IFN alfa monotherapy in previously untreated patients with chronic HBV.Method: Patients were randomly assigned to 6 months' therapy with IFN alfa 9 million units 3 times weekly alone or in combination with 100 mg/d oral lamivudine. Alanine aminotransferase (ALT) measurements and viral load assessments (HBV DNA level as measured by polymerase chain reaction) were performed at baseline and months 6 and 12. Levels of hepatitis B e antigen (HBeAg) and anti-HBeAg were determined at baseline and at the end of treatment (month 12). Knodell histologic activity index score was determined at baseline.Results: Fifty patients were enrolled in each group. ALT normalization rates in the monotherapy and combination therapy groups, respectively, were 56% and 86% (P < 0.05 between groups) at month 6, and 48% and 64% at month 12 (P < 0.05 between groups). In the monotherapy and combination groups, respectively, there were 21 (42%) and 24 (48%) complete responders (P < 0.05); 5 (10%) and 10 (20%) partial responders (P < 0.05); and 24 (48%) and 16 (32%) nonresponders (P < 0.05). HBeAg seroconversion rates were 22% in the monotherapy group and 30% in the combination therapy group at the end of 12 months (P = NS between groups).Conclusion: Concurrent combination therapy with IFN alfa and lamivudine has a more beneficial effect on biochemical parameters (ie, ALT levels) than on viral parameters (ie, HBV DNA, seroconversion to anti-HBeAg) and this effect is more pronounced after 1 year of treatment than after 6 months. Further studies are needed to determine the long-term effects of combination therapy with lamivudine and IFN alfa.     

拉米夫定耐药的HBV反转录酶区基因突变模式分析

目的分析慢性乙型肝炎（cHB）患者在拉米夫定（LAM）治疗过程中出现耐药的HBV反转录酶区基因的突变模式及临床特征,指导临床用药。方法采用巢式聚合酶链反应（PCR）方法对2009年1月至2011年12月广州市第八人民医院肝病门诊或住院治疗的LAM初治发生耐药的105例CHB患者血清HBV聚合酶基因反转录酶区进行扩增,对PCR产物进行测序,分析LAM耐药时HBV聚合酶基因的不同突变模式及患者临床特征。结果105例患者诊断为LAM耐药,98例患者检测到LAM相关的HBV聚合酶基因突变,总体突变模式共8种,其中95例患者存在YMDD基因突变,占96．9％。rtM204I单点突变患者42例,占43．9％;rtM204V单点突变患者3例,占3．1％,二者比较差异有统计学意义（χ2=21．899,P〈0．05）,提示rtM204位点（YMDD）点突变模式以rtM204I点突变为主。rtM204V以联合rtL180M组合突变的模式为主。LAM耐药时,3种主要突变模式rtM204I、rtL180M＋rtM2041、rtL180M＋rtM204V患者的年龄、性别比例、血清HBVDNA栽量、ALT水平、肝硬化发生率及HBeAg阳性率比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。HBV聚合酶区基因突变患者与伴生化学突破患者的HBVDNA载量明显高于HBV—P-RT区基因未突变和未发生生化学突破的患者,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论YMDD基因突变是LAM耐药后HBV聚合酶基因突变的主要模式,且突变患者的HBVDNA载量明显增高,检查耐药患者基因序列,可指导临床合理用药。     

慢性乙型肝炎前C区基因突变危险因素相关性分析及与中医证型的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区变异与慢性乙型肝炎患者中医证型分布的关系及临床意义.方法:随机抽取1999年2月-2002年12月住广州中山大学附属第三医院,且检测HBV前C区1896位变异性的140例慢性乙型肝炎患者按前C区变异性分为阳性组和阴性组,每组各70例.通过检测HBV标记物、T淋巴细胞亚群、肝细胞纤维化指标及HBV-DNA定量等,对两组不同中医证型进行比较分析,筛选HBV前C区1896位变异的预测因子.结果:前C区变异阳性组与阴性组各证型分布有显著性差异(P均<0.05),Logistic回归分析显示,CD 4、Ⅳ型胶原(Ⅳ.C)、DNA的相对危险度均大于1,其中CD 4为负相关,Ⅳ.C、DNA为正相关.结论:HBV-DNA定量测定、CD 4、Ⅳ.C数值可看作发生HBV前C区1896位点变异的危险因子;辨证为湿热血瘀兼正虚的慢性乙型肝炎患者出现前C区变异的几率可能较高.     

核苷类药物治疗慢性乙型肝炎患者知识需求的调查

目的 提高使用核苷类药物治疗慢性乙型肝炎患者用药依从性,从而达到维持病情稳定.方法 对2010年2-6月我科住院使用核苷类药物治疗的106例慢性乙型肝炎患者进行医疗用药指导需求、心理指导及宣教方式的问卷调查.结果 106例患者中,73%的患者对用药相关知识的需求高,27%的患者对用药知识需求较高,92.4%的患者选择专题讲座的宜教方式.结论 使用核苷类药物治疗慢性乙型肝炎患者对用药相关知识的需求都很强烈,护理人员可根据患者的需求开展有针对性的、形式多样的健康用药指导,使健康用药指导的内容和形式真正落实到实处,有利于慢性乙型肝炎患者提高使用核苷类药物治疗的依从性.     

310例接受拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者HBV RT区全长测序及结果分析

目的对接受拉米夫定(LAM)治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV P基因RT区全长测序并分析结果。方法选择接受拉米夫定治疗6个月以上的慢性乙型肝炎患者310例,收集LAM治疗后患者的血清,采用直接PCR产物基因测序法对HBV RT区碱基进行测序,后对测序数据用Chromas 223软件进行分析,找出HBV P基因RT区基因的变异位点和相应的氨基酸,进一步分析HBV耐药突变模式。结果 1)310例患者出现位点变异的有135例(43.5%),变异位点24个;2)基础变异位点和频率:rtM204 v/I 111例(82.20%),rtS213T 8例(5.92%),rtC256S 4例(2.96%),3位点差异有统计学意义(P0.05);3)变异模式和频率:rtM204I 39例(28.89%),rtM204V+rtL108M 25例(18.51%),rtM204V+rt204I+rtL180M 11例(8.15%),rtM204I+rtL180M 6例(4.44%),rtM204V+rtL180M+rtV173L/M 5例(3.70%),rtS213T 5例(3.70%),rtM204V+rtL180M+rtV207M/L/I 4例(2.96%),rtM204V 4例(2.96%)等;4)rtM204V还可伴随rtT184 I/S/M、rtA181T、rtC256S、rtS213T、rtL229V等位点变异。结论拉米夫定长期治疗可引起主要耐药位点rtM204 v/I突变,并常有rtL180M、rtV173L、rtS213T、rtC256S、rtV207M/L等一系列补偿性耐药位点伴随;单位点突变除rtM204I一种外,还存在rtS213T、rtM204V等突变模式;联合突变模式多数包含rtM204位点,但也存在rtS213T+rtL187I、rtC256S+rtF221Y等突变模式。     

乙型肝炎基因分型同耐药位点突变的关系研究

目的：探讨耐药位点突变与乙型肝炎病毒(HBV)基因分型及其他临床信息的相关性。方法以358例慢性乙型肝炎(CHB)患者为研究对象,采用聚合酶链反应(PCR)-反向点杂交法检测耐药位点及基因分型。收集患者血清 HBV DNA 载量、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,以及乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg)、性别、年龄、核苷(酸)类似物用药时间等临床资料。结果所有标本均成功扩增阳性条带。HBV 基因型以 B 型(267例)为主,其次为 C 型(81例)、D 型(10例)。使用核苷(酸)类似物的311患者中完全野生型269例,未用药的47例患者均未见耐药突变。耐药位点突变以204及180/204位点突变为主。耐药突变与患者性别、年龄、血清 HBV DNA 载量、病毒基因型、ALT 水平及 HBeAg 无明显相关性(P >0.05);用药时间越长,耐药突变率越大(P <0.05);180位点突变与204位点突变有一定相关性(P <0.05)。结论PCR-反向点杂交技术可有效检测 HBV 基因型及突变位点,可有效指导临床用药。     

核苷类似物抗病毒治疗失败的慢性乙型肝炎患者基因型耐药分析

目的了解慢性乙型肝炎患者服用核苷类似物抗病毒治疗失败后,病毒基因型耐药变异情况,为选择新抗病毒治疗方案提供参考依据。方法分别选取服用拉米夫定和阿德福韦酯抗病毒治疗失败的患者作为研究对象,用巢式聚合酶链反应（ntPCR）方法扩增目的基因片段,并对其进行序列测定及分析,检测与病毒耐药相关的突变点位。结果 20例患者出现与耐药相关的突变位点。11例拉米夫定治疗患者,发生rtM204V/I突变10例（90.9%）,出现rtL180M/I/L位点突变5例（45.5%）,出现rtA181V位点突变1例（9.0%）,出现M204I单位点耐药突变5例（45.5%）,出现包含180和204位点的多个位点联合突变6例（54.5%）。9例阿德福韦酯治疗患者出现rtA181T或rtN236T单位点突变各4例（44.4%）,出现rtA181T＋rtN236T联合突变1例（11.1%）。结论乙型肝炎病毒（HBV）耐药变异株的出现是抗病毒失败的主要原因,目前临床上服用拉米夫定和阿德福韦酯抗病毒治疗的患者较多,拉米夫定治疗的患者也可以出现rtA181V位点突变,该位点突变出现可以发生二者的交叉耐药。防止多药耐药的发生具有重要的意义,建议抗病毒治疗失败后参考基因型耐药检测结果更换药物。     

慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒基因分型的临床意义

目的：探讨不同乙型肝炎病毒（HBV）基因型与相关生化指标和HBV‐DNA定量水平的相关性。方法采用DNA芯片技术,对216例HBV感染患者进行HBV基因型分型检测,同时检测血清HBV‐DNA和肝功能指标。结果216例患者中,HBV‐B型138例（占63．89％,138/216）,HBV‐C型68例（占31．48％,68/216）,HBV‐B＋HBV‐C型混合感染8例（占3．70％,8/216）,HBV‐D型2例（占0．93％,2/216）。各基因型HBV感染者之间比较,HBV‐DNA水平和肝功能指标差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论该院患者HBV感染以HBV‐B型为主,HBV‐C型次之。