112. 胃癌患者CD＋4／CD＋8比值与C3bR的测定及相关性研究

目的：胃癌是人体常见的恶性肿瘤,常伴有免疫功能障碍。以往人们一直认为只有白细胞才具有免疫功能,而近年来已证明红细胞在抗肿瘤免疫中占有重要的地位。为了了解胃癌患者红、白细胞免疫功能的关系,本文对41例胃癌患者及30例正常人的T细胞亚群(TC)、NK细胞杀伤活性和红细胞C3b受体（RBC-C3bR）进行测定,并对TC亚群的CD+4/CD+8比值与RBC-C3bR间的相互关系进行了统计学相关分析。方法：RBC-C3bR采用郭峰等报道的测定方法;NK细胞活性测定采用改良的MTT试验方法;外周血TC亚群检测采用冻干抗体致敏的红细胞花环法。结果：①胃癌患者TC亚群、NK细胞活性和RBC-C3bR的测定结果: ②胃癌患者CD4＋／CD+8比值与RBC-C3bR阳性率之间的相关性分析：经统计学相关性分析,CD4＋／CD＋8比值与RBC-C3bR阳性率呈直线正相关关系,n=41;r=0.415;P＜0．01。结论：T细胞的数量和功能以及它们之间的相互作用在机体免疫监视系统中有重要地位。了解TC亚群的变化,检测T细胞CD+4/CD+比值是很有意义的,是估计患者机体免疫状态的一种较准确的方法。红细胞免疫是近年来逐渐为人们所重视,红细胞像白细胞一样具有重要的免疫功能。本实验结果显示,胃癌患者TC亚群中CD+3、CD+4、CD+4/CD+8、NK活性均低于正常组,RBC-C3bR阳性率也明显低于正常组(P＜0．01）。胃癌患者RBC-C3bR阳性率与CD+4/CD+8比值间呈明显正相关(P＜0．01）。表明红细胞免疫功能与TC间关系密切、相互影响。通过检测和观察胃癌患者的TC亚群与红细胞免疫功能的变化,可更加全面评估患者的免疫状态,具有一定的临床应用价值。     

贲门癌、胃癌患者红细胞C3b受体与CD4+/CD8+比值、NK细胞活性的相关性研究

背景与目的:研究贲门癌、胃癌患者红细胞C3b受体(RBC-C3bR)与CD4 /CD8 比值、NK细胞活性的相关性。材料与方法:利用酵母菌花环试验、克隆抗体致敏花环法和MTT法对53例贲门癌、51例胃癌患者及30例正常人外周血RBC-C3bR阳性率、T细胞CD3 、CD4 百分率、CD4 /CD8 比值及自然杀伤细胞(NK)活性进行测定。结果:贲门癌组、胃癌组RBC-C3bR阳性率、CD3 、CD4 细胞百分率、CD4 /CD8 比值和NK细胞杀伤活性均比正常对照组低,差异具有统计学意义(F=28.68,P<0.01),而贲门癌与胃癌组间比较,差异无统计学意义(t=0.081～0.871,P均>0.05);经统计学相关性分析显示,贲门癌、胃癌组RBC-C3bR阳性率与CD4 /CD8 比值、NK细胞杀伤活性间呈正相关(贲门癌RBC-C3bR阳性率与CD4 /CD8 比值:r=0.431,P<0.01;RBC-C3bR阳性率与NK细胞活性:r=0.347,P<0.05;胃癌RBC-C3bR阳性率与CD4 /CD8 比值:r=0.429,P<0.01;RBC-C3bR阳性率与NK细胞活性:r=0.528,P<0.01)。结论:贲门癌、胃癌患者红细胞免疫与白细胞免疫功能均受到抑制。     

原发性肝细胞癌微环境中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞分布与局部免疫的关系

目的通过检测原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）局部肝癌组织和癌旁组织中T细胞亚群的分布情况,探讨在肝癌发生、发展过程中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与局部免疫状态的关系。方法54例肝癌组织和癌旁组织及10例正常肝组织用免疫组织化学S—P法标记CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Tr细胞）,并对组织中CD4^＋CD25^＋Tr细胞与CD4^＋T、CD8^＋T及CD4^＋T／CD8^＋T值进行相关性分析。结果54例肝癌、癌旁组织中CD4^＋CD25^＋Tr细胞单个高倍视野平均数分别为5．6208±2．7235和3．8554±1．6018（P=0．001）;肝癌中CD4^＋CD25^＋Tr细胞数目与肿瘤大小、有无子灶有关,组间差异有显著性（P〈0．01）;肝癌中CD4^＋CD25^＋Tr数量与CD4^＋T细胞的数量以及CD4^＋T／CD8^＋T值呈显著负相关（r=-0．459,P=0．015;r=-0．563,P=0．011）,而与浸润性CD8^＋T细胞的数量分布无关（r=-0．485,P=0．072）。结论在肝癌微环境中CD4^＋T淋巴细胞表达降低,CD4^＋CD25^＋Tr细胞表达增高,后者可能通过抑制CD4^＋T淋巴细胞的增殖来抑制肝癌局部免疫,从而促进肿瘤的进展以及侵袭或转移。     

肿瘤患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞流式细胞术分析

目的：分析比较肿瘤患者和健康人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特点,为肿瘤免疫学研究及治疗探索新方法。方法：收集并分离30例肿瘤患者和32例健康人的外周血单个核细胞（PBMCs）,用荧光标记的抗人CD4及抗人CD25单抗标记肿瘤患者和健康人PBMCs细胞,FCM检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞,分析CD4^＋CD25^＋Treg细胞在肿瘤患者和健康人中的差别。结果：肿瘤患者的CD4^＋CD25^＋Treg细胞百分数明显高于健康人（年龄〈55者62．4vs40．4;年龄≥55者53．1vs31．0,P〈0．05）。结论：肿瘤患者的CD4^＋CD25^＋Treg细胞高于健康对照,为肿瘤免疫治疗提供新策略,通过删除CD4^＋CD25^＋Treg细胞,有可能增强抗瘤免疫反应。     

肝癌者红细胞和NK细胞的免疫活性研究

目的对肝癌患者的红、白细胞免疫粘附功能与T细胞亚群变化和NK细胞活性的关系进行观察.方法对53例肝癌患者在入院与病情恶化时,采用患者外周静脉血进行红、白细胞免疫粘附功能、T细胞亚群和NK细胞活性的对比测定.结果肝癌患者的红细胞C3b受体花环率、白细胞-补体受体花环率、CD3、CD4、CD8和CD4/CD8、及NK细胞的活性、第一次和第二次测定均低于对照组,P值分别为(P＜0.05)和(P＜0.01).同时还发现NK细胞的活性与红、白细胞的免疫功能密切相关.结论肝癌患者的红、白细胞免疫功能、T细胞亚群和NK细胞的活性低下,并随着病情恶化其降低显著扩大;NK细胞活性与红、白细胞的免疫功能密切相关.     

胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞表型CD8^＋、CD28^＋的变化及其临床意义

目的探讨胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞(PBL)表型CD8+、CD28+的变化及其临床意义.方法应用CD8+、CD28+单克隆抗体,采用流式细胞术,对20例胃癌患者于术前及18例患者于术后进行PBL表型CD8+、CD28+的检测.结果①肿瘤组患者淋巴细胞CD8+的表达显著高于对照组,有非常显著性差异(P＜0.01);而CD28+、CD8+/CD28+的表达则低于对照组,有非常显著性差异(P＜0.01).②进展期胃癌组患者CD8+/CD28+的表达明显低于早期胃癌组患者,有显著性差异(P＜0.05);淋巴结转移组患者CD28+、CD8+CD28+的表达低于无淋巴结转移组患者,有显著性差异(P＜0.05);侵及浆膜层组患者CD/8+的表达高于侵及粘膜、粘膜下层组患者,而CD28+的表达则低于侵及粘膜及粘膜下层组患者,有显著性差异(P＜0.05).③根治性及姑息性切除肿瘤后,CD8+的表达明显降低(P＜0.05),CD28+、CD8+/CD28+表达显著升高(P＜0.01).结论胃癌患者淋巴细胞表型CD8+、CD28+的表达与肿瘤的生物学行为密切相关,切除肿瘤有助于改善患者细胞免疫功能.     

肝脏患者外周血CD4＋、CD8＋和CD16＋56＋细胞亚群变化

目的：观察肝病患者PBMC中CD3 、CD4 、CD8 、CDl6 56 细胞亚群变化研究其在肝脏损伤中的意义。方法：流式细胞仪检测肝病患者PBMC中CD3 、CD4 、CD8 、CDl6 56广卜细胞亚群变化。结果：肝病患者除重型肝炎CD3 下降外，其他急慢性肝病组CD3 稍有上升。重型肝炎、慢乙肝活动期和急性肝炎CD4 下降而慢乙肝静止期、失代偿期肝硬化、恶性肿瘤CD4 下降不明显，而代偿期肝硬化CD4 反而上升。除肝硬化CD8 下降外，其他肝病组则上升。肝病CD4 ／CD8 变化与CD4 相类似。除重型肝炎和慢乙肝CDl6 56 变化不明显，失代偿期肝硬化、急性肝炎、代偿期肝硬化和恶性肿瘤CDl6广卜56 下降。相关分析发现，肝病患者CDl6 56 与CD3 和CD4 ／CD8 负相关，仅CD8 与急、慢性肝损伤指标有关。结论：PBMC中CD3 、CD4 、CD8 、CDl6 56 细胞亚群的检测在肝病的诊治应用意义有限，不宜仅单凭CD4 、CDl6 56 和CD4 ／CD8 上升与否和CD8 下降与否来评判疾病和治疗效果，进一步结合其他亚群标志物可能更有利于疾病机制研制了解和疾病的诊断及治疗效果的评定。     

冷冻消融对晚期前列腺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节T细胞影响的临床观察

目的:分析探讨氢氦冷冻治疗对前列腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响及临床意义.方法:前列腺癌患者40例,分别于氩氦冷冻治疗术前、术后3个月、6个月采取外周血.放射免疫法检测外周血PSA,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、NK细胞、Treg细胞)变化情况.结果:前列腺癌患者冷冻后外周血PSA较冷冻前明显下降(P<0.01).与治疗前比较,治疗后3个月、6个月CD3+T、CD4+T、CIM+T/CD8+T、NK细胞比例明显增高,CD8+T细胞比例降低(P<0.05),Treg细胞比例较治疗前降低(P<0.05).冷冻后6月与冷冻后3月比较,Treg细胞无明显变化(P>0.05).相关性分析结果表明:经氩氦冷冻治疗后Treg细胞比例变化与PSA下降呈正相关(r=0.76,P<0.01).结论:前列腺癌氩氦冷冻治疗后外周血T淋巴细胞亚群分布异常得到一定改善,Treg细胞比例变化与肿瘤负荷大小有关.     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化及意义.方法采用流式细胞技术检测64例乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞,采用ELISA法检测外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平.结果乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(5.1±2.9)%,高于乳腺良性肿物患者和健康志愿者(P均<0.05).乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平与肿物大小、TGF-β1呈正相关(r分别为0.511和0.253),与CD8+CD28+T细胞和NK细胞呈负相关(r分别为-0.243和-0.301).结论乳腺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞水平较高,对乳腺癌患者具有免疫抑制作用.     

肺癌患者外周血中CD25^＋和CD4^＋细胞的相关性分析

目的探讨肺癌患者外周血中CD25+(IL-2R)和CD4+(Th)细胞表达水平变化的相关性.方法采用流式细胞术检测101例肺癌患者外周血中CD25+和CD4+细胞的表达水平,并对两者之间的变化关系进行了相关性分析.结果肺癌患者外周血中CD25+和CD4+细胞的检出率显著低于正常对照组(P＜0.01).对各组肺癌病例CD25+和CD4+细胞检出率的相关分析表明,两者之间呈明显的直线回归的统计相关性.结论肺癌患者外周血中CD25+细胞和CD4+细胞均明显减少,其外周血中CD25+细胞表达水平的变化可能是由CD4+细胞变化引起的.     

老年肺癌患者血清T淋巴细胞亚群CD28的检测及临床意义

目的：探讨老年肺癌患者淋巴细胞免疫功能状态、临床意义及与肺癌病理类型、临床分期的关系。方法：采用三色免疫荧光标记流式细胞术检测35名正常老年人及32例老年肺癌患者外周血的总T淋巴细胞（CD3^＋）、辅助／诱导T淋巴细胞（CD4^＋）、抑制／细胞毒T淋巴细胞（CD8^＋）、细胞毒T细胞（CD8^＋CD28^＋）和抑制T细胞（CD8^＋CD28）。结果：老年肺癌组CD4^＋Tz细胞（t=2．01,P〈0．05）和CD3^＋、CD8^＋T细胞及CD8^＋CD28^＋T细胞亚群明显低于老年正常对照组,t=2．01,P〈0．01;CD8^＋CD28T细胞亚群明显高于老年正常对照组,t=2．01,P〈0．01;老年肺癌患者中,T淋巴细胞及亚群CD28的表达在TNM临床分期及病理类型间差异均无统计学意义,t=2．11,P值均〉0．05。结论：老年肺癌患者存在明显的T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,抗肿瘤能力明显下降,并导致病情恶化更严重,且与病理类型及临床分期无关。     

CD4^＋T和CD8^＋T细胞的新功能

Ｔ细胞为抗癌免疫反应的核心细胞，成熟Ｔ细胞为αβＴＣＲ＾＋Ｔ细胞，主要为ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋两大亚群。ＣＤ４＾＋Ｔ细胞不仅在初始免疫反应中行使强有力的调节作用，在抗癌免疫记忆反应中更为重要且可参与靶细胞的直接杀伤。ＣＤ８＾＋Ｔ细胞除行使杀伤效应外，亦具有强烈的调节效应，并可类似于Ｔｈ１／Ｔｈ２而分化出Ｔｃ１／Ｔｃ２，从而参与针对癌症，病毒，胞内菌和自身免疫病的调节。     

进展期胃癌病人脾脏免疫功能状态的研究

目的探讨进展期胃癌患者脾脏的免疫状态.方法检测正常人及进展期胃癌患者共35例脾静脉血和外周静脉血进行T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK细胞)活性、循环免疫复合物测定.结果(1)与正常人外周血淋巴细胞(PBL)相比,进展期胃癌患者的PBL、脾静脉血淋巴细胞(SVL)的NK细胞活性及CD+3、CD+4细胞降低,CD+8细胞增多,使CD+4/CD+8比值下降.(2)从进展期胃癌患者PBL.SVL比较结果可见,后者NK细胞活性、CD+4/CD+8细胞比值明显低于PBL.(3)进展期胃癌患者SVL的循环免疫复合物(CIC)水平高于其PBL,也高于正常人PBL.结论进展期胃癌患者脾脏不但未能起正性免疫作用,且逐步转向负性免疫状态.     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肿瘤免疫及化疗方面的研究进展

Treg（CD4^＋CD25^＋调节性T细胞）是具有独特免疫调节功能的T细胞亚群，抑制免疫反应，在机体免疫稳态维持、肿瘤免疫以及移植耐受等方面发挥着重要的作用影响其抑制作用的表面分子标记有Foxp3、CD127、GITR等越来越多的研究表明在实体肿瘤和血液恶性肿捕患者中Treg数目增多。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌以及肝癌等多种实体肿瘤患者外周血和肿痛局部微环境中，Treg比例增高，且数目与患者肿瘸进展程度和预后、生存率呈负相关血液恶性肿瘤患者中Treg数目呈肿瘤发展阶段相关性增长。但是，Treg增高的机制尚不清楚。去除Treg或封闭其抑制功能，可以增强抗肿瘤免疫反应。化疗作为一种重要的治疗肿瘤的方法，对肿瘤患者外周血中的Treg数目可产生一定影响。化疗药物可能通过抑制肿瘤微环境中血管生成，促进Treg凋亡，从而起到有效控制肿瘤的作用，据报道环磷酰胺、多西紫杉醇和氟达拉滨等化疗药物均可使肿瘤明显退化，患者生存期延长但也有报道证明肿瘤患者接受化疗后，外周血中Treg数目增多。化疗究竞时Treg会产生怎样的影响，目前尚无定论，有待于进一步研究因此，Treg在肿瘤治疗方面的应用成为研究的热点，如何清除或逆转Treg的抑制作用是肿瘤免疫治疗的一个关键问题。     

转录因子RORγt对肠道和皮肤中NKp46^＋CD3^-细胞发育和功能的影响

NK细胞存在不同的功能亚群虽然已知人和小鼠的肠道、皮肤中有NK细胞存在，但其具体的细胞亚群及相应功能特征尚未可知。为探讨这一问题，论文作者首先通过组织免疫荧光确认在人和小鼠的肠道固有层和皮肤的真皮层中存在NKp46^＋CD3^-细胞，通过表型分析证明该淋巴细胞不是T、B淋巴细胞，而是表达多种NK细胞表面受体的NK细胞群；进一步功能检测发现，真皮中的NKp46^＋CD3^-细胞与肠道中的该细胞群不同：真皮中NKp46^＋CD3^-细胞的表面分子表达与常规NK细胞类似，但是在功能方面具有未成熟NK细胞的特点，即较弱的分泌细胞因子和杀伤效应以及较强的增殖活性；     

Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者免疫功能的临床研究

目的:探讨Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者免疫功能状态及临床分期与免疫功能的关系.方法:对30例经病理组织学证实的Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者外周血T细胞亚群百分率和NK细胞数进行检测,并以30例自愿者正常人作对照.结果:Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者CD3+、CD4+细胞值,CD4+/CD8+比值下降,且NK细胞活性显著降低,CD8+细胞值显著高于对照组,而Ⅳ期比Ⅲ期患者CD3+、CD4+、CD8+细胞值降低,CD4+/CD8+比值增高,NK细胞活性增加(P＜0.01).结论:Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者免疫功能均低于正常值,Ⅳ期患者的CD3+、CD4+、CD8+细胞值随期别增高而降低,CD4+/CD8+比值、NK细胞活性随治疗方式不同而升高.     

乳腺癌患者淋巴结CD4＋CD25＋T细胞和相关细胞因子的检测及相关性分析

目的探讨CD4＋CD25＋T细胞在乳腺癌发生、发展中的作用。方法将取自35例乳腺癌患者的105个肿大淋巴结,制备成单细胞悬液,应用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞比例及CD4＋CD25-、CD8＋T细胞、NK细胞的相对水平。采用定量RT-PCR法,检测IL-2、IL-10、TGF-β1和IFN-γ的细胞因子水平。结果乳腺癌患者淋巴结中的CD4＋CD25＋T细胞水平（在CD4＋T细胞中的百分含量）与淋巴结转移相关,转移淋巴结中其水平明显高于未转移淋巴结。乳腺癌患者淋巴结中CD4＋CD25＋T细胞与CD4＋CD25-、CD8＋T细胞和NK细胞的水平呈负相关关系。乳腺癌患者淋巴结中CD4＋CD25＋T细胞水平与TGF-β1呈正相关,与IL-2、IL-10、IFN-γ无相关性。乳腺癌患者淋巴结中TGF-β1、IL-10、IFN-γ水平与淋巴结转移相关,转移淋巴结中TGF-β1、IL-10含量高而IFN-γ含量较低。IL-2与淋巴结转移无相关性。结论乳腺癌患者转移淋巴结中的CD4＋CD25＋T细胞水平高于未转移淋巴结。     

Ⅲ期—Ⅳ期肺癌患者免疫功能的临床研究

目的 :探讨Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者免疫功能状态及临床分期与免疫功能的关系。方法 :对 30例经病理组织学证实的Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者外周血T细胞亚群百分率和NK细胞数进行检测 ,并以 30例自愿者正常人作对照。结果 :Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者CD3 + 、CD4+ 细胞值 ,CD4+ /CD8+ 比值下降 ,且NK细胞活性显著降低 ,CD8+ 细胞值显著高于对照组 ,而Ⅳ期比Ⅲ期患者CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 细胞值降低 ,CD4+ /CD8+ 比值增高 ,NK细胞活性增加 (P<0 0 1)。结论 :Ⅲ期～Ⅳ期肺癌患者免疫功能均低于正常值 ,Ⅳ期患者的CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 细胞值随期别增高而降低 ,CD4+ /CD8+ 比值、NK细胞活性随治疗方式不同而升高。     

胃癌患者红细胞免疫功能及T淋巴细胞亚群的变化

目的 :探讨胃癌患者红细胞免疫功能状态和T淋巴细胞亚群的改变。方法 :测定 6 0例胃癌患者的红细胞Ⅰ型补体受体花环率 (C3bRR)、免疫复合物花环率 (ICR) ,同时用流式细胞仪 (FCM )检测T细胞亚群 ,与 4 0例健康献血员的红细胞免疫指标及T淋巴细胞亚群的变化作对照。结果 :胃癌患者C3bRR降低 ,ICR增高 ,T淋巴细胞亚群CD4+ 及CD4+ CD8+ 比值都低于对照组 ,不同病理分期之间差异有显著意义 ,胃癌组C3bRR与CD4 + CD8+ 比值呈正相关。结论 :胃癌患者红细胞免疫功能低下、T淋巴细胞亚群比例失调 ,两者关系密切 ,并与临床分期相关     

胃癌合并慢性病性贫血患者红细胞膜表面CD35和CD58的表达

目的：研究细胞因子对正常人和胃癌伴慢性病性贫血（anemia of chronic cliseasis，ACD）的影响。方法：采用ELISA方法测定CD35和CD58水平，红细胞酵母花环法测定RBC-C3bRR和RBC-CR，聚乙醇沉淀比浊法测定CIC，流式细胞术测定CD2.结果：胃癌组和正常对照组进行比较：RBC-C3b差异有统计学意义，P〈0．01；RBC-ICR差异有统计学意义，P〈0．05；CD35差异有统计学意义，P〈0．01；而CD58虽然低于正常对照组，但差异无统计学意义，P〉0.05；CIC测定结果均正常。结论：胃癌患者RBC-C3b,CD35和CD58水平下降与胃癌患者具有免疫活性的细胞因子有直接关系。但CD58无统计学意义。