大鼠肝贮脂细胞的分离、培养和鉴定

肝脏星形细胞(hepatic stellate cell，HSC)，又称贮脂细胞(fat—storing cell，FSC)、Ito细胞、寞周脂肪细胞、储存维生素A细胞及肝脏特异性周皮细胞(liver-specific pericyte)等，是肝脏的一种非实质细胞。它是肝脏中兼具肌细胞、成纤维细胞及脂肪细胞特征的间质细胞。目前一致认为，激活的HSC为肝纤维化时产生各种细胞外基质(ECM)成分的主要细胞     

维生素E对培养的肝细胞和储脂细胞细胞外基质的影响

1989 年,Chojkier 和Igarashi 分别报告脂质过氧化可发生在未受刺激、静止的培养成纤维细胞和活体正常组织。本实验旨在了解体外培养大鼠肝细胞和储脂细胞（Ito 细胞）是否存在过氧化脂质和前胶原基因表达的产物,正常培养大鼠Ito 细胞有无其它细胞外基质的产生,维生素E（ VE）能否抑制基础脂质过氧化和细胞外基质（ECM）产生。1 材料和方法用体重为180～210g、680～740g雄性Wistar 大鼠,分离培养肝细胞、Ito 细胞。参照Moshage 的方法分离大鼠Ito 细胞,培养1 周后用Desmin 多抗行免疫组化鉴定,结果显示95%以上Desmin 染色阳性…     

肝星形细胞具有干细胞样特性

肝星形细胞(hepatic stellate cells,HSC),又称Ito细胞、维生素A储存细胞、脂细胞(lipocyte)、窦周细胞(perisinusoidal cell)等,在肝纤维化的发生发展过程中处于中心地位.作为肝的一种间质细胞,HSC同时兼有成纤维细胞、脂肪细胞和肌细胞的特征,能产生多种细胞外基质( extracellular matrix,ECM)组分.既往研究过于重视HSC在肝纤维化形成中的生物学效应,忽略了其他方面的特征.近来很多研究显示HSC与干细胞(stem cells,SC)在多个方面有着惊人的相似.于是干细胞与HSC的关系以及肝纤维化形成中的干细胞机制开始受到人们的关注,现就近年国内外的相关研究进展做以下综述.     

贮脂细胞收缩,内皮素和一氧化氮与门脉高压的发病机理

目前已发现有许多种介质与肝内门脉高压症有关，它们的准确作用点可能位于肝内（包括窦前性、窦性或窦后的）任一水平上。最近的研究认为肝窦血流可能受居于窦周Disse间隙的贮脂细胞[也称星形细胞（stellatecell）、Ito或窦周细胞及间充质细胞]的调节。其中有明显血管调节活性的成分即内皮素（ET）和一氧化氮（NO）。本文简述贮脂细胞、ET和NO各自在肝内血管调节过程中的作用和在门脉高压治疗中的意义。贮脂细胞及其收缩性正常肝脏中贮脂细胞起了极大的脂酯（Retinoidesters）储存库的作用。肝脏损害时，贮脂细胞经过“活化”产生细胞…     

肝贮脂细胞的形态结构及其机能意义

自50年代 Ito 发现肝贮脂细胞(Fat-storing cell 简称 FSC)以来,国外许多作者对贮脂细胞进行了广泛研究。国内对贮脂细胞仅在组织学教材和参考书中简单提及;因此本文就所收集到的资料,对贮脂细胞的研究经过、细胞形态结构和机能意义作出综合报道,以供参考。     

细胞移植及细胞联合移植修复脊髓损伤的研究进展

<正>脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是中枢神经系统的严重创伤,其发病率和致残率呈逐年增高的趋势,而且给社会和家庭带来沉重的负担[1],是近年医学研究的热点难题之一。随着神经组织工程技术的发展,利用细胞移植和细胞联合移植修复SCI成为近年研究的热点。目前可供选择的移植细胞类型有神经干细胞(neural stem cells,NSCs)、施万细胞(schwann cells,SCs)、胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)、嗅鞘细胞(olfactory ensheating cells,OECs)、骨髓间充质干细胞(bone mesenechymal stem cells,BMSCs)、少突胶质     

胰岛素对THP—1细胞脂蛋白脂酶mMA表达及细胞泡沫化的影响

目的：观察胰岛素在氧化低密度脂蛋白(ox—LDL)致人髓系白血病单核细胞株THP—1细胞泡沫化过程中的作用，并探讨其机理。方法：用不同浓度胰岛素及ox—LDL与THP-1细胞一起共同孵育，观察：THP—1细胞脂蛋白脂酶(LPL)mRNA RT—PCR产物、非特异性脂酶染色THP—1细胞所得脂酶阳性细胞数、细胞大小变化、油红O染色所得含脂滴细胞数、细胞内胆固醇含量。结果：100mU/L以上浓度胰岛素各组：THP—1细胞LPL mRNA表达与oox—LDL对照组比较上调2倍；细胞周长、脂滴阳性细胞百分率及细胞内胆固醇含量均明显高于ox—LDL对照组(P＜0．05)。结论：高浓度胰岛素在ox—LDL存在条件下有促进THP—1细胞向泡沫细胞转化的作用，其机理可能与细胞LPL mRNA表达上调有关。     

Tfh、Tfr细胞表达情况与HSP患儿肾脏受累情况的关系

目的 研究过敏性紫癜(Henoch Sch(o)nlein purpura,HSP)患儿外周血滤泡调节性T细胞(follicular regulatoryT cells,Tfr细胞)、滤泡辅助性T细胞(follicular helperT cells,Tfh细胞)的表达情况,及其与肾脏受累的关系.方法 选取我院2017...     

树突状细胞与调节性T细胞相互作用研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是1类复杂且具有异质性、可塑性的细胞,系"专职的"抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APCS),也是体内主要的可激活"初始型"免疫反应的细胞.     

树突状细胞-肿瘤细胞之融合细胞在抗肿瘤免疫中的研究进展

树突状细胞(dendritic cells，DCs)是体内的专职抗原呈递细胞，具有活跃地摄取、处理抗原的能力，并表达高水平的MHC-Ⅰ、Ⅱ类抗原和CD80、CD86等共刺激分子，因而能有效地向T细胞呈递抗原、激发初次细胞免疫应答。肿瘤融合细胞可用于免疫治疗，最早由Cohen报道，他发现某些弱免疫原性肿瘤的肿瘤相关抗原(tumourassociated antigen，TAA)在     

调节性B细胞在变应性疾病中对T细胞免疫的调节作用及其调节因素

由于B细胞(Breg cells)在免疫反应中具有介导特异性免疫反应、分泌抗体的作用，一直以来人们都认为B细胞在免疫反应中起到正性的免疫调节作用。然而，越来越多的研究证实B细胞同样具有负性的免疫调节作用。在变应性疾病中，某种具有调节功能的B细胞亚集可以通过分泌IL-10、TGF-I等细胞因子方式促进调节性T细胞(Treg cells)的分化或是直接抑制免疫性T细胞的增殖。这种B细胞的亚集被称作调节性B细胞，即B调细胞。同时，B调细胞所处的微环境对B调细胞的产生、增殖及分泌也起到调节作用。在这篇综述中，我们结合近年来的研究成果，讨论B调细胞在变应性疾病中，对T细胞免疫反应进行调节的可能机制以及B调细胞所处微环境中的某些因素对B调细胞的调节作用，并展望了B调细胞未来的研究方向。     

胰岛素对THP-1细胞脂蛋白脂酶 mRNA表达及细胞泡沫化的影响

目的 观察胰岛素在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致人髓系白血病单核细胞株THP-1细胞泡沫化过程中的作用,并探讨其机理.方法 用不同浓度胰岛素及ox-LDL与THP-1细胞一起共同孵育,观察THP-1细胞脂蛋白脂酶(LPL) mRNA RT-PCR产物、非特异性脂酶染色THP-1细胞所得脂酶阳性细胞数、细胞大小变化、油红O染色所得含脂滴细胞数、细胞内胆固醇含量.结果 100 mU/L以上浓度胰岛素各组THP-1细胞LPL mRNA表达与ox-LDL对照组比较上调2倍;细胞周长、脂滴阳性细胞百分率及细胞内胆固醇含量均明显高于ox-LDL对照组(P＜0.05).结论 高浓度胰岛素在ox-LDL存在条件下有促进THP-1细胞向泡沫细胞转化的作用,其机理可能与细胞LPL mRNA表达上调有关.     

不同激活方式影响细胞因子诱导杀伤细胞的扩增与活性

目的：研究不同激活方式对CIK细胞(Cytoline-induced killer cells，CIK)体外扩增的影响。方法：使用植物血球凝集素(pHYTOHEMAGGLUTININ，PHA)或抗CD3单抗刺激细胞增殖，从脐血单个核细胞定向诱导CIK细胞，用乳酸脱氢酶(LDH)分析法分析细胞毒活性，用流式细胞分析法对不同培养条件下CIK细胞的纯度进行分析。结果:使用抗CD3 mAb刺激生成的CIK细胞在扩增能力、纯度和细胞毒性方面都优于使用PHA刺激生成的CIK细胞。在细胞因子和有丝分裂原加入3d后，将其洗脱，但仍加入IL-2，有利于提高细胞的扩增能力。另外，使用包被的方法将抗CD3 mAb固定在孔板上比悬浮加入效果好。结论：这一结果对于CIK细胞的大量扩增和临床应用具有指导意义。     

NK细胞和NKT细胞在病毒性肝炎中的作用

NK细胞(Natural killer cells)和NKT细胞(Natural killer T cells)参与机体的天然免疫反应。NK细胞在肝炎病毒感染的早期免疫反应中起到重要作用,而慢性病毒性肝炎患者NK细胞功能降低。另外,动物实验显示NKT细胞可致肝组织损伤并能抑制肝炎病毒的复制。因此通过调节NK细胞和NKT细胞的功能治疗病毒性肝炎将有可能成为一种新的策略。     

大鼠未成熟树突状细胞体外分离、扩增与鉴定

树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是目前为止发现的功能最强的专职抗原提呈细胞,而不同生长阶段的DCs对于诱导T细胞免疫应答的能力也有所不同,未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,iDCs)具有极强的抗原摄取能力,并能诱导T细胞的免疫耐受[1].为进一步研究iDCs诱导免疫耐受的功能及特性,我们建立了利用大鼠骨髓细胞诱导产生iDCs,并对其表型和功能进行分析鉴定.     

放射状胶质细胞的研究进展

脊椎动物中枢神经系统(central neural system,CNS)发育过程中,有一类细胞与CNS的发育密切相关一神经干细胞(neural stem cells,NSCs),目前已知的NSCs主要有3种:神经上皮细胞、放射状胶质细胞(radial glial cells,RGCs)、基祖细胞.     

与CIK细胞共培养降低K562/ADR来源DC细胞MDR-1基因表达

细胞因子诱导的杀伤细胞(eytokine induced killer cell,CIK)是一种高效、新型的免疫活性细胞.树突细胞(dendritic cells,DC)是目前发现的功能最强的抗原呈递细胞(APC),它通过处理、呈递抗原,介导机体的免疫应答[1].     

小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响

目的：探讨小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的作用，同时应用流式细胞术及原位末端核苷酸标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果：不同浓度的小檗碱对NIT-1胰岛β细胞作用呈剂量依赖性：低浓度小檗碱（≤5 μmol/L） 对细胞无明显毒性，随浓度升高毒性作用明显。在培养基中加入高糖高脂及低浓度的小檗碱共同培养24 h, 小檗碱组细胞凋亡率低于高糖高脂组（P<0.01）。结论：小檗碱能抑制高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡。     

心肌肽素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的 研究新药心肌肽素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响及其在离子通道水平的作用机制。方法 用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞及标准的全细胞膜片钳技术，观察不同浓度的心肌肽素对Ito的影响。结果 心肌肽素呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ito，心肌肽素浓度(mg/L)为10、50、100、250和500 时分别使Ito降低(%)4、13、22、32和38。心肌肽素50 mg/L使Ito电流密度-电压曲线下移，但不改变曲线的形状，也不改变Ito稳态激活曲线。结论 心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞Ito，可能是其抗心律失常作用的机制之一。     

贮脂细胞凋亡与肝纤维化逆转

贮脂细胞经过激活、刺激性增殖、表型转换后分泌大量的细胞外基质和基质金属硫蛋白酶抑制剂 (TIMPs)而在肝纤维化中发挥了关键作用。但随着贮脂细胞的激活 ,其凋亡敏感性发生改变 ,通过Fas依赖途径发生凋亡 ,其数量明显减少 ,细胞外基质合成和TIMPs的表达快速下降 ,而使肝纤维化发生逆转。这一过程涉及贮脂细胞中凋亡和抑凋亡基因的表达变化。提示通过诱导激活的贮脂细胞凋亡 ,可能为肝纤维化的逆转治疗提供一新的乐观手段。