胃癌侵袭和转移相关基因的研究现状

目前胃癌,死亡率仍占恶性肿瘤的首位,为了寻找早期诊断的方法,目前针对胃癌侵袭及转移的机制探讨已进入到分子生物学的水平[1]。现将当前胃癌相关基因的研究综述如下:     

与肺癌和胃癌转移可能相关的RAB5A基因

目的 研究和分离肿瘤转移相关基因,探讨肺癌及胃癌转移发生的分子基础。方法 应用细胞培养、ｍＲＮＡ差异显示技术、ｃＤＮＡ克隆、测序技术、ＲＴ－ＰＣＲ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术以及免疫组化技术,分析比较了细胞来源相同,但转移能力不同的人肺腺癌细胞系Ａｎｉｐ９７３和ＡＧＺＹ８３－ａ基因差异表达及其差异表达基因ＲＡＢ５Ａ在临床胃癌和肺癌标本中存在的实际意义。结果 在两细胞系之间确有明显的差异表达基因存     

LncRNA-MALAT1在缺氧诱导胃癌侵袭转移中的作用

目的:探讨LncRNA-MALAT1对缺氧诱导胃癌侵袭转移的影响。方法:RT-PCR检测胃癌组织标本和胃癌细胞株中MALAT1的表达;通过基因重组方法构建MALAT1的siRNA载体,并感染人SGC7901及MKN45胃癌细胞,RT-PCR验证siRNA干扰有效;Transwell实验研究其对胃癌细胞SGC7901及MKN45侵袭转移能力的影响。结果:MALAT1在胃癌组织和胃癌细胞株中的表达高于癌旁组织和胃正常上皮细胞;缺氧能够促进SGC7901及MKN45细胞的侵袭转移能力,而下调MALAT1能够明显抑制缺氧条件下SGC7901及MKN45细胞的侵袭转移能力。结论:MALAT1在促进胃癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用,为胃癌靶向治疗提供理论依据。     

骨桥蛋白在胃癌中的表达及与胃癌侵袭转移的关系

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)在胃癌侵袭转移中的作用。方法 采用免疫组织化学SABC法检测OPN、核因子-κB p65(NF-κBp65)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在12例非癌胃组织和72例胃癌标本中的表达及分布。结果 OPN、NF-κB p65和MMP-9的阳性表达率,在12例非癌胃组织中均为0,在30例无淋巴结转移胃癌组织中分别为43．3％、40．0％和46．7％;在26例有淋巴结转移胃癌组织中分别为76．9％、73．1％和80．8％,与无淋巴结转移的胃癌组织的差异有统计学意义(P值分别为0．011,0．013和0.009);在16例有淋巴结转移且伴胃外器官转移的胃癌组织中分别为87．5％、81．3％和93．8％,与无淋巴结转移的胃癌组织差异有统计学意义(P值分别为0．004,0．007和0．002)。胃癌组织中,OPN与NF-κB及NF-κB p65与MMP-9的阳性表达率有差别,但有相关关系,r分别为0．67和0．72。结论 OPN与胃癌的侵袭转移有关,可能机制是通过活化NF-κB,上调转移相关分子MMP-9的表达,从而促进癌细胞的侵袭转移。     

Heparanase及bFGF在胃癌组织中的表达及其与胃癌侵袭转移的关系

目的:探讨乙酰肝素酶(Heparanase HPA)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系.方法:RT-PCR法检测HPA mRNA在胃癌组织中的表达,同时应用免疫组织化学法检测bFGF蛋白在胃癌组织中的表达.结果:HPA mRNA的高表达与胃癌的大体类型、浸润深度、细胞分化程度及组织学生长方式、淋巴结转移、腹膜转移、TNM分期呈正相关:而与肿瘤大小无明显关系.bFGF与浸润深度及TNM分期呈正相关.HPA与bFGF共同表达的病例腹膜转移率、淋巴结转移率、腹腔脱落癌细胞检出率均明显增高.结论:HPA在胃癌组织中的表达增高.HPA及bFGF的表达与胃癌的恶性程度密切相关,在胃癌的侵袭转移中发挥重要作用.两者共同表达时恶性程度明显增高.     

MMP-2、TIMP-2在骨肉瘤侵袭转移中的作用

目的 研究骨肉瘤术后标本中MMP-2、TIMP-2的表达,结合临床病理资料,探讨二者在骨肉瘤侵袭转移过程中的作用和相互关系.方法 利用免疫组织化学染色法检测53例骨肉瘤标本及20例骨软骨瘤中MMP-2、TIMP-2的表达.结果 MMP-2在骨肉瘤中高表达,在骨软骨瘤中低表达,而TIMP-2则相反.MMP-2和TIMP-2的表达与骨肉瘤的病理组织类型无明显关系,而与软组织侵袭和远处转移有关.MMP-2和TIMP-2在骨肉瘤中的表达有明显的相关性.MMP-2和TIMP-2表达之间的平衡在骨肉瘤侵袭转移过程中有重要作用,MMP-2阳性TIMP-2阴性时具有明显的软组织侵袭和远处转移倾向.结论 MMP-2和TIMP-2表达与骨肉瘤的侵袭、转移有密切关系,为骨肉瘤侵袭转移的预测和预后的判断及临床治疗提供理论依据.     

胰腺癌侵袭和转移相关基因的研究进展

胰腺癌恶性生物学行为的1个重要特点就是具有明显的侵袭和转移性，在胰腺癌的早期就可以发生胰外播散，浸润至局部淋巴结、肠系膜血管、门静脉、胰周脏器和脂肪组织以及腹膜后神经丛等，或通过血行性转移至肺、肝等远处器官，导致3／4以上的胰腺癌患者就诊时丧失了根治性手术治疗的机会，使胰腺癌有较高的死亡率，5年生存率低于5％，因此深入揭示胰腺癌侵袭和转移的分子机制具有重要的理论和临床应用价值，     

肿瘤血管生成在胃癌侵袭,转移和预后判断中的意义

采用CD34单克隆抗体QB－END／10免疫组织化学SP法检测了68例胃癌组织中的微血管密度（MicrovesseldensityMVD），旨在探讨肿瘤血管生成在胃癌侵袭、转移和预后判断中的意义。结果发现，所有胃癌组织中平均MVD为18．2土10．9，MVD随肿瘤侵袭深度、TNM分期的增加而增大，有淋巴结转移患者的MVD（20．85士10．19）明显高于无淋巴结转移患者（14．32土10．67）（P＜0．01）。有血管、神经侵犯的胃癌患者MVD明显高于无血管、神经侵犯者（P＜0．01）。单因素、多因素分析表明，高MVD（≥18）胃癌患者比低MVD（＜18）患者预后明显为差（P＜O．05），MVD是影响胃癌预后的独立因素。研究表明，肿瘤血管生成是胃癌侵袭、转移发生必不可少的环节，MVD是衡量胃癌细胞侵袭转移能力和判断患者预后的一个有用指标。     

RAGE在胃癌组织中的表达及与肿瘤侵袭转移的关系

目的 研究RAGE蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌的侵袭和转移的关系。方法 选取50例胃癌组织标本,采用SP免疫组化法检测RAGE表达情况。选取9例新鲜手术切除胃癌标本用于蛋白质印迹（western blot）检测。结果 RAGE在正常组织表达于内皮、平滑肌细胞、单核吞噬细胞。胃癌组织中表达明显增多（P〈0.05）。RAGE在低分化腺癌中的表达明显升高,RAGE的表达和有无淋巴结转移呈负相关（γs=-0.399,P=0.004）。有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P〈0.05）。RAGE蛋白表达的相关性分析表明浸润深度与RAGE蛋白的表达呈正相关（γs=0.385,P=0.06）。不同浸润深度的RAGE的表达差异有显著性意义（P〈0.05）。Western blot结果 分析表明：胃癌的组织学类型与RAGE的表达呈正相关（γs=0.744,P=0.001）。在正常组织、癌旁组织、高分化、中分化、低分化癌组织中,RAGE蛋白含量呈依次上升趋势（P〈0.05）。结论 RAGE在正常胃组织低水平表达,在胃癌组织中的表达明显增强。RAGE的表达与胃癌的侵袭转移密切相关。     

Sema3A在胃癌增殖和侵袭中作用的初步研究

目的:探讨Sema3A在胃癌增殖和侵袭中的作用。方法:构建Sema3A正义表达载体,经慢病毒包装,感染胃癌高转移潜能MKN-28M细胞,获得外源性稳定表达的Sema3A胃癌细胞株。利用MTT法、克隆形成实验、细胞凋亡实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞生长增殖能力的影响。Transwell侵袭实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响。结果:慢病毒包装Sema3A正义表达载体转染入胃癌细胞MKN-28M后,有效增加了Sema3A基因的表达。Sema3A慢病毒包装载体感染MKN-28M细胞后,与对照组相比,细胞生长、增殖速度明显减慢(P<0.05),克隆形成率明显下降(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05),体外侵袭试验表明外源性上调Sema3A显著降低了高转移细胞系MKN-28M的侵袭转移能力(P<0.05)。结论:成功构建了外源性过表达Sema3A基因的慢病毒载体,上调Sema3A基因的表达显著降低了胃癌高转移系MKN-28M细胞的生长增殖能力,抑制了侵袭转移能力,提示Sema3A在抑制胃癌的发生发展中具有重要作用。     

Snail蛋白表达与胃癌浸润转移的相关性研究

目的：研究Snail蛋白在胃癌中的表达与胃癌浸润转移的关系。方法：应用免疫组织化学sP法，检测Snail蛋白在87例胃癌和24例正常胃粘膜组织中的表达及其在细胞中的定位。结果：Snail蛋白高度表达于胃癌组织的细胞核、细胞质，正常胃粘膜组织中表达较少甚至不表达，阳性率分别为89．6％和29．1％，两者有统计学意义（P〈0．05）。Snail的表达与胃癌的组织学分化、浸润深度和淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论：胃癌的侵袭转移与Snail蛋白的表达有关，Snail蛋白有可能成为胃癌侵袭转移的生物学标志。     

经胃黏膜下层食管胃黏膜单层吻合法的抗返流作用研究

目的探讨经胃黏膜下层食管胃黏膜单层吻合的抗返流作用。方法 412例食管下段癌、贲门癌患者,按肿瘤根治要求切除,残胃残端予以闭合器关闭,胃体部大弯侧作黏膜下隧道,长3.0 cm,宽3.0 cm;游离食管末端黏膜层,食管黏膜穿入胃壁隧道内与胃黏膜层吻合,食管肌层与隧道入口处胃壁浆肌层间断缝合,隧道出口胃壁浆肌层切口间断缝合关闭隧道。结果无吻合口瘘、吻合口狭窄发生,2例有少量反酸,其中68例患者行纤维胃镜检查:吻合口上3～4 cm处食管呈关闭状态,黏膜无充血水肿及糜烂,血管纹理清晰。食管黏膜活检按Menin氏标准分级:0、Ⅰ、Ⅱ级分别有10例(14.7%)、47例(69.1%)和11例(16.2%),无Ⅲ级病例。食管液pH值测定,pH值为6.5、7.0、7.5分别有13例(19.1%)、46例(67.7%)和9例(13.2%)。结论经胃黏膜下层食管胃黏膜单层吻合适于病变小的食管癌、贲门癌患者,具有良好地抗返流作用。     

幽门螺杆菌感染与胃癌细胞侵袭转移的关系研究

目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)感染与胃癌细胞侵袭转移的关系及可能机制。方法将幽门螺杆菌与胃癌细胞株SGC7901共培养12 h;按胃癌细胞与H.pylori菌落之比为1∶100,与SGC7901共培养0、12、24 h来进行Western-blot实验,测定基质金属蛋白酶9(MMP-9)、细胞外总调节蛋白激酶1/2(t-ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)在胃癌细胞中表达水平的变化;共培养24 h后,分为两组,不处理组和加入ERK抑制剂U0126的处理组,应用Transwell小室细胞侵袭实验,比较抑制ERK前后对胃癌细胞运动、侵袭能力的影响。结果随着胃癌细胞与H.pylori比例增大,胃癌细胞中MMP-9、p-ERK1/2表达明显增高(P<0.01),t-ERK1/2表达水平无明显差异(P>0.05)。不处理组胃癌细胞穿透基膜的数量与H.pylori比例呈正相关,而U0126处理组的胃癌细胞穿透基膜数量明显减少。各组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论幽门螺杆菌感染能促进胃癌细胞的侵袭迁移能力,可能与其通过ERK信号途径增强MMP-9表达而诱导胃癌的发生发展有关。     

淋巴管癌栓和淋巴结转移对胃癌术后生存率的影响

目的：探讨淋巴管癌栓与胃癌临床病理特点的关系。方法：比较淋巴管栓和淋巴结转移对胃癌预后的影响。结果：１）浸润深度及生长方式影响淋巴管癌栓的发生;２）只有在元淋巴结转移的条件下,淋这癌栓才会影响胃癌患者的预后。结论：淋巴结转移对一影响明显高于淋巴管癌栓。     

胃癌组织中RAB5A蛋白的表达及其与转移的关系

目的检测ＲＡＢ５Ａ蛋白在胃癌组织 的表达及其与转移的关系。方法应用免疫组化ＳＰ方法检测４７例胃癌石蜡包埋标本及７例正常胃组织中ＲＡＢ５Ａ蛋白的表达情况。结果 正常胃组织中ＲＡＢ５Ａ蛋白表达的阳性率为０;胃癌组织中ＲＡＢ５Ａ蛋白表达的阳性率为９１．４９％,两者的阳性率有显著性差异。有无淋巴结转移者的ＲＡＢ５Ａ蛋白表达的阳民生率分别为９１．８９％和９０％,无显著性差异,但两者ＲＡＢ５Ａ蛋白的表达程度有     

同源异型盒基因HOXA5对胃癌细胞BGC823侵袭能力的影响

目的 检测人胃癌组织中HOXA5基因的表达情况,观察干扰HOXA5基因的表达之后,胃癌细胞BGC823的迁移和侵袭能力的变化,为阐明HOXA5在胃癌向远处转移的分子机制中提供新的思路.方法 通过实时定量PCR(qRT-PCR)、Western blot以及免疫组织化学等技术,检测胃癌组织中HOXA5基因的表达.应用细胞转染的方法 将HOXA5基因的过表达质粒转入胃癌细胞BGC823中,经qRT-PCR和Western blot验证HOXA5表达上调之后,利用Transwell侵袭实验检测BGC823细胞侵袭能力的变化.结果 在收集的69例新鲜的胃癌组织以及相对应的癌旁组织中,免疫组织化学显示相比于癌旁组织的表达情况,胃癌组织中只有26例HOXA5的表达高于癌旁组织,比例为37.7％;qRT-PCR、Western blot检测发现相对于癌旁组织,胃癌组织中HOXA5的表达水平显著下调(mRNA水平下调3倍,蛋白水平下调2倍,差异具有统计学意义,P<0.05).BGC823细胞转染了过表达质粒之后,HOXA5的表达能够被上调.过表达了HOXA5基因的BGC823细胞的侵袭能力下降.结论 在胃癌组织中HOXA5的表达下调,而在胃癌细胞BGC823中增强HOXA5的表达能够降低细胞的侵袭能力,说明HOXA5在胃癌的发生发展和侵袭、转移中发挥着抑癌基因的作用,可作为一个新的治疗靶点.     

胃癌腹膜转移相关基因 MYH-9与胃癌转移及其预后的关系

目的：研究胃癌腹膜转移相关基因MYH-9与胃癌转移及预后的关系。方法50例组织标本取自手术切除的胃癌组织及同一患者的腹膜转移组织标本。组织固定在10％的缓冲甲醛溶液用于病理诊断,冷冻于液氮中备于免疫印迹分析、细胞培养、siRNA转染、细胞粘附实验。结果 MYH-9在所有的鳞状细胞癌组织（100％）和8个邻近正常组织中表达（26．7％,P＝0．000）。癌组织中MYH-9高表达水平与腹膜转移、肿瘤分化程度差和较晚的肿瘤分期显著相关。单变量分析结果显示：肿瘤分期、胃癌病灶是否切除、腹膜转移的存在、MYH9高表达（基于免疫组化染色）与患者总生存率显著相关（P＝0．008、P＝0．001、P＝0．006和P＝0．007）。进一步的多因素回归分析显示,肿瘤分期与MYH-9高表达是与总生存期相关的独立不良预后因素。结论 MYH-9的过度表达可能与较高的癌细胞迁移性相关。     

胃癌的淋巴结转移规律及其意义

目的：探讨胃癌淋巴结转移规律及合理淋巴结清除术的原则和适应证。方法：采用病理组织不学、免疫组织化学法研究转移淋巴结分型、分期、分级和计量学及淋巴结的检出率。结果：全组淋巴结转移率为74.8%，以No3、No7为高；不同病期的转移率有明显差别；转移淋巴结数量、级别和类型是反映胃癌生物行为和预后的重要指标。胃癌组织中淋巴管癌栓（ ）、FDP、TPA高表达，E-cd低表达和DNA含量增高与淋巴结转移密切相关。术中胃壁内注射CH40，认识淋巴结跳跃性转移规律，切除标本美蓝染色结合淋巴结连续切片，对提高淋巴结清除率和检出率有一定的应用价值。结论：针对胃癌淋巴结清除率、分型、分期、分级和计量学，以及淋巴结转移率、检出率和分子标志物研究，对选择合理根治术式、提高生存率具有重要的临床意义。     

Gab2通过调节EMT促进胃癌的侵袭转移

目的 探讨Gab2在胃癌组织中的表达情况及其对胃癌细胞侵袭转移能力的影响与机制。方法 采用免疫组织化学SP法检测胃癌组织中Gab2、E-cadherin、N-cadherin及MMP-9的表达并分析其与淋巴结转移的关系。应用小RNA干扰技术,转染SGC7901细胞株,RT-PCR法检测瞬时转染后Gab2基因表达情况,体外侵袭实验检测细胞转染后侵袭能力的变化,Western blot法检测各蛋白的表达。结果 胃癌组织中Gab2的表达水平与淋巴结转移显著相关（P=0.002）,与E-cadherin的表达负相关（r=-0.693, P=0.000）,而与N-cadherin和MMP-9的表达水平正相关（r=0.407, P=0.021; r=0.335, P=0.017）。小RNA干扰技术降低Gab2蛋白的表达后SGC7901细胞侵袭转移能力降低,同时E-cadherin表达增多,N-cadherin和MMP-9蛋白表达降低。结论 Gab2可能通过调节EMT在胃癌侵袭转移中发挥重要作用。