锌或铜诱导肝脏金属硫蛋白结合锌镉比值与铜镉比值的研究

[目的]观察镉（Cd）染毒后锌（Zn）或铜（Cu）诱导肝脏金属硫蛋白（MT）结合锌镉比值（Zn／Cd）与铜镉比值（Cu／Cd）的关系及其意义。[方法]将28只雄性Wistar大鼠随机分为7组,每组4只,分别为：空白对照组（0）,不做任何处理;非预处理组（A1、A2）,皮下注射生理盐水;Zn处理组（B1、B2）,皮下注射ZnCl2（每千克体重染Zn 25mg）;Cu处理组（C1、C2）,皮下注射CuSO4（每千克体重染Cu 12.5mg）。预处理24h后,为实验组动物皮下注射镉．金属硫蛋白（CdMT,Cdmetallothionein）,造成Cd急性中毒,其中A1、B1、C1组每千克体重染Cd0．1mg,A2、B2、C2组每千克体重染Cd0．4mg。24h后处死,取肝脏,制备匀浆。离心后取上清液,加入SephadexG-75色谱层析柱。[结果]空白对照组动物肝脏中与MT结合的最主要金属元素是Zn,而Cd、Cu含量在检测限以下;与前者相比,A1、A2组动物肝脏MT和Cd含量随染毒剂量增加而升高,且A1、A2组肝脏MT中Zn／Cd值分别为20．0和10．0;B1、B2组肝脏MT中Zn／Cd值分别为20．8和20．3,Cu离子未检出;C1、C2组肝脏MT的Cu／Cd值分别为80．0和36．5,Zn含量下降明显。[结论]不同剂量Cd染毒后,Zn或Cu诱导动物肝脏MT中金属含量比例存在差异,Cu／Cd值高于Zn／Cd值,即与MT结合的Cd相比,Cu更易取代与MT结合的Zn。另外,肝脏中非MT结合Zn也是影响与MT结合的金属离子稳态的重要因素。     

镉饱和法测定大鼠肝脏及血浆金属硫蛋白方法研究

<正>金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量(分子质量约为6 000～7 000 u)、富含半胱氨酸、缺少环状氨基酸的金属结合蛋白,每摩尔MT可以结合6～12个锌、镉、铜、汞、银等重金属[1,6]。结合了2价金属镉离子的MT在250 nm处有特殊的光吸收峰[2]。金属硫蛋白参与体     

微量元素对金属硫蛋白基因表达的调控

研究表明，锌、铜、镉等多种微量元素可能影响机体金属硫蛋白（MT）的表达。作为MT激活剂的金属调节元素（MREs）与金属调节蛋白相互作用，可启动MT基因的转录。但微量元素调控MT基因表达的机制待进一步研究证实。     

金属硫蛋白与镉中毒

金属硫蛋白（Metallothion，in，简称MT）是一种低分子量（6000～10000）蛋白质，具有高金属含量（每分子含7～12个金属分子），金属通过硫酯键与蛋白结合。氨基酸组合中约含23％～33％半胱氨酸，通过形成金属硫键选择性的结合半脱氨酸无二硫键及芳香族氨基酸和组氨酸。MT被发现以来，围绕着与镉毒性的关系做了许多研究工作，发现MT的亲金属性使生物体接触铜后引起一系列特殊的生物学效应，如有特定的靶器官，生物半减期长，药物促排困难，干扰体内必需微量元素的平衡等。本文就MT与Cd的吸收、转运、中毒与解毒以及铜与其它微量元素的关…     

竞争性ELISA法检测人尿金属硫蛋白方法的改进及应用

[目的]改进检测人尿金属硫蛋白（UMT）的竞争性酶联免疫吸附法（ELISA），探讨应用该法测定人尿样标本UMT含量的价值。[方法]分离纯化人肝脏金属硫蛋白（HMT），制备抗金属硫蛋白单克隆抗体（McAb），利用待测样品中MT与包被MT竞争结合McAb的原理，建立竞争性ELISA，并检测健康在校大学生298份尿样中的UMT含量。[结果]竞争性ELISA对人UMT最低检出限为9ng／mL，组内和组间的变异系数分别为1．78％一6．72％和5．45％～13：26％，样品的回收率为99．69％～107．25％。尿样检测结果显示运动后UMT含量为（19．73±8．65）ng／μmolCr较运动前的（10．58±5．62）ng／μmolCr明显增加（P〈0．05）；吸烟群体UMT含量为（86．58±30．96）ng／μmolCr，显著高于不吸烟人群[（14．73±6．57）ng／μmolCr]（P〈0．05）。[结论]本法对于检测人UMT具有较好的精密度和准确度，可用于人UMT检测；运动后UMT水平显著升高，吸烟者UMT明显高于正常对照。     

螯合剂与金属硫蛋白对铀的竞争结合作用

目的 通过探讨螯合剂与金属硫蛋白（MT）竞争结合铀（U）（VI）的作用,建立铀促排螯合剂体外筛选的新方法。方法 采用竞争ELISA法,96孔酶标板经MT抗原包被、U（VI）或Zn²⁺预处理、螯合剂（CBMIDA-CaNa₂、BPCBG和DTPA-CaNa₃）处理、MT抗体免疫结合、HRP偶联二抗结合及OPD显色反应后,在波长490 nm处检测吸光度值以评价螯合剂与MT竞争结合U（VI）、Zn²⁺的能力。结果 本反应体系的吸光度值随MT质量浓度和MT抗体浓度增加而增加,其中最佳MT抗原包被浓度和MT抗体浓度均为2 μg/mL。与Zn²⁺的作用相似,U（VI）亦可使反应体系的吸光度值随其浓度增加而降低,其中最佳U（VI）和Zn²⁺浓度均为300 μg/mL。加入CBMIDA-CaNa₂和BPCBG则能明显提高U（VI）处理体系的吸光度值,CBMIDA-CaNa₂的作用强于BPCBG,而DTPA-CaNa₃则无明显作用;各螯合剂与MT竞争结合U（VI）能力的强弱顺序与以往细胞和动物U（VI）促排实验的结果相吻合。这3种螯合剂对Zn²⁺处理体系的吸光度值均无明显影响。结论 CBMIDA-CaNa₂和BPCBG能有效竞争结合于MT上的U（VI）,DTPA-CaNa₃无明显作用,竞争ELISA法可作为体外筛选U（VI）促排螯合剂的方法,具有简便、快速和高通量的优势。     

镉—金属硫蛋白的抗体制备及酶联免疫吸附法测定

镉金属硫蛋白的抗体制备及酶联免疫吸附法测定第二军医大学生化教研室（上海２００４３３）金慧英魏尧梅胡惠民冯伟华刘军华金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）是一种小分子富含巯基的蛋白质，可以与多种金属结合，并可被多种金属（镉、锌、汞、银等）诱...     

锌诱导金属硫蛋白体内合成的实验研究

对孕兔皮下注射氯化锌溶液，探讨了不同浓度的氯化锌对孕兔肝脏和胚胎金属硫蛋白（ＭＴ）合成的影响。实验结果表明，低剂量的氯化锌２ｍｇ／ｄ（每公斤体重），能诱导兔肝内金属硫蛋白的合成增多，当每天给孕兔注射氯化锌２０ｍｇ／ｄ（每公斤体重）时，兔肝脏金属硫蛋白的合成可高出对照组８．３倍，胚胎内金属硫蛋白水平也有明显的升高，提示母体锌水平不但影响自身肝脏金属硫蛋白的合成，而且可影响胚胎金属硫蛋白的水平。     

金属硫蛋白及其在镉接触评价中的应用

金属硫蛋白(MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白家族。MT主要与重金属解毒及细胞内微量元素锌、铜的储存、运输和代谢有关。本文主要对MT基因结构、调控、诱导及在镉接触评价中的应用进行综述。     

锌营养对大鼠应激反应及金属硫蛋白的影响

目的：在心理应激条件下，观察大鼠组织中金属硫蛋白（MT）水平的变化及其与锌营养状况的关系。方法：60只雄性Wistar大鼠随机分为6组：缺锌组（ZD）、喂对组（PF）、对照组（CT），以及相应的3个应激组（SZ、SP、SC）。以光－电刺激方法建立心理应激动物模型，观察应激对皮质醇激素、锌和金属硫蛋白的影响。结果：应激诱导动物脑和肝脏MT含量增加，而血浆锌出现不同程度下降。缺锌动物血锌浓度降低，肝脏和脑中金属硫蛋白的含量减少，而其整体应激反应强度增加。结论：维持良好的锌营养状况有助于诱导整体和脑组织产生应激蛋白，并提高机体对心理应激的适应能力。     

镉对Ⅱ型糖尿病小鼠金属硫蛋白基因表达的诱导与镉肾脏毒性之关系

目的 探讨金属硫蛋白基因诱导表达能力与Ⅱ型糖尿病小鼠（ob/ob小鼠）对镉金属硫蛋白肾脏毒性易感性之间的关系。方法 以β-actin为内参照,采用半定量RT－PCR方法检测在相同肾皮质镉水平条件下,镉对ob/ob小鼠和瘦型小鼠（正常小鼠）肾皮质MT1和MT2基因的诱导表达。结果 镉对ob/ob小鼠肾皮质MT1和MT2基因诱导表达的能力过低,而镉对瘦型小鼠MT1及MT2基因具有明显的诱导能力。结论 本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉肾脏毒性易感的可能原因与糖尿病小鼠肾中镉对MT基因的诱导能力过低有关。     

Metallothionein In Trace Metal Metabolism

While the unique function of metallothionein remains unknown, synthesis of the protein is induced by zinc, copper, cadmium and mercury. Zinc absorption, metabolism and transfer to apo-enzymes is promoted by zinc-thionein.     

Ⅱ型糖尿病小鼠对镉金属硫蛋白致肾脏毒性的易感性

[目的]探讨Ⅱ型糖尿病小鼠对重复性镉金属硫蛋白（CdMT)染毒致肾脏损伤的易感性。[方法]18只6月龄雄性Ⅱ型糖尿病小鼠（Umea ob/ob小鼠）和18只同种系非Ⅱ型糖尿病的雌性瘦型小鼠（正常小鼠）,各自随机分为3个组,采用背部皮下注射方式染毒。为了使两种类型小鼠肾皮质中达到相似的染镉浓度,根据两种小鼠肾脏体系数之比值来确定不同的CdMT染毒剂量。[结果]ob/ob小鼠尿NAG、尿钙及肾皮质钙含量在低肾皮质镉剂量时升高,而瘦型小鼠在试剂量时的相应指标无明显改变。[结论]本研究提示Ⅱ型糖尿病小鼠对镉的肾脏毒性易感。     

Metallothionein induced by cadmium or zinc inhibits lipid peroxidation in rats exposed to dimethylnitrosamine

Dimethylnitrosamine (N-nitrosodimethyamine) is a potent inducer of microsomal lipid peroxidation in the liver and kidneys. The results of this study show that prior exposure of adult rats to cadmium or zinc antagonises the effect of dimethylnitrosamine on lipid peroxidation by inducing increased metallothionein synthesis. Increased concentration of reduced glutathione (GSH) in the liver and kidney of rats pre-treated with cadmium or zinc and exposed to dimethylnitrosamine suggests that metallothionein inhibits oxidative stress. The presented results have been corroborated by findings that exposure of adult rats to cadmium or zinc may activate genes for metallothionein and glutathione-S-transferase, the protective proteins against oxidative stress.     

Metallothionein Induction By Ethanol

Acute ethanol administration transiently induces metallothionein in the liver of mice. Whether the effect is a direct one or is mediated through stress or altered zinc metabolism is not clear.     

镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅰ.尿金属硫蛋白对镉毒性肾损害的检测价值

采用Sephadex G-75凝胶柱色谱技术对亚急性镉毒性肾损害大鼠肝、肾、血、尿中金属硫蛋白(MT)进行了分离测定。结果表明,镉暴露后,肝、肾、血、尿中MT增多。MT是体内镉的主要存在形式,其在体内镉的运转、蓄积及排泄过程起最重要的作用。尿中MT增高是镉毒性肾损害最早出现的变化之一,它作为低分子蛋白质是肾小管功能障碍的灵敏指标。同时,作为一种镉金属结合蛋白,在反映镉性肾损害有其特异性。     

金属硫蛋白在镉致睾丸氧化损伤中的保护作用

应用不同剂量的氯化镉（０,２,０．４和０。．８ｍｇ／ｋｇ ＢＷ）对成年雄性ＳＤ大鼠进行腹腔染毒,连续染毒７天后将动物处死,分离睾丸,测定其中金属硫蛋白（ＭＴ）含量,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）等抗氧化酶活性和脂质过氧化产物丙二醛（ＤＭＡ）含量,结果显示,低剂量组ＭＴ含量虽有所升高,但与对照组比较差异无显著性,中剂量组ＭＴ含量显著升高,高剂量组ＭＴ含量反而显著降低。     

外源性镉金属硫蛋白对小鼠脾淋巴细胞功能影响的研究

目的 分析外源性镉金属硫蛋白（CdMT）的免疫毒性。方法 采用分离纯化经诱导合成的CdMT作为受试物与CdCI2比较,经口给予BALB／C小鼠不同剂量染毒2周和4周,检测脾T淋巴细胞增殖和T细胞亚群评价细胞免疫功能。结果 与阴性对照和脱金属硫蛋白（Apo-MT)组相比,CdMT组和CdCI2组表现为T细胞增殖功能降低;L3T4^ 亚群减少、Lyt2^ 亚群升高、L3T4^ /Lyt2^ 比值降低;且在CdMT组的改变明显低于相同含量的CdCI2组。结论 外源性CdMT经口作用可体内脾淋巴细胞免疫抑制作用,并与染毒剂量和时间有关,但CdMT经口免疫毒性低于CdCI2;结果可为评价环境镉暴露的生物学作用提供依据。