崭露头角的基因工程乙肝疫苗

我国属于乙型肝炎高发地区,乙型肝炎病毒携带者占总人口的10％左右。1985年我国成功研制了血源性乙肝疫苗,多年来对预防乙型肝炎取得了良好的社会效益。但是,血源性乙肝疫苗采用的是血浆为原料,使用血清分离技术制造,而血浆的供给受到限制,且有时亦难以保证血源的质量。 近几年研制成功的基因工程乙肝疫苗,采用基因重组技术,将乙肝病毒的DNA基因与酵母菌整合,经纯化、灭     

血源乙肝疫苗与基因工程乙肝疫苗免疫效果比较

接种乙肝疫苗是控制HBV感染的有效措施。血源乙肝疫苗（下称血源苗）在我国已应用10余年，近年来，国内已应用基因工程乙肝疫苗（下称基因苗）替代血源苗。为比较两种疫苗疗效，我们于19g7年5月～1998年6月观察了549名婴儿抗一HBS产生情况，现将结果报告如下。l方法1．1免疫方法将在本市2所医院分娩、产前检查＊BS＊。（一）的孕妇所生婴儿，随机分为血源苗组275人和基因苗组274人。两种疫苗均为北京生物制品研究所生产，使用时均在有效期内。按0、1、6免疫方案，血源苗10ugX3针，基因苗sugX3针，均接种于婴儿三角肌内。1．2检测方法全…     

基因工程乙肝疫苗引起过敏性休克1例

维康基因工程乙肝疫苗（以下简称基因疫苗）是最新预防乙型肝炎的主要药物，因其不含任何血液成份，故比血源性疫苗更安全，更易为人们所接受。最近，我们抢救了1例因注射基因疫苗而引起过敏性休克的患者，现报告如下：患者，女性，34岁，经查乙肝三系统5项均为阴性，肝功能检查正常，为预防乙型肝炎而接种基因疫苗。注射方法为上臂三角肌皮下注射，剂量sug／0．sml。30分钟后，患者突然出现呼吸困难、面色期红、心慌、气短、四肢发冷、脉搏细速等休克症状。立即给予盐酸肾上腺素ling肌注，症状来见缓解，即送我院急诊室抢救，给予平卧、吸…     

基因工程乙肝疫苗致过敏性休克1例

基因工程乙肝疫苗,目前已是计划免疫用生物制剂,我院自1997年至今,共注射了千余人次,其中1例因皮下注射乙肝疫苗导致过敏性休克,现将抢救、护理体会报告如下。1　病例介绍患者男,12岁,微胖,平时身体健康,既往无食物、药物过敏史。于1997年7月29日第1次三角肌注射乙肝疫苗5μｇ/     

维康基因工程乙肝疫苗免疫效果观察

乙型肝炎病毒感染是引起慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌的重要原因。接种乙肝疫苗是预防乙型肝炎的最有效手段[1 ] 。目前我国已相继研制生产出血源性乙肝疫苗和基因工程乙肝疫苗 ,为了解基因工程乙肝疫苗的免疫效果 ,笔者于 1 998年 9月至 1 999年 1 0月对接种者进行了观察 ,结果报告如下。1　材料与方法观察对象为 1 998年来 ,我站门诊经 ELISA法检测乙肝五项指标均为阴性者 ,年龄 1～ 65岁。接种深圳康泰生物制品有限公司生产的酵母重组基因工程乙肝疫苗 ,按厂家推荐剂量 5μg三针 ,0 ,1 ,6月。完成全程免疫者 3 3 7人 ,于第三针接种完…     

DNA重组乙肝疫苗的安全性与免疫原性

早期有文献报道了血浆源性乙肝疫苗临床应用的安全性与免疫原性,由于血浆源性疫苗价格昂贵以及人们害怕传染爱滋病,使其广泛应用受到阻碍。作者用酵母制备的DNA重组乙肝疫苗对人体进行试验,以此来估价其安全性与免疫原性,并与早期对血浆源性疫苗的研究结果进行比较。作者将110名新兵易感者(随机抽取的)按1∶1的比例随机分成两组,分别肌注5μg或10μg的重组乙肝疫苗,于试验     

乙型肝炎基因工程疫苗免疫原性和免疫效果研究

为了解不同类型乙肝疫苗免疫学特性,提供选择生产路线的依据,对基因工程乙型肝炎疫苗的免疫原性和免疫效果进行了研究.实验结果表明不同来源乙肝抗原结构不同,诱导的细胞免疫和体液免疫水平也有所不同.无糖基化的酿酒酵母抗原诱导Th1细胞反应能力强于其它种类糖基化抗原,对CHO疫苗进行去糖基化后,细胞免疫水平增强,与单克隆抗体反应的表位密度发生改变.在严格控制抗原量、孕妇的HB3eAg水平和检测试剂等条件下,对518名免疫14批乙肝疫苗的新生儿进行母婴传播阻断研究,同时对2291名免疫21批乙肝疫苗的小学生进行1～7年的免疫观察,证明国产乙肝酵母疫苗母婴传播阻断保护率达到80.56%～92.59%,与国外酵母疫苗相同,5μg国产酵母疫苗虽然剂量小,诱导的抗体较低,但保护效果高于其他糖基化疫苗,与血源疫苗30μg相当,说明可能细胞免疫起主要作用.国产酵母疫苗抗体阳转率在免后5年时与Merck疫苗水平相当,但低于10μg Amgen和血源疫苗.建议尽早加强免疫.乙肝疫苗免疫失败与HBV S抗原变异、孕妇HBV DNA含量高等因素有关.     

乙型肝炎基因工程疫苗免疫原性和免疫效果研究

为了解不同类型乙肝疫苗免疫特性,提供选择生产路线的依据,对基因工程乙型肝炎疫苗的免疫原性和免疫效果进行了研究。实验结果表明：不同为源乙肝抗原结构不同,诱导的细胞免疫和体液免疫水平也有所不同。无糖基化的酿酒酵母抗原诱导Th1细胞反应能力强于其它种类糖革化抗原,对CHO疫苗进行去糖基化后,细胞免疫水平增强,与单克隆抗体反应的表位密度发生改变。在严格控制抗原量,孕妇的HBeAg水平和检测试剂等条件下,对518名免疫14批乙肝疫苗的新生儿进行母婴传播阻断研究,同时对2291名免疫21批乙肝疫苗的小学生进行1－7年的免疫观察,证明国产乙肝酵母疫苗母婴传播阻断保护率达到80．56％－92．59％,与国外酵母疫苗相同,5ug国产酵母疫苗虽然剂量小,诱导的抗体较低,但保护效果高于其他糖基化疫苗,与血源疫苗30ug相当,说明可能细胞免疫起主要作用,国产酵母疫苗抗体阳转率在免后5年时与Merck疫苗水平相当,但低于10ug Amgen和血源疫苗,建议尽早加强免疫,乙肝疫苗免疫失败与HBV S抗原变异,孕妇HBVC DNA含量高等因素有关。     

乙型肝炎基因工程疫苗免疫原性和免疫效果研究

1.人体免疫效果考核为保证疫苗人体考核结果的可靠性和可比性,在考核中严格筛选研究对象、在母婴传播阻断研究中,选择怀孕期间HBsAg阳性、HBeAg阳性(OD>3倍Cut off值)的母亲所生的新生儿作为研究对象,以HBsAg单阳性和健康母亲所生的新生儿作为对照。血清抗-HBs抗体阳转率和抗体滴度计算,采取改良Holliger公式,以抗体滴度大于10mIU/ml为判断标准。     

乙型肝炎基因工程疫苗免疫原性和免疫效果的研究

开展对乙肝疫苗免疫原性和免疫效果的研究、对选择、推广何种类型的乙肝疫苗十分重要,可以为制定开发、引进和疫苗更新换代的行政决策提供依据。本项研究及时跟踪国外研究进展.结合我国的实际情况.研究了不同类型乙肝疫苗的免疫原性和免疫效果.对乙肝酵母疫苗和CHO疫苗的抗原蛋白的生化结构、免疫原性、免疫效果、抗体水平和免疫持久性进行了全面的综合性比较研究。文详见15、16版《中华医学科技奖》。     

HEV保护性基因工程抗体的制备及功能研究

目的：制备抗戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）的人鼠嵌合基因工程抗体并研究其中和保护作用及特性。方法：将已获得的抗HEV鼠源单克隆抗体基因序列进行优化,设计人鼠嵌合的工程化抗体基因序列,将其克隆入真核表达载体;表达载体共转染293F细胞进行表达优化,高效制备基因工程化抗体;通过酶联免疫反应（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）、免疫荧光及HEV细胞感染模型,研究工程化抗体的结合能力及中和活性。结果：成功构建基因工程化人鼠嵌合HEV保护性抗体表达载体,在293F表达系统中实现高效表达。抗体表达产率达30 mg/L,亲和力为1.202×10-8 mol/L。免疫荧光检测结果显示抗体能够灵敏、特异地与已感染HEV的 Kernow细胞结合,实时荧光定量PCR检测结果显示抗体可保护易感的C3A细胞不被HEV感染。结论：基因工程化抗体抗体具有高效的HEV结合能力及中和作用,能有效阻断HEV感染,并实现低成本高效表达。     

不同剂量基因工程乙肝疫苗加强免疫后效果观察

接受乙肝疫苗初免后有较长的免疫原性,通常为5～7年。数年后,要进行加强免疫,以保证抗体保护的有效性。也有学者认为,因为存在“免疫记忆”,疫苗接种后不需加强注射。但是这种记忆能维持多久?基因工程乙肝疫苗加强免疫效果如何?目前全军报道甚少。我们从1997年开始对某部干部进行乙肝疫苗计划免疫,均普遍应用5μg基因工程疫苗预防接种;而国际上则广泛应用10μg基因工程疫苗。为比     

基因工程制备胰岛素

据最近外电报道:由细菌基因制作、用于人类的第一种药物已在市场出售.美国礼来制药公司宣布,他们已获得政府批准,可通过基因工程来制造治疗糖尿病的人胰岛素(Hu-mulin).该公司已向美国和许多欧洲国家申请.英国已首先批准. 5年前,礼来公司在南部旧金山的基因技术(Genentech)公司实验室内开始用细菌制造人胰岛素.由于商业上的有利因素促使基因技术公司(现在是一所规模很大的生物工程公司)制造人胰岛素.这是利用基因工程制造     

禽流感病毒H5N1亚型基因工程疫苗设计、表达制备及动物实验研究

目的设计并获得一种安全、高效,并能对以H5N1亚型为主的多种禽流感病毒亚型产生保护的复合基因工程疫苗。方法利用分子生物学和分子免疫学方法对国内以及周边国家流行的禽流感毒株进行全面分析,利用生物信息学技术合理设计亚单位加表位的全新复合结构疫苗的氨基酸序列;利用大肠杆菌密码子优化技术根据疫苗氨基酸序列获得基因序列;通过全基因合成的方法获得该疫苗的基因,并通过大肠杆菌表达系统对该疫苗进行表达;目的蛋白经过包涵体洗涤和色谱纯化后复性;通过ELISA评价其抗原特异性,并乳化制备成禽流感蛋白疫苗,通过小鼠体内免疫试验检测其免疫效力。结果设计了包含通用性的辅助性T细胞表位、B细胞表位以及CTL表位的串接疫苗结构;全基因合成获得了该复合疫苗的基因序列;该基因在大肠杆菌表达系统中得到了高效表达,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白30%;经过粗纯和精纯后的目的蛋白纯度达到95.5%,复性后获得可溶性蛋白溶液,浓度可达2.4 mg/mL。结论通过小鼠实验,验证了该H5N1亚型基因工程疫苗的抗原性,证实该基因工程疫苗在免疫小鼠体内激发体液免疫的同时调动了细胞免疫。小鼠免疫试验证明,该疫苗可以在小鼠体内有效诱发免疫应答。     

宫颈癌细胞膜抗原的制备及其免疫原性研究

采用逐级高渗盐溶液处理小鼠宫颈癌细胞，获得结构似花环状的宫颈癌影细胞即膜抗原。形态学观察显示该影细胞形状、大小均与宫颈癌细胞相似，核为空泡状，其胞膜连续完整，与核膜、胞浆组成一个空泡状的影细胞。该影细胞已失去分裂增殖能力。用其免疫小鼠可诱导显著的细胞和体液免疫反应，提示该影细胞保留了原有的肿瘤免疫原性，用该影细胞预先接种免疫小鼠可有效地抑制宫颈癌细胞的攻击力，该项研究对于宫颈癌疫苗的研制具有重要意义。     

2001年二等奖项目介绍乙型肝炎基因工程疫苗免疫原性和免疫效果的研究

项目详细内容 立项背景 乙肝疫苗的抗原主要来自两个表达系统,即酵母(酿酒酵母为主)和哺乳动物细胞(CHO细胞为主).     

DCs疫苗的制备及动物抑制实验研究

目的：为研究疫苗在肿瘤防治领域的应用。方法：选择了以MCA38肿瘤细胞作为体外冲击树状突细胞的肿瘤抗原来源，以C57BL／6（H－2^6)近交系小鼠为实验动物制备树状突细胞疫苗并建立动物实验。结果：树状突细胞疫苗接种组瘤重与对照组相比明显减小（P＜0．05），60d无肿瘤生长率明显高于对照组（P＜0．05）。结论：树状突细胞疫苗可有效抑制肿瘤的发生与生长。