补阳还五汤的研究及其应用

补阳还五汤出自清代名医王清任的《医林改错》,是治疗气虚血淤所致的中风名方 ,近年来 ,随着现代科学技术的应用 ,本方的药理作用得到进一步研究 ,应用范围也在不断扩大 ,现简单综述如下。1　现代药理学研究谭氏 [1]观察补阳还五汤对百日咳菌液致大鼠急性脑水肿 ( BE)时 ,氧自由基 ( O- 2 )有关参数与脑细胞超微结构的影响结果表明 ,补阳还五汤可明显减少 BE时鼠脑蛋白丙二醛含量 ,使降低的脑组织超氧歧化酶 ,谷胱甘肽过氧化物酶活性增高 ,轻度减轻左侧大脑皮质脑毛细血管周围星形胶质细胞突与神经元内线粒体水肿。显著减少左侧脑毛细血管…     

补阳还五汤对大白鼠血脑屏障影响的实验研究

观察补阳还五汤对百日咳菌液致大白鼠急性脑水肿时血脑屏障(BBB)与细胞超微结构的影响。结果表明,补阳还五汤可明显地减少脑水肿时鼠脑组织蛋白、Evan′s Blue含量,显著减轻脑组织的蓝染范围与程度,轻度减轻左侧大脑皮质脑毛细血管周围星形胶质细胞突与神经元内线粒体水肿,显著减少脑毛细血管内皮细胞(VEC)内吞饮小泡的转运,右侧脑组织含水量亦较对照组显著地减少(p<0.05)。提示补阳还五汤有保护VEC与BBB的功能。     

补阳还五汤的钙拮抗作用对脑水肿细胞超微结构变化的影响

为了观察补阳还五汤（BYHWD）的钙拮抗作用对实验性脑水肿（BE）细胞超微结构变化的影响，以夹闭左颈外、枕、翼腭动脉，向左颈总动脉顺血流方向注入百日咳菌液（PV）致大鼠BE模型，从阴茎静脉注入BYHWD或生理盐水作对照，PV注射后4h处死动物，测定脑组织水、钙、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶活性，并用电镜观察脑组织细胞超微结构的变化。结果BE时脑含水量与脑组织钙含量的增加呈正相关（r=0．9187，P＜0．01），BYHWD使脑毛细血管周围星形胶质细胞突与神经元内线粒体的肿胀减粒，脑组织钙含量减少，MDA含量降低，SOD活性升高。提示BYHWD可通过抑制氧自由基连锁反应，维持细胞内Ca2 稳态，减轻由胞浆内Ca2 积聚引起的血脑屏障与脑细胞及其细胞器损伤。     

补阳还五汤及其精简方抗脑缺血损伤功效比较

目的评价补阳还五汤及其精简方对脑缺血损伤的保护作用。方法体内实验:SD大鼠按体质量随机分为假手术组、局灶性脑缺血(MCAO)模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方组,每组10只,观察各组大鼠体质量、脑梗死面积和脑含水量等指标的变化。体外实验:采用过氧化氢(H2O2)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)致损,建立体外氧化应激细胞模型,将PC12细胞分为正常组、空白对照组、补阳还五汤组和补阳还五汤精简方不同浓度组(0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.5 mg/mL)及模型组,MTT法考察补阳还五汤及其精简方对模型细胞的保护作用。结果体内实验表明,补阳还五汤及其精简方给药7 d后,均能恢复MCAO模型大鼠的体质量、降低脑梗死面积、减轻脑组织水肿,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),两方组间比较差异无统计学意义(P0.05);体外实验表明,补阳还五汤及其精简方与细胞作用2 h即能发挥保护作用,对H2O2所致的氧化应激损伤有明显的保护作用,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),细胞存活率升高,同一浓度两方组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论体内外实验均表明,补阳还五汤精简方在抗脑缺血损伤方面功效显著,且药效不亚于补阳还五汤,在保证药效的前提下大大节约了中药资源。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤血脑屏障的保护作用,阐明该方抗脑缺血的机理。方法采用线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,造模后24 h给药,补阳还五汤组给予补阳还五汤灌胃,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃。造模后7 d,评价各组大鼠神经功能并处死取材,四氮唑红染色观察大鼠脑组织梗死体积,HE染色观察大鼠脑微血管的一般形态,ELISA检测大鼠脑组织内基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平及血清中血管性血友病因子(vWF)的表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组能显著改善神经功能行为评分,减少脑梗死体积,降低MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF水平。病理观察结果显示,补阳还五汤组脑组织病理变化较模型组减轻。结论补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其作用可能与保护血脑屏障,抑制MMP-9、MMP-2、VEGF、vWF的表达有关。     

益气活血类方剂补阳还五汤、黄芪桂枝五物汤与缺血性脑卒中气虚血瘀证“方证相关”的比较研究

目的:比较补阳还五汤和黄芪桂枝五物汤与缺血性脑卒中气虚血瘀证"方证"之间关联性大小,确立与缺血性脑卒中气虚血瘀证密切关联的方剂。方法:建立缺血性脑卒中气虚血瘀证大鼠模型,观察补阳还五汤和黄芪桂枝五物汤对模型大鼠糖、脂代谢、血液流变学及脑细胞凋亡的影响。结果:模型大鼠存在明显的糖、脂代谢异常、血液流变学异常及脑细胞凋亡,补阳还五汤与黄芪桂枝五物汤均能改善上述异常状态,与黄芪桂枝五物汤组比较,补阳还五汤组各指标均更接近假手术组,效果要优于黄芪桂枝五物汤。结论:补阳还五汤和黄芪桂枝五物汤与脑卒中气虚血瘀证都有相关性,但补阳还五汤与缺血性脑卒中气虚血瘀证之间具有更大的关联性。     

补阳还五汤对沙鼠脑缺血后海马CA1区细胞形态结构与细胞凋亡的影响

目的研究补阳还五汤对沙鼠脑缺血损伤后海马CA1区细胞形态结构与细胞凋亡的影响.方法采用沙土鼠双侧颈总动夹闭脑缺血再灌注模型,于再灌注后120 h取大脑半球,在解剖显微镜下定位海马,切取海马,切片机切片后观察神经细胞超微结构和神经细胞凋亡情况.结果补阳还五汤可使海马CA1区神经细胞和毛细血管变性、死亡减轻,并可使海马CA1区神经细胞的凋亡数目明显减少.结论补阳还五汤可能通过减轻神经元的溃变、死亡,减少神经细胞的凋亡而发挥抗脑缺血的作用.     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤行为和病理改变的保护

目的 :观察补阳还五汤 (BHD)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法 :采用非开颅可逆性大鼠大脑中动脉栓塞法造成大鼠脑缺血再灌注损伤。补阳还五汤小剂量 ( 1 0 g·kg- 1)或大剂量 ( 2 0 g·kg- 1)实验前连续灌胃给药 7d。结果 :补阳还五汤可显著减轻神经功能障碍及脑组织病理损伤 ,明显降低脑组织含水量和脑梗塞面积。结论 :补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

补阳还五汤对大鼠血管源性脑水肿的抗应激治疗作用

目的观察补阳还五汤对大鼠血管源性脑水肿(vasogenic brain edema,VBE)的应激治疗作用。方法 (1)48只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、补阳还五汤治疗组、参附生脉汤治疗组(阳性药对照);(2)采用腹腔注射去氧肾上腺素制成血管源性脑水肿动物应激模型,中药治疗组造模前2h灌胃相应中药复方,正常对照组及模型对照组造模前2h灌胃等体积温开水。于造模后30min和3h分别观察大鼠的血糖、肛温、血压等指标变化;造模后30min及3h各处死大鼠,断头取脑,测量脑组织干湿重,计算出大鼠脑组织含水量,测量其血浆MDA含量及SOD活性。结果模型组大鼠出现相应的症状,说明大鼠血管源性脑出血模型造模成功。补阳还五汤组及参附生脉汤组的血压显著低于模型组的血压,补阳还五汤组血压也显著低于参附生脉汤组(P0.01)。补阳还五汤组与参附生脉汤组血糖与肛温显著低于模型组(P0.001);补阳还五汤组的脑组织含水量低于模型组及参附生脉汤组(P0.05)。补阳还五汤组可降低MDA含量、升高SOD活性,与模型组比较差异有显著性(P0.05)。结论补阳还五汤组对血管源性脑水肿的抗应激干预治疗效果显著,其作用机理是通过降低应激反应引起的血糖升高、降低血压、减轻大鼠脑水肿等环节起作用。     

超微补阳还五汤对脑缺血模型大鼠SOD、MDA及NGF的影响

目的:探讨超微补阳还五汤对脑缺血模型大鼠脑组织神经生长因子(NGF)、血浆丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法:建立脑缺血模型,药物治疗后测定血液中SOD及MDA含量及用免疫组织化学法观察NGF的表达。结果:脑缺血后MDA明显增加,SOD活性降低;超微补阳还五汤能明显降低组织内的MDA和增加SOD活性,并增强NGF的表达,超微补阳还五汤以1/2传统生药剂量时即可达到传统补阳还五汤的效果,等剂量时效果明显增加。结论:超微补阳还五汤能通过降低组织内的MDA和增加SOD活性,并增强NGF的表达对大鼠脑缺血损伤进行保护,其等效剂量优于传统补阳还五汤。     

Effects of buyang huanwu decoction on changes of oxygen free radical and cell ultrastructure in rats with experimental brain edema]

Effects of Buyang Huanwu decoction (BYHWD) on the change of oxygen free radical and cell ultrastructure were observed in rats with acute brain edema induced by pertussis vaccine (PV). The results showed that BYHWD could decrease significantly the contents of brain tissue protein and malondialdehyde, and raise the declining of superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities. Also, BYHWD could reduce markedly the transport of pinosome in the left cerebral capillary endothelial cell, and lessen slightly the swelling of cerebral perivascular astrocyte processes and mitochondria in neuron. There was no significant reduction of water content in the left hemisphere on intravenous administration of BYHWD before and after injecting PV; while that in the right hemisphere, it was less remarkable in BYHWD group than that in control (P < 0.05). Hence, it suggests that BYHWD had the evident effects in antagonizing the damage of blood brain barrier and encephalic cell caused by free radical in brain edema.     

补阳还五汤治疗缺血性中风药理作用机制的研究进展

近年来,国内学者对补阳还五汤抗脑缺血的药理作用进行了大量研究,结果表明：补阳还五汤可通过改善血液流变性、提高脑组织能量代谢、抗炎、抗自由基损伤、保护血脑屏障,促进神经发生、保护神经元等多种途径抗脑缺血损伤。文章就补阳还五汤治疗缺血性中风药理作用机制作一综述。     

补阳还五汤抗缺氧再给氧乳鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的：观察含补阳还五汤的大鼠血清对缺氧24h再给氧4h后新生乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及对一氧化氮（NO）含量的影响。方法：采用Annexin V-PI双标记方法（以流式细胞仪和ELISA法）检测细胞凋亡，以紫外分光光度法测定心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放水平，采用改良Yu方法测定NO浓度，用Ohkawa法测定硫代巴比妥酸（TBARS）反应物质含量。结果：补阳还五汤药物血清能显著抑制心肌细胞的凋亡及LDH释放，降低培养细胞上清液中NO和TBARS水平，其效应呈剂量依赖关系。结论：补阳还五汤具有抗缺氧再给氧心肌细胞凋亡作用，其机制与清除氧自由基和NO特性有关。     

银杏叶制剂对正常脑温大鼠脑缺血治疗的实验研究

目的：观察常温下银杏叶提取物（GBF）对脑缺血组织抗氧化酶，脂质过氧化物及脑含水量的影响。方法：24只Wistar大鼠随机分为假手术组，脑缺血对照组及GBE治疗组（n=8)，制备正常脑温大鼠大脑中动脉缺血／再灌注模型，观察脑缺血组织超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)，还原型谷胱甘肽（GSH），丙二醛（MDA）含量及脑含水量变化。结果：对照组SOD，GSH－Px,GSH水平低于手术组，治疗组高于对照组（P＜0．01或P＜0．05），对照组MDA水平高于假手术组，治疗组低于对照组（P＜0．01），对照组脑含水量高于假手术组，治疗组低于对照组（P＜0．01或P＜0．05），结论：正常脑温下，国产GBE能抑制脑缺血时自由基的过多产生和脂质过氧化反应，减轻脑水肿和血脑屏障破坏，保护脑缺血组织。     

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血再灌注后脑组织热休克蛋白70表达的影响

目的 :比较补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方 ,于缺血15min再灌注 4 8h后 ,以Northernblot检测脑组织HSP70mRNA的表达 ,以Westernblot检测其蛋白表达。结果 :沙土鼠脑缺血再灌注后 ,脑组织HSP70mRNA和蛋白表达显著增加 ,补阳还五汤及其有效部位组方可使脑缺血再灌注后HSP70mRNA表达减少 ,补阳还五汤的抑制作用强于有效部位组方 ;但两者对脑缺血再灌注后HSP70蛋白表达的增加均无明显影响。结论 :补阳还五汤及其有效部位组方可能通过抗缺血作用而抑制了缺血后HSP70mRNA的表达。     

针刺对脑缺血及再灌注家兔脑水肿、自由基病理学损伤的保护作用及相关性分析

目的:探讨针刺对实验性脑缺血及再灌注家兔脑水肿、自由基病理学损伤的影响及相关性分析。方法:利用皮瓣包埋方法结扎椎底动脉,造成急性不完全性脑缺血及再灌注模型,给予针刺治疗观察其对实验性脑缺血再灌注家兔的脑组织含水量、自由基含量及Ca2 含量的对比性观察。结果:脑缺血及脑缺血再灌注组均存在明显的脑组织水肿及自由基含量的升高,以缺血再灌注组最为严重(P<001),Ca2 含量增加则以缺血6h组最为显著,并且缺血再灌注组的自由基水平与脑水肿具有明显的相关性(r=0.8076P<0.05)。针刺可明显改善上述指标。尤以缺血再灌注组为著。结论:针刺对实验性脑缺血再灌注家兔脑水肿、自由基病理学损伤具有保护作用。     

补阳还五汤有效部位对局灶性脑缺血再灌注后caspase表达的作用

目的 研究补阳还五汤中4类有效部位抗脑缺血再灌注损伤作用是否是通过抑制脑组织caspase表达而实现的.方法 采用大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,缺血2 h再灌注46 h,分别于缺血前和缺血后12、24、36 h给予由补阳还五汤提取的生物碱、苷、多糖和苷元,以尼莫地平为对照药.以免疫组化法检测caspase-1、caspase-3、caspase-8蛋白表达.结果 脑缺血再灌注后,缺血侧脑组织caspase-1、caspase-3蛋白表达增强,caspase-1主要表达在脉络膜,caspase-3在海马、皮质和髓质均有表达.补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元均可抑制caspase-1表达,尼莫地平对caspase-1表达无显著影响.生物碱可抑制海马和髓质区caspase-3表达,苷和苷元可抑制海马、皮质和髓质caspase-3表达,尼莫地平可抑制海马和髓质caspase-3表达,而多糖对其无显著影响.各组caspase-8表达均无显著差异.结论 补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元可能通过抑制caspase-1表达,减少炎性细胞因子的产生,从而对抗缺血后炎症反应.生物碱、苷和苷元可能通过抑制caspase-3表达,抑制缺血后神经元凋亡,从而对抗神经元迟发性死亡.生物碱、苷、多糖和苷元可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的主要物质基础.     

牛磺酸对大鼠急性脑缺血的保护作用

采用结扎大鼠两侧颈总动脉及迷走神经的方法,造成大鼠急性不完全性脑缺血模型。此方法简单易行,损伤少,结果可靠。缺血组与假手术组相比,有明显的脑水肿,脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性下降,过氧化脂质(MDA)含量增多。给大鼠ip牛磺酸300mg/kg,可明显改善上述改变,对脑缺血组织具有保护作用。牛磺酸10～50mmol/L对大鼠红细胞膜有明显的稳定作用,且随剂量增加而加强。牛磺酸可能通过此作用稳定脑神经细胞膜及大脑微细血管膜,降低其通透性,从而减轻脑水肿。