桥本甲状腺炎及正常甲状腺组织褪黑素受体亚型基因表达差异的研究

目的　研究成人桥本甲状腺炎及甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织褪黑素受体亚型基因表达的差异及意义。方法　取成人桥本甲状腺炎患者手术切除的甲状腺组织及甲状腺腺瘤瘤旁1. 0cm外正常甲状腺组织,抽提总RNA,合成mt1、MT2 受体引物,用逆转录多聚酶链反应半定量分析褪黑素受体亚型mRNA表达的改变。结果　成人桥本甲状腺炎、甲状腺腺瘤瘤旁正常甲状腺均存在mt1 受体表达,未检测到MT2 受体亚型。桥本甲状腺炎甲状腺组织mt1 受体表达量较正常甲状腺组织明显减少,统计学分析有显著性差异(P<0. 05)。结论　桥本甲状腺炎发病可能与mt1亚型受体抑制有关。褪黑素免疫调节作用可能通过mt1 受体介导。     

甲状腺滤泡细胞癌组织褪黑素受体表达的研究

目的研究成人甲状腺滤泡细胞癌及癌旁正常甲状腺组织褪黑素受体(MR)表达的改变及意义。方法选取第二军医大学长征医院2004年2月至2005年6月手术的成人甲状腺滤泡细胞癌组织及癌旁正常组织,用放射配体结合法检测肿瘤组织MR表达,用逆转录-聚合酶链反应半定量分析MR亚型mRNA表达的改变。结果甲状腺滤泡细胞癌组织125I褪黑素(Mel)特异结合Scatchard分析结果为最大结合容量(Bmax)(0.63±0.07)fmol/mg,平衡解离常数(Kd)值为(45.3±9.3)pmol/L;正常甲状腺组织Bmax(0.58±0.04)fmol/mg,Kd值为(43.5±8.2)pmol/L。甲状腺滤泡细胞癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2受体表达;甲状腺滤泡细胞癌MT2受体亚型表达量比正常甲状腺组织显著增加(P<0.05)。结论褪黑素受体亚型MT2与甲状腺滤泡细胞癌的发生发展有一定关联。     

G蛋白α亚基mRNA在不同甲状腺疾病的表达

目的　观察G蛋白α亚基mRNA在不同甲状腺疾病的表达。方法　收集手术切除的甲状腺组织包括Graves病 5例、结节性甲状腺肿 7例、正常功能甲状腺腺瘤 6例和甲状腺乳头状癌 5例 ,以腺瘤周围组织作为正常甲状腺组织对照 ,观察刺激性G蛋白 (Gs)和抑制性 (Gi)α亚基的表达。结果　 (1 )GsαmRNA的表达 :甲状腺乳头状癌 (1 67± 0 2 5)较正常甲状腺组织 (1 1 0± 0 1 4 )和结节性甲状腺肿 (0 96± 0 31 )明显增高 (P <0 0 5和P <0 0 1 ) ,Graves病 (1 47± 0 1 1 )和正常功能甲状腺腺瘤 (1 36± 0 2 8)均显著高于结节性甲状腺肿 (P <0 0 5) ,但与正常甲状腺组织表达水平相似 ;(2 )Giα 2mRNA的表达 :Graves病显著低于结节性甲状腺肿 (0 68± 0 2 6比 1 1 5± 0 35 ,P <0 0 5) ;(3)Giα 1和Giα 3mRNA在不同甲状腺疾病的表达相似。结论　Gs蛋白α亚基的高表达可能在甲状腺乳头状癌的发病中起重要作用 ,不同疾病时甲状腺G蛋白α亚基具有不同的表达水平     

人外周血淋巴细胞和粒细胞褪黑素受体亚型mt1 的检测

目的检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体(MR)亚型mt1和其细胞内定位.方法分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞,应用RT-PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA,阳性产物用自动测序仪测序;同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片,应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布.结果 RT-PCR产物电泳显示人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带,片段长度约370 bp,测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合;免疫组化结果显示人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白,分布于细胞膜、细胞浆和细胞核,以细胞膜和细胞浆为主.结论人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官,提示褪黑素在生理及病理情况下可能对免疫系统有调节作用.     

人外周血淋巴细胞和粒细胞褪黑素受体亚型mt1 的检测

目的 检测人外周血淋巴细胞和粒细胞的褪黑素受体(MR)亚型mt1和其细胞内定位。方法 分离出健康成年人外周血淋巴细胞和粒细胞，应用RT-PCR技术分别检测其亚型mt1的mRNA，阳性产物用自动测序仪测序；同时将所分离的淋巴细胞和粒细胞制成细胞涂片，应用免疫组化染色检测mt1在淋巴细胞和粒细胞上的分布。结果 RT-PCR产物电泳显示：人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1阳性条带，片段长度约370bp，测序结果显示扩增产物与GenBank的人mt1受体亚型的基因序列相吻合；免疫组化结果显示：人外周血淋巴细胞和粒细胞均存在mt1受体蛋白，分布于细胞膜、细胞浆和细胞核，以细胞膜和细胞浆为主。结论 人外周血淋巴细胞和粒细胞中均存在MR的亚型mt1,外周血淋巴细胞和粒细胞为褪黑素作用的外周靶器官，提示褪黑素在生理及病理情况下可能对免疫系统有调节作用。     

甲亢甲状腺细胞单层培养检测TSAb条件的探讨和临床应用

采用PEG粗提IgG刺激甲状腺细胞,通过测定甲状腺细胞合成cAMP的量,探讨Graves病甲状腺组织作为TSAb测定靶细胞的最佳条件和临床意义。结果,Graves病甲状腺细胞同正常甲状腺细胞一样对IgG的刺激具有良好的反应性。实验条件以原代培养72小时,血清用量250μl和刺激时间4小时较为适宜。以此标准检测TSAb的阳性率在Graves病未治疗组和复发组分别为88％(22/25)和81.9％(18/22),缓解组为45.8％(11/24);桥本病为20％(1/5);单纯性甲状腺肿组和对照组TSAb均阴性。提示Graves病甲状腺组织是检测TSAb的理想靶细胞,用此法测定自身免疫性甲状腺疾病患者TSAb的敏感性与特异性均较高。     

甲状腺特异转录因子1、主要组织相容性复合物1在自身免疫性甲状腺疾病时甲状腺组织中的表达

应用免疫组化检测主要组织相容性复合物1(MHC-1)、甲状腺特异转录因子1(TTF-1)在Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)甲状腺滤泡上皮的表达.结果显示MHC-1、TTF-1在GD、HT的表达显著强于对照组,这种表达差异在GD、HT的发病中可能起重要作用.     

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达及意义

目的探讨凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax在Graves病(GD)和桥本氏病(HT)中的表达及意义。方法取外科手术切取的GD及HT病人甲状腺组织标本,颈部手术时取正常甲状腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测甲状腺标本Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达和分布状况。结果(1)Fas/FasL在GD和HT甲状腺滤泡上皮细胞表达均较正常对照组增高(P<0.01)。(2)在GD甲状腺滤泡上皮细胞Bcl-2及Bax表达明显高于HT组及正常对照组,以Bcl-2表达强度显著高于同组Bax(P<0.01),而在HT,Bcl-2表达强度与正常对照组比较差异无统计学意义。(3)GD与HT相比较,GD甲状腺滤泡细胞及浸润淋巴细胞Fas,Bcl-2抗原表达均强于HT,但其浸润淋巴细胞表达强度明显低于同组甲状腺滤泡细胞(均P<0.05)。结论Fas/FasL高表达和Bcl-2的低表达可能引起HT甲状腺滤泡上皮细胞的凋亡。在GD,Fas、Bax诱导细胞凋亡的作用可能被高表达Bcl-2对抗,从而致甲状腺体积增大、功能亢进。此外,Bcl-2与Bax表达强度的比值对于凋亡的调控有重要影响作用。     

Graves病甲状腺共刺激分子GL50-ICOS的表达及其免疫病理意义

目的 研究共刺激分子GL50-ICOS在Graves病(GD)甲状腺组织中的表达及其免疫病理意义.方法运用细胞培养、流式细胞术、RT-PCR、Western印迹和免疫组化技术,检测GD甲状腺组织和原代培养的甲状腺滤泡细胞(TFC)共刺激分子GL50和ICOS的表达.结果 (1)与正常同龄对照相比,CD4+CD28-T细胞群体在GD患者外周血中显著升高,其表面ICOS表达上调.(2)RT-PCR显示,GD患者甲状腺组织中有ICOS mRNA表达,与对照非毒性甲状腺肿(NTG)组相比具有统计学差异(P＜0.01).(3)Western印迹显示,GL50蛋白在10例GD患者组织中全部表达,较对照组差异有统计学意义(P＜0.01).(4)与对照甲状腺腺瘤组相比,GL50在20例GD患者组织切片中全部检出,而对照组无阳性表达(P＜0.01).(5)炎性细胞因子刺激体外原代培养的甲状腺滤泡细胞表面上调表达GL50(P＜0.05).结论共刺激分子GL50-ICOS在Graves病甲状腺组织异常表达.     

Graves病异常表达HLA-DR抗原的甲状腺上皮细胞与血清TSAb的关系

用免疫组化法检测正常甲状腺,未见HLA-DR抗原阳性的甲状腺上皮细胞(TEC),在所有被检Graves病(GD)甲状腺组织均可见到TEC不同程度地表达DR抗原。GD患者TEC DR抗原的表达水平与血清甲状腺刺激性抗体(TSAb)水平明显相关(r=0.357,P<0.05),提示GD患者血TSAb水平与异常表达DR的甲状腺上皮细胞有密切关系。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.