人红白血病细胞株c-myc/N-ras/P_(53)mRNA的表达及其与细胞生物学特性的关系

本实验用一定浓度的苦参碱作用Ｋ５６２细胞１６ｈ, ２４ｈ,４８ｈ,采用分子生物学Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和Ｄｏｔ Ｂｌｏｔ杂交技术分析ｃ－ｍｙｃ,Ｎ－ｒａｓ及Ｐ５３ ｍＲＮＡ在Ｋ５６２细胞诱导分化过程中表达水平改变,以探讨其表达水平与细胞生物学特性的关系。结果显示苦参碱作用Ｋ５６２细胞２４ｈ时,Ｎ－ｒａｓ基因ｍＲＮＡ表达活化;Ｐ５３－基因表达增强：作用４８ｈ时,ｃ－ｍｙｃ　ｍＲＮＡ水平表达明显受抑。说明苦参碱在诱导Ｋ５６２细胞分化启动时,能明显改变早期相关癌基因的表达。提示ｃ－ｍｙｃ,Ｎ－ｒａｓ和Ｐ５３等癌基因是一类重要的细胞增殖、分化调控因素。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c—myc,N—ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探讨对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２３１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性，Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌六     

红白血病细胞株c-mYc/N-ras/P53 mRNA的表达及其与细胞生物学特性的关系

本实验用一定浓度的苦参碱作用Ｋ５６２细胞１６ｈ,２４ｈ,４８ｈ,采用分子生物学Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和Ｄｏｔ Ｂｌｏｔ杂交技术分析ｃ－ｍｙｃ,Ｎ－ｒａｓ及Ｐ５３ ｍＲＮＡ在Ｋ５６２细胞诱导分化过程中表达水平改变,以探讨其表达水平与细胞生物学特性的关系。结果显示苦参碱作用Ｋ５６２细胞２４ｈ时,Ｎ－ｒａｓ基因ｍＲＮＡ表达活化;Ｐ５３基因表达增强;作用４８ｈ时,ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ水平表达明显受抑。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．     

微矩阵基因芯片筛选喉鳞癌相关基因的研究

目的：应用基因微矩阵方法筛选喉鳞癌相关基因。方法：按一步法抽提喉鳞癌和对照喉正常组织的总ＤＮＡ并纯化ｍＲＮＡ;将４０９６种人类基因ＰＣＲ产物用ＣａｒｔｅｓｉａｎＰｉｘｓｙｓ７５００点样仪按微矩阵排列点样于化学涂层的载玻片上,制成基因芯片;将等量的对照组织和喉鳞癌组织ｍＲＮＡ分别逆转录合成荧光分子掺入的ｃＮＤＡ－链做探针,混合后杂交上述基因芯片,经严格洗片后用ＳｃａｎＡｒｒａｙ３０００扫描仪扫描芯片     

电针和福尔马林诱发大鼠脑c—fos基因表达研究

目的：从分子水平探讨电针镇痛的机理。方法：采用ＲＮＡ斑点杂交技术比较电针与福尔马林刺激时大鼠脑内ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的改变,并观察吗啡对ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：电刺激具有明显的镇痛作用。电针和福尔马林刺激后均可诱发ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达增强。吗啡能明显抑制福尔马林诱导ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达,而对电针诱导的ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达则无明显影响。结论：ｃ－ｆｏｓ基因可能参与痛觉调     

MRP基因表达对NSCLC术后化疗的影响

目的 探讨多药耐药性相关蛋白基因－ＭＲＰ基因（ｍｕｌｔｉ－ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅ）对肺癌患者术后化疗疗效的影响。方法 应用原位分子杂交结合免疫组化技术检测３５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＳ）根治术后化疗患者石蜡组织标本中肺癌细胞ＭＲＰ基因ｍＲＮＡ表达,并回顾性随访。结果 ３５例ＮＳＣＬＣ患者肺癌细胞均有不同程度的ＭＲＰ基因ｍＲＮＡ表达,其表达水平     

抗肿瘤核酶的研究进展

20世纪 8 0年代初 ,由美国科学家Ｃｅｃｈ和Ａｌｔ ｍａｎ发现了核酶 (Ｒｉｂｏｚｙｍｅ) ,它是一类具有生物催化活性的ＲＮＡ分子 ,可通过碱基配对特异性地与靶ＲＮＡ底物结合 ,定点切割ｍＲＮＡ靶分子 ,是一类很有希望的基因功能阻断剂 ,被形象地称为“分子剪刀”。它在抗病毒、抗肿瘤等领域的应用研究是目前基因治疗中的一个热点。本文简述核酶在抗肿瘤应用中的研究进展。1　核酶抗ｒａｓ基因ｒａｓ癌基因在细胞发育和肿瘤发生中起重要作用。ｒａｓ基因家族有Ｈ -ｒａｓ、Ｎ -ｒａｓ和Ｋ -ｒａｓ ,它们编码的蛋白质参与信号传导途径。肿…     

原癌基因K-ras mRNA的体外核酶定点切割

目的：确定人工设计的梅核Ｒｘ１９９对原癌基因Ｋ－ｒａｓ ｍＲＮＡ的体外切割活性，为Ｋ－ｒａｓ特异性核酶的体内应用提供依据。方法：利用ＤＮＡ重组技术构建Ｋ－ｒａｓ外显子１及核酶Ｒｚ１９９的体外转录质粒，以Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行转录获得核酶Ｒｚ１９９对其靶ＲＮＡ分子进行切割。结果：Ｋ－ｒａｓ体外转录体为２５４ｎｔ的ＲＮＡ分子，能被核酶Ｒｚ１９９切割成大小分别为９０，１６４ｎｔ的２个片段。结论：梅核Ｒａ１     

重组IL—1受体拮抗剂单克隆抗体的鉴定

采用点印迹法与Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术对ｒＩＬ－１ｒａ ＭｃＡｂｓ进行了鉴定。结果表明；ｒＩＬ－１ｒａ ＭｃＡｂ ２Ｅ４在点印迹中识别信号为阳性，经转移电泳后可在ＮＣ膜上特异性识别ｒＩＬ－１ｒａ，ＰｃＡｂ对照识别结果进一步表明Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术的高度敏感性及ＭｃＡｂ ２Ｅ４的高度特异性。     

重组IL-1受体拮抗剂单克隆抗体的鉴定

采用点印迹法与Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术对ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂｓ进行了鉴定。结果表明：抗ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂ２Ｅ４在点印迹中识别信号为阳性（＋＋），经转移电泳后可在ＮＣ膜上特异性识别ｒＩＬ－１ｒａ（２０ｋｄ）；ＰｃＡｂ对照识别结果进一步表明Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术的高度敏感性及ＭｃＡｂ２Ｅ４的高度特异性。此株单抗的鉴定成功将有助于进一步认识ＩＬ－１的生物学活性，特别是在炎症疾病中的病理作用，以指导ｒＩＬ－１ｒａ治疗炎症的临床应用     

原癌基因c-fos在大鼠缺血再灌注肾组织中的表达

目的：探讨原癌基因ｃ－ｆｏｓ在缺血再灌注肾脏中表达情况及其在急性缺血性肾脏损伤修复中的作用。方法：用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，检测急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的分布、强度及时程动力学等指标。结果：缺血再灌注早期即可诱导肾组织中ｃ－ｆｏｓ的高效表达，且ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达早于Ｆｏｓ蛋白；Ｆｏｓ蛋白表达出现于再灌注后１ｈ，２￣４ｈ达高峰，８ｈ开始锐减，     

谷氨酸受体在大鼠c—fos基因的表达及其与癫痫易感性的关系

为探讨Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体在ｃ－ｆｏｓ基因表达及其与癫痫易感性的关系，我们以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法测定结果显示：（１）外源性ＮＭＤＡ可诱导脑细胞ｃ－ｆｏｓ基因的ｍＲＮＡ表达；竞争性或非常竞争性ＮＭＤＡ受体拮抗剂可完全阻断ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲＮＡ表达。（２）ＮＭＤＡ诱导脑内ｃ－ｆｏｓ的ｍＲＮＡ表达随神经元发育呈上升趋势，于体外培养２４天达高峰。（３）在发育中，听源性癫痫易感大鼠脑     

r—干扰素对过度增生的血管平滑肌细胞癌基因表达的抑制作用

本实验建立了兔腹主动脉球囊扩张（ＢＡ）动物模型。以地高辛标记的ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因探针进行ＢＡ术后血管段组织的原位杂交，以生物素标记的ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ探针以经ＢＡ组织培养液刺激的、培养的血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）进行细胞的原位杂交。结果显示：（１）ＢＡ术后再狭窄的血管段中ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ－Ｎ－ｒａｓ三种癌基因表达均增高，而且表达颗粒主要分布于粥样斑块再狭窄     

ODC反义RNA对人肺鳞癌细胞c—myc及c—Ha—ras基因表达的影响

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ＯＤＣ）反义ＲＮＡ逆转人肺鳞癌细胞ＬＴＥＰ７８（Ｌ７８）恶性表型的分子机理。方法：核酸杂交，免疫细胞化学染色等。结果：在ＯＤＣ反义基因稳定整合、ＯＤＣ反义ＲＮＡ高效表达的转染细胞株中，ｃｍｙｃ及ｃＨａｒａｓｍＲＮＡ的表达比Ｌ７８亲本细胞显著下降；ｒａｓＰ２１蛋白的表达也受到明显抑制。结论：ＯＤＣ反义ＲＮＡ引起细胞内多胺耗竭，对ｃｍｙｃ及ｃＨａｒａｓ基因表达有明显的下调作用，这可能是其逆转人肺鳞癌细胞恶性表型的重要机制之一。     

P53,P21ras,PCNA,c—erbB—2,nm23／NDPK在胃癌,大肠癌中表达的比较研究

目的：对胃肠癌Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３／ＮＤＰＫ，ＰＣＮＡ过表达进行对比分析，探讨胃肠癌中多种基因单独、共同表达及肿瘤发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法，同时检测５５例胃癌和６０例大肠癌中Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｎｍ２３／ＮＤＰＫ、ＰＣＮＡ的表达。结果：Ｐ５３、Ｐ２１ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＰＣＮＡ过表达及ｎｍ２３／ＮＤＰＫ低表达与胃肠癌浸润     

大鼠压力超负荷性心肌肥厚早期c—fos mRNA表达的变化

采用核酸分子杂交观察腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚早期左室ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达改变。实验结果显示：正常左室仅有少量ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达,腹主动脉缩窄后１ｈｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达明显增加,３ｈ达高峰,１２ｈ明显下降。从而表明在压力超负荷性心肌肥厚模型中早期有ｃ－ｆｏｓ原癌基因的快速短暂表达。     

SD鼠未成熟心肌细胞缺氧/复氧期c-fos,c-myc mRNA的表达

目的 研究未成熟细胞缺氧／复氧期间ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ的表达。方法 建立Ｓ大鼠未成熟心肌细胞原代培养及缺氧／复氧模型应用原位分子杂交技术,观察ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ在心肌细胞核内的表达。结果 未成熟心肌细胞在缺氧前ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｍＲＮＡ无表达,对照（１）组和（２组）ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ在缺氧１２０ｍｉｎ开始表达,复氧６０ｍｉｎ表达程度进一步升高。牛磺酸保护组（Ⅲ）组在缺氧１     

云锡肺癌、其他人群肺癌N-ras,C-myc和C-fos原位分子杂交检测的比较研究(摘要)

用原位分子杂交的方法检测２０例云锡矿工肺癌（Ｍ组），２０例非云锡地区其他人群肺癌（ＮＭ组）以及１０例死于非肺部疾患者的尸解肺组织（Ｃ组）中Ｎ－ｒａｓ，Ｃ－ｍｙｃ及Ｃ－ｆｏｓ癌基因的过度表达情况，结果发现：Ｍ组中５５％（１１／２０）出现Ｎ－ｒａｓ癌基因...     

胃癌高表达基因gcys-18的部分cDNA克隆

目的：分离克隆测序胃癌高表达基因ｇｃｙｓ－１８的部分ｃＤＮＡ．方法：采用ｍＲＮＡ差异展示技术从胃癌ＧＣ７９０１与胃粘膜ＧＥＳ－１细胞株中分离出一差异表达基因片段,对其命名,并进行克隆、测序及ＧｅｎＢａｎｋ检索;以此片段作探针与细胞株总ＲＮＡ进行打点杂交．结果：从差示ＰＣＲ电泳凝胶中分离出大小为４１６ｂｐ的差异表达片段,命名为ｇｃｙｓ－１８;ＲＮＡ打点杂交证实ｇｃｙｓ－１８在ＧＣ７９０１中呈高表达,