聚乳酸-壳聚糖纤维/羟基磷灰石-硅酸钙复合支架材料的细胞相容性

背景：实践证明,有机和无机材料单独应用都不是理想的支架材料。聚乳酸具有良好的生物相容性、生物降解性和生物吸收性,聚乳酸类复合材料将成为21世纪最重要的生物复合材料之一。 目的：观察复合支架材料聚乳酸-壳聚糖纤维/羟基磷灰石-硅酸钙对成骨细胞黏附、增殖、分化的影响。 方法：取新生24 h内Wistar大鼠的颅盖骨,采用改良胶原酶消化法进行成骨细胞原代培养。通过倒置相差显微镜、苏木 精-伊红染色、碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色对获得的细胞进行生物学特性的观察与鉴定。然后将第3代细胞与聚乳酸/壳聚糖纤维、聚乳酸-壳聚糖纤维/硅酸钙、聚乳酸-壳聚糖纤维/羟基磷灰石-硅酸钙三种支架材料体外复合培养。培养3,6,9 d后,采用倒置相差显微镜观察材料周边的细胞形态,通过碱性磷酸酶活性测定法和MTT法观察3种支架材料对细胞分化、增殖的影响。 结果与结论：三种材料均有利于成骨细胞的黏附、生长、分化、增殖,而聚乳酸-壳聚糖纤维/羟基磷灰石-硅酸钙复合支架材料较聚乳酸/壳聚糖纤维、聚乳酸-壳聚糖纤维/硅酸钙支架材料促进成骨细胞的分化增殖效果更好,证实其生物相容性好,有望成为一种新型的骨组织工程支架材料。 关键词：复合支架;细胞相容性;生物材料;成骨细胞;组织工程支架材料;骨组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.016     

胶原-纳米羟基磷灰石复合支架的细胞相容性

背景：观察成骨细胞在生物材料上的形态、增殖和分化等项目,可评估生物支架材料的生物相容性。 目的：观察复合支架材料纳米羟基磷灰石/胶原对成骨细胞增殖、分化的影响。 方法：取新生24 h内Wistar大鼠的颅盖骨,采用改良胶原酶消化法进行成骨细胞原代培养,取第3代细胞与纳米羟基磷灰石/胶原支架或普通羟基磷灰石材料体外复合培养。培养3,6,9 d后,观察材料周边的细胞形态及支架材料对细胞分化、增殖的影响。 结果与结论：纳米羟基磷灰石/胶原材料较普通的羟基磷灰石材料更有利于成骨细胞的黏附、生长、分化、增殖,证实其生物相容性更好,有望成为一种新型的骨组织工程支架材料。     

定制型聚羟基乙酸/聚乳酸支架与犬骨髓基质细胞的体外复合培养

背景：聚羟基乙酸、聚乳酸均属于脂肪族聚酯,是一种具有一定机械强度和良好成型性能的生物可降解材料,在体内无毒,不聚积,且有良好的生物相容性。 目的：应用CAD、CAM、快速成型和激光扫描技术等组成的数字医学系统制作聚羟基乙酸/聚乳酸三维仿真的下颌支髁突形态模型,并检测其细胞生物相容性。 方法：通过CT扫描获得犬头颅骨影像信息,以CAD和CAM实现下颌骨髁突形态的三维重建影像,快速成型技术获得下颌骨髁突的树脂阳模。阴阳模转换获得相应石膏阴模,聚羟基乙酸/聚乳酸在阴模内成型。抽取犬髂骨骨髓获得骨髓基质细胞,与定制型聚羟基乙酸/聚乳酸支架在体外复合培养,检测支架材料的生物相容性。 结果与结论：定制型聚羟基乙酸/聚乳酸支架和影像原型比较,当测试点误差小于1.0 mm时,复合率大于95%。通过CAD、CAM、快速成型技术、预压成型技术和激光扫描技术等组成的数字医学系统可实现颅颌面下颌骨髁突形态结构聚羟基乙酸/聚乳酸生物材料的三维仿真。体外复合培养结果表明,定制型聚羟基乙酸/聚乳酸支架和骨髓基质细胞具有良好的生物相容性。     

改性聚乳酸-羟基乙酸/Ⅰ型胶原复合支架的细胞亲和性

背景：聚乳酸-羟基乙酸是一种较好的细胞支架材料,但细胞亲和性较差、机械强度不够等缺点又限制了它的应用。因此,聚乳酸类支架材料的改性是非常必要的。 目的：研究改性聚乳酸-羟基乙酸/Ｉ型胶原复合生物支架的细胞亲和性。 设计、时间及地点：体外对比观察实验,于2005-02/12在遵义医学院中心实验室完成。 材料：利用多聚赖氨酸对聚乳酸-羟基乙酸改性后与Ｉ型胶原构成复合生物支架。 方法：将改性聚乳酸-羟基乙酸/Ⅰ型胶原复合支架与聚乳酸-羟基乙酸支架各12块,分别放入2块24孔培养板中,每孔加1×1011 L-1第2代兔耳软骨细胞悬液100 μL,在37 ℃、体积分数为5%CO2培养箱中培养4 h后,每孔加1 mL含血清DMEM 培养24 h。 主要观察指标：①倒置显微镜下观察改性前后支架空间结构。②观察改性后支架吸附细胞的形态结构。③计算改性前后支架对兔耳软骨细胞的吸附率。 结果：改性后复合支架的粗糙度增加,其细胞吸附率明显高于聚乳酸-羟基乙酸支架组(P < 0.05),细胞形态结构较好。 结论：改性聚乳酸-羟基乙酸/Ｉ型胶原复合生物支架具有较好的细胞亲和性。     

改性聚乳酸-羟基乙酸/Ⅰ型胶原复合支架与兔耳软骨细胞的细胞相容性

背景：聚乳酸-羟基乙酸是一种应用前景较好的细胞支架材料,其亲水性和细胞亲和性较差,因此对其改性很有必要。 目的：观察改性聚乳酸-羟基乙酸/Ｉ型胶原复合支架的亲水性及与兔耳软骨细胞的细胞相容性。 方法：利用多聚赖氨酸对聚乳酸-羟基乙酸改性后与Ｉ型胶原构成改性复合支架,倒置显微镜下观察支架的大体结构。将改性复合支架(实验组)与聚乳酸-羟基乙酸支架(对照组)分别浸泡在双蒸水中,间隔0.5,1,2,4,8,12,24 h后计算吸水率。用酶消化法培养兔耳软骨细胞并传代,取第2代软骨细胞,浓度为1×1011 L-1接种在两种支架上并培养,倒置显微镜下观察细胞的形态和生长情况,采用细胞计数法计算细胞接种24 h后支架对细胞的吸附率;以及采用细胞增殖法(MTT比色试验)分别于1,2,4,6 d测细胞吸光度值。 结果与结论：改性复合支架具有高孔隙率,表面粗糙度较对照组增加。两种支架吸水率在相同时间点比较差异有显著性意义(P < 0.01),说明改性复合支架具有较好的亲水性。第2代软骨细胞接种后24 h,实验组对细胞的吸附率为0.908 0± 0.019 2,对照组为0.733 2±0.047 5,两组比较差异有显著性意义(P < 0.05),说明改性复合支架具有较好的细胞亲和性。软骨细胞在实验组和对照组支架上接种培养后1,2,4,6 d吸光度值比较,差异均有显著性意义(P < 0.05),说明改性复合支架对细胞增殖有显著的促进作用。 关键词：聚乳酸-羟基乙酸;改性;Ⅰ型胶原;软骨细胞;细胞相容性;支架材料;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.001     

MC3T3-E1细胞在改性聚（DL-乳酸）表面的黏附性能*★

背景：聚乳酸是经FDA批准可进入人体的生物可降解材料，因其表面疏水性强，与细胞亲和力差，所显示的生物相容性较差。 目的：观察MC3T3-E1成骨前体细胞在马来酸酐改性聚乳酸和丁二胺改性聚乳酸表面的黏附情况，评价改性聚乳酸的细胞相容性，并与聚（DL-乳酸）对比。 设计、时间及地点：对比实验，于2007-06在重庆大学生物工程学院生物材料与仿生工程研究中心完成。 材料：聚（DL-乳酸）、马来酸酐改性聚乳酸和丁二胺改性聚乳酸为自制；MC3T3-E1细胞株购自上海细胞生物研究所。 方法：采用体外培养细胞的方法，将MC3T3-E1细胞直接接种到聚（DL-乳酸）、马来酸酐改性聚乳酸和丁二胺改性聚乳酸材料上。 主要观察指标：通过细胞形态、细胞增殖、细胞周期、细胞黏附检测比较不同基底材料对MC3T3-E1成骨前体细胞的影响。 结果：MC3T3-E1成骨前体细胞在马来酸酐及丁二胺改性聚乳酸膜上的增殖速率和黏附力大于聚（DL-乳酸）(P < 0.05)；细胞周期测定显示马来酸酐及丁二胺改性聚乳酸膜能促进MC3T3-E1成骨前体细胞从G0期向S期和G2/M期过渡，细胞形态也较为成熟。 结论：马来酸酐改性的聚乳酸和丁二胺改性的聚乳酸能促进MC3T3-E1成骨前体细胞黏附、增殖，并促进其更迅速地从成骨前体细胞向成骨细胞分化，具有比聚乳酸更好的细胞相容性。     

仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原的制备及其细胞相容性

摘要 背景：目前骨组织工程常用的支架材料主要有无机材料、有机高分子材料及天然衍生材料等，上述材料各有优缺点，为了充分发挥各类材料的优势，弥补其不足，目前多采用联合材料制备复合支架。 目的：制备新型仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原，并观察其对骨髓间充质干细胞增殖、黏附及分化的影响。 方法：制备壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原复合支架材料，扫描电镜观察支架材料表面微观形貌；采用真空吸附法将骨形态发生蛋白7多肽与支架材料复合，高效液相色谱仪检测骨形态发生蛋白7多肽在体外的释放规律；将骨髓间充质干细胞接种到复合骨形态发生蛋白7多肽的仿生支架材料上，以未复合多肽的支架材料作为对照，检测支架材料表面细胞增殖、黏附率、生长形态及碱性磷酸酶活性。 结果与结论：壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原支架材料呈多孔状，孔径10~100 µm；骨形态发生蛋白7多肽可以从支架材料中缓慢释出；在复合多肽的仿生支架材料表面，骨髓间充质干细胞的黏附及向成骨细胞方向分化能力均明显强于对照组(P < 0.05)，而增殖能力与对照组差异无显著性意义(P > 0.05)。说明新型仿生支架材料骨形态发生蛋白7多肽/壳聚糖/纳米羟基磷灰石/胶原是一种理想的骨组织工程支架材料，具有良好的细胞相容性。 关键词：支架材料；骨形态发生蛋白7多肽；壳聚糖；胶原；纳米羟基磷灰石；骨组织工程；细胞相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.08.014     

不同支架材料构建组织工程肌腱的性能评价

摘要 目的：总结修复肌腱损伤的主要组织工程支架材料及研究进展。 方法：由第一作者采用电子检索的方式,在CNKI数据库中检索1902-01/2010-10有关生物材料应用于组织工程肌腱支架的研究文章,关键词为“重建肌腱,生物材料,人工肌腱,组织工程,支架材料”。排除重复研究、普通综述或Meta分析类文章,筛选纳入18篇文献进行评价。 结果：来源于自然界的天然生物材料主要有蚕丝、小肠黏膜下层、胶原、衍生肌腱支架材料等,保留了组织正常的三维网架结构,组织相容性好,但力学性能较差、降解速度快。人工合成高分子材料主要为聚乳酸和聚羟基乙酸、聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物、聚磷酸钙纤维等,但存在亲水性低、细胞黏附性能差的不足。 结论：天然及合成高分子材料作为组织工程支架材料都有各自的优缺点,绝大多数还处于研究阶段,尚未应用于临床,因此改进支架材料的性能是目前研究的主要方向之一。 关键词：肌腱;重建;天然高分子材料;人工合成高分子材料;支架材料;生物相容性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.039     

仿生合成梯度含锶磷酸钙骨水泥的体外细胞生物学性能检测

目的：通过在仿生理条件下构建梯度含锶磷酸钙骨水泥，并应用L-929成纤维细胞和幼兔成骨细胞检测含锶磷酸钙骨水泥的体外生物学性能。 方法：实验于2006-11/2007-04在解放军第四军医大学口腔医院颌面外科和西安交通大学金属材料强度国家重点实验室完成。①实验材料：仿生理条件下合成梯度含锶磷酸钙骨水泥。②实验方法：应用了L-929成纤维细胞和成骨细胞两种细胞，将不同浓度的梯度含锶磷酸钙骨水泥分别与两种细胞接触。③评估指标：采用MTT检测法，对细胞增殖活性进行检测，计算细胞相对增殖率，用6级毒性分类法评级；并应用相差显微镜、扫描电镜进行形态学观察。用碱性磷酸酶测定试剂盒检测浸提液对兔成骨细胞功能表达的影响；检测其细胞毒性、促成骨细胞黏附、增殖及表达能力以及生物降解潜能。 结果：仿生理条件下合成的梯度含锶磷酸钙骨水泥无细胞毒性，表面成骨细胞的黏附性良好，增殖活跃，并显示出可能存在良好的生物降解能力。 结论：含锶磷酸钙骨水泥体外细胞生物相容性良好，是安全的新型骨组织工程支架材料。     

超临界流体技术合成的复合型骨替代生物材料：体内外生物学评价

背景：在复合材料内部增加细胞黏附性较好的高分子材料或同骨组织羟基磷灰石成分相似的无机材料,可以改善材料的表面化学结构。过去的十几年,产生和发展了许多合成生物降解支架材料的新技术,虽然超临界流体技术应用在合成支架中时间尚短,但有着其他技术不可比拟的众多优点,目前越发受到学者的重视。 目的：以聚乳酸和同种异体骨粉为原材料,通过超临界流体技术合成复合型骨替代生物材料,评价其生物学特性。 方法：首先将同种异体皮质骨粉与聚乳酸在超临界二氧化碳作用下合成多孔复合型骨生物替代材料。将材料浸提液与成骨细胞系复合培养,体外观察细胞形态、增殖情况;通过材料浸提液皮内注射实验和材料肌袋内埋入实验,体内观察动物的致敏、组织炎症发生情况。 结果与结论：体外大体观察该种复合材料形状、大小、孔隙可控,孔径适中,有较好的硬度,体外实验表明细胞相容性良好,对细胞的增殖无毒副作用;体内实验表明材料植入动物体内未发生致敏反应,组织相容性良好,但无异位成骨作用。说明制备的新型复合骨组织生物材料在细胞学和生物相容性检测上可以满足组织工程支架和骨组织替代的要求,该种合成技术及多孔生物材料有广阔发展前景。 关键词：聚乳酸;同种异体骨;超临界流体技术;复合材料;组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.25.005     

新型组织工程化骨磷酸钙骨水泥/聚乳酸-聚羟基乙酸复合骨髓间充质干细胞修复兔桡骨缺损**☆

背景：前期已成功制备磷酸钙骨水泥/聚乳酸-聚羟基乙酸（calcium phosphate cements /PLGA, CPC/PLGA）生物复合材料，并证实其具有良好的机械强度和生物相容性。 目的：进一步验证CPC/PLGA复合骨髓间充质干细胞作为一种新型组织工程化骨材料修复骨缺损的可行性。 设计、时间及地点：随机对照动物体内观察，于2004-01/2005-12在中南大学湘雅三医院中心实验室完成。 材料：自制CPC/PLGA支架材料，与兔骨髓间充质干细胞复合培养制备组织工程骨。 方法：日本大耳白兔40只，制备桡骨骨缺损模型后随机分成4组，于骨缺损处分别植入组织工程骨、CPC/PLGA复合材料、复合了种子细胞的磷酸钙骨水泥及单纯磷酸钙骨水泥。 主要观察指标：经不同时间的X射线片、组织形态学及电镜观察，了解各组材料的成骨作用。 结果：X射线照片显示组织工程骨组不同时间新骨形成的量均优于其他组，其骨缺损修复的方式和速度均优于其他组；组织学观察到组织工程骨组的成骨细胞及骨小梁出现均早于其他组；电镜结果表明，与其他组相比较，组织工程骨组的成骨速度较快。 结论：种植了骨髓基质干细胞的CPC/PLGA复合物能促进骨组织生长，有望作为一种新型人工骨材料修复骨缺损。     

骨修复用纳米羟基磷灰石/聚酰胺66的体内外生物相容性

背景：采用基于纳米羟基磷灰石溶胶新方法制备纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合材料,该材料提高了纳米羟基磷灰石在聚酰胺66基体中的均匀分布和二者的有效键合,进而有利于改善材料的生物性能,有望成为新型骨修复材料。 目的：评价纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合材料体内外生物相容性。 方法：①将原代培养的成骨细胞与纳米羟基磷灰石/聚酰胺66及聚酰胺66材料复合培养,使用倒置相差显微镜和场发射扫描电子显微镜观察材料周围及表面的细胞形态。②将纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合材料植入兔右侧胫骨,将聚酰胺66作为对照组材料植入兔左侧胫骨。在术后2,8周,取材料周围骨组织进行病理组织切片观察。 结果与结论：①纳米羟基磷灰石/聚酰胺66和聚酰胺66未表现出明显的细胞毒性,纳米羟基磷灰石/聚酰胺66材料周围细胞形态好于聚酰胺66,且纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面细胞数量多于聚酰胺66,在复合培养的第3天差异尤其显著(P < 0.01)。②在植入早期,与纳米羟基磷灰石/聚酰胺66相接的骨组织成骨细胞活跃且该组材料周围的骨形成过程较对照组更快。结果说明纳米羟基磷灰石/聚酰胺66复合材料较聚酰胺66有更好的生物相容性。 关键词：纳米羟基磷灰石/聚酰胺66;聚酰胺66;生物相容性;细胞培养;骨修复材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.08.044     

持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

背景：骨髓基质干细胞来源的成骨细胞是骨髓腔内主要的受力细胞,在人工关节置换病例中,其生命活动状况与假体传导压力有密切关系。 目的：观察持续性压力培养环境对兔骨髓基质干细胞增殖的影响,揭示持续压力致假体松动下沉进展及其置换后活动影响的生物学机制。 设计、时间及地点：随机分组设计,细胞学体外观察,于2004-02/2007-10在解放军第四军医大学骨科研究所完成。 材料：出生1个月的新西兰幼兔1只,体质量0.5 kg,取其骨髓基质干细胞用于实验。 方法：传代培养兔骨髓基质干细胞,将生长良好的第3代骨髓基质干细胞按1×104个/孔随机接种于7块24孔培养板,14 h后细胞完全贴壁,换新鲜含体积分数为10%胎牛血清的DMEM。实验随机将4块培养板分为4组：对照组不予加压,20 kPa持续压力组,60 kPa持续压力组,100 kPa持续压力组分别在规定的时间内每天施以20,60,100 kPa的持续3 h压力。 主要观察指标：四甲基偶氮唑盐法检测培养1,3,5,7 d各组骨髓基质干细胞的吸光度值变化。 结果：除培养第1天外,第3,5,7天各压力组骨髓基质干细胞的吸光度值均低于对照组(P < 0.01)。其中第3天20 kPa持续压力组与60 kPa持续压力组吸光度值差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于100 kPa持续压力组(P < 0.05)。第5天不同持续压力组吸光度值两两比较差异具有显著性意义(P < 0.05),压力越高,吸光度值越低。第7天100 kPa持续压力组吸光度值低于压力20 kPa持续压力组(P < 0.05)。 结论：关节置换后早期患者不宜过早下地,否则将产生持续性应力,可以引起骨髓腔内骨髓基质干细胞的抑止,从而不利于骨质愈合,容易产生假体下沉和松动。     

人工材料在急性运动骨损伤中的应用与表面修饰

摘要 背景：选择合适的表面修饰材料,有针对性的对基质支架材料进行表面改性和表面修饰,提高材料表面的细胞黏附性以及促进细胞的增生是骨组织工程支架材料研究的重要内容。 目的：概述骨组织工程支架材料的运用情况,支架材料表面修饰材料的运用以及修饰方法或途径。 方法：由第一作者检索1995/2010 PubMed数据及万方数据库文章,选择与组织工程支架材料运用及表面修饰相关的文献。 结果与结论：成骨细胞与支架材料的作用依赖于材料的表面特性、局部形态、表面能或化学能等,这些表面特性决定了细胞怎样吸附到材料表面、细胞的定位以及细胞的功能行为等。因此生物材料的复杂性和细胞-生物材料表面的相互作用决定着进行生物支架材料表面修饰的重要性。理想的表面修饰应该兼顾表面拓扑结构、特异性识别、亲水与疏水平衡、蛋白质吸附等各个方面才能得到功能化的新生组织。目前,应用最多的表面修饰材料是Ⅰ型胶原,未来研究中将多种表面修饰材料进行复合发挥材料的互补作用,以及基因疗法和纳米材料的发展,将成为骨组织工程学领域研究的热点问题。 关键词：骨;支架材料;表面修饰;运动损伤;生物材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.03.041     

Compound soft regenerated skull material for repairing dog skull defects using bone morphogenetic protein as an inductor and nanohydroxyapatite as a scaffold**

BACKGROUND：In previous studies of skull defects and regeneration, bone morphogenetic protein as an inductor and nanohydroxyapatite as a scaffold have been cocultured with osteoblasts. OBJECTIVE： To verify the characteristics of the new skull regenerated material after compound soft regenerated skull material implantation. DESIGN, TIME AND SETTING： The self-control and inter-group control animal experiment was performed at the Sun Yat-sen University, China from February to July 2007. MATERIALS： Twenty-four healthy adult dogs of both genders weighing 15–20 kg were used in this study. Nanohydroxyapatite as a scaffold was cocultured with osteoblasts. Using demineralized canine bone matrix as a carrier, recombinant human bone morphogenetic protein-2 was employed to prepare compound soft regenerated skull material. Self-designed compound soft regenerated skull material was implanted in models of skull defects. METHODS： Animals were randomly assigned into two groups, Group A （n = 16） and Group B （n = 8）. Bilateral 2.5-cm-diameter full-thickness parietal skull defects were made in all animals. In Group A, the right side was reconstructed with calcium alginate gel, osteoblasts, and nanometer bone meal composite; the left side was reconstructed with calcium alginate gel, osteoblasts, nanometer bone meal and recombinant human bone morphogenetic protein-2 composite. In Group B, the right side was kept as a simple skull defect, and the left side was reconstructed with calcium alginate gel, osteoblasts, nanometer bone meal and recombinant human bone morphogenetic protein-2 composite. MAIN OUTCOME MEASURES： Bone regeneration and histopathological changes at the site of the skull defect were observed with an optical microscope and a scanning electron microscope after surgery. The ability to form bone was measured by alizarin red S staining. In vitro cultured osteoblasts were observed for morphology. RESULTS： One month following surgery, newly formed bone trabeculae mostly covered the broken ends of the fr     

超临界流体技术复合人工骨生物替代材料修复腔隙性骨缺损☆

背景：复合材料是目前骨组织工程研究的热点之一。通过两类材料的复合，取长补短，使之具有更好的骨传导功能。 目的：通过超临界流体技术将聚乳酸和同种异体骨粉合成复合型骨替代生物材料置入骨缺损模型，检测其成骨能力。 设计、时间及地点：观察性实验，于2005-12/2006-06在南方医科大学组织工程实验室和山西省医用组织库完成。 材料：20只家兔由南方医科大学动物实验中心提供。新鲜健康成人尸体股骨干标本由山西省医用组织库提供。聚乳酸粉末由山东医疗器械研究所提供。 方法：首先将同种异体皮质骨粉与聚乳酸在超临界二氧化碳作用下复合成多孔骨生物替代材料。将家兔左侧股骨远端造成1.5 cm×1.0 cm×0.6 cm大小的骨缺损，植入复合材料。 主要观察指标：于植入后2，4，8，12周取股骨远端植入材料区，进行大体观察、X射线检查、组织学检查和扫描电镜检查。 结果：实验第2周取材时大体观察已经接近皮质骨强度，第4周电镜观察见材料内部出现成骨细胞，第8周时X射线检查骨缺损基本已经被完全修复，第12周组织学观察材料内部软骨基质钙化，已经形成编织骨，且部分成骨小梁样结构。 结论：采用聚乳酸和同种异体骨粉制备出的复合材料生物相容性良好，修复骨缺损能力良好，可以做为骨组织替代材料。     

藻酸钙/骨髓基质成骨细胞复合物修复兔颅骨缺损实验研究

目的：在兔颅骨缺损中区植入组织工程骨，观察其成骨和对骨缺损的修复作用。方法：取兔髂骨，获取骨髓基质干细胞，体外扩增培养，将获得的骨髓基质成骨细胞与藻酸盐复合，制备成盘状组织工程骨，植入兔颅骨缺损区，单纯藻酸盐植入作为对照组，8周后行X线和组织学检查，观察其成骨和对骨缺损的修复作用。结果：骨髓基质成骨细胞/藻酸钙复合物植入组，有明显的新骨形成，而对照组无骨形成。结论：藻酸钙/骨髓基质成骨细胞复合物可用于修复非受力区、范围较小的骨质缺损。     

5000/兔脂肪源性间充质细胞体外复合PLGA膜的生长规律研究

背景：脂肪来源间充质细胞在组织工程领域的应用越来越广泛。寻找合适的支架材料是其进一步应用的关键。 目地：研究兔脂肪来源间充质细胞在PLGA膜的生长规律。 设计、时间及地点：体外观察,于2007-2009在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科研究所和上海组织工程重点实验室完成。 材料：6月龄雌性新西兰大白兔6只,由上海市银根养兔室提供。 方法：兔麻醉后取颈背处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获得原代细胞,接种至含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM培养液中,细胞达80%融合时传代,取第4代细胞用于实验。 主要观察指标：用Dio染料标记第四代细胞后测定不同接种细胞浓度在PLGA膜上的粘附率;在细胞与材料共培养1周以后,分别利用荧光倒置显微镜、扫描电镜及双光子显微镜观察细胞在材料表面及内部的生长情况。 结果：不同接种细胞浓度与材料的黏附率最高可达99％。细胞与材料共培养1周以后,荧光倒置显微镜检查发现材料中有表达绿色荧光的大量细胞,形态呈纤维样或卵圆状;显微镜检查扫描电镜表明细胞在材料表面呈复层生长且与材料粘附良好,细胞分泌基质较旺盛;双光子显微镜检查提示细胞在内部分布均匀且形态以纤维样为主。 结论：脂肪源性间充质细胞与PLGA材料相容性较好,并且前者可在后者的表面及内部生长。这提示PLGA是脂肪源性间充质细胞理想的生物支架材料。     

干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除后的硬膜外瘢痕粘连

摘要 背景：应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其中一个重要的研究方向。 目的：制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA]与干扰素/PLGA复合膜,观察其防止兔椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的作用。 方法：大耳白兔120只行L2椎板切除,随机分为6组：对照组硬膜外不放任何物质;自体游离脂肪移植组取皮下脂肪贴于硬膜表面;透明质酸钠组将透明质酸钠1 mL 滴于硬膜外;PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组,分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外。术后2,4,6,8 周处死动物,观察L2术区的瘢痕形成及与硬膜粘连的情况并评分。术后4周,透射电镜下观察成纤维细胞的超微结构。 结果与结论：随着时间的延长,对照组形成较广泛的瘢痕。游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组。透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组,后期无显著性差异,但优于对照组。壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量最少,与硬膜无或轻微粘连,其作用明显优于其他各组,但两种复合膜组间差异不明显。术后4周,对照组、游离脂肪组和PLGA膜组的成纤维细胞的状态和功能明显好于壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/ PLGA膜组。壳聚糖/PLGA复合膜与干扰素/ PLGA复合膜是预防椎板切除后硬膜外瘢痕粘连的有效材料。 关键词：聚乳酸-羟基乙酸共聚物;干扰素;壳聚糖;硬膜外瘢痕;椎板切除 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.043