HFRS患者IFN-γ和HFRSV抗原在外周血淋巴细胞群及亚群中的分布

作者应用硷性磷酸酶-抗硷性磷酸酶法(APAAP)和ABC双标记技术,对肾综合征出血热(HFRS)患者IFN-γ和HFRSV抗原在外周血淋巴细胞群及亚群中分布及IFN-γ与病毒抗原间的关系进行了初步研究,发现:①患者外周血中IFN-γ产生细胞主要包括T_4,T_8及NK细胞,     

甲状腺浸润T细胞活化与滤泡细胞DR抗原表达

用硷性磷酸酶抗硷性磷酸酶(APAAP)免疫细胞化学法,检测桥本甲状腺炎(HT)及其它甲状腺疾病甲状腺单个核细胞(TG-MNC)中四种 T 细胞活化抗原表达及甲状腺滤泡细胞(TFC)HLA-DR 表达,发现在 HT 与甲状腺肿的甲状腺中 T 细胞活化程度差异明显,而在 HT 与 Graves 病间差异则不明显。活化 T 细胞可攻入甲状腺滤泡;多种甲状腺病可出现 DR 抗原异常表达,但以 HT 为显著。认为 T 细胞活化与 TFC HLA-DR 抗原异常表达有关。     

自身免疫性甲状腺疾病HLA—DR抗原的免疫组化研究

<正> 用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP免疫组化法研究19例桥本甲状腺炎(HT)、11例Graves病(GD)和4例非毒性甲状腺肿(NTG)的甲状腺滤泡细胞(TFC)HLA-DR抗原的异常表达。发现TFC DR抗原表达与自身抗体     

致敏淋巴细胞对兔颅骨成骨细胞功能的影响

目的 研究致敏淋巴细胞对兔颅骨成骨细胞增殖、分化的作用。方法 经酶消化法从新生兔颅骨中分离成骨细胞,进行成骨细胞的碱性磷酸酶染色及成骨能力的检测。从经铬（Cr^6 ）致敏的新西兰兔外周血分离淋巴细胞并提取其培养上清液（LCM）,并分别观察在无LCM、加未经抗原（Ｃr^6 )刺激的LCM和加经Ｃr^6 刺激的LCM等3种情况下成骨细胞增殖、碱性磷酸酶和骨钙素分泌的情况。结果 从兔颅骨分离的细胞碱性磷酸酶染色阳性,在长期培养中能够形成钙化结节。致敏淋巴细胞培养介质抑制成骨细胞的增殖、促进碱性磷酸酶的分泌,抑制骨钙素的产生。经方差分析检验均具有明显的统计学差异。结论 致敏淋巴细胞能够抑制成骨细胞的功能,可导致骨形成障碍。     

前列腺癌组织中PAP、PSA及HNK-1抗原含量的免疫组织化学观察

前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一。前列腺癌组织中肿瘤标志物的研究对于明确诊断、转移灶的鉴别,患者转归及预后判断等均具有重要意义。为了探讨前列腺癌组织中PAP(前列腺酸性磷酸酶),PSA(前列腺特异性抗原)及HNK-1(人类自然杀伤细胞抗原-1)抗原的分布规律,本实验采用抗PAP、抗PSA及抗HNK-1单克隆抗体作第一抗体对68例前     

mPEG修饰淋巴细胞HLA-A2抗原的研究

目的用甲氧基-聚乙二醇(mPEG)修饰淋巴细胞表面HLA-A2抗原,阻断它与相应抗体的特异性结合。方法在不同温度、不同pH的磷酸缓冲液(PBS)中分别使用终浓度为12 mmol/L不同种类的mPEG对淋巴细胞表面HLA-A2抗原进行修饰。结果4 ℃及室温对淋巴细胞表面HLA-A2抗原修饰效果无明显影响,30 ℃及37 ℃条件下不利于修饰;高浓度mPEG在碱性环境中对HLA-A2抗原的修饰效果较好,且不同mPEG对修饰效果亦有影响。结论室温下,在pH7.4的PBS介质中mPEG-BTC(benzotriazole carbonate)对淋巴细胞表面HLA-A2抗原的修饰效果最好,其次为mPEG-丙酸-琥珀酰亚胺,mPEG-马来酰亚胺无修饰能力。     

mPEG修饰淋巴细胞HLA-A2抗原的研究

目的 用甲氧基-聚乙二醇(mPEG)修饰淋巴细胞表面HLA-A2抗原，阻断它与相应抗体的特异性结合。方法 在不同温度、不同pH的磷酸缓冲液(PBS)中分别使用终浓度为12mmol／L不同种类的mPEG对淋巴细胞表面HLA-A2抗原进行修饰。结果 4℃及室温对淋巴细胞表面HLA-A2抗原修饰效果无明显影响，30℃及37℃条件下不利于修饰；高浓度mPEG在碱性环境中对HLA-A2抗原的修饰效果较好，且不同mPEG对修饰效果亦有影响。结论 室温下，在pH7．4的PBS介质中mPEG-BTC (benzotriazole carbonate)对淋巴细胞表面HLA-A2抗原的修饰效果最好，其次为mPEG-丙酸-琥珀酰亚胺，mPEG-马来酰亚胺无修饰能力。     

自然流产病人免疫治疗后外周血T淋巴细胞亚群的变化

①目的探讨自然流产病人主动免疫治疗后T淋巴细胞亚群的变化.②方法 30例自然流产妇女采用其配偶静脉血中的淋巴细胞进行免疫治疗,采用抗生物素-生物素-碱性磷酸酶标记的免疫染色方法,对30例妇女的外周血淋巴细胞亚群CD抗原进行检测.③结果经免疫治疗后,CD4+/CD8+比值明显升高(t＝2.65,P＜0.05).④结论自然流产病人免疫治疗后外周血淋巴细胞亚群CD4、CD8抗原检测,可以了解细胞免疫功能的变化,预测疗效.     

应用Wu系列MCAbs对正常人群T淋巴细胞亚群分布的检测

应用Wu系列McAbs及碱性磷酸酶一抗碱性磷酸酶桥联酶标技术(APAAF桥联酶标技术)对不同年龄组正常健康人群进行T淋巴细胞亚群的检测,并与国内不同实验室的结果作了比较。     

应用APAAP试剂盒作T淋巴细胞亚群分型方法的改进

应用ＡＰＡＡＰ试剂盒作Ｔ淋巴细胞亚群分型方法的改进广州市第二人民医院血液室（５１０１５０）莫淑贤碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）桥联酶标技术是根据Ｔ细胞表面的抗原标志，利用单克隆抗体将其分为不同功能亚群的新方法。我室利用北京军事医学科学院生物制...     

外周血T淋巴细胞表面分化抗原与肿瘤临床

<正>恶性肿瘤患者免疫功能变化与肿瘤的发生发展及预后有着密切关系。随着肿瘤生物学及免疫学药理学的进展,肿瘤生物治疗的手段日益丰富,如生物反应调节剂(BRM)、肿瘤增殖逆转剂及基因工程疗法等,测定人体免疫功能,在肿瘤临床上有其重要意义。由于T细胞亚群的变化在一定程度上反映机体免疫能力。因此,本文就外周血T淋巴细胞表面分化抗原及肿瘤临床应用的近期研究进展综述如下。一、T淋巴细胞主要CD的生物学特性目前国际上关于T细胞表面分化抗原的标准命名是CD系统~[1]。简称CD(Cluster of differentiation)表示某群抗体识别抗原的群别。如CD8是一组单抗识别抑制性T细胞功能性抗原。它即可代表抗原又可代表抗体．表示抗原写“CD8抗原”,表示抗体是“CD8抗体”。     

单克隆抗体IA2结合胰岛细胞膜155kD和160kD抗原蛋白的纯化

免疫吸附实验表明87％ 1型糖尿病人血清自身抗体能替代单克隆抗体IA2与大鼠胰岛β-肿瘤细胞结合,并且单抗1A2能与人胰岛及大鼠胰腺提取物中的抗原结合。由于抗原含量很低,用亲和沉析、免疫沉淀、HPLC的方法均未得到可检测量的抗原蛋白。我们尝试用凝胶洗脱的办法得到了足够的大鼠胰腺提取物抗原蛋白。银染及Western Blot显示为155kD和160kD两条带。用胰蛋白酶部分消化后N末端氨基酸序列分析得到了12个氨基酸,初步认为该抗原不同于谷氨酸脱羧酶(GAD)、酪氨酸磷酸酶(IA2)等已发现的抗原。本实验为该抗原蛋白的分子克隆及1型糖尿病发病机制的研究打下了基础。     

小儿下呼吸道感染病毒病原学动态变化的研究

应用单克隆抗体碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法 ( APAAP)检测 1 69例小儿肺炎及毛细支气管炎鼻咽部脱落细胞病毒抗原——呼吸道合胞病毒 ( RSV)、流感病毒A、B亚型 ( Flu- A、Flu- B)、副流感病毒 1 .3及 2亚型 ( PIV1.3、PIV2 )、腺病毒 ( Adv)等 6种病毒抗原。结果 :阴性 77例 ,阳性 92例 ,阳性率 5 4 .44% ,两种及以上病毒感染 1 7例 ,占 1 8.47%。阳性病例中 RSV比例最大 ,共 42例 ,占病毒性肺炎及毛细支气管炎的 38.1 3% ,主要感染 6个月以下的小婴儿。通过对所检 6种病毒连续 4年的动态研究发现。RSV感染有较大幅度上升 ,而流感病毒 A、B亚型 ,腺病毒及副流感 2亚型感染则呈明显下降趋势。提示 :呼吸道合胞病毒是小儿下呼吸道感染的主要病原     

单克隆抗体IA2结合胰岛细胞膜155kD和160kD抗原蛋白的纯化

免疫吸附实验表明87％1型糖尿病人血清自身抗体能替代单克隆抗体IA2与大鼠胰岛β-肿瘤细胞结合^[1]，并且单抗1A2能与人胰岛及大鼠胰腺提取物中的抗原结合。由于抗原含量很低，用亲和沉析、免疫沉淀、HPLC的方法均未得到可检测量的抗原蛋白。我们尝试用凝胶洗脱的办法得到了足够的大鼠胰腺提取物抗原蛋白。银染及Western Blot显示为155kD和160kD两条带。用胰蛋白酶部分消化后N末端氨基酸序列分析得到了12个氨基酸，初步认为该抗原不同于谷氨酸脱羧酶(GAD)、酪氨酸磷酸酶(IA2)等已发现的抗原。本实验为该抗原蛋白的分子克隆及1型糖尿病发病机制的研究打下了基础。     

人原始生殖细胞的迁移及表面标志物变化的实验研究

目的探讨人胚胎原始生殖细胞向生殖嵴迁移及其细胞标志物改变.方法人胚生殖嵴或生殖腺经石蜡切片;HE染色,光镜观察;免疫组化方法检测阶段特异性胚胎抗原SSEA-4和SSEA-1的表达;钙-钴法检测碱性磷酸酶(AP)活性;RT-PCR检测4.5、7、9、11周人胚胎生殖嵴中转录因子Oct-4的表达.结果人胚胎第4.5周生殖嵴未见有碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞,且不表达转录因子Oct-4;第5～11周胚胎生殖嵴中持续存在碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞,且表达转录因子Oct-4;第12周胚胎生殖嵴中阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性细胞数量明显减少,但存在碱性磷酸酶阳性细胞.结论人胚胎原始生殖细胞自第5周后开始迁移至生殖嵴,直至第11周后完全分化,其形态学特征为碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1阳性,且表达转录因子Oct-4.     

肺炎克雷伯氏菌特异性抗原的筛选与鉴定

目的寻找肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)血清学检测用特异性抗原。方法双向电泳分离K.pneumoniae总蛋白,通过免疫印迹(Western blotting)与常见病原菌的多抗反应筛选特异性抗原蛋白,原核表达该蛋白并用ELISA法验证。结果获得K.pneumoniae的双向电泳图谱。寻找Western blotting中与K.pneumoniae自身多抗反应而不与与其它病原菌多抗反应的蛋白,质谱鉴定为酸性磷酸酶(Acid phosphatase,GI:238894261)。经表达纯化并以酶联免疫吸附试验(ELISA)验证,证明该蛋白作为包被抗原的灵敏度高,特异性强。结论 K.pneumoniae酸性磷酸酶是适用于该菌感染检测特异性抗原蛋白。     

儿童血流感染病原菌分布情况及mNAP、Presepsin、TREM-1的早期预测价值

目的 探讨儿童血流感染的病原菌分布情况及中性粒细胞膜碱性磷酸酶(mNAP)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(Presepsin)、髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的早期预测价值.方法 收集2018年5月—2019年5月在河北省儿童医院住院的血流感染患儿207例作为血流感染组,分析其血培养阳性率及病原菌分布情况.根据血...     

HIV/AIDS合并早期隐性梅毒患者淋巴细胞HLA-DR抗原表达

目的研究HIV/AIDS合并早期隐性梅毒患者外周血淋巴细胞HLA-DR抗原的表达,探讨其临床意义。方法用流式细胞仪检测72例HIV患者、45例HIV/AIDS合并早期隐性梅毒患者和35例健康体检者外周血T淋巴细胞HLA-DR抗原百分比(CD3+HLA-DR+)和B淋巴细胞HLA-DR抗原百分比(CD3-HLA-DR+)。结果与对照组[(6.16±2.47)%]比较,HIV感染合并组和AIDS合并组CD3+HLA-DR+抗原百分比[分别为(16.7±5.13)%和(16.9±5.87)%]显著升高(P均<0.01),HIV感染合并组与AIDS合并组CD3+HLA-DR+抗原百分比差异无统计学意义(P>0.05)。HIV感染合并组CD3-HLA-DR+抗原百分比[(6.79±2.54)%]显著低于AIDS合并组[(12.2±2.47)%,P<0.01]和对照组[(14.7±3.23)%,P<0.01],AIDS合并组CD3-HLA-DR+抗原百分比与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。HIV感染合并组CD3-HLA-DR+抗原百分比显著低于HIV感染组(P<0.01),HIV感染合并组与HIV感染组CD3+HLA-DR+抗原百分比无显著性差异(P>0.05),AIDS合并组与AIDS组两组间CD3-HLA-DR+抗原百分比和CD3+HLA-DR+抗原百分比均无显著性差异(P>0.05)。结论 HIV/AIDS合并早期隐性梅毒感染患者外周血T、B淋巴细胞HLA-DR抗原百分比与HIV/AIDS患者存在一定的区别,与HIV进程无明显的相关性。     

慢性肝炎患者外周血单个核细胞Fas抗原及T淋巴细胞亚群的检测意义

[目的 ]探讨Fas抗原系统和T淋巴细胞亚群在慢性肝炎发病机制中的作用及意义。 [方法 ]提取患者外周血单个核细胞 ,应用流式细胞术检测Fas抗原、CD3 、CD4 、CD8 ,进行统计学方差分析。共检测 2 5例慢性肝炎患者 ,其中慢性乙型肝炎 (CHB)患者 1 6例 ,脂肪性肝炎患者 9例。[结果 ]2 5例慢性肝炎患者总的Fas抗原及 1 6例慢性乙型肝炎和 9例脂肪肝患者的Fas抗原阳性率分别为 (4 7.35± 6 .1 4 ) %、(4 8.31± 6 .6 8) %和 (4 7.1 9± 8.71 ) % ,明显高于对照组 (2 5 .0±7.0 7) % ,P均 <0 .0 1 ,有显著性差异。各组慢性肝病之间Fas抗原含量无显著性差异。对T淋巴细胞亚群的分析 ,慢性乙型肝炎组CD3 与对照组呈显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其余均无差异。 [结论 ]慢性肝炎患者 ,包括CHB及脂肪性肝炎 ,外周血单个核细胞Fas抗原表达明显增高 ,同时外周血T淋巴细胞数量 (CD3 )有明显下降     

淋巴细胞免疫治疗技术在生殖医学中的应用进展

随着免疫遗传学及基础遗传学的发展,有越来越多研究发现,不明原因反复自然流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)病因与母胎免疫调节紊乱有关。近年研究也进一步证实:URSA患者夫妻间人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)相容性增强,致使妊娠妇女对胎儿父系同种抗原呈低识别或低反应,导致无法产生足够的可以使胎儿免受免疫打击而流产的保护性抗体即封闭抗体。而淋巴细胞免疫治疗可提高URSA患者免疫反应性,使其产生足够数量封闭抗体,避免胎儿父系抗原被母体免疫系统识别、杀伤和排斥,使妊娠获得成功。