外周血CD4+CD25+ 调节性T细胞在大鼠肾移植中的动态变化及应用研究

目的监测CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植外周血中的动态变化,研究其在预测排斥反应和免疫耐受中的价值。方法流式细胞术监测CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植外周血中的动态变化。结果CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植急性排斥反应过程中明显低于同系对照组,而CsA组CD4+CD25+调节性T细胞明显高于同系对照组。结论 CD4+CD25+调节性T细胞在抑制肾脏移植排斥反应中发挥重要作用,动态监测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的水平可预测和判断急性排斥反应的发生,了解肾脏移植后受体和移植肾之间的免疫反应程度或耐受状态。     

CD4~+CD25~+T细胞在实验性重症肌无力中的作用研究

目的:探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型小鼠外周免疫耐受机制异常在疾病发生、发展中的作用。方法:检测成模组小鼠CD4+脾细胞中CD4+CD25+T细胞(Treg)水平,脾细胞Foxp3mRNA的表达情况,并与未成模组、弗氏佐剂组及正常对照组进行比较。结果:与未成模组、弗氏佐剂组及正常对照组相比,成模组小鼠CD4+脾细胞内Treg的水平明显下降(P<0.01),脾细胞Foxp3mRNA的表达降低(P<0.01)。结论:EAMG模型小鼠存在外周免疫耐受缺陷,FoxP3基因可能通过影响Treg的数量和功能在EAMG的发病中起作用。     

重症肌无力患者外周血Th17和调节性T细胞分析

重症肌无力（MG）是以神经肌肉接头处突触传递障碍为特征的自身免疫性疾病，T细胞依赖，乙酰胆碱受体抗体（AchR-ab）介导被认为是本病的主要病因。研究表明，CD4＋T细胞及其细胞因子在MG的发病机制中起重要调节作用。     

调节性T细胞在胃癌患者外周血的表达及临床意义

目的 研究胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的表达,并探讨该群细胞频数的变化与肿瘤临床分期的相关性,从而探讨在胃癌肿瘤免疫过程中Treg细胞对免疫效应细胞的调节作用,探讨其在胃癌发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测39例胃癌患者外周血淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25+调节性T细胞的表达,并以30例健康人作为对照.结果 胃癌患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平明显低于正常对照组,CD4+CD25+和CD8+水平显著增高,胃癌临床分期越晚CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平越低,CD4+CD25+和CD8+水平越高,在临床Ⅰ、Ⅱ期患者与临床Ⅲ、Ⅳ期患者之间存在显著差异,差异有显著统计学意义.结论 胃癌患者机体免疫功能低下,胃癌患者外周血中CD3+、CD4+ T细胞数量下降,而Treg细胞的数量较正常人明显增高,使T细胞不能有效地清除肿瘤,与胃癌的发病有关.     

重症肌无力胸腺中CD4+CD25+ Treg细胞分布与数量变化的临床意义

目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者胸腺内CD4 CD25 天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义.方法 采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达, 同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血中CD4 CD25 T细胞在CD4 T细胞中的比例.结果 MG增生胸腺中CD25表达与对照胸腺相比显著升高(P＜0.05),与MGFA分期呈正相关.增生胸腺中CD4 CD25 细胞占CD4 细胞比例明显高于对照胸腺(P＜0.05),而外周血中CD4 CD25 T细胞比例无显著变化(P＞0.05).结论 胸腺内nTreg细胞数量的下降与MG自身耐受的破坏有重要的关系,进一步研究胸腺内nTreg细胞数量和功能的变化有助于了解MG的发病机制.     

CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中作用的研究

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在糖尿病发病中的作用及机制。方法:选取BALB/c小鼠,每日腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg/kg,连续5天,建立1型糖尿病模型;从小鼠内眦静脉采血,检测血糖;取小鼠尿液,检测尿糖;流式细胞术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞百分含量;ELISA法检测脾细胞培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果:BALB/c小鼠的IFN-γ水平在注射STZ第2周和4周明显增高(P<0.05);IL-10水平在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05);CD4+T细胞数量在注射STZ第2周未见明显升高,第4周水平明显升高(P<0.05);CD4+CD25+T细胞数量在注射STZ第2周和4周明显降低(P<0.05)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞通过抑制Th1型细胞因子分泌,分泌IL-10等细胞因子,防止糖尿病的发生,维持自身耐受。     

宫颈癌病人外周血调节性T细胞的表达水平及其临床意义

目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞（Treg）在宫颈癌病人外周血中的表达水平及其临床意义。方法:回顾性分析65例经病理检查确诊为宫颈癌病人的临床资料,归入宫颈癌组;同时选取同期60例子宫肌瘤病人及60名健康女性为对照,分别归入子宫肌瘤组和健康对照组。采用流式细胞仪检测研究对象外周血中CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+CD25+细胞数量的百分比,比较3组间的差异;分析宫颈癌病人CD4+CD25+CD127-Treg外周血表达水平与宫颈癌临床分期、肌层浸润深度、病理分化程度及有无淋巴结转移等临床病理特征的相关性。结果:宫颈癌组的外周血CD4+CD25+CD127-Treg/CD4+CD25+百分比显著高于子宫肌瘤组和健康对照组（P<0.01）,子宫肌瘤组亦明显高于健康对照组（P<0.01）。CD4+CD25+CD127-Treg/CD4+CD25+T百分比在宫颈癌临床分期、肌层浸润深度、病理分化程度及淋巴结有无转移间差异均有统计学意义（P<0.05~P<0.01）。结论:CD4+CD25+CD127-Treg表达水平与宫颈癌病变的发生、发展具有一定相关性,可初步评估宫颈癌的进展情况,具有重要临床意义。     

晚发型重症肌无力的临床免疫学研究

目的 探讨晚发型（〉50岁）重症肌无力的临床免疫学特点。方法 MG患者共174例，分为早发（EOMG）组、晚发（LOMG）组和伴胸腺瘤（MGT）组，并设正常对照组（NT）56例。测血清AChRAb、PrSMAb、TitinAb、RyRAb水平，外周血单个核细胞经刺激培养后测上清液IFN-γ、IL-10水平，流式细胞仪检测CD4＋CD25＋T细胞数量。结果 （1）本研究LOMG组46例，肌无力评分、危象发生率均低于EOMG组和MGT组（P〈0．01）；（2）血清TitinAb高于EOMG组和NC组（P〈0．01），血清AChRAh、RvRAb低于MGT组，三组MG患者PrSMAb无差异；（3）LOMG组复发率明显低于EOMG组和MGT组，且LOMG组中高TitinAb水平者复发频次明显增加；（4）流式细胞仪检测发现LOMG组CD4^＋CD25^＋Treg细胞明显降低。外周血单个核细胞经刺激培养后与NC组相比发现LOMG组IL-10降低。结论 本组晚发型重症肌无力病情严重程度低，复发少，伴有血清TitinAb水平单项增高，TitinAb与病程有关，且是复发的危险因素，CD4^＋CD25^＋Treg细胞的减少可能与LOMG的发病机制有关。     

重症肌无力患者胸腺调节性T细胞的原位表达及意义

目的 探讨调节性T细胞(Tregs)在胸腺中的原位表达及其对重症肌无力(MG)发病的意义.方法 选取未行免疫抑制治疗的MG患者胸腺39例,对照组9例.用间接免疫荧光双标记方法对胸腺Tregs进行定位分析,借助图像分析软件定量分析.结果 (1)MG组和正常对照组胸腺组织的Tregs均表达在胸腺髓质细胞区.(2)胸腺生发中心的细胞高表达CD25,但CD4表达较弱.表明生发中心多数为B细胞集合.(3)生发中心周围调节性T细胞分布较少.(4)平均视野阳性细胞绝对数MG组(17±3)与对照组(18±4)差异无统计学意义(P>0.05),平均视野阳性细胞比例对照组(45%±7%)高于MG组(36%±7%)(P<0.05).结论 MG患者胸腺组织存在Tregs数量比例的减少,因该种细胞比例的减少引发的免疫调节及抑制功能的下降可能是MG的促发因素之一.     

糖皮质激素对重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3及其胞内CTLA-4表达的影响

目的 研究糖皮质激素治疗重症肌无力( MG)患者外周血CD4 +CD25 +调节性 T 细胞( Treg )中 Foxp3 和胞内CTLA-4的表达水平的变化. 方法 收集MG患者34例,分为非治疗组8例和糖皮质激素治疗组26 例. 另将20 例健康者设为对照组. 采用流式细胞仪检测分析患者和健康者外周血CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4的变化.结果 ① MG非治疗组患者外周血 CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4水平较对照组显著下降( P<0. 05 );②糖皮质激素治疗能显著提升CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达比例( P <0. 05 ) ,但仍低于对照组( P <0. 05);③ CD4 +CD25 +Treg细胞Foxp3和胞内CTLA-4表达呈正相关性(r=0. 870,P<0. 001). 结论 MG患者外周血CD4 +CD25 +Treg Foxp3和胞内CTLA-4呈低表达,糖皮质激素治疗能显著提升Foxp3和胞内CTLA-4表达水平,但尚未达正常者免疫状态.     

大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的分选和提取

目的 分选提取大鼠脾脏和淋巴结CD4+CD25+调节性T细胞并进行纯度和活性检测.方法 用免疫磁珠两步法既阴性选择和阳性选择分选提取大鼠CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞仪检测细胞纯度,台盼蓝染色计算细胞存活率.结果 免疫磁珠分选提取的CD4+CD25+调节性T细胞纯度在86% 以上,并且活性良好,活细胞百分率大于97%.结论 通过免疫磁珠分选能够提取高纯度高活性的CD4+CD25+调节性T细胞.     

人CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞蛋白质组的双向电泳分析

目的 用双向电泳技术分析人CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达的蛋白质组，建立二者之间的差异表达谱。方法 从人脾脏分选CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞，用双向电泳技术分析两种细胞蛋白质组的表达差异。结果 分选细胞纯度分别为CD4^ CD25^ T细胞82.3%,CD4^ CD25^-T细胞96.5%，双向电泳分析发现有4个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^ T细胞检测到表达，有9个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^-T细胞检测到表达。结论 CD4^ CD25^-T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达蛋白质组有明显差异。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在肺癌中的表达及其临床意义

目的：：探讨CD4+ CD25+调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法：应用流式细胞术分析42例肺癌患者(肺癌组)外周血CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平,与15名健康志愿者作对照。结果：肺癌组患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞数量为(7.17±3.63)%,明显高于对照组的(4.25±2.11)%(P<0.01)。肺癌组患者外周血中调节性T细胞数量在病理类型间差异无统计学意义(P>0.05),晚期肺癌患者外周调节性T细胞数量高于早期患者(P<0.05)。结论：调节性T细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与肝移植免疫耐受

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞因其独特的免疫抑制功能而备受关注,在诱导和维持移植免疫耐受方面具有重要的作用。肝脏具有移植免疫特性．但肝移植术后如何避免排斥反应、诱导免疫耐受、提高存活率这一问题仍尚未解决。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肝移植免疫耐受中具有重要的作用。本文即从CD4^＋CD25^＋调节性T细胞入手,对其在肝移植排斥反应与免疫耐受中的作用加以综述。     

CD+4CD+25调节性T细胞在肿瘤免疫治疗中的价值及应用前景

恶性肿瘤的临床治疗主要是手术治疗、化学治疗和放射治疗.近年来,随着分子生物技术的不断发展,肿瘤的生物治疗在临床应用中的地位日渐突出.但是免疫细胞过继治疗作用的一过性和功能抑制成为影响其临床应用的瓶颈,其中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋ regulatory T cell ,Treg）在抑制肿瘤免疫方面起着重要作用.本文就其近年来的肿瘤临床研究进展做一综述.     

双向电泳-质谱法分析人CD4+CD25+T细胞与CD4+CD25-T细胞蛋白质组差异

目的 用双向凝胶电泳-质谱法(2．DE／MS)分析人CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达的蛋白质组，建立二者之问的差异表达谱。方法 提取人脾脏源CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞总蛋白质，双向电泳分离蛋白，比较两种细胞的蛋白质组表达差异，对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间问质谱(Matrix-assisted laser des-orpfion／ionization time of flying maass spectrometry，MAIDI-TOF-MS)进行鉴定。结果 胶图差异分析发现25个表达水平存在明显差异的蛋白质点，其中17个点在CD4^ CD25^-T细胞上调，8个点在CD4^ CD25^ T细胞上调。质谱初步鉴定出15个差异蛋白质点。结论 CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达蛋白质组存在差异，这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究调节性T细胞功能相关蛋白质。     

重症肌无力患者外周血中CD4＋CD25high调节性T细胞的变化及意义

目的 研究CD4＋CD25high调节性T细胞（CD4＋CD25high regulatory T cells,CD4＋CD25highTr）在重症肌无力（myasthenia gravis,MG）发病过程中的作用.方法 采用流式细胞仪对51例MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量进行测定,分组比较病情不同的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量,并选择35例健康体检者作为正常对照.结果 MG组患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于正常对照组的健康体检者,差异具有统计学意义（P〈0.05）;病情控制不佳的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量低于病情稳定的MG患者及健康体检者（均P〈0.05）;胸腺切除的MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量明显高于非胸腺切除患者（P〈0.05）.结论 MG患者外周血中CD4＋CD25highTr的表达量异常,其可能参与MG的发生与发展,与MG的稳定程度密切相关.     

原因不明性复发性流产患者主动免疫治疗效果及调节性T细胞水平变化观察

目的探讨原因不明性复发性流产患者接受主动免疫治疗的效果及接受主动免疫治疗后患者外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的变化。方法对118例原因不明性复发性流产患者进行丈夫或第三个体的淋巴细胞主动免疫治疗。在118例中随机选取26例用流式细胞术检测主动免疫治疗前后外周血CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞的变化。结果118例患者中,62例再次妊娠,56例仍在治疗中。再次妊娠的患者中6例再次发生早期流产（其中2例患者胚胎绒毛染色体发现异常）,22例已成功分娩,34例仍在继续妊娠中（孕周〉12周）。治疗的成功率达90.32％。随机选取的26例患者主动免疫治疗后的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及CD4^＋CD25^high T淋巴细胞的表达均高于主动免疫治疗前（P〈0.05）。结论主动免疫是一种治疗原因不明性复发性流产安全、有效的方法。主动免疫治疗可能通过提高外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及CD4^＋CD25^high T淋巴细胞的表达来调控母胎界面免疫耐受的形成。     

丹参对哮喘患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞影响机制的研究

目的观察丹参对哮喘患者治疗的疗效,进一步探讨其对哮喘患者外周血CD4＋和CD25＋调节性T细胞的影响机制。方法选取90例哮喘患者,采用随机对照的研究方法,将90例支气管哮喘患者随机分为观察组（常规治疗＋丹参）和对照组（常规治疗）各45例,于治疗前和治疗后比较两组患者治疗的疗效、肺功能的变化情况以及治疗后两组CD4＋CD25＋Treg的变化情况。结果经过治疗后,观察组的疗效明显优于对照组,两组肺功能治疗后均较治疗前明显改善．且观察组较对照组改善更明显．治疗后两组的CD4＋CD25＋Treg均较治疗前明显升高,且观察组较对照组升高更明显,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论应用丹参治疗支气管哮喘疗效确切,可明显改善患者的肺功能,且分析其疗效可能是通过调节CD4＋CD25＋Frea而发挥免疫作用机制而实现的。