基于HPLC-MS的冬虫夏草蛋白特征图谱快速分析

目的 采用高效液相色谱-质谱联用技术建立冬虫夏草蛋白特征图谱的快速分析方法。方法 采用Sepax Bio-C₄色谱柱(4.6 mm×150 mm, 3μm),以0.1%甲酸(A)-0.1%甲酸/乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.6 mL·min^-1,柱温30℃,质谱检测器。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)对冬虫夏草色谱图进行处理,并计算所有批次的相似度。结果 建立了冬虫夏草蛋白对照特征图谱,标示出了4个共有峰,12批冬虫夏草与对照特征图谱相似度均大于0.90,22批冬虫夏草混淆品的相似度均<0.10。结论 本研究建立的方法可有效鉴别冬虫夏草及其混淆品,为冬虫夏草的真伪鉴别技术的提升提供了技术支持。     

液质联用技术用于醋酸阿托西班注射液中杂质结构鉴定

目的:采用高效液相色谱(HPLC)、超高效液相色谱-四极杆串联静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Orbitrap MS)技术对醋酸阿托西班注射液中杂质结构进行鉴定。方法:HPLC法采用Inertsil ODS-2 C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相A为乙腈-甲醇-三氟乙酸溶液(pH 3.2)(15∶10∶75),流动相B为乙腈-甲醇(60∶40),梯度洗脱，流速1.2 mL·min^-1,检测波长220 nm。UPLC-Q Orbitrap MS法采用BEH300 C₁₈色谱柱(150 mm×2.1 mm, 1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1;采用电喷雾离子源，选择正离子模式进行Full MS/dd-MS²扫描。结果:对5家企业各1批醋酸阿托西班注射液进行了有关物质测定，以面积归一化计算，含量>0.1%的杂质峰个数分别为9、10、13、9和6,总杂含量分别为0.35...     

UPLC-MS/MS法与ELISA法测定胖大海中黄曲霉毒素的比较研究

目的 采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)和酶联免疫吸附法(ELISA)对胖大海中的黄曲霉毒素进行检测，比较 两种方法的检测结果以及方法学差异性。方法UPLC-MS/MS法测定：样品采用70%甲醇提取经过免疫亲和柱净化，色谱柱为C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7μm)，柱温为40℃，流动相为水含0.1%甲酸(A)-甲醇含0.1%甲酸(B)，梯度洗脱，流速为0.3 m L·min^-1，多反应检测扫描采集模式，正负离子同时扫描进行数据采集。同时采用ELISA法测定，样品采用甲醇提取，酶联免疫试剂盒反应。结果 UPLC-MS/MS法测定：黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂线性关系良好，检测限分别为0.013 5,0.002 9,0.008 6,0.003 6μg·kg^-1，定量限分别为0.045 0,0.009 8,0.028 6,0.011 9μg·kg^-1，平均回收率分别为98.98%,10...     

UPLC-Q-TOF-MS/MS法定性分析丹膝颗粒的化学成分

目的:采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对丹膝颗粒中的化学成分进行定性分析.方法:采用Atlantis?T3色谱柱(2.1 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温35℃,进样量2μL.质谱采用电喷雾(ESI)...     

不同产地桑白皮HPLC的指纹图谱的研究

目的 建立简单可行的桑白皮药材指纹图谱方法.方法 采用高效液相色谱法,Agilent Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:以乙腈-0.2%甲酸进行梯度洗脱,流速:1 mL·min-1,柱温:30℃,检测波长:280 nm,进样量为10μL.结果 用梯度洗脱得到的色谱图中各色谱峰分离较好,达到指纹图谱分析的效果.结论 该方法重复性好、检测方法简便,可为桑白皮指纹图谱的质量控制提供依据.     

痛宁凝胶的HPLC-MS指纹图谱研究

目的建立痛宁凝胶的高效液相色谱–质谱(HPLC-MS)指纹图谱,为其质量控制提供依据。方法采用Kromasil100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)–0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长:240 nm;体积流量:1.0 m L/min;柱温:30℃;进样量:10μL。进行质谱分析时,流动相B用0.1%甲酸溶液替代。结果测定了10批痛宁凝胶的指纹图谱,提取18个色谱峰作为指纹图谱共有峰,采用MS法指认了12个共有峰,并将共有峰归属到各药材;10批样品相似度均大于0.9。结论该法重复性好,简便可靠,为痛宁凝胶的质量控制和评价提供了依据。     

枸橼酸莫沙必利片杂质研究

目的 建立测定枸橼酸莫沙必利片有关物质检测条件下特定杂质莫沙必利柠檬酰胺2个色谱峰的超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)法。方法 HPLC条件，色谱柱为Agilent C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,5μm)，流动相为枸橼酸盐溶液-乙腈(梯度洗脱)，流速为1.0 mL/min，检测波长为274 nm，柱温为30℃，进样量为10μL;UPLC-Q-TOF-MS条件，色谱柱为YMC-Triant C₁₈柱(150 mm×2.1 mm,1.9μm)，检测器为DAD检测器，流动相为含0.1%甲酸的10 mmol/L乙酸铵(A)-乙腈(B)、梯度洗脱，流速为0.5 mL/min，检测波长为274 nm，柱温为40℃，进样量为0.5μL。电喷雾离子源正离子扫描模式(ESI⁺)，二级质谱碰撞能量30 e V，毛细管电压4 k V，锥孔电压45 V，碎裂电压60 V，干燥气流速8 mL/min，干燥气温度300℃，雾化气压力35 psi，扫描模式MS/MS；扫描范围m/z 50～700；按不加校正因子的...     

HPLC-MS/MS检测尿液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮

目的:建立尿液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF_525A)的乙腈提取含有甲卡西酮及卡西酮的尿液,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,HPLC-MS/MS检测。采用ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(50 mm×4.6 mm, 1.8μm),以0.2%甲酸乙腈液和0.2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温23℃,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)检测。结果:甲卡西酮质量浓度在0.2～3 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=0.000 688X+0.000 51(r~2=0.999 1),检测限为0.1 ng·mL^-1,定量限为0.2 ng·mL^-1;卡西酮质量浓度在0.5～3 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=0.000 687X+0.000 175(r~2=0.99...     

小儿风叶咳喘平合剂3个成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的:对小儿风叶咳喘平合剂中3个主要药效成分在大鼠体内的代谢产物以及药代动力学进行研究。方法:基于超高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(UHPLC-ESI TOF MS)方法，采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.3 mL·min^-1,质谱采用电喷雾离子源(ESI),以正负离子模式采集多级质谱碎片信息，对大鼠灌胃小儿风叶咳喘平合剂后的血清、胆汁、尿液和粪便进行分析，结合离子碎片进行代谢产物鉴定分析；同时采用超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)的技术进行药代动力学研究。以格列齐特为内标物，采用ACQUITY UPLC?BEH C₁₈色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱。血浆样品采用甲醇沉淀蛋白，采用ESI及多反应监测(MRM),选择监测离子(麻黄碱m/z 166.2→148.1、甘草次酸m/z 471.2→453.2、对香豆酸m/z 162.9→119.1、内标m/z 3...     

HPLC-MS/MS法用于达沙替尼血药浓度监测

目的 建立一种稳定性好、灵敏度高、通用性强测定人血浆中达沙替尼血药浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。方法 血浆样本经甲醇除蛋白后,流动相为含0.1%甲酸的甲酸铵缓冲液(A相)和0.1%甲酸的乙腈溶液(B相),采用梯度洗脱方式,Luna^? C₁₈色谱柱(2.0 mm×20 mm, 3μm)进行分离,流速为0.6 mL·min^-1,柱温35℃。电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测,类似物伊马替尼-D₈作为内标。用于定量分析的离子对为m/z 488.2→m/z 401.1 (达沙替尼)和m/z 502.3→m/z 394.1(伊马替尼-D₈)。结果 达沙替尼的线性范围为1～1000 ng·mL^-1,定量下限为1 ng·mL^-1;日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于10%,达沙替尼低、中、高浓度的提取回收率分别为97.8%,98.6%,94.1%。临床样本检测结果表明中国慢性髓系白血病患者达沙替尼血药浓...     

康艾注射液UPLC/MS指纹图谱研究

目的:建立康艾注射液的UPLC/MS指纹图谱。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（50mm×2.1mm,1.7μm）进行分离,乙腈-20mmol·L^-1醋酸铵溶液梯度洗脱,流速:0.4ml·min^-1。离子化模式:ESI⁺。结果:对15批康艾注射液样品进行检测,建立了UPLC/MS指纹图谱并标示了8个共有指纹峰。各共有峰相对保留时间变化的RSD均在0.5%之内。结论:该方法准确、重复性好,为进一步质量标准化研究和控制提供依据。     

LC-MS/MS法测定人尿液中乳清酸的浓度及临床应用

目的：建立测定人尿液中乳清酸浓度的方法,并应用于临床。方法：尿液样本加水稀释100倍,经0.22μm滤膜过滤后,取滤液100μL加入甲醇400μL沉淀蛋白,以卡马西平(0.50μg·mL^-1)2μL为内标,经涡旋1 min,13 000 r·min^-1离心5 min,取上清液100μL采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。色谱柱为Waters Atlantis dC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为5 mmol·L^-1甲酸铵溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.50 mL·min^-1,柱温为4℃,进样量为3μL。采用电喷雾离子源以正离子及负离子模式,检测方式为Full MS,Full MS分辨率为70 000,质量扫描范围m/z130～360。乳清酸和内标卡马西平的检测离子分别为m/z (-)155.009 82、(+)237.102 24。结果：乳清酸尿液浓度在0.016～1.0μg·mL^-1范围内线性关系良好(r2=0.996...     

白花蛇舌草高效液相色谱-二极管阵列检测指纹图谱的建立

目的:建立白花蛇舌草药材的HPLC指纹图谱。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测法,选用Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,4 μm)色谱柱,Easy GuardⅡ C₁₈为保护柱,甲醇-0.1%冰醋酸溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 ml·min^-1,检测波长254 nm,柱温40 ℃。采用中国药典委员会颁布的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723)》评价不同产地白花蛇舌草图谱的相似性。结果:采用10批白花蛇舌草药材建立HPLC指纹图谱,方法学符合指纹图谱技术要求,10批白花蛇舌草的相似度在0.766~0.985之间。结论:该指纹图谱方法稳定、准确、可靠,为白花蛇舌草药材质量标准的制定提供了科学依据。     

UPLC-MS/MS法检测人体毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬

目的:建立一种准确、快速检测毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF_525A)的甲醇溶液提取含有右美沙芬及其代谢物的毛发,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,UPLC-MS/MS检测。采用ACQUITY UPLC HSS T3超高液相色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.2%甲酸(10 mmol·L^-1甲酸铵)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温为室温。采用电喷雾离子源,正离子多反应模式检测。结果:右美沙芬和去甲右美沙芬质量浓度均在1～100 ng·mL^-1范围内线性响应良好,线性方程分别为Y=1.349 49X-0.020 80 (r=0.998 8)和Y=0.775 10X-0.013 87 (r=0.999 1),检测限和定量限均分别为0.01 ng·mL^-1和0.025 ng·mL^-1,平均回收率在97.0%～104.8%...     

基于HPLC-Q-Exactive-MS和HPLC-MS/MS技术的小儿解感颗粒定性与定量分析

目的:建立小儿解感颗粒化学成分快速鉴定及定量分析方法。方法:定性分析采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸水(B),流速为0.30 mL·min^-1,柱温40℃,进样量5μL,质谱采用正、负离子扫描,扫描范围m/z 110～1 200。定量分析采用Shim-pack GIST-HP C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 3μm),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸水(B),流速0.25 mL·min^-1,柱温35℃,进样量为3μL,多反应监测(MRM)正、负离子切换监测模式。结果:在小儿解感颗粒中鉴别出63个成分,包括40个黄酮类、9个三萜类、7个有机酸类、4个脂肪酸类和3个氨基酸类成分;定量分析结果显示,柴胡皂苷a、黄芩苷、柴胡皂苷d、黄芩素、芦丁、甘草苷在线性范围内呈良好的线性关系(r≥0.999 1),加样回收率范围在100.2%～104.9%。3批解感颗粒中6个成分的质量分数范围分别为0.062～0.068,15.144～1...     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS快速鉴定腰康宁汤中化学成分

目的 采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对腰康宁汤中化学成分进行快速鉴定。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm)，流动相为0.2%甲酸水溶液-甲醇，梯度洗脱，流速：0.5 m L·min^-1，柱温：40℃，进样量：3μL；电子喷雾离子源，在正、负离子模式下对色谱流出物质进行质谱检测。结果 通过与对照品对照和结合文献，从腰康宁汤中鉴定出山奈苷、宝藿苷Ⅰ、葛根素、毛蕊异黄酮苷、芍药苷、夏佛塔苷、芒柄花苷、丹酚酸B、二十八烷酸、2-乙氧羰基-5,7-二羟基-4-甲氧基异黄酮10种成分。结论 建立的定性分析方法能快速、系统地分析腰康宁汤中的化学成分，为该方的质量控制及药效物质基础研究提供了理论基础。     

UHPLC-MS/MS法测定盐酸二甲双胍制剂中2种亚硝胺类基因毒性杂质

目的 建立超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定盐酸二甲双胍制剂中2种基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(N-nitrosodimethylaminen, NDMA)和N-亚硝基二乙胺(N-nitrosodiethylamine, NDEA)的含量的方法。方法 采用多反应监测(MRM)模式检测，离子源为APCI(+),色谱柱为ACE Excel 3 C₁₈-AR柱(100 mm×4.6 mm, 3μm),以体积分数0.1%甲酸水溶液(A)-质量分数0.1%甲酸甲醇溶液(B)为流动相梯度洗脱，流速0.5 mL·min^-1,进样体积5μL。结果 NDMA和NDEA的线性范围分别为0.99～99μg·L^-1(r>0.999 9)和0.53～53μg·L^-1(r>0.999 9),平均回收率为90.9%～98.9%,定量限分别为0.99和0.53μg·L^-1,检测限分别为0.3和0.2μg·L^-1。用建立的方法测定不同剂型的6批样品，2批...     

UHPLC-MS/MS法测定盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔

目的 建立盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测方法。方法 Waters ACQUITY UPLC CSH^TM C₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm, 1.7μm),10 mmol·L^-1甲酸铵的水溶液(含0.1%甲酸)作为流动相A,乙腈溶液(含0.1%甲酸)作为流动相B,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为50℃,进样器温度为5℃,进样体积为10μL,采用多反应监测(MRM)模式,对盐酸普萘洛尔缓释片中的N-亚硝基普萘洛尔进行定量检测。结果 N-亚硝基普萘洛尔在1～20 ng·mL^-1范围内具有良好的线性关系。低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)在98.4%～103.2%之间,RSD≤2.7%。检测限和定量限分别为0.09 ng·mL^-1和0.3 ng·mL^-1。检出盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔含量为1.8μg·g^...     

采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析宛艾化学成分

目的:研究宛艾的非挥发性化学成分,以促进其进一步的研究与开发。方法:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS),并结合文献报道对宛艾中的化学成分进行鉴定,色谱柱为Agilent Poroshell 120EC-C18(3mm×150mm,2.7μm);流动相为乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.5mL·min^-1。结果:鉴定出宛艾中23个化学成分,其中黄酮及黄酮苷类12个,苯丙酸类9个,香豆素类1个,其他1个。结论:本研究阐明了宛艾的非挥发性化学成分,方法精确、高效,适用于宛艾非挥发性化学成分的快速鉴定,为宛艾的深入研究及进一步开发利用奠定了基础。     

小儿咽扁颗粒中掺伪山银花检验方法研究

目的：建立小儿咽扁颗粒中山银花的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检查方法,打击中药制剂中金银花的掺假行为。方法：采用薄层色谱(TLC)法,以灰毡毛忍冬皂苷乙为指标成分,以三氯甲烷-甲醇-水(6∶4∶1)为展开剂,快速筛查小儿咽扁颗粒中掺伪的山银花;采用HPLC-ELSD法鉴别小儿咽扁颗粒中掺伪的山银花,选择Sun Fire^?C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量10μL;采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)法进行确证,选择Thermo Hypersil GOLD aQ C₁₈(150 mm×2.1 mm,3μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,质谱使用电喷雾离子源,负离子模式下检测。结果：TLC法检测结果显示,34批样品中共有8家企业生产的16批次样品疑似检出灰毡毛忍冬皂苷乙;HPLC-ELSD法的验证结果...