逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA

本文应用逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA,并与检测抗HCV IgG的ELISA方法进行比较。结果提示逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA,具有早期、灵敏、特异性高的优点。     

双PCR检测丙型肝炎病毒RNA

本文报告了丙型肝炎病毒RNA检测方法的建立及临床初步应用结果。应用该方法的特点是:(1)微量,可从100μl血清中提取RNA;(2)操作程序精简,不用超速离心机等特殊设备;(3)快速,从提取HCV RNA-逆转录可在4小时内完成,1～2天可报告结果。临床初步应用结果表明,在14例输血后肝炎血清中13例检出HCV RNA,此结果表明输血后肝炎主要为HCV感染引起发病,提示供血员筛选的重要性。     

不同基因型丙型肝炎病毒RNA定量分析

目的　根据定量 PCR检测结果 ,了解血清不同基因型 HCV- RNA的含量 .方法　采用荧光定量 PCR和逆转录巢式定性 PCR同时检测 16 6例丙肝患者的血清 HCV- RNA,再进行酶切分型 .计算各型 HCV- RNA平均含量 .结果　定量 PCR阳性血清 (131例 ) HCV- RNA含量在 1× 10 4 .0 4～ 1×10 8.1 1拷贝· m L- 1 .HCV- 型 (10 6例 )、HCV- 型 (18例 )和 / 混合型 (3例 ) RNA平均滴度分别为 1× 10 6 .88± 2 .0 1拷贝· m L- 1 ,1× 10 5.79± 1 .82 拷贝· m L- 1 和 10 5.50± 1 .6 2 拷贝· m L- 1 .结论　定性和定量检测结果有很好的一致性 .HCV- 型病毒含量显著高于 HCV- 型 .     

喀什分离到新型双链RNA病毒

2005年7～8月在喀什地区采集蚊虫13,491只,50～100只／组进行研磨,取上清在06／56和Veto细胞上进行病毒分离,获得24个对06／36细胞致病变而对Vero细胞不致病变的病毒。24个病毒分离物的基因组核酸电泳显示相同的12节段双链RNA（double stranded ENA,dsENA）带型。以随机六聚体g1物pd（N）6反转录制备病毒基因组cDNA,采用辽宁病毒（liaoning virus,LNV）第j25因片段特异性引物进行POE扩增,PCE产物进行核酸序列测定,序列BLAST比对显示与GenBank中已知LNV第12基因片段核酸序列同源性超过85％,证实24个病毒分离物均为LNV。核酸序列系统进化分析显示与LNV-NE9712进化关系更接近。     

原位鉴定肌肉中的丙型肝炎病毒RNA

对4例肌炎和丙型肝炎(H CV)患者的骨骼肌样本进行研究,其中在2例患者的肌肉组织匀浆中PCR检测到H CV RNA,同时检测到肌纤维和浸润淋巴细胞的H CV RNA的原位杂交信号。以上结果可能与肌炎患者感染H CV的病理机制有关。原位鉴定肌肉中的丙型肝炎病毒RNA@Ito H.$Department of Neurology, Kansai Medical University, 10-15, Fumizonocho,Moriguchi, Osaka, 570-8507, Japan,Dr. @Nagano M. @王英鹏…     

RT-PCR法测定泪液中丙型肝炎病毒RNA

为确定血液以外途径是否可以传播丙型肝炎病毒(HCV),同时测定泪液中与血液中丙型肝炎病毒(HCV)RNA。54例血清HCVRNA阳性患者,其泪液中HCV RNA全部阳性,表明除血液以外,HCV还有其它传播途径。     

森林脑炎病毒RNA的提取及其性质

从森林脑炎病毒感染的鼠脑组织中直接抽提总核酸,然后经Sepharose4B柱层析将病毒RNA与细胞RNA分离,方法简便、分离的病毒RNA在260nm处有典型的紫外吸收光谱,260/280nm的比值近似2,对RNase敏感,有感染性。     

血液病患者丙肝病毒RNA检测结果分析

应用逆转录套式ＰＣＲ检测６１例血液病患者血清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ，结果其阳性率明显高于正常人群。因此建议筛选献血员时除检测乙肝外，应联合检测抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ－ＲＮＡ，提高丙肝的检出率，以降低需要长期输入血制品的易感染人群的丙肝感染率，减少输血后肝炎的发生。     

丙型肝炎病毒RNA与血清标志物的关系

目的 :探讨血清HCVRNA含量与丙氨酸氨基转氨酶 (ALT)、HCV抗体的关系。方法 :采用荧光定量 聚合酶链反应 (FQ PCR)检测 75例HCV抗体复检阳性无偿献血者、9例丙型肝炎患者的HCVRNA含量 ,并与HCV抗体、ALT的检测结果比较。结果 :75例献血者中 ,HCV抗体 (+ )、ALT(-)组HCVRNA阳性率高于HCV抗体 (+ )、ALT(-)组。在 9例丙型肝炎患者中 ,ALT与HCVRNA含量呈正相关 ,且相关性显著 (r =0 72 ,P <0 0 5 )。结论 :在HCV感染的人群中 ,ALT的高低可间接反应HCV在体内的状态 ,这对安全输血和诊断有重要意义     

RNA病毒性脑膜炎的实验诊断研究

目的:研究探索RNA病毒所致毒性脑膜炎(病脑)的临床实验诊断方法。方法:病毒性脑膜炎患者(病脑组)和非病毒性脑膜炎患者(对照组)为对象,应用反转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测脑脊液标本中RNA病毒(包括肠道小RNA病毒组、柯萨奇病毒及风疹病毒),应用酶联免疫分析技术(ELISA)检测脑脊液和血液中柯萨奇病毒-IgM和风疹病毒-IgM。结果:RT-PCR方法的特异性为100%,阳性率分别为肠道小RNA病毒组35.3%、柯萨奇病毒29.8%、风疹病毒9.7%;而ELISA方法检测血清标本的特异性为93.7%(COX-IgM)和95.2%(RV-IgM),敏感性分别为38.2%和8.4%,检测脑脊液则无阳性发现。结论:RT-PCR是一种临床实验确证诊断病脑的有效而实用的方法,与ELISA方法(检测血清标本)联合应用,可以进一步提高实验诊断资料的质量。     

用原位杂交检测肾综合征出血热病毒RNA

作者应用生物素标记的肾综合征出血热(HFRS)R_(22)株病毒M片段cDNA为探针,通过原位杂交检测培养细胞中HFRS病毒RNA,获得了满意的结果。     

37例病毒性肝炎患者庚型肝炎病毒RNA检测结果分析

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对３７例住院病毒性肝炎患者作庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ检测。结果７例阳性，阳性率为１８．９２％。其中１３例原因不明肝炎ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性４例，阳性率为３０．７６％。男、女均是ＨＧＶ的易感者，传播途径与丙肝、乙肝可能相似，有各种临床类型，肝功能损害程度较轻，ＨＧＶ可单纯感染，也可与其他肝炎病毒同时或重复感染。７例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性者，其中４例作肝组织病理检查，例７见合胞体巨细胞     

丁型肝炎病毒RNA巢式逆转录PCR检测

为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＳＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＦＶ ＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶ ＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｄ阳性均未检出ＨＤＶＲＮＡ。     

丁型肝炎病毒RNA巢式逆转录PCR检测

为了提高丁型肝炎病毒的实验室诊断水平，建立一个高敏感性和特异性的丁型肝炎病毒的检测方法。根据ＧＥＮＢＡＮＫ中ＨＤＶ的核酸序列设计出巢式引物，采用逆转录巢式ＰＣＲ方法对４０例肝炎患者进行检测。结果：２０例丁型肝炎病毒抗原阳性的ＨＤＶＲＮＡ均为阳性，１０例丁型肝炎病毒抗体阳性中ＨＤＶＲＮＡ阳性６例，１０例单纯ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性的均未检出ＨＤＶＲＮＡ。结论：巢式逆转录ＰＣＲ可以作为丁型肝炎病毒临床检测的一种方法     

动物RNA病毒反向遗传学操作技术研究进展

反向遗传学(Reverse genetics)就是通过人为地改变生物体或生物大分子的基因型,考察其表型或者生物学特性是否发生改变以及如何改变,从而揭示该基因与表型的关系.     

秘灵王提取物抗DNA,RNA病毒效应

采用秘灵王提取物在人羊膜细胞ＦＬ株及小鼠纤维母细胞Ｌ９２９株上进行抗病毒作用研究,并对其抗病毒机理进行探讨。结果表明,ＭＬＷ提取物可不同程度地抑制ＤＮＡ病毒ＡｄＶ－Ⅲ,ＨＳＶ－１及ＲＮＡ病毒,ＣＢ３Ｖ,ＰｏｌｉｏＶ,ＶＳＶ的致细胞病变效应,使组织培养的细胞得不同程度的保护。