微小 RNA-338-3p靶向调控高迁移率族蛋白 B1增强子宫内膜癌对紫杉醇敏感性的研究

目的 探讨miR-338-3p靶向调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)影响子宫内膜癌对紫杉醇(Paclitaxel,PTX)敏感性的分子机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blottingting)检测miR-338-3p和HMGB1在子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1B中的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-338-3p和HMGB1之间的靶向关系;将Ishikawa和HEC-1B细胞分为如下5组:miR-338-3p组(转染miR-338-3p mimics组)、miR-NC组(转染miRNA阴性对照组)、si-HMGB1组(转染干扰RNA)、si-NC组(转染siRNA阴性对照)、miR-338-3p+HMGB1组(共转染miR-338-3pmimics和pcDNA3.0 HMGB1组).将各组用转染试剂转染至细胞,用不同浓度的PTX处理上述转染组细胞,CCK-8法检测Ishikawa和HEC-1B细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,Western blotting检测HMGBI蛋白表达.结果 与人正常子宫内膜上皮细胞ESC相比,miR-338-3p在子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1B中表达下调[(1.00±0.10)比(0.51±0.04)、(0.46±0.04)],而HMGB1则相反;miR-338-3p靶向并负性调节HMGB1表达;过表达miR-338-3p抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1B增殖,促进凋亡,增加其对PTX敏感,与敲低HMGB1结果一致;HMGB1可部分逆转miR-338-3p对子宫内膜癌细胞增殖,凋亡以及对PTX敏感性的影响.结论 miR-338-3p通过负性调控HMGB1抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1B增殖,促进凋亡和增强其对PTX敏感性.     

微小 RNA-490-3p靶向 FK506相关蛋白 14表达抑制骨肉瘤 MG63细胞侵袭和迁移的实验研究

目的探讨微小 RNA-490-3p(miR-490-3p)对骨肉瘤 MG63细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法 2019年 9月至 2020年 4月,从中科院上海细胞库购买人骨肉瘤细胞株 MG63进行体外培养,分为对照组(未转染)miR-NC组(转染 miR-NC)、 miR-490-3p组(转染 miR-490-3p mimics),miR-490-3p+pcDNA组(共转染 miR-490-3p mimics与空载体、)和 miR-490-3p+FKBP14组(共转染 miR-490-3p mimics与 FKBP14过表达载体),采用 RT-PCR检测 miR-490-3p表达, Transwell小室法检测细胞侵袭、迁移,蛋白质印迹法检测钙黏蛋白 E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)、上皮间质转化因子 Twist转录因子( Twist)和 FK506相关蛋白 14(FKBP14)蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测 miR-490-3p和 FKBP14的靶向关系。结果与对照组比较, miR-490-3p组细胞中 miR-490-3p表达水平明显升高( 3.68±0.37比 1.02±0.10,P<0.05),而侵袭细胞数( 33.25±2.02比     

高迁移率族蛋白B1及其与炎症反应相关性的研究进展

高迁移率族蛋白（High mobility group protein，HMG）因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移能力而得名．是一大类富含电荷的低分子非组蛋白染色体核蛋白，HMGB1是其成员之一，山A区和B区及C端尾部3个结构域构成。B区的1-20号氨基酸是诱导TNF、IL-1、IL-6等细胞因子产生的部位。HMGB1因参与了DNA复制、转录和修饰，     

微小 RNA-301b-3p靶向第 10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-301b-3p(miR-301b-3p)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 本研究起止时间为2019年3—9月.人成骨细胞(hFOB)和骨肉瘤细胞U2OS、MG63购自美国菌种保藏中心.U2OS细胞分为miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-301b-3p抑制物(anti-miR-301b-3p)组、anti-miR-301b-3p+小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、anti-miR-301b-3p+第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)小干扰RNA(si-PTEN)组;实时荧光定量PCR(RT-qP-CR)检测miR-301b-3p表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测miR-301b-3p和PTEN的靶向关系.结果 与hFOB细胞相比,U2OS、MG63中miR-301b-3p表达水平[(0.89±0.09),(0.70±0.07)比(0.20±0.02)]显著升高.与anti-miR-NC组比较,anti-miR-301b-3p组U2OS细胞活性[(0.59±0.06)比(1.33±0.13)]显著降低,而凋亡率[(22.06±2.31)％比(7.48±0.78)％]、PTEN蛋白表达[(0.69±0.07)比(0.35±0.03)]显著升高.PTEN是miR-301b-3p的直接靶基因.与anti-miR-301b-3p+si-NC组比较,anti-miR-301b-3p+si-PTEN组U2OS细胞活性[(1.16±0.12)比(0.56±0.06)]显著升高,而凋亡率[(10.28±1.16)比(22.12±2.34)]显著降低.结论 抑制miR-301b-3p表达可通过调控PTEN抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡.     

血必净注射液辅助治疗对脓毒症患者病情及微小高迁移率族蛋白B1、微小RNA-223表达的影响

目的 分析血必净注射液辅助治疗治对脓毒症患者病情转归及外周血高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、微小RNA-223(miR-223)表达的影响.方法 选取我院2019年1月—10月收治的脓毒症68例,据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组34例.对照组接受常规治疗,观察组在对照组基础上加用血必净注射液.比较2组治疗前及治...     

高迁移率族蛋白B1及其受体在炎症发生中的作用机制研究

<正>高迁移率族蛋白(high mobility group protein,HMG)是一大类富含电荷的低分子非组蛋白染色体核蛋白,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移能力而得名,HMGB1属于HMG家族成员之一,广泛存在于各种细胞中,人HMGB1基因定位于染色体13q12,在进化过程中高度保守,     

高迁移率族蛋白B1与恶性血液病

高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)是一种非组蛋白,可参与DNA转录,维持基因稳定,另外还可介导炎症反应,对于肿瘤的生长、转移等均有影响.近年来,已有研究证明HMGB1在各种淋巴瘤、白血病、骨髓增生异常综合(MDS)征等恶性血液疾病中呈高表达状态,并且依赖不同的机制实现其生物学效应.在治疗上使用HMGB1中和抗体还可增加恶性血液病对化疗药物的敏感性,HMGB1作为恶性血液病的治疗靶点越来越受到重视,该文就HMGB1的基本特征,HMGB1在恶性血液疾病中当前的研究进展以及其发展前景作一综述.     

高迁移率族蛋白B1与慢性非细菌性前列腺炎

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种高度保守的核蛋白,具有调控DNA稳定、复制、转录及翻译等功能。慢性非细菌性前列腺炎的发病和多种细胞因子的表达有关,由于HMGB1不同于TNF-α等早期细胞因子,发病后24 h才上升达到高峰,其可能成为慢性非细菌性前列腺炎治疗的新靶点,因此该文就HMGB1参与调控细胞因子及在慢性非细菌性前列腺炎中的作用,做一综述。     

利多卡因调控微小RNA-195对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

目的 探讨利多卡因(lidocaine)对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其可能的作用机制.方法 研究于2018年5―12月,体外培养骨肉瘤MG63细胞,不同浓度的利多卡因干预MG63细胞,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测MG63细胞存活率及顺铂半抑制浓度(IC50值);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时...     

溃疡性结肠炎患者血清高迁移率族蛋白B1水平的变化及其临床意义

目的 探讨溃疡性结肠炎患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平的变化及其临床意义.方法 采用ELISA法检测75例溃疡性结肠炎患者(溃结组)和75例健康体检者(对照组)血清HMGB1水平,应用ROC曲线评估其对溃疡性结肠炎的诊断价值.结果 溃结组血清HMGB1水平高于对照组[4.126(1.711,6.104)ng...     

胸水高迁移率族蛋白B1测定的临床意义研究

目的探讨胸水高迁移率族蛋白B1水平检测对胸水性质鉴别的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验对26份漏出液、37份炎症性渗出液和42份肿瘤性渗出液胸水标本进行HMGB1检测,并与白细胞计数作相关性分析。结果炎症性渗出液和肿瘤性渗出液的HMGB1水平均显著高于漏出液(P<0.01),而炎症性渗出液的HMGB1水平明显高于肿瘤性渗出液(P<0.01);胸水HMGB1对渗出液鉴别的灵敏度为89%时,其特异性为84%;渗出液中HMGB1水平与白细胞计数间具有正相关性(r=0.487,P<0.01)。结论胸水HMGB1检测对于胸水性质的鉴别具有较好的临床意义。     

miR-125b-5p对过氧化氢诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响及其机制研究

目的研究miR-125b-5p对H₂O₂诱导的小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的影响及潜在的机制。方法将RGC-5分为12组:对照组(细胞未处理组)、H₂O₂组(200μmol·L^-1H₂O₂处理12 h建立氧化损伤模型)、miRNC组、miR-125-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-125-5p组、H₂O₂+miR-NC组、H₂O₂+miR-125b-5p组、H₂O₂+si-NC组、H₂O₂+si-LCN2组、H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA组和H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA-LCN2组。H₂O     

肝细胞癌高迁移率族蛋白B1的表达及临床意义

目的检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达情况,并分析HMGB1蛋白与HCC临床病理特征的关系及意义。方法应用免疫组化法检测35例HCC癌组织及22例HCC癌旁组织中HMGB1蛋白的表达情况,比较两种组织中HMGB1蛋白的差异;记录HCC患者临床病理资料,分析HMGB1蛋白与HCC各项临床病理特征的关系。结果 HCC中HMGB1蛋白表达较癌旁组织增高(P<0.05)。HMGB1蛋白表达与HCC肿瘤临床TNM分期、Edmondson分级、淋巴结转移及其他脏器转移有关(均P<0.05)。结论 HMGB1蛋白表达在HCC中表达增高,与HCC部分临床病理特征有关,HMGB1蛋白可能对HCC的侵袭和转移有促进作用。     

大黄素抑制高迁移率族蛋白B1胞外释放及其机理

目的 研究大黄素对脂多糖激活后巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放的影响及其机理.方法 通过细胞培养和动物实验,观察大黄素对脂多糖激活后巨噬细胞株RAW264.7 HMGB1释放、HMGB1 mRNA表达和HMGB1核浆转移的作用,以及对内毒素血症小鼠血清HMGB1水平和存活率的影响.结果 大黄素明显抑制脂多糖激活后巨噬细胞HMGB1的基因表达、核浆转移和胞外释放,降低内毒素血症小鼠血消HMGB1水平并提高存活率.结论 大黄素具有抑制HMGB1胞外释放作用.     

粗糠柴毒素上调微小RNA-204-5p对脂多糖所致心肌损伤的保护机制研究

目的 探讨粗糠柴毒素对脂多糖（LPS）所致心肌损伤的影响及其保护机制。方法 该研究自2018年9月至2019年4月,用终浓度为10 mg/L的LPS刺激HCM、AC16心肌细胞6 h,分别加入终浓度为0.5μmol/L、1.0μmol/L、1.5μmol/L、2.0μmol/L粗糠柴毒素（Rottlerin）再处理12 h后分别记为LPS+0.5μmol/L Rottlerin组、LPS+1.0μmol/L Rottlerin组、LPS+1.5μmol/L Rottlerin组、LPS+2.0μmol/L Rottlerin组,以单纯10 mg/L LPS处理的为LPS组,以未经粗糠柴毒素和LPS处理的为对照组。将模拟物阴性对照（miR-NC）、微小RNA-204-5p模拟物（miR-204-5p）、抑制剂阴性对照（anti-miR-NC）、miR-204-5p抑制剂（anti-miR-204-5p）分别转染至未经任何处理的HCM细胞中,记为miR-NC组、miR-204-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-204-5p组。将miR-NC,miR-204-5p转染至单纯...     

miR-218-5p靶向B细胞淋巴瘤因子3表达影响白血病K562细胞的增殖和凋亡

目的 探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)靶向B细胞淋巴瘤因子3(BCL3)基因对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 反转录及荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测正常人骨髓细胞和白血病骨髓细胞中miR-218-5p和BCL3的表达水平.以白血病细胞K562...     

miR-140-5p在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤细胞侵袭转移的影响

目的研究miR-140-5p在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤细胞MG-63及U2OS侵袭转移的影响。方法 qRT-PCR及免疫原位杂交法检测miR-140-5p在骨肉瘤组织中的表达情况; qRT-PCR检测miR-140-5p在骨肉瘤细胞M G-63、U2OS及正常成骨细胞系hFOB 1. 19中的表达;在MG-63、U2OS细胞中转染miR-140-5p mimic以上调miR-140-5p的表达,qRT-PCR确认转染成功; Transwell实验检测不同miR-140-5p表达水平对骨肉瘤细胞MG-63、U2OS侵袭转移的影响。结果与癌旁组织比较,miR-140-5p在骨肉瘤组织中表达降低;与正常成骨细胞系h FOB 1. 19比较,miR-140-5p在骨肉瘤细胞MG-63、U2OS中表达降低;在MG-63、U2OS中转染miR-140-5p mimic后,miR-140-5p表达升高,M G-63、U2OS细胞侵袭转移能力下降。结论 miR-140-5p在骨肉瘤组织及细胞系MG-63、U2OS中表达下降,上调其表达水平可抑制MG-63、U2OS细胞侵袭转移。     

微小 218?5p调控 Wnt家族成员 2B抑制骨肉瘤细胞 143B的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨微小RNA-218-5p(miR-218-5p)对骨肉瘤细胞增殖,侵袭和迁移能力的影响及其作用机制.方法 2016年1月至2019年1月,实时荧光定量PCR检测miR-218-5p在骨肉瘤与正常骨组织及正常成骨细胞株与骨肉瘤细胞株的表达差异.应用CCK-8法检测过表达miR-218-5p对人骨肉瘤细胞株143B增殖的影响;细胞划痕实验检测和Transwell小室实验检测过表达miR-218-5p对骨肉瘤细胞143B迁移能力的影响.同时,应用在线miRNA靶基因预测软件预测miR-218-5p的靶基因,并应用荧光素酶报告实验进行结合位点验证.蛋白质印迹法验证靶基因的蛋白表达水平.结果 miR-218-5p在骨肉瘤组织中的表达水平(0.59±0.21)％明显低于正常骨组织,骨肉瘤细胞系中的表达水平(0.712±0.015)％、(0.685±0.016)％、(0.542±0.021)％、(0.524±0.011)％明显低于正常成骨细胞,P<0.05.同时,与对照组相比,过表达miR-218-5p(miR-218-5p mimic)的骨肉瘤细胞143B的细胞活力t6h(0.274±0.011),t24h(0.514±0.04),t48h(0.828±0.16),t72h(1.212±0.013),侵袭(164±12)个和迁移距离(26±2.4)％明显减弱,P<0.05.应用TargetScan网站进行预测,结果显示Wnt家族成员2B(WNT2B)为miR-218-5p的潜在靶基因之一;荧光素酶报告实验结果表明miR-218-5p直接靶向WNT2B;蛋白质印迹法证实miR-218-5p过表达组细胞中WNT2B蛋白的表达水平较对照组明显减少.结论 miR-218-5p在人骨肉瘤组织和癌细胞中低表达,其可能通过靶向WNT2B抑制骨肉瘤细胞143B的增殖、迁移和侵袭.     

微 RNA-30d-5p通过调控 ABCB5对胰腺癌进程的影响

目的探讨微 RNA(miR)-30d-5p在胰腺癌( PAAD)中的潜在作用和调控机制。方法选择 2016年 12月至 2019年 1月来新疆维吾尔自治区人民医院接受手术治疗的胰腺癌病人 35例,术后即刻获得胰腺肿瘤组织和癌旁非肿瘤组织,采用实时定量 PCR检测 miR-30d-5p在胰腺癌组织和细胞中的表达水平。使用细胞计数试剂盒( CCK-8)、克隆形成、 transwell和流式细胞术检测 miR-30d-5p对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。通过萤光素酶测定和蛋白质印迹法评估 miR-30d-5p对 ABCB5表达的调控作用。进一步构建裸鼠成瘤模型通过肿瘤质量和体积验证 miR-30d-5p对肿瘤生长的影响。采用苏木精伊红染色验证肿瘤组织增殖情况。结果与癌旁组织( 1.03±0.17)及正常细胞( 0.98±0.18)相比,胰腺癌组织( 0.35±0.08)和细胞( 0.63±0.08,     

微小 RNA-744-5p靶向整合素连接激酶对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-744-5p(miR-744-5p)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制.方法 选取2016年2月至2018年11月枣庄矿业集团枣庄医院接收的经病理确诊的56例膀胱癌病人病理组织切片,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测56例膀胱癌组织和对应癌旁组织中miR-744-5p表达水平.分别转染miR-744-5p模拟物(mimics)、miR-744-5p抑制剂或共转染miR-744-5p mimics与整合素连接激酶(ILK)过表达载体至膀胱癌BIU-87、T739细胞,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western Blotting)检测过细胞中细胞周期蛋白(Cyclin D1)、P21、基质金属蛋白酶(MMP-2)和钙黏附蛋白E(E-cadherin)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-744-5p与ILK调控关系.结果 与癌旁组织相比,膀胱癌组织中miR-744-5p表达水平显著降低[(0.98±0.10)比(0.25±0.02),P<0.05].过表达miR-744-5p后,BIU-87和T739细胞OD值、迁移数和侵袭数及Cyclin D1和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),而P21和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05).抑制miR-744-5p后,BIU-87和T739细胞OD值、迁移数和侵袭数升高(P<0.05).miR-744-5p靶向结合并负调控ILK,过表达ILK逆转过表达miR-744-5p对BIU-87和T739细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 膀胱癌组织中miR-744-5p呈低表达,过表达miR-744-5p可阻碍膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭,而抑制miR-744-5p则起相反的作用,其可能通过靶向负调控ILK表达发挥作用.