木瓜醇提物对大鼠类风湿性关节炎模型关节炎症及滑膜细胞凋亡的影响

目的:探讨木瓜醇提取物(CFE)对类风湿性关节炎(RA)大鼠模型的作用及机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,CFE低、中、高剂量组及雷公藤多苷片组。除正常组外,其余各组分别从每只大鼠右后足跖皮内注入完全弗氏佐剂0.1 mL,复制RA模型。灌胃给药,CFE低、中、高剂量组剂量分别为0.15,0.30,0.60 g·kg~(-1)·d~(-1),雷公藤多苷片组的剂量为0.009 g·kg~(-1)·d~(-1),正常组及模型组灌胃等体积的蒸馏水,每天1次,连续30 d。观察大鼠足肿胀度、炎症指数、脏器指数,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠滑膜组织病理变化情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠关节B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)及死亡因子(Fas)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠足肿胀度、炎症指数显著升高(P0.01);血清中的促炎因子IL-1β,IL-6,TNF-α水平显著升高(P0.01),抗炎因子IL-10显著降低(P0.01),滑膜组织中Bcl-2表达明显升高(P0.05);与模型组比较,CFE中、高剂量组足趾肿胀程度及炎症指数显著降低(P0.01),CFE各剂量组滑膜组织增生及炎症细胞浸润等病理变化减轻,血清中的促炎因子IL-1β,IL-6,TNF-α水平明显降低(P0.05),抗炎因子IL-10明显升高(P0.05),Bax,Fas的表达量升高,Bcl-2的蛋白表达量显著降低(P0.01)。结论:CFE能够降低RA关节炎症程度,具有较好的抗RA功效,这可能与CFE诱导的关节滑膜细胞凋亡有关。     

江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响

目的探讨江浙腹蛇毒(AHV)诱导类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白Caspase-3表达的影响。方法 AHV处理培养的滑膜细胞后,采用MTT比色法检测AHV对滑膜细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT的检测结果显示5μg/mL AHV处理组滑膜细胞增殖抑制率达67.2%,且与时间、剂量具有正相关关系(P0.05),AHV体外作用滑膜细胞24 h的IC50为3.508μg/mL。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,AHV各剂量组凋亡率明显增加(P0.05),并与剂量呈正相关。AHV体外作用滑膜细胞24 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,其蛋白表达率明显高于对照组。结论 AHV对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,细胞凋亡率明显增加可能与AHV诱导滑膜细胞Caspase-3活化相关。     

寒热方剂对胶原性关节炎大鼠的治疗作用及对滑膜细胞超微结构的影响

目的：从治疗作用评价、滑膜细胞超微结构观察的角度，探讨寒、热方剂清络饮、温络饮对胶原性关节炎大鼠的治疗作用、作用机理及作用异同。方法：以Ⅱ期胶原诱导的关节炎大鼠为对象，以寒、热方剂清络饮、温络饮分别进行干预，雷公藤多苷片为治疗对照。于CIA免疫1、7、21、33d分别进行疼痛试验及关节肿胀程度、关节炎指数等体征评价，CIA免疫33d时行滑膜细胞透射电镜观察。结果：寒热两方均可明显改善CAI免疫侧、继发侧疼痛（P＜0．01）和踝关节肿胀（P＜0．01）等主要结局指标，降低关节炎指数（P＜0．01），效果速于、优于或近于雷公藤多苷片对照组。清络饮改善CIA踝关节肿胀、控制继发病理改变的效果优于温络饮。寒热两方均可减轻滑膜细胞亢进的分泌功能及其代谢活性，反映出寒热两方的部分作用机理。     

微针刀拔吸疗法治疗类风湿性关节炎及滑膜炎

目的：探讨微针刀拔吸疗法治疗类风湿性关节炎及滑膜炎的临床疗效.方法：98例类风湿性关节炎及滑膜炎患者随机分为研究组和对照组,研究组采用微针刀拔吸进行治疗,对照组采用药物进行治疗.结果：研究组关节疼痛指数、肿胀指数显著优于对照组,P〈0.05,研究组总有效率为85.7%,对照组总有效率为73.5%.结论：微针刀拔吸疗法治疗类风湿性关节炎及滑膜炎的疗效可靠,值得在临床推广.     

黄芪桂枝五物汤对CIA模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤(HGW)对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:选用SD大鼠72只,随机分为正常组,模型组,HGW低、中、高剂量组,Tofacitinib(TFN)组,HGW低、中、高剂量组药物剂量分别为16,32,64 g·kg~(-1),相当于临床常人用量的3,6,12倍,TFN给药剂量为15 mg·kg~(-1),正常组、模型组每日给予10 m L·kg~(-1)蒸馏水。以牛Ⅱ型胶原加弗氏完全佐剂建立CIA大鼠模型,经HGW治疗4周后光镜下观察各组大鼠踝关节病理形态;通过流式细胞术检测白细胞介素(IL)-4,IL~(-1)0含量,免疫组化法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)染色检测滑膜细胞的凋亡。结果:与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达增多(P0.05),模型组Bax蛋白表达减少(P0.05);与模型组比较,HGW高剂量组,TFN组大鼠滑膜中Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多(P0.05)。滑膜细胞凋亡可见,与正常组比较,模型组,HGW低、中、高剂量组,TFN组滑膜细胞增多,凋亡率下降(P0.05);与模型组比较,HGW低、中、高剂量组,TFN组大鼠滑膜细胞凋亡率上升(P0.05);与HGW低剂量组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率显著上升(P0.01);与HGW-M组比较,HGW高剂量组滑膜细胞凋亡率上升(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤可以促进RA大鼠异常亢进的滑膜细胞凋亡。     

蒲公英提取物对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡及炎症因子的影响

目的:探讨蒲公英提取物对类风湿性关节炎成纤维样滑膜(FLS)细胞增殖、凋亡及炎症的影响及其可能作用机制。方法:原代分离培养类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞,不同浓度的蒲公英提取物处理成纤维样滑膜细胞,检测细胞增殖、凋亡及IL-6、TNF-α;qRT-PCR法检测miR-708-5p的表达量;miR-NC、miR-708-5p mimics分别转染至成纤维样滑膜细胞,anti-miR-NC、anti-miR-708-5p分别转染至成纤维样滑膜细胞后加入5 mg/mL蒲公英提取物培养细胞,检测细胞增殖、凋亡及IL-6、TNF-α。结果:蒲公英提取物处理后细胞活力和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),miR-708-5p的表达量、细胞凋亡率升高(P<0.05);转染miR-708-5p mimics可降低细胞活力和IL-6、TNF-α的水平(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);转染anti-miR-708-5p可减弱蒲公英提取物对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡及炎症反应的作用。结论:蒲公英提取物可通过促进miR-708-5p表达而抑制类风湿性关节炎成...     

痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎大鼠原代滑膜细胞的影响

[目的]观察痹痛灵颗粒对胶原诱导类风湿性关节炎(CIA)大鼠关节原代滑膜细胞的影响。[方法]通过测量Ⅱ型胶原诱导大鼠类风湿性关节炎模型的足踝体积和关节肿胀评分,并对CIA大鼠原代滑膜细胞增殖能力的检测及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的测定,观察痹痛灵颗粒对滑膜细胞及滑膜细胞培养上清液IL-1β、TNF-α含量的影响。[结果]痹痛灵颗粒高、中剂量组大鼠滑膜细胞增殖小于模型组,与模型组相比有显著性差异;痹痛灵颗粒高、中、低剂量组与雷公藤多苷片组的细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平明显低于模型组,有显著差异。[结论]痹痛灵颗粒通过抑制CIA大鼠滑膜细胞病理性增生,降低滑膜细胞培养液中IL-1β、TNF-α水平,对胶原诱导大鼠类风湿性关节炎产生一定的治疗作用。     

中药调节滑膜细胞治疗类风湿性关节炎研究进展

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是以滑膜炎为主要特征的慢性、系统性、自身免疫性疾病。该病是临床常见病,病程长、治疗难、易反复,最后导致功能障碍影响生活质量。RA属于中医学＂痹证＂范畴,是由于风、寒、湿邪入侵,导致气血凝滞,经络痹阻而引起的肢体关节病变。往往寒热错杂、虚实同见、痰瘀互结,病程缠绵难愈。近年来滑膜细胞成为中药治疗RA的主要靶向,许多中药通过调节相关因子的表达及分泌直接或间接地作用于滑膜细胞达到治疗RA的目的,临床疗效显著。     

温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

目的：研究中药温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜细胞凋亡作用。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（n=10,简称正常组）、造模组,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。造模成功后随机分为模型组（n=10）、温化蠲痹方组（n=10,简称中药组）、MTX组（n=10）。正常组、模型组、中药组按22.9g·kg-1·d-1剂量分别灌胃生理盐水、温化蠲痹方,均每日1次,MTX组按0.78mg·kg-1·w-1剂量灌胃MTX混悬液,每周1次。给药30天后,运用透射电镜和流式细胞术检测大鼠滑膜细胞凋亡。结果：与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数（AI）评分明显降低（P〈0.01）;与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低（P〈0.01）。透射电镜显示,中药组大鼠滑膜细胞凋亡较模型组大鼠滑膜细胞凋亡明显。流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组大鼠滑膜细胞凋亡率明显降低（P〈0.05）;与模型组大鼠比较,中药组和MTX组大鼠滑膜细胞凋亡率明显升高（P〈0.01）。结论：CIA大鼠滑膜细胞凋亡减少,诱导滑膜细胞凋亡可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一。     

艾灸对类风湿性关节炎大鼠关节滑膜细胞超微结构的影响

目的:观察艾灸"肾俞""足三里"穴对类风湿性关节炎模型大鼠关节滑膜细胞的影响,为艾灸抗炎的免疫作用机制提供新的依据.方法:120只雄性Wistar大鼠随机选取20只为正常组,其余大鼠采用风、寒、湿环境因素结合弗氏完全佐剂的方法复制类风湿性关节炎模型,而后随机分为模型组、艾灸组、针刺组、药物组、CO2激光组,每组20只....     

针刺对脑缺血大鼠海马区凋亡细胞及Caspase-9蛋白表达的影响

目的观察针刺对脑缺血损伤大鼠大脑海马区凋亡细胞及Caspase-9蛋白表达的影响,探讨针刺对脑缺血损伤的神经保护机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、脑缺血模型组、脑缺血治疗组,每组10只,采用化学刺激诱导血栓性闭塞大脑中动脉造成大鼠局灶性脑缺血模型。针刺“百会”、“水沟”,每日1次,治疗7d。应用苏木素-伊红染色（HE）及免疫组化方法观察针刺前后大鼠缺血区凋亡细胞及海马区Caspase-9蛋白表达的变化。结果大鼠局灶性脑缺血后Caspase-9表达增加,针刺对脑缺血损伤大鼠Caspase-9的过度表达有明显抑制作用。HE染色显示,缺血灶内大量神经元变性坏死,出现脑水肿表现,针剌治疗后变性坏死细胞明显减少。结论针刺可减轻Caspase-9的过度表达,改善脑缺血状态,从而减轻脑损害程度,这可能是针刺减轻脑缺血损伤的机制之一。     

药物电针刀疗法对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的研究药物电针刀疗法对骨关节炎家兔一氧化氮(NO)及软骨细胞凋亡的影响。方法应用关节制动的方法复制骨关节炎(OA)模型,18只造模成功的中国家兔,随机分为药物电针刀组(简称 A组)、液针刀组(简称 B 组)和对照组(简称 C 组),A 组用药物电针刀加手法治疗,B 组用液针刀加手法治疗,C组仅予以手法治疗,每3日1次,疗程为1个月。用硝酸还原法检测关节滑液中 NO 含量;用流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡率。结果 A、B、C 组关节滑液中 NO 的含量分别为(33.67±17.72)μmol·L~(-1)、(58.90±22.07)μmol·L~(-1)和(83.30±16.20)μmol·L~(-1),软骨细胞的凋亡率分别为(25.27±10.82)%、(51.71±12.42)%和(74.80±9.37)%,3组间差异有显著性。结论与液针刀加手法相比较,药物电针刀疗法加手法能更显著减少关节液 NO 的含量,抑制软骨细胞的凋亡,而治疗膝骨性关节炎。     

无尾果醇提物对类风湿性关节炎大鼠的影响

目的研究无尾果乙醇提取物对类风湿性关节炎大鼠的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型,观察醇提物对大鼠体质量、关节炎指数、足肿胀程度、关节病理改变及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-2、p65、IκBα磷酸化水平的影响。结果乙醇提取物可明显改善大鼠症状,显著降低TNF-α、IL-1β、IL-6、p65、IκBα磷酸化水平(P0.05,P0.01),显著升高IL-2水平(P0.01)。结论无尾果乙醇提取物具有良好的抗类风湿性关节炎作用,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

针刀联合药物治疗类风湿性关节炎疗效Meta分析

目的 系统评价针刀联合药物治疗类风湿性关节炎(RA)的临床疗效和安全性。方法 在知网、万方、中国生物医学、维普、PubMed、The Cochrane Library中搜集有关针刀联合药物治疗RA的随机对照试验(RCT)研究。根据Cochrane系统评价手册,2名评审人员独立筛选出符合标准的文献,严格按标准评价其文献质量,之后提取出所需要的资料。然后用RevMan 5.4软件行统计学分析。结果 最终纳入13个RCT,合计947例RA患者。Meta分析结果显示,针刀联合药物治疗RA的总有效率、视觉模拟评分法、晨僵时间、类风湿因子方面均优于单纯使用药物治疗。结论 针刀联合药物治疗RA具有明显疗效,且安全性高,但因为此次研究纳入文献少且质量偏低,后续需更多高质量RCT研究加以验证。     

兔类风湿性关节炎模型的建立及成纤维样滑膜细胞的培养

目的:建立卵蛋白诱导的兔类风湿性关节炎模型,明确兔类风湿性滑膜细胞培养的条件,储备后期用于实验研究的滑膜细胞,为后期体外细胞实验提供最佳实验条件。方法:健康大耳白兔8只,随机分为正常组4只,模型组4只,模型组建立卵蛋白诱导的类风湿性关节炎动物模型,动物模型建成后第2周取模型组兔膝关节滑膜细胞培养、传代、收集冻存细胞,1月后复苏细胞。结果:模型组兔膝关节病理切片见炎性细胞浸润,滑膜细胞增生明显,血管翳形成,并侵蚀和破坏软骨;培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征,呈长梭形极向生长,成功储备及复苏滑膜细胞。结论:成功建立兔类风湿性关节炎模型,成功地培养出了兔膝关节类风湿性滑膜细胞。     

艾灸对佐剂性关节炎大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡的影响

目的:观察艾灸对佐剂性关节炎(AA)大鼠足趾滑膜组织自噬和凋亡相关指标的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、甲氨蝶呤组、雷帕霉素组,每组9只。采用弗氏完全佐剂注射法制备AA大鼠模型。艾灸组予艾灸“足三里”“关元”,每次20 min,每日1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤(0.35 mg/kg)灌胃,每周2次;雷帕霉素组予雷帕霉素腹腔注射(1 mg/kg),隔日1次;3组均干预3周。采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,透射电镜观察大鼠足趾关节滑膜细胞自噬体,Western blot法检测大鼠足趾滑膜组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)C1、磷酸化(p)-mTORC1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、死亡受体(Fas)、死亡受体配体(FasL)蛋白表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠足趾容积增大(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著升高(P<0.001),足趾滑膜组织中p-mTORC1蛋白表达量升高(P<0...     

电针干预佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡的MMP-3、MMP-9分子调节机制

目的观察电针干预对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡和相关蛋白基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法32只雄性SD大鼠被随机分为生理盐水组、模型组、电针干预组和假电针干预组,每组8只。生理盐水组大鼠在双侧足垫部注射模拟造模,其余大鼠用弗氏完全佐剂在双侧足垫部注射造模。电针干预组大鼠予以电针干预。假电针干预组予以假电针刺激处理。HE染色观察模型大鼠踝关节炎症进展情况,Tunnel法检测模型大鼠踝关节滑膜细胞凋亡情况,RT-PCR检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的mRNA表达,Western blot检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的蛋白表达。结果HE染色显示,电针干预组大鼠的关节炎症显著轻于模型组。Tunnel法检测,电针干预可以促进关节炎大鼠的滑膜细胞凋亡。RT-PCR和Western blot检测结果显示,电针干预可以显著降低关节炎大鼠踝关节滑膜组织中的MMP-3、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论电针干预可以显著减轻佐剂性关节炎大鼠的关节炎症和增殖的滑膜细胞数量,其分子机制可能和电针降低局部的MMP-3、MMP-9蛋白的表达有关。     

类风湿关节炎滑膜细胞凋亡研究进展

<正>类风湿关节炎(RA)是一种主要累及小关节的慢性自身免疫性疾病。主要表现为对称性多关节肿胀、疼痛、晨僵,体质量减轻以及全身多系统的受累。病理特征是遗传与环境等多因素相互作用而导致的滑膜组织炎症,血管翳形成及随后的关节损坏,同时伴有纤维沉淀、细胞增殖、分化及凋亡异常     

当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠滑膜MMP-9的影响

目的研究当归拈痛汤对类风湿性关节炎大鼠的滑膜组织中MMP-9的影响,进一步探讨该药物的作用机制。方法用Mtb诱导实验性类风湿性关节炎大鼠模型,并随机分为4组,空白对照组、当归拈痛汤组、模型组以及作为阳性对照的雷公藤组。经过实验阶段的干预后,检测各组大鼠关节滑膜组织的MMP-9水平。结果与阳性对照组和模型对照组相比,当归拈痛汤组显著降低模型大鼠关节滑膜中MMP-9水平(P0.05)。结论当归拈痛汤可以下调模型大鼠关节滑膜组织中的MMP-9水平,提示其作用机制可能与调控MMP-9水平相关。