罗格列酮预防肝纤维化作用研究

肝纤维化是各种原因引起的慢性肝损伤所共有的病理过程,肝星形细胞（HSC）的激活、增殖及细胞外基质沉积是肝纤维化的重要环节。新近有学者观察到活化后的HSC及肝纤维化组织中过氧化酶增殖物激活受体γ（PPARγ）表达明显下调,PPARγ参与了肝纤维化的发生,     

罗格列酮预防非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化的研究

目的观察罗格列酮预防非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝纤维化的作用。方法建立SD大鼠NAsH伴肝纤维化的模型（HF24w）,同时高脂喂养大鼠12周后予罗格列酮（1．5mg·kg^-1·d^-1）干预12周（HF24W＋RGZ12W组）。观察肝组织病理学改变,测定血清丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因-α（TNF—α）、游离脂肪酸（FFA）、Ins、FPG,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）。结果HF24W＋RGZ12W组肝组织炎症、纤维化评分明显低于HF24W组（P〈0．05）,脂肪变性与HF24W组无统计学差异;HF24W＋RGZ12W组血清MDA、TNF—α、FFA、Ins、HOMAIR均明显低于HF24W组（P〈0．05）。结论罗格列酮可以减缓NASH大鼠肝纤维化的发生发展。     

大鼠肝纤维化逆转机制研究

本实验应用腹腔注射无菌 40 %ＣＣＬ4溶液的方法[1] 造成大鼠肝纤维化自发逆转模型及不能逆转模型 ,观察平滑肌α肌动蛋白 (α ＳＭＡ)、基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的动态变化 ,探讨了调解逆转的生物学机制。材料和方法一、材料雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 64只 ,每只重 2 0 0～ 3     

罗格列酮对免疫性肝纤维化大鼠肝组织IGF-1表达的影响

目的探讨免疫性肝纤维化大鼠肝组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达变化,并观察罗格列酮对其的影响。方法应用猪血清腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,适时给予罗格列酮干预。采用ELISA法检测血清IGF-1水平和免疫组织化学法检测肝组织IGF-1的表达。结果与对照组相比,第4、6、8周模型组大鼠血清及肝组织IGF-1水平均显著升高(P<0.05);与模型组相比,8周罗格列酮组大鼠纤维化程度减轻(P<0.01),血清及肝组织IGF-1表达水平降低(P<0.01)。结论随肝纤维化进展,大鼠血清和肝组织IGF-1的表达均增强,罗格列酮可降低肝组织IGF-1的表达,因而能减轻大鼠肝纤维化。     

罗格列酮对HCT-15细胞相关蛋白表达的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮（ROS）对人结直肠癌HCT-15细胞相关蛋白表达的影响。方法培养HCT-15细胞,分别加入25、50、100μmaol／L的ROS进行干预,检测干预前后细胞中基质金属蛋白酶7（MMP-7）、组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）蛋白的阳性表达率。结果MMP-7、TIMP-1在人结直肠癌细胞HCT-15中呈阳性表达,用药后可显著降低两种蛋白的表达,且呈明显的浓度依赖性。结论ROS可通过降低MMP-7、TIMP-1在人结直肠癌细胞HCT-15中的表达而发挥抗肿瘤作用。     

抗纤合剂对血吸虫病肝纤维化的防治作用研究

目的 :观察抗纤合剂的抗肝纤维化作用。方法 :用日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔 ,制成肝纤维化模型 ,病兔均以吡喹酮顿服杀虫治疗 ,继之中药组开始服用抗纤合剂治疗肝纤维化 ,并与秋水仙碱组及 0 .9%Na Cl组比较。RIA法检测血清 型前胶原 (PC )、透明质酸 (HA) ,苏木精 -伊红、天狼红染色观察胶原沉积 ,通过原位杂交检测基质金属蛋白酶 - 1(MMP- 1)和基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 1(TIMP- 1)的表达 ,并作 、 型胶原和转化生长因子 β1 (TGF- β1 )免疫组化染色。结果 :中药组 PC 、HA水平降低 (P <0 .0 5 ) ,图像分析显示肝组织 、 型胶原和TGF- β1 表达减弱 (P <0 .0 5 ) ,肝组织 MMP- 1m RNA的表达增强 ,TIMP- 1m RNA表达减弱 (P <0 .0 5 ) ,肝纤维化程度减轻。结论 :抗纤合剂具有抗实验性血吸虫病兔肝纤维化的作用。     

罗格列酮抗日本血吸虫病小鼠肝纤维化的实验研究

目的 研究PPARy配体罗格列酮抗日本血吸虫病肝纤维化作用。方法 应用HE染色、免疫组化法及多媒体病理图文定量分析，观察罗格列酮治疗血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏的病理改变及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果罗格列酮治疗组小鼠肝脏纤维组织的增生明显减少，Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量明显低于对照组及吡喹酮治疗组。结论 PPARy配体罗格列酮有抗日本血吸虫病肝纤维化作用，能明显减少肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。     

正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMPs和TIMPs蛋白表达的影响

目的：观察正肝化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMPs和TIMPs蛋白表达的影响，探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组与正肝化瘀方组，对正肝化瘀方组大鼠采用四氯化碳＋高脂低蛋白饮食诱导肝纤维化模型，造模当天即以正肝化瘀方溶液进行灌胃，6周，模型组和正常组大鼠予以等量生理盐水灌胃。采用蛋白印迹法分析各组大鼠肝组织α-SMA、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达，明胶酶图法检测各组大鼠肝组织MMP-2和MMP-9的活性。结果：模型组大鼠肝组织α-SMA蛋白表达明显增强，正肝化瘀方组大鼠α-SMA蛋白表达明显减弱；模型组大鼠肝组织MMP-2／9活性显著升高，正肝化瘀方组的MMP-2／9蛋白活性明显下降；模型组大鼠肝组织TIMP-1／2蛋白表达明显增强，正肝化瘀方组大鼠肝组织TIMP-1／2蛋白表达较模型组减弱，其TIMP-2蛋白表达减弱更为明显。结论：正肝化瘀方能显著下调α-SMA蛋白表达，降低MMP-2／9蛋白活性，下调MMP-2／9蛋白和TIMP-1／2蛋白的表达．促进ECM（细胞外基质）的降解，抑制肝纤维化的形成，促进肝纤维化的逆转。     

罗格列酮对大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶组织抑制因子1表达的影响

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR γ)是一种由配体激活的核转录因子,其作用广泛,与肝纤维化也存在密切联系[1].本实验选择PPAR γ的高亲和配体罗格列酮作用肝星状细胞(HSC),观察罗格列酮对HSC增殖、细胞外基质的主要成分Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)以及与细胞外基质降解密切相关的基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)表达的影响,以期探讨罗格列酮对肝纤维化的影响.     

基质金属蛋白酶与肝纤维化的研究进展

肝纤维化是慢性肝脏疾病的重要病理特征，主要由于肝脏细胞外基质代谢失衡，合成超过降解所致，肝纤维化和原代细胞培养的早期，肝星状细胞（HSC）短暂表达基质金属蛋白酶－3（MMP－3）、MMP－13和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA)并表现为降解基质的表型，肝纤维化进展期和HSC培养的晚期，HSC可表达降解正常肝基质，但抑制肝纤维化中沉积的胶原纤维降解的MMPs成分，同时金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)的表达增加，抑制MMPs的活性，肝纤维化恢复期TIMPs迅速下调，MMPs活性增加。肝基质降解，导致肝纤维化消退。     

肝纤维化基质金属蛋白酶-26/基质金属蛋白酶抑制因子-1 mRNA的表达

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组能降解细胞外基质（ECM）的酶，该家族的一些酶是迄今为止已发现的惟一能分解纤维类胶原的酶类，MMP-26是MMPs家族的一个新成员，又称endometase或matrilysin-2，MMP-26可能参与一系列与组织重建有关的事件。基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）是一组能特异性抑制MMPs活性的低分子蛋白质，     

加味桃核承气汤对四氯化碳所致肝纤维化模型大鼠TIMP-1蛋白表达的影响

目的：观察加味桃核承气汤对四氯化碳（CCl4）肝纤维化的治疗作用，从分子生物学水平探讨其对金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的影响。方法：用CCl4诱导大鼠肝纤维化，将实验动物随机分为正常对照组、模型对照组、加味桃核承气汤高、中、低剂量治疗组和秋水仙碱对照组；采用灌胃给药，疗程8周；用苦味酸-天狼红胶原染色方法观察肝纤维化积分（SSS）的变化；用免疫组化技术半定量检测肝组织TIMP-1的蛋白表达水平。结果：模型对照组SSS显著高于正常对照组，经加味桃核承气汤治疗后SSS显著减轻；模型对照组大鼠肝组织TIMP-1的蛋白表达水平增加。各治疗组的TIMP-1的蛋白表达水平均显著下降。结论：①加味桃核承气汤对CCl4诱导的肝纤维化有治疗作用。②加味桃核承气汤抗实验性肝纤维化作用机制与抑制肝星状细胞（HSC）的活化，调控TIMP-1的蛋白表达水平有关。     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1表达的影响

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制.方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过RT-PCR检测MMP-1、TIMP-1的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Masson胶原染色.结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠MMP-1的表达无明显影响(P>0.05),但可以抑制TIMP-1的表达(P<0.05),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.05);然而在病理形态学的观察中,未发现秋水仙碱治疗组与肝纤维化模型组之间存在的显著性差异(P>0.05).结论 秋水仙碱可以抑制纤维化肝脏TIMP-1的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化的作用,但其作用有限.     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶—1及其抑制因 …

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）、基质金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达的影响。从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制。方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＭＰ－１、ＴＰＭＰ－１的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色。结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠ＭＭＰ－１的表达无明     

基质金属蛋白酶—1,反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒？…

目的 观察基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）,反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对大鼠肝纤维经的影响。方法 运用重组ＤＮＡ技术,构建大鼠ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１,真核细胞表达质粒,经脂质包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠纤维化模型体内,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果 ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１表达质粒均可促进肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原的降解（Ｐ〈０．０５－Ｐ〈０．０１）,且作     

超声微泡联合超声辐射介导基质金属蛋白酶抑制因子-1 siRNA抗大鼠肝纤维化的作用

基质金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）对MMPs的抑制是导致ECM在肝纤维化过程中过度沉积的关键，理论上抑制TIMP-1基因在肝组织中表达有利于MMPs降解过度沉积的胶原及防止肝窦毛细血管化。我们用RNA干扰（RNAi）技术构建了定点干扰TIMP-1表达的pRNAT-U6．2／Lenti siRNA病毒表达载体，体外实验证明该载体抑制TIMP-1表达的效果显著。为使目的基因在肝组织中释放而不影响其他器官TIMP1基因的正常表达，我们用超声造影剂微泡混合TIMP-1 siRNA表达载体，同时超声辐照大鼠肝脏，观察该方法定位释放靶基因到靶器官的有效性。[第一段]     

肝炎平对肝纤维化大鼠血浆同型半胱氨酸水平的影响

目的探讨肝炎平对肝纤维化大鼠血浆同型半胱氨酸、半胱氨酸、半胱．甘氨酸及谷胱甘肽水平的影响。方法制备CCl4大鼠肝纤维化模型。动物随机分为正常对照组（N组）、肝炎平治疗组（G组）、和络舒肝胶囊治疗组（H）及肝纤维化模型组（D组）。采用高效液相色谱法（HPLC）测定各组血浆同型半胱氨酸（homocysteine）、半胱氨酸（cysteine）、半胱．甘氨酸（cysteinyl-glycine）及谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平。结果肝炎平治疗组及和络舒肝胶囊治疗组同型半胱氨酸含量明显下降，与模型组相比较有显著性差异（P〈0．05）。结论肝炎平通过调节肝纤维化大鼠体内含硫氨基酸代谢，降低血浆同型半胱氨酸，可能是其抗大鼠肝纤维化作用的机制之一。     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织Kruppule样因子6信号通路的影响

目的观察罗格列酮对NASH肝纤维化大鼠肝组织kruppule样因子（KLF）6及其下游靶基因TGFβ1信号通路的影响。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、高脂组和罗格列酮组,24周末处死所有大鼠,留取肝组织行HE和Massson染色,检测血清TG、游离脂肪酸、AST、ALT及HA、LN、CⅣ等,RT-PCR检测核转录因子KLF6、TGFβ1以及反映HSC活化的特异性标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA的变化,免疫组织化学检测KLF6、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、α-SMA的蛋白表达。结果模型组大鼠24周末出现典型脂肪性肝纤维化,治疗组纤维化程度明显减轻和改善。模型组血清生物化学指标及肝纤维化指标均有不同程度增高,罗格列酮干预16周后上述各指标均见明显改善,两组间差异有统计学意义（P〈0.01）。RT-PCR显示模型组KLF6 mRNA（0.96±0.08）、TGFβ1 mRNA（0.91±0.07）和α-SMA mRNA （1.08±0.19）的相对表达量均明显上升,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;治疗组则显示增高的上述基因呈不同程度的下降,差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组织化学显示罗格列酮组KLF6、α-SMA蛋白的表达较模型组减少,而PPARγ的表达较模型组增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论罗格列酮可以激活PPARγ,降低NASH肝纤维化大鼠肝组织核转录因子KLF6及其下游靶基因TGFβ1的表达,抑制HSC的活化,阻止肝纤维化形成,这可能是其发挥抗肝纤维化的作用之一。     

依达拉奉对实验性肝纤维化大鼠脂质过氧化的影响

目的探讨依达拉奉（EDA）对实验性肝纤维化大鼠脂质过氧化的影响。方法以四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型。30只Sprague—Dawley大鼠随机分为对照组（10只）、肝纤维化模型组（10只）和EDA防治组（10只）。检测各组大鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平及肝组织羟脯氨酸、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。结果EDA防治大鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平分别为714．2±28．2U／L和766．0±11．0U／L,较模型组（1110．3±45．9U／L和1640．3±26．7U／L,P〈0．05和P〈0．01）明显降低;EDA组大鼠肝组织羟脯氨酸和丙二醛含量分别为0．4±0．1μg／mg和5．5±2．3nmol／gl,较模型组（0．8±0．1μg／mg和7．5±2．1nmol／gl,P均〈0．01）显著下降;EDA组大鼠超氧化物歧化酶活性为129．7±2．3u／g,较模型组（933±3．9u／g,P〈0．01）明显升高;EDA组和模型组大鼠肝组织纤维化评分分别为2．7±1．0和3．5±0．7,差异显著（P〈0．01）。结论EDA对大鼠肝纤维化有一定的防治作用,其机制很可能与抗脂质过氧化损伤有关。