基于UPLC-Q-TOF-MS的泽泻盐制前后血清药物化学比较分析

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对泽泻、盐泽泻水提液灌胃给药后大鼠血清中的移行成分进行比较分析。方法：SD大鼠随机分为空白组、泽泻组(10 g·kg^-1)和盐泽泻组(10 g·kg^-1),每组3只,给药组分别灌胃给予泽泻、盐泽泻水提液,空白组灌胃等体积饮用水,早晚各1次,连续3 d,末次给药60 min后,眼眶采血,制备血清样品。采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,10%～50%A;10～27 min,50%～95%A;27～27.1 min,95%～10%A;27.1～30 min,10%A),流速0.3 mL·min-1,正离子模式下采集数据,扫描范围m/z 100～1 200。在自建泽泻化学成分库的基础上借助UNIFI 1.9.2软件对泽泻、盐泽泻水提液及给药血清、空白血清的总离子流图和二级质谱碎片信息进行比对,推导泽泻、盐泽泻可能的入血移行成分及其裂解规律,并计算...     

维吾尔族药睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法建立

目的：针对睡莲花质量控制指标选择较为单一、整体质量控制水平较低等问题,建立睡莲花中多种活性成分同步测定的质量控制方法。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)鉴别并选择质量控制指标,色谱条件为流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～2 min,3%～8%B;2～4 min,8%～10%B;4～13 min,10%～15%B;13～19 min,15%～20%B;19～26 min,20%～45%B),流速0.4 mL·min-1,检测波长350 nm;质谱条件为电喷雾离子源,负离子扫描模式,离子源温度120℃,扫描范围m/z 100～1 200,低能量扫描时传输碰撞能量6 eV,高能量扫描时传输碰撞能量25～50 eV。采用高效液相色谱法(HPLC)建立睡莲花多指标成分同步测定的质量控制方法,流动相0.2%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～30 min,12%～15%B;30～60 min,15%～22%B;60～90 min,22%～40%B),检测波长350 nm;含量测定的供试品溶液制备方法为加80倍量70%甲醇...     

基于血清药物化学和网络药理学的泽漆抗慢阻肺药效物质基础分析

目的：对泽漆水提物的入血成分进行分析,探讨该水提物抗慢性阻塞性肺疾病（COPD）的药效物质基础。方法：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）检测大鼠灌胃泽漆水提物后入血成分,检测条件为Agilent RRHD SB-C18色谱柱（3 mm×100 mm,1.8μm）,流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～15 min,5%～30%B;15～20 min,30%～50%B;20～30 min,50%～95%B;30～35 min,95%～5%B）,检测波长190～800 nm,柱温40℃,流速0.3 mL·min-1,进样量4μL,电喷雾离子源（ESI）,正、负离子模式检测,检测范围m/z 50～1 250。利用网络药理学方法对入血成分的靶点与COPD的靶点进行交互分析,通过网络拓扑分析筛选关键成分和关键靶点,运用Metascape数据库预测泽漆抗COPD主要涉及的分子功能、生物过程、细胞组成及信号通路,并采用分子对接技术判断关键靶点与关键成分的亲合力。结果：大鼠灌胃泽漆水提物后,从其含药血清中检测出了29个入血成分,9个为原...     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析白术及其不同炮制品化学成分及其差异

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对白术生品及其4种炮制品的成分进行快速分析及鉴定,找出炮制前后差异成分。方法 运用Titank C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(正离子模式：0～0.01 min, 5%B;0.01～5 min, 5%～30%B;5～14 min, 30%～60%B;14～23min, 60%～70%B;23～31 min, 70%～95%B;31～35 min, 95%B)正离子模式检测,电喷雾离子源(ESI),扫描范围m/z 50～1250。结合对照品、数据库及相关文献对白术及其炮制品进行化学成分鉴定。各样品数据经MarkView 1.2.1归一化处理后导入SIMCA 14.1中进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),通过变量重要性投影(VIP)值>1且t检验中P<0.01的原则,筛选得到白术炮制前后差异成分。结果 共鉴定出57个化学成分,白术50个成分,麸炒白术53个成分,土炒白术...     

米泔水漂苍术炮制前后化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）对茅苍术生品及米泔水制品的成分进行快速分析及鉴定,找出其炮制前后差异性成分。方法 运用TitanK C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（负离子模式：0~0.01 min,10%B;0.01~12 min,10%~25%B;12~18 min,25%~55%B;18~30 min,55%~70%B;30~35 min,70%~95%B;35~37 min,95%B;37~37.1 min,95%~10%B。正离子模式：0~0.01 min,10%B;0.01~10 min,10%~56%B;10~30 min,56%~75%B;30~35 min,75%~95%B;35~37 min,95%B;37~37.1 min,95%~10%B）,正、负离子模式检测,电喷雾离子源（ESI）,扫描范围m/z 100~1 250。结合对照品、数据库及相关文献信息,运用PeakView 1.2软件对茅苍术及其米泔水制品进行化学成分鉴定。各样品数据经MarkerView? 1.2.1归一化处理后导入SIMCA 14.1中进行主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）,通过变量重要性投影（VIP）值>1且t检验中P<0.01的原则,筛选得到茅苍术炮制前后差异性成分。结果 从茅苍术生品及米泔水制品中共鉴定得到56个成分,包括萜类17个、聚乙炔类8个、有机酸12个、糖苷类4个、黄酮类4个及其他类11个,两者共有成分43个,特有成分分别为7、6个。PCA及OPLS-DA结果表明,茅苍术炮制前后化学成分含量存在明显差异,共筛选得到苍术素、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ及汉黄芩素等23个差异性成分。结论 茅苍术中主要含有倍半萜类、聚乙炔类及有机酸类成分,其炮制前后成分发生了水解等反应,且苍术素等有效成分含量增加,可为茅苍术炮制增效的物质基础研究提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS联合网络药理学的桑源药材不同入药部位改善胰岛素抵抗的物质基础

目的：基于液质联用联合网络药理学和分子对接技术比较桑源药材不同部位改善胰岛素抵抗（IR）物质基础异同。方法：利用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）技术分析桑源药材不同部位的成分差异;用Sybyl-X2.1软件将成分与IR核心靶标进行对接,以Total Score≥5为遴选条件,绘制成分-疾病-靶点网络图;计算单靶点-成分对接评分数据集与总靶点-成分对接评分数据集的总量统计矩标准相似度（TQSMSS）,筛选TQSMSS较高的靶点,构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,利用R语言对其进行基因本体论（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。结果：通过色谱-质谱技术共分析得到桑源药材的41种活性成分,总量统计矩（相似度）法筛选桑枝、桑白皮、桑椹、桑叶TQSMSS≥0.75的靶点数量分别为20、23、30、27,4味桑源药材中GO富集分析靶点功能排序为桑椹>桑叶>桑白皮>桑枝,涉及到血糖稳态、糖代谢过程、葡萄糖跨膜转运等生物过程;4味桑源药材KEGG通路富集排序为桑椹>桑枝>桑叶>桑白皮,涉及到单磷酸腺...     

经典名方达原饮化学成分的UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS快速表征

目的：基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)对达原饮的化学成分进行定性分析。方法：采用Thermo Acclaim^TMRSLC 120 C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.2μm),流动相选择乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～7.5 min,10%～19%A;7.5～12 min,19%～22.5%A;12～23 min,22.5%～27%A;23～27 min,27%～56%A;27～35 min,56%～84%A;35～36 min,84%～90%A),流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,加热电喷雾离子源(HESI),正、负离子模式下采集数据,检测范围m/z 80～1 200。结合对照品保留时间、碎片离子、Pub Chem等数据库及相关文献信息,运用Xcalibur 3.0完成对达原饮中化学成分的定性鉴别。结果：从达原饮中共表征出161个化学成分,包括生物碱类14个、黄酮类60个、萜类16个、皂苷类26个、苯丙素类18个...     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的生脉饮（党参方）口服液化学成分分析

目的：采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对生脉饮(党参方)口服液中的化学成分进行定性表征。方法：选择ACQUITY UPLC^?HSS T₃色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^–1。采用电喷雾离子源,正、负离子全扫描模式下采集数据,扫描范围为m/z 50～1500。利用SCIEX OS-Q 1.6软件建立生脉饮(党参方)中单味中药材化学成分的本地数据库,将采集的化合物精确m/z和二级碎片离子信息与本地数据库及SCIEX OS-Q 1.6软件配置的中药二级数据库匹配,结合文献和对照品的相应信息进行化学成分表征。结果：共推断和鉴定了90个化合物,主要为黄酮类、皂苷类、苯丙素类、多炔类、有机酸类、生物碱等类及其他类成分,其中41个化合物来源于党参、33个化合物来源于麦冬、24个化合物来源于五味子。结论：建立了一种基于UPLC-Q-TOF-MS/MS对生脉饮(党参方)口服液中不同类型化合物进行鉴...     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的酸枣仁汤颗粒化学成分分析

目的:建立一种全面、深度分析市售酸枣仁汤颗粒化学成分的检测方法.方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS),检测条件设定为流动相0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～8 min,5％～17％B;8～10 min,17％B;10～11 min,17％～18％B;11～...     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析葛根配方颗粒的化学成分

目的：建立一种快速识别葛根配方颗粒中化学成分的检测方法,明确葛根配方颗粒的物质基础。方法：采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS/MS)在正、负离子模式下对葛根配方颗粒提取液进行检测,检测条件为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0～4 min,5%～10%B;4～10 min,10%～15%B;10～20 min,15%～16%B;20～27 min,16%～31%B;27～33 min,31%～59%B;33～42 min,59%～95%B;42～42.1 min,95%～5%B;42.1～45 min,5%B),流速0.35 mL·min^-1,柱温40°C,进样量5μL,选择电喷雾离子源(ESI)。利用PeakView 1.2软件和PubChem、ChemicalBook、ChemSpider等数据库,对比对照品图谱并结合文献信息,对葛根配方颗粒中的化学成分进行全面分析。结果：从葛根配方颗粒中共鉴...     

基于“色如漆，甘如饴”的砂仁陈皮制熟地黄炮制过程质量评价

目的:研究砂仁陈皮制熟地黄炮制过程样品表观颜色、综合甜度与苷类成分含量变化的关联性,为揭示地黄炮制原理奠定基础。方法:采用全自动色差计测量熟地黄样品粉末颜色;采用高效液相色谱法测定不同加热时间点样品中14个活性成分的含量(5-羟甲基糠醛、梓醇、益母草苷、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷、橙皮苷、地黄苷D共7个苷类成分和D-果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉子糖、甘露三糖、水苏糖共7个糖类成分),流动相乙腈-水梯度洗脱。以糖类成分甜度计算样品综合甜度变化,运用SPSS 21.0软件对砂仁陈皮制熟地黄炮制样品色度值、综合甜度与苷类成分含量进行关联分析,以三角形面积法建立熟地黄炮制样品质量综合评价指数。结果:在炮制过程中,样品粉末色度值增加,样品表观颜色变深。含量测定结果显示,随加热时间增加,熟地黄样品的苷类成分含量减少,单糖成分含量增加,样品综合甜度增加。关联性分析结果表明色度值、综合甜度与环烯醚萜苷含量呈显著负相关(P<0.01),色度值与呋喃醛衍生物含量、苯乙醇苷含量、黄酮类含量,以及综合甜度与呋喃醛衍生物含量、苯乙醇苷含量均呈显著正相关(P<0.01),综合甜度与黄酮类含量呈明显正相关(P<0.05)。炮制至52 h时样品综合评价指数最高,达0.99。结论:熟地黄样品粉末色度值聚类分析总体趋势与直观区分基本一致,结合样品粉末色度值、综合甜度与苷类成分含量3个指标可对砂仁陈皮制熟地黄进行综合质量评价。     

陈皮、青皮商品调查

对陈皮、青皮的来源、产地、商品规格进行了调查。     

砂仁制地黄的炮制工艺分析

目的:探讨砂仁制地黄的最佳炮制工艺。方法:采用肾阴虚兼湿困脾胃模型来评价砂仁制地黄的滋阴(增效)和祛腻作用,大鼠随机分成空白组,模型组,阳性组,地黄组,1%砂仁制地黄组,2%砂仁制地黄组,5%砂仁制地黄组和10%砂仁制地黄组,给药体积均为10 m L·kg-1,筛选砂仁制地黄的最佳配比;以毛蕊花糖苷、单糖(D-果糖和D-无水葡萄糖)质量分数为评价指标,结合色黑如漆和中央发空的感官评价指标,通过单因素试验考察黄酒类型、黄酒用量、蒸制温度、蒸制时间、砂仁粉粒度和砂仁粉加入方式对砂仁制地黄炮制工艺的影响。结果:砂仁制地黄组与模型组相比,大鼠血清皮质醇、雌二醇、甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、肌酐、甘油三酯、总胆固醇和胃动素降低,睾酮、免疫球蛋白G和胃泌素升高,且2%砂仁制地黄组效果最佳。砂仁制地黄的最佳炮制工艺为每100 kg生地黄用黄酒30~50 kg,砂仁粉蒸制前后各用1 kg,黄酒、砂仁粉拌匀,润透,110~120℃蒸约4 h,至内外色黑如漆为度,取出,低温干燥至约八成干时,切片,干燥,用砂仁粉拌匀,即可。结论:优选的炮制工艺稳定可行,为阐释砂仁制地黄的增效祛腻机制提供实验依据。     

基于数据挖掘比较广陈皮和蒸陈皮的用药规律

目的：基于数据挖掘比较分析广陈皮和蒸陈皮在临床中的用药规律。方法：收集广州中医药大学第二附属医院门诊开具的含广陈皮及含蒸陈皮的处方,运用古今医案云平台V2.3.5分析比较患者的基本信息（包括性别、年龄）,广陈皮与蒸陈皮的剂量分布,病证与药物配伍的关系等。结果：共收集处方1 753张,其中含广陈皮的处方756张,含蒸陈皮的处方997张。两种处方中患者基本信息包括性别及平均年龄分别比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。两种处方中60～69岁患者占比均最高,50～59岁均次之;而含蒸陈皮方中0～9岁患者占比显著高于含广陈皮方,差异有统计学意义（P<0.05）。处方中广陈皮剂量为1～20 g,平均剂量（7.57±3.00）g,5 g剂量出现频数最高;蒸陈皮剂量为1～30 g,平均剂量（8.54±4.22）g,10 g剂量出现频数最高。两种处方中广陈皮与蒸陈皮平均剂量比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两种处方中频率超过1%的中医疾病中有6种证型是相同的,其中含广陈皮方治疗胃痞病的占比最高,含蒸陈皮方治疗不寐的占比最高。出现频数前10位的中医证候中有5种证型是相同的,含...     

基于颜色客观化的陈皮药材鉴别

目的:引入分光测色计,将中药材性状品质这一经验指标数据化,依据获取的中药材颜色信息实现对中药材品种的鉴别,为研究中药鉴定共性技术问题提供一种新的方法及思路。方法:以陈皮为研究对象,在全国范围内收集陈皮药材,采用色度学分析方法获取陈皮颜色特征参数,通过统计分析,建立陈皮品种鉴别的数学预测模型和90%参考值范围。结果:建立了基于L*a*b*色度空间的陈皮药材品种鉴别的数学判别模型,其判别符合率为100%,双侧90%参考值范围分别为陈皮:L*(66.621 5~73.916 5),b*(29.329 5~52.211 0);广陈皮:L*(53.950 0~63.260 0),b*(24.610 0~30.770 0)。结论:实验证明分光测色计获取的颜色信息可实现陈皮药材品种的鉴别,采用色度学分析方法对中药品种鉴别具有一定的可行性。     

陈皮及青皮药材中辛弗林含量比较研究

目的 建立高效液相色谱法测定陈皮、青皮药材中辛弗林含量的方法,为陈皮、青皮药材质量控制标准的完善及两药功效差异物质基础的阐明提供依据.方法 采用Hypersil BDS C(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水(水中含0.06%磷酸及0.1%十二烷基硫酸钠):55-45;检测波长224 nm;流速0.7 ml/min;柱温:30℃.结果 辛弗林在0.295～2.36μg范围内呈良好的线性关系,r = 0.999 9,平均回收率为99.20%(n=5),RSD=1.22%.结论 该方法 准确、简便,具有良好的重复性和稳定性.陈皮与青皮药材中辛弗林含量存在显著性差异,青皮(未成熟果皮)辛弗林含量较陈皮(成熟果皮)高.     

基于代谢组学分析不同蒸制次数熟地黄中糖类成分的变化规律

目的:基于代谢组学技术研究不同蒸制次数的熟地黄中糖类成分的变化规律。方法:收集采用传统方法加工的第1蒸至第9蒸熟地黄样品,分别对其水提液进行1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生及LC-MS测定。采用SIMCA-P 13.0软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),得到差异标记物,通过多级质谱离子碎片及对照品比较对差异标记物进行鉴定。结果:经OPLS-DA共鉴定了6种糖类化合物,分别为甘露三糖、蜜二糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;其中甘露三糖和蜜二糖逐渐降低,在第9蒸熟地黄中相对峰面积最低,分别为0.60和0.52;阿拉伯糖逐渐升高,在第9蒸熟地黄中相对峰面积达到4.74;甘露糖先升高后降低,其相对峰面积在第5蒸熟地黄中最高,达3.33;而葡萄糖和半乳糖基本上处于稳定状态。PCA结果显示第1蒸至第9蒸熟地黄沿着PC1轴逐渐改变,糖类代谢物发生着显著变化。结论:不同蒸制次数的熟地黄样品中糖类成分差异较大,可为九蒸九晒熟地黄的质量评价提供实验依据。     

不同陈化时间广陈皮中黄酮类成分的UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术分析不同陈化时间广陈皮中的黄酮类成分.方法:采用Agilent Extend-C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8 μm),流动相0.1％乙酸水溶液(A)-0.1％乙酸甲醇溶液(B)梯度洗脱(0～25 ...     

青皮的指纹图谱研究

目的为青皮药材的质量控制标准提供依据,并对四花青皮和个青皮进行区分.方法采用气相色谱法和高效液相色谱法对 10个青皮样品进行测定,并对获取的指纹图谱采用加权相似度计算和进行基于主成分分析的投影法研究.结果 气相色谱和液相色谱的结果均表明四花青皮和个青皮之间存在明显差异.这些差异是否会对药效产生显著影响,还需要药理实验证明.以青皮样品为例可知,对于样品中某一物质含量很高的体系,加权相似度是一种行之有效的方法.结论 该方法简便、可靠、重现性好,为青皮药材质量控制标准的确立奠定了基础.     

不同炮制加工的熟地黄对雌性大鼠排卵功能的影响

目的:探究不同炮制加工的熟地黄水煎液对雌性大鼠排卵功能的影响,为熟地黄的炮制加工与临床用药提供参考。方法:分别采用清蒸法(一蒸一晒)和传统法(九蒸九晒)炮制生地黄,得到2种不同炮制工艺的熟地黄。以动情周期正常的雌性成年大鼠为研究对象,设空白组和清蒸组、传统组。观察这2种熟地黄的水煎液对雌性大鼠动情周期、卵巢组织形态及血清激素水平的影响,清蒸组和传统组的给药剂量均为3.6 g·kg-1。建立熟地黄的HPLC指纹图谱,并结合药效学指标研究熟地黄对雌性大鼠排卵功能影响的差异。结果:与空白组比较,清蒸组大鼠血清中雌二醇和孕酮含量明显降低(P0.05),动情周期明显延长(P0.05),卵巢中闭锁卵泡数目明显升高(P0.05);传统组各项指标变化皆不明显,与空白组相比无统计学差异。谱效学结果显示毛蕊花糖苷与清蒸法制备的熟地黄抑制大鼠排卵作用呈正相关;传统法制备的熟地黄HPLC图谱中3,5号峰与抑制排卵作用呈负相关。结论:清蒸法炮制的熟地黄对正常雌性大鼠的排卵有一定抑制作用,传统法炮制的熟地黄在排卵功能方面有一定优势。