α7烟碱型乙酰胆碱受体基因敲除小鼠牙髓炎模型的构建

目的：构建α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotine acetylcholine receptor,α7 nAChR）基因敲除小鼠牙髓炎模型,为研究α7 nAChR在牙髓炎发生发展过程中的作用机制提供实验模型。方法：取16只α7 nAChR基因敲除（knock out,KO）小鼠和16只野生型（wide type,WT）C57BL/6鼠的上颌第一磨牙的牙髓暴露法建立牙髓炎模型,分别在牙髓暴露后1、3、7 d处死小鼠,HE染色、免疫组化检测牙髓组织NOD样受体蛋白3（NOD?like receptor protein 3,NLRP3）表达情况。结果：HE染色结果显示牙髓暴露后1 d,α7 nAChR KO鼠及WT鼠的穿髓孔周围血管充血、组织水肿;牙髓暴露后3 d,炎症细胞聚集,α7 nAChR KO鼠炎症细胞聚集已达冠髓底部,WT鼠的炎症细胞主要聚集在穿髓孔周围的牙髓组织中;牙髓暴露后7 d,α7 nAChR KO鼠的牙髓炎症细胞浸润至根部牙髓,而 WT鼠的牙髓炎症细胞仍然主要聚集于冠髓底部。免疫组化染色结果显示,牙髓暴露后,α7 nAChR KO鼠牙髓NLRP3表达高于WT鼠,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：成功建立了α7 nAChR基因敲除鼠的牙髓炎模型,而且α7 nAChR基因敲除鼠牙髓炎症浸润明显快于WT小鼠。     

Mafb基因敲除小鼠的构建及其尿道下裂表型初步分析

目的 利用成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)/重组CRISPR相关核酸酶9(CRISPR-associated protein 9, Cas9)构建Mafb基因敲除小鼠,初步研究该基因缺失对尿道发育的影响。方法 根据CRISPR/Cas9技术原理构建Mafb基因杂合子（Mafb+/-）F1代小鼠,裂解鼠尾提取DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳判定基因型结果。使Mafb+/- F1代小鼠与野生型（wild type, WT）C57BL/6J小鼠交配繁殖。将获得的Mafb+/-小鼠间进行交配,获得Mafb基因敲除纯合子（Mafb-/-）雄性胎鼠。免疫荧光验证Mafb-/-胎鼠阴茎组织中Mafb基因表达情况;扫描电镜及石蜡切片HE染色观察Mafb-/-胎鼠阴茎组织形态,免疫荧光检测胎鼠阴茎组织尿道缝处细胞E-Cadhrin和α-SMA的表达情况。结果 成功构建、繁育Mafb+/-小鼠,保持种群数量并得到Mafb-/-雄性胎鼠,PCR法成功鉴定基因型。免疫荧光结果显示Mafb-/-胎鼠阴茎组织中几乎不存在Mafb蛋白表达,且相较于WT型,尿道缝处细胞E-Cadhrin蛋白表达明显降低,α-SMA蛋白表达明显增高;扫描电镜及HE染色显示Mafb-/-雄性胎鼠为尿道下裂表型。结论 成功构建 Mafb基因敲除小鼠模型,确定其敲除可导致小鼠出现尿道下裂表型,发现尿道缝处细胞中E-Cadhrin和α-SMA的表达差异,为进一步研究该基因在尿道下裂发生机制中的作用提供基础。     

LSS基因功能缺失对雄性小鼠生殖的影响

目的 研究羊毛固醇合成酶(LSS)基因功能缺失对小鼠生殖的影响.方法 取8周龄的LSS+/+(WT)型和LSS+/-(KO)型鼠雌雄共30只鼠,分别按♂WT×♀WT、♂WT×♀KO、♂KO×♀WT、♂KO×♀KO分组进行1:1合笼,时长4个月,统计每胎生仔个数及平均产仔周期;取WT型和KO型小鼠的血清,进行性激素检测;...     

组蛋白去乙酰化酶3对恒定型自然杀伤性T细胞发育和功能的调控作用

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）缺失对恒定型自然杀伤性T细胞（iNKT）数量、发育表型和细胞因子产生功能的影响,确定HDAC3在iNKT细胞发育和功能发挥中的调控作用。方法：采用T细胞特异的hdac3基因敲除（HDAC3KO）及其野生型正常对照（WT）小鼠,每种小鼠各取3~5只,分离小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和肝脏淋巴细胞,采用细胞表面抗体染色和流式细胞术检测HDAC3对iNKT细胞数量和发育表型的变化,实验至少重复3次。采用HDAC3KO小鼠及其同系B6.SJL小鼠,每种小鼠各取4~6只;提取以上2种小鼠骨髓细胞,混合后经尾静脉注入经γ射线照射的B6.SJL小鼠,以制备骨髓混合嵌合体模型,8周后流式细胞术检测不同骨髓来源iNKT细胞在胸腺的产生和发育,实验重复3次。选取HDAC3KO和WT小鼠,每种各取小鼠3~5只;采用iNKT细胞特异激活剂半乳糖神经酰胺腹腔注射4 h后,收集各组小鼠脾脏淋巴细胞和血清,分别采用细胞内染色、流式细胞术和酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测HDAC3作用下iNKT细胞因子水平,实验至少重复3次。结果：与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠胸腺和外周免疫器官中iNKT细胞比例和数量均明显降低（P<0.05）,且HDAC3KO小鼠胸腺iNKT细胞中CD44-NK1.1-和CD44+NK1.1-细胞比例明显升高（P<0.05）,而CD44+NK1.1+、CD122+、CD69+和DX5+细胞比例明显降低（P<0.05）。骨髓混合嵌合体实验,与正常B6.SJL小鼠来源的骨髓细胞比较,来源于HDAC3KO小鼠的骨髓细胞产生的iNKT细胞数量明显减少（P<0.05）,同时iNKT细胞中CD44+NK1.1+细胞比例也明显降低（P<0.05）。细胞因子胞内染色和ELISA法检测,与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠iNKT细胞和血清中IFN-γ和IL-4水平均明显降低（P<0.05）。结论：HDAC3缺失通过内源性机制导致iNKT细胞数量减少,细胞发育成熟受阻;同时HDAC3缺失导致iNKT细胞因子产生功能明显降低。提示HDAC3在iNKT细胞的发育和功能发挥中具有重要调控作用。     

幽门螺杆菌感染的C57BL/6 CD177基因敲除小鼠模型建立

目的建立幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）感染的C57BL/6 CD177基因敲除（CD177 gene knock-out, CD177 KO）小鼠模型,为进一步进行相关研究奠定基础。方法屏障环境中饲养的无特定病原生物（specific pathogen free, SPF）C57BL/6野生型（wild type, WT）小鼠及CD177基因敲除小鼠各22只,雌雄各半,野生型及CD177基因敲除小鼠各自随机分成2组: 野生型小鼠Hp悉尼菌株（SS1）灌胃组（HpSS1 WT组）10只、野生型小鼠Hp49503株灌胃组（Hp49503 WT组）10只、CD177基因敲除小鼠Hp悉尼株灌胃组（HpSS1 KO组）10只、CD177基因敲除小鼠Hp49503株灌胃组（Hp49503 KO组）10只,另设WT及KO空白对照各1组,各自相应对照组小鼠每组随机各2只,共6组。每组小鼠均禁食12 h后按HpSS1组和Hp49503分组分别予各自菌株的菌液予灌胃。灌胃2周后颈椎脱臼法处死小鼠,取小鼠胃黏膜组织,分别行快速尿素酶实验、病理切片常规H-E染色及特殊组化Warthin-Starry银染色,观察Hp在小鼠胃腔内定植,胃黏膜炎症细胞构成及炎症变化等病理组织学变化情况。结果无论HpSS1株还是Hp49503株在C57BL/6 WT及CD177KO小鼠胃窦隐窝可观察到细菌定植,胃黏膜及胃黏膜下层可见炎症细胞浸润。结论成功建立了Hp感染诱发C57BL/6 CD177KO小鼠胃炎模型。     

Nrf2基因缺失对子鼠肺组织发育的影响研究

目的 探究Nrf2基因缺失对子鼠肺组织发育的影响。方法 分别采用C57BL/6孕鼠(WT)和Nrf2基因缺失孕鼠(Nrf2-/-)构建IUGR子鼠模型。根据出生体重将子鼠分为四组：WT Normal, WT IUGR,Nrf2-/-Normal, Nrf2-/-IUGR。观察各组体重变化,出生后2、4周分别取材,观察脑/肝比和肺组织形态变化;肺组织切片免疫组化染色进行CD31阳性细胞计数;qRT-PCR检测肺组织VEGFα和VEFR2 mRNA的相对水平。结果 Nrf2-/-IUGR子鼠出生体重、7d、14d体重均显著低于WT IUGR子鼠(P<0.05);14d时Nrf2-/-子鼠脑/肝比均低于WT子鼠,28d时Nrf2-/-Normal子鼠高于WT Normal子鼠(P<0.05)。HE染色显示,Nrf2-/-子鼠肺泡塌陷和肺泡壁增厚的现象较WT子鼠更加严重。Nrf2-/-小鼠与WT小鼠的肺泡平均线性截距与CD31阳性细胞计数均有显著差异(P<0.05)。14d时,与WT子鼠相比,Nrf2-/-子鼠肺组织中VEGFα和VEFR2的mRNA的表达均显著上调(P<...     

IL⁃17A对小鼠实验性牙周炎骨破坏作用研究

目的：通过构建白介素?17A（interleukin?17A,IL?17A）基因敲除小鼠实验性牙周炎模型,初探IL?17A参与调控牙周炎骨破坏的机制。方法：选用雄性IL?17A基因敲除（knock out,KO）的C57BL/6小鼠和相同基因背景的野生型（wild type,WT）C57BL/6小鼠,通过结扎和喂菌诱导小鼠实验性牙周炎,WT小鼠及KO小鼠均分为正常对照组和牙周炎组。确认结扎4周后处死小鼠收集上颌骨,进行Micro?CT断层成像、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate?resistant acid phosphatase,TRAP）染色、免疫组化和组织病理学分析。结果：在喂菌和结扎诱导的小鼠实验性牙周炎模型中,在Micro?CT的三维重建及近远中向截面上,KO小鼠较WT小鼠牙槽骨吸收减少,KO小鼠上颌第二磨牙牙槽嵴顶到釉牙骨质界的近中线性距离为（0.51 ± 0.11）mm,远中为（0.45 ± 0.04）mm,显著低于WT小鼠的近中（0.61 ± 0.09）mm和远中（0.65 ± 0.08）mm（P < 0.05）;KO小鼠骨体积分数比为41.88 ± 1.82,显著高于WT小鼠的36.55 ± 2.08（P < 0.05）;KO小鼠骨密度为84.39 ± 2.11,显著高于WT小鼠的76.90 ± 2.55（P < 0.05）;HE染色中可见牙槽骨吸收减少;TRAP染色中可见TRAP染色阳性细胞减少;免疫组化结果显示牙周组织核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL）的表达降低。结论：牙周炎中IL?17A可能有促进牙周炎发生发展及促进牙槽骨吸收的作用。     

脂肪甘油三酯脂肪酶基因敲除对C57BL/6鼠肾脏结构和功能的影响

目的 研究脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因敲除对C57BL/6鼠肾脏结构和功能的影响.方法 将Atgl+/-小鼠通过近亲交配繁殖得到Atgl基因敲除纯合子小鼠(Atgl-/-鼠)和野生型鼠(Atgl+/+鼠),通过观察Atgl-/-鼠和Atgl+/+鼠肾脏结构和功能差异来研究Atgl基因敲除对小鼠肾脏结构和功能影响.实验分为对照组(Atgl+/+鼠)及实验组(Atgl-/-鼠),为保证实验结果的一致性,实验所用所有小鼠均为雄性;8～ 10周龄;体质量约20 g;每组8只.ELISA检测各组小鼠尿肌酐及尿白蛋白浓度,通过计算尿白蛋白肌酐比反映肾功能变化.HE染色及透射电镜分别观察各组小鼠肾皮质病理及超微病理改变.油红O染色观察脂肪在各组小鼠肾脏分布.肾脏组织TG定量检测比较两种小鼠肾脏TG含量差异.结果 Atgl-/-鼠尿白蛋白肌酐比显著高于对照组[(4 219.0±2 331.8) g/mol vs (329.8 ±175.6) g/mol,P＜0.05],而两组尿肌酐浓度差异无统计学意义[(36.7±13.7)μmol/L vs(32.6±9.2)μmol/L,P＞0.05].HE染色显示Atgl-/-鼠肾小管肿胀,肾小囊明显缩小,油红O染色结果提示肾小球及肾小管均有弥漫性脂滴聚集,以肾小管为主.肾脏组织TG检测结果提示Atgl-/-鼠每毫克肾脏中TG含量显著高于Atgl+/+鼠[(39.89 ±5.14) μg vs (2.18 ±0.58) μg,P＜0.05].透射电镜进一步证实了这一点,并发现Atgl-/-鼠足细胞足突融合,微绒毛脱落萎缩;足细胞及肾小管细胞内线粒体形态结构异常进一步提示足细胞及肾小管细胞功能失调.这些结果提示Atgl-/-鼠存在滤过功能及重吸收障碍.结论 Atgl基因敲除引起脂滴大量聚集于肾小球和肾小管,导致肾小球滤过屏障及肾小管结构和功能异常.     

表皮生长因子受体的敲除对小鼠骨密度以及成骨细胞募集的影响

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）信号转导系统在小鼠骨胳发育中的作用。 方法：以EGFR敲除鼠(EGFR-/-)为实验动物模型,通过马森三色染色（Masson Trichrome）、原位杂交技术,观察其子₁代胚胎鼠及新生鼠四肢长骨发育过程中松质骨的形成及成骨细胞募集的变化。 结果:形态学观察分析, EGFR-/-松质骨的形成较正常野生鼠(EGFR+/+)延迟,骨小梁较正常鼠减少;在胚胎发育第16.5天 (E16.5), 其成骨细胞向中心生长板的募集速度较EGFR+/+亦延迟; 形态学观察EGFR-/-和EGFR+/+核心结合因子A （Cbfa）、降钙素 （OC）及I 型胶原（Col I）在表达数量上有明显不同。结论:EGFR信号转导系统在在小鼠松质骨的形成过程中起着重要作用,其机制可能与调节成骨细胞向中心生长板的募集有关。     

P2Y12敲除在LPS诱导的急性肺炎肺损伤中的保护作用

目的研究G蛋白偶联P2Y受体12（P2Y12）敲除对脂多糖（LPS）诱导的急性肺炎肺损伤的保护作用。方法选取野生型（WT）小鼠（WT组）和P2Y12敲除（P2Y12 KO）小鼠（P2Y12 KO组）,通过LPS注射建立小鼠急性肺炎模型,比较2组小鼠经LPS处理0～7 d后的生存率。收集2组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织,采用生化分析仪和BCA法检测BALF中性粒细胞数量和蛋白含量,采用HE染色和ELISA法检测2组小鼠肺损伤情况和肺组织炎症因子[肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-10、巨噬细胞炎性蛋白1Β（MIP1B）]的表达。结果与WT组相比,P2Y12 KO组小鼠经LPS处理0～7 d后存活率明显增加。LPS处理后6～48 h,与WT组比较,P2Y12 KO组BALF中性粒细胞数量和蛋白含量均明显降低（P<0.05或P<0.01）;HE染色结果显示,LPS处理24 h后,与WT组比较,P2Y12 KO组肺组织中性粒细胞募集明显减少（P<0.01）,并且肺部聚合纤维蛋白染色较浅,肺水肿程度明显降低（P<0.01）;ELISA实验结果显示,LPS处理24 h后,与WT组比较,P2Y12 KO组肺组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10和MIP1b含量明显下降（P<0.01或P<0.001）。结论 P2Y12敲除可显著降低LPS诱导的小鼠肺部炎症反应并减少肺损伤。     

血管紧张素转化酶2参与臭氧暴露导致的小鼠肺部炎症及气道重塑

目的 研究血管紧张素转换酶2（ACE2）在臭氧暴露致小鼠肺部炎症及气道重塑中的作用。方法 16只野生型（WT）C57BL/6J小鼠和16只ACE2 敲除（KO）小鼠分别暴露于空气和臭氧（0.8 ppm）中,每天暴露3 h,连续暴露5 d。分别设置AirWT组,Air KO组,Ozone WT组和Ozone KO组。Masson染色观察小鼠肺组织胶原沉积情况,HE染色观察小鼠肺部病理学改变,并进行评分;收集小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）,并进行细胞计数;分别采用BCA法和酶联免疫吸附法（ELISA）测定BALF总蛋白和细胞因子浓度;荧光定量PCR检测肺组织中气道重塑相关指标的mRNA表达;小鼠的气道阻力采用小动物呼吸机测量（乙酰甲胆碱激发）。结果 臭氧暴露ACE2 KO小鼠肺组织炎症病理学变化总分显著高于臭氧暴露WT小鼠（P<0.05）。Masson染色结果显示,臭氧暴露小鼠肺组织支气管和肺泡周围有大量的胶原沉积,臭氧暴露ACE2 KO小鼠肺组织的支气管和肺泡的胶原沉积阳性区域面积为（19.62±3.16）%、（21.63±3.78）%,高于臭氧暴露 WT 小鼠肺组织的（6.49±1.34）%、（4.44± 0.99）%,两者差异具有统计学意义（P<0.05）。臭氧暴露ACE2 KO小鼠BALF中总细胞数与总蛋白含量均高于臭氧暴露WT小 鼠,差异无统计学意义（P>0.05）。臭氧暴露ACE2 KO小鼠BALF中IL-6、IL-1β、TNF-α、趋化因子（C-X-C基序）配体1（CXCL1/KC）和单核细胞趋化蛋白（MCP-1）水平均高于臭氧暴露WT小鼠,其中IL-1β水平的变化差异具有统计学意义（P<0.05）。臭氧暴露 ACE2 KO 小鼠的肺组织中的基质金属蛋白酶 9（MMP-9）、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP4）、Ⅰ型胶原α1 （COL1A1）、TGF-β的mRNA水平均明显高于WT组小鼠,两组的MMP-9、TIMP4、COL1A1、TGF-β的mRNA水平差异具有统计学意义（P<0.01）。两组小鼠在0、10、25、100 mg/mL的乙酰甲胆碱浓度下的气道阻力的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 ACE2参与臭氧暴露导致的小鼠肺部炎症及气道重塑。     

碱性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征

目的：阐明碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase, alk-SMase) 基因剔除小鼠的背景特征,为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法: 将野生型（WT, / ）、杂合子( /-)、纯合子（KO,-/-）alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果: 与WT和杂合子比较,KO鼠显示：外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247bp; 小肠粘膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论: alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,这为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。 【关键词】碱性鞘磷脂酶;基因剔除小鼠;基因型;表型     

催产素受体基因敲除对雌激素调节骨密度的影响

目的:探讨催产素受体基因敲除对雌激素调节骨密度的影响. 方法:选取3月龄野生型Oxtr+/+和纯合型Oxtr-/-雌性BABL/c小鼠各20只,随机分成野生型组(WT组)、野生型+雌二醇组(WT+E2组)、野生型去势组(WT OVX组)、野生型去势+雌二醇组(WT OVX+E2组)、纯合型组(KO组)、纯合型+雌二醇组(KO+E2组)、纯合型去势组(KO OVX组)及纯合型去势+雌二醇组(KO OVX+E2组),每组5只.17β-雌二醇皮下注射,每只50 μg·d-1,每天1次.实验4周后测量各组小鼠脊柱和股骨的骨密度. 结果:与WT组相比较,WT+E2组的骨密度显著增高(P<0.05),WT OVX组的骨密度显著降低(P<0.05),WT OVX+E2组的骨密度差异无统计学意义(P>0.05);与WT OVX组相比较,WT OVX+E2组的骨密度明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);与KO组相比较,KO+E2组、KO OVX组及KO OVX+E2组的骨密度差异均无统计学意义(P>0.05);KO OVX+E2组与KO OVX组相比较,骨密度差异也无统计学意义(P>0.05).结论:催产素参与调节雌激素的骨合成代谢作用.     

蛋白磷酸酶5(PP5)对小鼠脂肪代谢的影响

目的利用蛋白磷酸酶5(PP5)基因敲除小鼠,探究PP5在小鼠脂肪代谢中的作用。方法随机选取6周龄雄性PP5基因敲除(PP5 KO)和野生型(WT)小鼠,高脂饲养6周后,应用HE染色和油红O染色技术对小鼠肝脏结构和脂滴积累进行检测,应用Western blotting和real-time PCR技术检测肝脏组织中脂代谢相关基因的表达情况。同时应用PP5 KO和WT小鼠成纤维细胞,在体外观察PP5对脂肪分化的影响。结果与WT小鼠相比,高脂饲养后PP5 KO小鼠体重与WT小鼠相比显著减轻,肝脏中脂滴数量显著较少且脂滴较小。体外实验发现与WT小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)相比PP5 KO MEF细胞脂肪分化显著较弱,脂滴较小。此外,在PP5 KO肝脏组织中脂肪分化标记基因CD36、AP2、PPARγ2和Glut4的相对表达量显著降低,而能量代谢相关蛋白糖皮质激素受体(GR)的磷酸化水平显著增加,解偶联蛋白1(UCP1)表达量也显著升高。结论 PP5通过调节GR的去磷酸化影响机体脂肪分化和能量代谢调控小鼠脂肪代谢。     

利用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠评价药物心脏毒性的初步探索

目的：研究具有潜在心脏毒性的药物西布曲明（Sibutramine）对心脏特异性CYP2E1（细胞色素P450 2E1，Cytochrome P2E1）基因修饰小鼠（心脏特异性CYP2E1转基因小鼠，α-MHC CYP2E1 transgenic mice，Tg(+)和心脏特异性CYP2E1基因沉默小鼠，α-MHC CYP2E1 silence mice，sTg(+)）的心脏、肝脏、肾脏等的影响，探索使用心脏特异性CYP2E1基因修饰小鼠来评价药物的毒性作用，Tg(+)型小鼠是否在评价药物的心脏毒性中具有更高的敏感性。方法：8周龄雄性Tg(+)型小鼠、sTg(+)型小鼠、野生型C57BL/6小鼠（WT），各50只，分别随机分成5组，每组10只，溶媒对照组（灌胃给予纯净饮用水）及4个实验组（分别灌胃给予50mg/kg 、100mg/kg 、150mg/kg 、300mg/kg西布曲明）。给药过程中进行一般症状观察以及存活率的测定；给药15d 后取血并解剖取心脏、肝脏、肾脏三个脏器，测定各组实验小鼠血生化指标（心脏毒性指标（乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB））、肝脏毒性指标（丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP））和肾脏毒性指标（尿素氮（UN）、肌酐（CREA））、脏器系数等，并进行病理组织学检查，免疫组织化学方法观察心脏组织缝隙蛋白43（Connexin 43 ，CX43）的表达情况。结果：1、从心脏损伤血生化指标结果来看，在给药剂量50mg/kg和100mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于WT型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；在给药剂量50mg/kg、100mg/kg和150mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著高于sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01）；而在给药剂量300mg/kg时，Tg(+)型小鼠均显著低于WT和sTg(+)型小鼠（P<0.05 或P<0.01），且sTg(+)型小鼠减小的程度最小。2、病理组织学结果显示，Tg(+)和WT型小鼠各个给药组均表现出心脏损伤的迹象。3、免疫组织化学染色显示，随着给药剂量的加大，Tg(+)、sTg(+)和WT型三种小鼠CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量均逐渐下降，且染色颜色逐渐变浅；而CX43在心肌细胞闰盘处的表达数量下降程度和染色颜色变浅程度由高到低分别为，Tg(+)型小鼠，其次是WT型小鼠，sTg(+)型小鼠。结论：Tg(+)型小鼠在评价药物潜在心脏毒性试验中可能比WT型小鼠具有更高的敏感性，而sTg(+)型小鼠则是一个很好的心脏毒性保护模型。     

芳香烃受体缺失对实验性结肠炎的影响及其机制

目的：探讨芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor,AhR）缺失在小鼠肠道炎症发生发展中的作用及可能机制。 方法：将实验对象分为4组：野生型对照组（WT control）、野生型肠炎组（WT TNBS）、AhR敲基因对照组（AhR-/- control）和AhR敲基因肠炎组（AhR-/- TNBS）（每组6只）。用2,4,6?三硝基苯磺酸（2,4,6?trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS）建立小鼠急性结肠炎模型,比较各组小鼠疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠长度和组织病理学表现。免疫印迹和免疫荧光实验检测小鼠肠组织中调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）特异性转录因子FoxP3的表达水平,流式细胞术检测小鼠外周血Treg细胞比例。结果：相比于WT小鼠,AhR-/-小鼠TNBS造模后肠炎更为严重,体重明显减轻（P < 0.01）,腹泻、便血症状更为突出,DAI评分更高（P < 0.001）,结肠明显缩短（P < 0.01）,组织学评分更重（P < 0.001）。同时,AhR-/- TNBS小鼠肠组织FoxP3表达下降（P < 0.01）,外周血Treg细胞比例降低（P < 0.01）。结论：AhR缺失能加重小鼠实验性结肠炎肠道炎症,该作用可能与小鼠肠组织和外周血中Treg细胞减少有关。     

Nrf2基因敲除小鼠的繁育及生长发育的生物学特性

目的 了解ICR-Nrf2小鼠的生物学特性.方法 用原种繁殖扩群,观察繁殖性能及仔鼠的生长发育.结果 ICR-Nrf2--/-与ICR-Nrf2-+/+比 ,总的产仔数与离乳数减少 (P<0.01或 P<0.05);体重在出生后第3周时差异有显著性(P<0.01), 第5周至第25周时同性别间差异非常显著 (P<0.01).结论 Nrf2基因缺失小鼠的产仔数、离乳数均少于野生型小鼠,仔鼠的生长速度也较野生型小鼠慢.     

Fmr1基因敲除小鼠悬尾实验的观察

目的：对不同周龄的 KO 小鼠与 WT 小鼠进行悬尾实验进行观察,探讨 KO 小鼠与 WT 小鼠的行为差别。方法采用健康的试验动物180只分两组：①KO 组（4、6、8周龄,各周龄30只,雌雄各半,共90只）②WT 组（4、6、8周龄,各周龄30只,雌雄各半,共90只）;通过悬尾实验观察性别,年龄对不动时间的影响。结果同龄 KO 雌性小鼠比雄性小鼠的静止时间差别不大;随着年龄增大,静止时间增长。同龄同性别的 KO 鼠比 WT 鼠的不动时间长。P ＜0．05;同龄雄性小鼠比雌性小鼠的不动时间短;随年龄增长各种系小鼠不动时间增长,KO 鼠的不动时间比 WT 鼠长,P ＜0．05。结论 KO 小鼠存在抑郁行为表型。     

剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:1)B6 CCR5 KO组,受者接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;2)B6 WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓和脾脏细胞;3)B6 CCR5 KO BMC组,受者只接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓细胞;4)B6 WT BMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果与B6 WT组比较,B6 CCR5 KO组小鼠以更快的速度死于急性移植物抗宿主疾病(GVHD);其受者体内的CD8+T细胞大量增生;T细胞恢复后产生更多的干扰素-γ(INF-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平,进一步促进T细胞增生。组织学检测提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现病理损伤,肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增生加重肝肾损害。提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。     

表皮生长因子受体对小鼠初级软骨内骨化、破骨细胞的募集及生成的影响

目的：探讨表皮生长因子受体（EGFR）信号转导在软骨内骨化中的作用。 方法：以EGFR敲除鼠（EGFR-/-）、EGFR正常野生鼠 （EGFR+/+）和（或）杂合子鼠（EGFR+/-）为实验动物模型，通过马森三色染色（Trichrome Masson）、原位杂交及抗九石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察各组小鼠四肢长骨软骨内骨化及破骨细胞募集情况的变化；体外分离培养破骨细胞，加入EGFR酪氨酸激酶的抑制因子AG1478，通过对破骨细胞生成实验的观察，明确EGFR信号转导在破骨细胞中的作用。 结果：EGFR+/+鼠与EGFR+/-鼠有相同的表型，因此在实验中将它们皆看做EGFR+/+鼠。形态学观察EGFR-/-鼠肥大细胞区域较EGFR+/+鼠增大，其区域大小约为EGFR+/+鼠的5倍；EGFR-/-鼠破骨细胞向中心生长板的募集速度较EGFR+/+鼠亦明显延迟；在胚胎16.5 d（E16.5）dEGFR-/-和EGFR+/+鼠金属蛋白酶-9 （MMP-9） 分布上有一定差别，但单个破骨细胞上MMP-9的表达数量二者无明显差别；加入EGFR抑制因子AG1478的实验组与加入DMSO的对照组比较，破骨细胞的形成明显减少(P<0.01)。结论:EGFR信号转导机制可能通过调节破骨细胞的生成，影响其向中心生长板的募集，从而影响小鼠初级软骨内骨化的进展。