金莲清热泡腾片抗流感病毒体内外药效实验及作用机制研究

目的 研究金莲清热泡腾片体内外抗流感病毒的药效学及作用机制。方法 进行体外实验考察金莲清热泡腾片对甲1型流感病毒株(NYMCX-179A)、甲3型流感病毒株(NYMCX-327)和乙型流感病毒株(B/Phuket/3073/2013)的作用,采用细胞病变效应(CPE)法检测高、中、低3个浓度下药物有效浓度(EC50),以及在细胞病毒感染后的不同时间点药物的作用情况及病毒滴度(TCID₅₀)。进行体内实验考察金莲清热泡腾片对甲1型流感病毒(鸡胚扩增)的作用,计算小鼠存活率、生存时间;观察肺组织切片;CPE法、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、血球凝集(HA)法测定其TCID₅₀。蛋白免疫印迹技术(WB)检测肺组织中H1N1病毒血凝素(HA)蛋白,探讨抗病毒机制。结果 在体外实验中,预防模式用药和治疗模式用药的金莲清热泡腾片高、中、低3个浓度均能明显抑制甲1型流感病毒10 TCID₅₀、甲3型流感病毒10 TCID₅₀、乙型流感病毒株100 TCID₅₀引起的细胞病变,其中...     

鼠尾草酸对甲型流感病毒的体外抑制作用研究

鼠尾草酸(carnosic acid, CA)是迷迭香与鼠尾草等植物中主要的酚二萜类活性成分,具有抗氧化、抗炎等作用,但目前未见CA抗流感病毒的相关报道。本研究通过病毒滴度测定方法评价了迷迭香中主要活性成分迷迭香酸、CA和熊果酸的抗流感病毒活性,发现CA在A549细胞中显著抑制流感病毒H5N1增殖,进一步通过间接免疫荧光、Western blot和实时荧光定量PCR等方法对CA的体外抗流感病毒作用进行了系统评价并初步探讨其作用机制。结果表明, CA在A549和MDCK细胞中可显著抑制流感病毒H5N1复制,半数有效浓度(EC₅₀)分别为4.30和3.64μmol·L^-1。同时, CA也抑制流感病毒2009panH1N1(EC₅₀:10.1μmol·L^-1)和H3N2(EC₅₀:12.8μmol·L^-1)在A549细胞中的复制。机制研究发现, CA对H5N1复制的抑制作用与其诱导A549细胞血红素加氧酶-1(HO-1)的表达并减少H5N1感染细胞中活性氧的水平...     

海洋来源的吲哚生物碱衍生物抗流感病毒作用研究

目的 对海洋来源的吲哚生物碱类化合物HDYL-GQQ-1932进行体外抗流感病毒活性研究。方法 CPE抑制实验测定HDYL-GQQ-1932对多种病毒株的增殖抑制作用。CPE实验结合血凝抑制和神经氨酸酶活性实验探究HDYL-GQQ-1932 作用病毒入侵细胞的方式以及细胞毒性,并且初步探究HDYL-GQQ-1932的作用靶点。 结果 HDYL-GQQ-1932体外对多种流感病毒株均有增殖抑制作用,其中对H1N1的抑制作用最强,IC₅₀为26.1μM ,且无明显的细胞毒性,CC₅₀为3313.2μM。通过不同作用方式以及不同作用时间的实验显示,感染后加入 HDYL-GQQ-1932能够很好的抑制病毒增值,且用HDYL-GQQ-1932预处理细胞后可明显降低病毒增殖。此外结果显示HDYL-GQQ-1932在病毒吸附后6-9 h有很好的抑制作用,且剂量依赖性地抑制神经氨酸酶(NA)的活力。故 HDYL-GQQ-1932可能是通过结合病毒神经氨酸酶并抑制其活性来阻断IAV的释放过程。结论 HDYL-GQQ-1932体外对甲型流感具有较好的抑制效果。本研究为海洋来源的该类小分子化合物的药物开发与理性改造提供了思路与方向。     

靛红衍生物类棕榈酰基转移酶抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究

基于已知化合物的化学结构,利用生物电子等排体原理,结合分子对接技术设计合成了12个靛红衍生物类棕榈酰基转移酶抑制剂,测定了其体外抗肿瘤活性并进行了分子对接研究。目标化合物结构均已由核磁共振氢谱(~1H NMR)、核磁共振碳谱(¹³C NMR)和高分辨质谱(HR-MS)进行了确证。体外抗肿瘤实验结果表明,化合物5b对棕榈酰基转移酶高表达的MCF-7细胞表现出的抑制活性与对照药(IC₅₀=8.4μmol·L^-1)相当,IC₅₀为12.0μmol·L^-1。化合物4b对He La细胞(IC₅₀=8.1μmol·L^-1)的抑制活性优于顺铂(IC₅₀=40.1μmol·L^-1)。同时分子对接结果表明,化合物均能完全进入3’-磷酸腺苷-5’-二磷酸(PAP)活性口袋内,且5b打分值最好,具有进一步的研究价值。     

环索奈德体外抑制寨卡病毒复制

寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)是一种新发蚊媒传播病毒,与胎儿严重先天性小脑畸形和成人格林-巴利综合征相关,至今尚无批准用于治疗ZIKV感染的药物或预防性疫苗。本文通过噬斑和细胞毒性实验发现环索奈德(ciclesonide)体外具有较好的抗ZIKV活性,其对ZIKV亚洲株SZ01和非洲株MR766的半数有效浓度(50%effective concentration, EC₅₀)分别为(0.40±0.22)和(1.59±1.08)μmol·L^-1,对Vero细胞的半数致死浓度(50%cytotoxic concentration, CC₅₀)为(64.70±7.33)μmol·L^-1;病毒产量降低实验和蛋白印迹实验显示环索奈德能够抑制ZIKV复制。此外,环索奈德还能够抑制A549细胞中ZIKV的复制;分时给药实验结果表明环索奈德主要作用于ZIKV RNA的合成阶段;进一步研究显示环索奈德还可抑制ZIKV的内化。本研究结果表明环索奈德是一种潜在的抗ZIKV药物。     

蜘蛛香中的倍半萜和环烯醚萜类成分及其抗炎和抗流感病毒活性

采用多种色谱技术从蜘蛛香根和根茎中分离得到3个倍半萜和9个环烯醚萜,并依据理化性质、NMR和MS数据鉴定了化合物的结构。其中,蜘蛛香酯G (1)是新的广藿香醇型倍半萜,化合物3为首次从缬草属植物中分离得到。化合物3和10可显著抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7中NO的释放, IC₅₀值分别为19.00和3.66μmol·L^-1。化合物4、6和12具有一定的抗流感病毒活性, IC₅₀值分别为51.75、51.40和102.08μmol·L^-1。     

香豆素调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路对过氧化氢诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨香豆素调节Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路对过氧化氢(H₂O₂)诱导的人卵巢颗粒细胞氧化损伤的改善作用。方法 将人卵巢颗粒细胞株COV434分为空白组(正常培养)、模型组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂)、香豆素组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+320μmol·L^-1香豆素)、抑制药组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+10μmol·L^-1 Keap1/Nrf2/ARE通路抑制药compound 20c)、联合组(0.5 mmol·L^-1 H₂O₂+320μmol·L^-1香豆素+10μmol·L^-1...     

抗病毒口服液在鸡胚内的抗病毒作用研究

目的观察抗病毒口服液在鸡胚内的抗病毒作用.方法采用鸡胚法(体内及体外)研究了抗病毒口服液对三种病毒(甲3型流行性感冒病毒IFV株、亚甲型流行性感冒病毒鼠适应的FM1株及新城疫鸡瘟病毒NDVⅡ系病毒株)的作用.结果抗病毒口服液对三种病毒株在鸡胚体外有明显的抑制作用或杀灭作用,在鸡胚内对鸡胚尿囊液HA效价有明显抑制趋势,但统计学处理无明显差异.结论抗病毒口服液在体外对甲3型流感病毒株、亚甲型FM1株和NDVⅡ系病毒株有明显的抑制作用,抗甲3型流感病毒和亚甲型FM1株的作用比抗NDVⅡ系病毒株的作用略强,但该药在鸡胚内抗病毒作用仅有抑制趋势.     

桑白皮抗病毒有效成分的提取分离及体外抗病毒活性研究

目的研究桑白皮中化学成分的抗病毒作用。方法利用细胞病变方法进行体外抗病毒筛选试验。结果桑白皮中分离得到的化合物1和化合物3在体外有较好的抑制副流感病毒、流感病毒的致病作用;化合物1具有抗呼吸道合胞病毒作用,延缓腺病毒Ⅲ、HSV Ⅰ致病作用;化合物2和化合物5也有部分抗病毒作用;化合物4能抑制腺病毒Ⅲ、柯萨奇病毒B3 、HSV Ⅰ、副流感病毒的致细胞病变作用。结论桑白皮提取物对呼吸道常见病毒有抑制作用。     

积雪草精油成分分析及其体外抗病毒作用分析

目的 研究了积雪草精油的化学成分及体外抗病毒活性。方法 采用气相色谱-质谱联用仪(GCMS)鉴定积雪草精油的化学成分，并采用体外细胞培养法研究积雪草精油对甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、柯萨奇病毒和肠病毒五种胃肠道病毒活性的影响。结果 表明积雪草精油共鉴定出64种组分，主要为律草烯、石竹烯、石竹素、环氧化蛇麻烯Ⅱ、胡椒烯等萜类物质及其含氧化合物，占总成分的63.18%。积雪草精油对甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、柯萨奇病毒和肠病毒的半数有效浓度分别为2.454μg·mL^-1、6.437μg·mL^-1、4.117μg·mL^-1、3.973μg·mL^-1和4.021μg·mL^-1。结论 积雪草精油能够对特定胃肠道病毒有显著抑制效果。     

Advances in the treatment of hepatitis B virus/hepatitis C virus coinfection

Introduction: Patients with chronic hepatitis B virus (HBV)/hepatitis C virus (HCV) coinfection are at a high risk of developing liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma, and consequently, warrant effective treatment.

Areas covered: Effective treatment should eradicate HCV infection and inhibit HBV replication but without serious adverse reactions. Careful evaluation of disease progression, predominance of one virus over another, comorbidities and concomitant hepatitis delta virus and/or HIV infection are essential for better therapy choices. In the case of HCV predominance, Peg-interferon plus ribavirin with or without a first-generation directly acting antiviral (DAA) should be the first choice, but future treatments will be DAA-based and interferon-free. In the case of HBV predominance, tenofovir or entecavir should be part of treatment. Patients should be closely monitored for early identification and treatment of HCV or HBV reactivation.

Expert opinion: High potency and high genetic barrier nucleos(t)ide analogues to inhibit HBV replication have been used for years, with no urgency for new drugs. Several DAAs for interferon-free therapy for HCV eradication will be available in the near future. We hope that the high cost of these drugs will not be a limitation to their use in developing countries. Further investigation of HBV/HCV interaction is needed before and during the administration of new therapies.     

病毒学研究与抗病毒治疗药物

人们在与病毒的长期斗争中取得了不少重要成就,一些病毒进入人体细胞的过程及其致病机制相继得到阐明。随着病毒学研究的进步,许多抗病毒治疗药物不断出现并被用于临床,人们治疗艾滋病、病毒性肝炎、流感和疱疹病毒感染等病毒性疾病也由此取得了明显进步。然而,面对众多病毒性疾病,人们现有的有效治疗措施仍然极为有限。加强病毒学研究以加深对病毒致病机制的认识是研发新型抗病毒治疗药物的关键。本文介绍目前对临床常见病毒的研究与治疗进展,强调病毒学研究的进步在促进抗病毒治疗药物开发中的重要作用。     

Novel strategies for discovering inhibitors of Dengue and Zika fever

Neurogenesis occurs in discrete regions of the adult brain, particularly the hippocampus. It is enhanced in the hippocampus of animal models and patients with neurological diseases and disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and epilepsy. Adult hippocampal neurogenesis is modulated by drugs used for treating AD and depression, particularly galantamine, memantine and fluoxetine. This reveals that adult neurogenesis and newly generated neuronal cells of the adult hippocampus are involved in neurological diseases and disorders and that adult neurogenesis and neural stem cells (NSCs) of the adult hippocampus are the target of drugs used for treating AD and depression. Hence, adult neurogenesis and NSCs open new opportunities for our understanding of the pathology of the nervous system and new avenues to discover and develop novel drugs for treating neurogical diseases and disorders; drugs that would target specifically the NSCs of the neurogenic regions in the adult brain, or neurogenic drugs, and that would reverse or compensate deficits and impairments associated with neurological diseases and disorders, particularly those associated with the hippocampus. Adult NSCs represent a model to discover and develop novel drugs for treating neurological diseases and disorders. These drugs may also have potential for regenerative medicine and the treatment of brain tumors.     

122例艾滋病患者合并乙肝病毒 丙肝病毒感染的临床流行病学研究

目的 研究在抗逆转录病毒药物治疗(HAART)状态下HIV/AIDS患者合并乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)的流行状况以及相关血清生化和病毒学特征。 方法 对122例正在接受HAART治疗的HIV/AIDS患者采集血标本,使用酶免法(MEIA)检测乙肝五项指标(HBs Ag、抗-HBs、HBe Ag、抗-HBe、抗-HBc)、肝功能,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体,运用RT-PCR法对丙肝病毒抗体阳性标本以及表面抗原和/或核心抗体阳性标本分别进行HCV-RNA以及HBV-DNA测定。以43名单纯HCV感染者作为对照组进行研究。 结果 122名 HIV/AIDS患者,乙肝五项指标全阴性97例(78.86%),表面抗原阳性3例(2.46%),表面抗体阳性者总计19例(15.57%),单纯核心抗体阳性者3例(2.46%)。HCV 抗体阳性84例(68.85%),84例HCV抗体阳性标本中HCV-RNA 阳性58例(69.05%),HIV/HCV/HBV合并感染者为0。HIV/HCV合并感染组 HCV-RNA 水平与感染者性别,CD4⁺ 细胞数水平无明显差异(P>0.05);HIV/HCV合并感染组与单纯HCV感染组 HCV-RNA水平、肝功能异常率无明显差异(P>0.05)。 结论 HIV感染者HBsAg阳性率低于普通人群,HIV/HCV合并感染的比例显著高于普通人群。HIV/HCV合并感染与单纯HCV感染者血清生化及病毒学改变相似。     

放线菌素D对持续感染乙脑病毒复制的影响

目的:研究放线菌素D对持续感染乙脑病毒增殖活性的影响。方法:将乙脑病毒感染人肝癌细胞株KN73,采用标准胰蛋白酶消化技术进行细胞传代,建立持续感染系,加入不同浓度的放线菌素D(0~2.0mg.L-1),24h后收集细胞内病毒,应用空斑形成实验测定病毒含量,对比用药前后持续感染病毒量的变化。结果:用浓度为0.1,0.2,0.5,1.0,2.0mg.L-1的放线菌素D处理感染细胞后,细胞内病毒量分别是对照组的1.89,3.33,4.34,4.52,4.85倍。结论:放线菌素D可使持续感染的乙脑病毒复制增加。     

Diagnostic value of anti-GBV-C antibodies in HIV-infected patients

The beneficial effect of co-infection by GB virus C (GBV-C) in the course of the disease in human immunodeficiency virus (HIV)-infected patients has been described, although its mechanism of action is yet to be determined. The role of anti-GBV-C antibodies in HIV-infected patients also remains unknown. At present, there are no commercial systems to detect specific markers of GBV-C infection. The research presented follows our previous work from which we obtained chimeric molecules formed by two domains of different GBV-C proteins with good sensitivity/specificity balances in the detection of anti-GBV-C antibodies in hemodialyzed and chronic hepatitis patient samples. It has been investigated the ability of the synthetic peptides to recognize specific anti-GBV-C antibodies in HIV and HCV/HIV co-infected patients by a peptide-based ELISA immunoassay. The results showed that human immunodeficiency virus-infected patients have a significantly higher frequency of anti-GBV-C antibodies than healthy controls. A comparison between HCV(+) /HIV(+) and HCV(-) /HIV(+) was analyzed. Although a higher percentage of HCV/HIV-positive sera were positive for antibodies against GBV-C peptides, the difference was not significant. The presence of anti-GBV-C antibodies could represent a good marker of exposure to GBV-C in HIV-infected patients to facilitate a further analysis of the effect of this exposure in the progression of illness caused by HIV infection.     

干扰素对流行性乙型脑炎病毒的抑制作用

目的：研究干扰素对流行性乙型脑炎病毒的抑制作用,为临床应用提供理论依据。方法：运用病毒滴定法,在培养病毒增殖系中投入干扰素（IFN）,观察其对病毒增殖的影响。结果：用IEN300IU·ml-1处理后病毒产生量在人肝癌细胞HepG2和人神经母细胞瘤细胞株IMR-32中分别为对照的14％和1．6％。结论：IFN对乙脑病毒的增殖有显著阻碍作用。     

拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染3年临床观察

目的:探讨拉米夫定治疗乙型肝炎的长期疗效和适当疗程。方法:选择HBsAg、HBeAg和HBVDNA均阳性的成年患者。服用拉米夫定100mg·d-1,治疗3年(156周),观察其对HBVDNA、HBeAg、ALT和病毒变异的影响。结果:拉米夫定对HBVDNA有明显的抑制作用,对维持ALT的正常有一定疗效,治疗2年有39.8%的患者发生病毒变异;可出现HBVDNA的反跳。拉米夫定的疗效与患者治疗前ALT和HBVDNA的水平相关。拉米夫定的不良反应轻微,患者耐受性好,可长期服用。结论:拉米夫定治疗HBV感染,对抑制HBV的病毒复制和维持患者的ALT正常有显著疗效;其临床应用的最佳适应证为HBeAg和HBVDNA均阳性,HBVDNA水平较低而ALT异常的患者。拉米夫定的长期疗效与乙型肝炎病毒的变异相关。