SOCS1、SHP1在JAK2V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤中的表达及鲁索替尼的调控作用

目的 研究JAK2V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤（MPN）组织中JAK2V617F突变量与磷酸化Janus激酶2（p-JAK2）、细胞因子信号转导抑制蛋白1（SOCS1）、含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1（SHP1）表达的关系,并探讨JAK2抑制剂鲁索替尼（ruxolitinib）对JAK2V617F突变阳性人红白血病细胞系HEL细胞的增殖和HEL细胞中SOCS1、SHP1表达的影响。方法 纳入2012年7月至2016年8月于河北省人民医院和保定市第一医院就诊的48例JAK2V617F突变阳性的MPN患者为MPN组,同期24例贫血患者为对照组。采用免疫组织化学法检测骨髓组织标本中p-JAK2、SOCS1和SHP1的蛋白表达水平。SOCS1、SHP1蛋白表达量与JAK2V617F突变量的相关分析采用Spearman等级相关分析。用不同浓度（50、100、250、500、1 000 nmol/L）的鲁索替尼处理HEL细胞后,采用CCK-8法检测HEL细胞的活力,qPCR法检测MPN组织和HEL细胞中JAK2V617F突变量以及HEL细胞中JAK2、SOCS1、SHP1 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测HEL细胞中JAK2、p-JAK2、SOCS1、SHP1的蛋白表达水平。结果 （1）MPN组织中JAK2V617F/JAK2比值为（57.33±20.82）%,对照组为0%。MPN患者骨髓细胞质中p-JAK2、SOCS1、SHP1蛋白质表达量与对照组相比差异均有统计学意义（P均<0.01）。（2）MPN组织中SOCS1、SHP1蛋白表达量均与JAK2V617F突变量呈负相关（r=-0.648、-0.692,P均<0.05）。JAK2V617F/JAK2比值<50% MPN患者的SOCS1、SHP1蛋白表达水平高于JAK2V617F/JAK2比值≥ 50%的MPN患者（P均<0.01）,p-JAK2的蛋白表达水平低于JAK2V617F/JAK2比值≥ 50%者（P<0.01）。（3）250 nmol/L鲁索替尼处理24、48、72 h后,HEL细胞活力分别为（60.06±3.87）%、（52.05±2.88）%、（36.43±2.01）%。随着鲁索替尼浓度的增加,HEL细胞中JAK2的mRNA和蛋白表达与p-JAK2的蛋白表达水平逐渐降低（P<0.01,P<0.05）,SOCS1和SHP1的mRNA和蛋白表达逐渐增加（P均<0.01）。结论 鲁索替尼能够抑制HEL细胞中JAK2的mRNA和蛋白表达及其磷酸化水平,增加SOCS1、SHP1 mRNA和蛋白表达,降低HEL细胞的活力。     

机器人手术系统与腹腔镜辅助直肠TME手术的回顾性对比分析

目的：　比较达芬奇机器人和腹腔镜行直肠癌TME手术的近期临床疗效。方法：　回顾性分析2017年1月至2020年1月甘肃省人民医院肛肠科365例行直肠癌TME手术的患者临床资料,根据手术方式不同分为2组,其中机器人组175例,腹腔镜组190例,比较2组术中、术后和随访情况。结果：　相比于腹腔镜组,机器人组术中出血量明显较少[（94.8±55.6）mL vs.（127.4±42.1）mL,t=-2.739,P=0.007];术后排气时间较短[（60.3±11.9）h vs.（78.8±12.3）h,t=-12.189,P=0.000];首次流质饮食时间较短[（89.0±15.0）h vs.（113.7±10.1）h,t=-13.597,P=0.000];术后住院时间较短[（8.5±1.7）d vs.（10.2±2.4）d,t=-4.150,P=0.000];但机器人组住院总费用较多[（83 538.1±10 911.0）元 vs.（70 640.4±11 659.0）元,t=6.338,P=0.000]。机器人组和腹腔镜组手术时间[（202.9±14.7）min vs.（207.0±14.2）min,t=0.566,P=0.572]、引流管留置时间[（5.9±1.4）d vs.（6.0±1.4）d,t=-0.516,P=0.557]和引流量[（202.7±87.0）mL vs.（200.0±87.1）mL,t=0.335,P=0.738]的差异无统计学意义。2组淋巴结清扫结果、肿瘤学结果和术后总体并发症的差异均无统计学意义（P>0.05）;2组环周切缘均为阴性。2组患者围手术期均无死亡。随访情况方面,机器人组175例（失访16例）平均随访17.4个月,3例老年患者因其他基础疾病死亡;腹腔镜组190例（失访23例）平均随访16.9个月,6例老年患者因其他基础疾病死亡。2组患者随访过程中均无复发,无腹壁切口疝、造口旁疝、造口坏死等严重并发症。结论：　相比于腹腔镜手术,机器人直肠癌TME手术出血量少且术后胃肠道功能恢复快,安全可行,值得在临床推广应用。     

慢病毒介导的过表达NR4A1单核细胞缓解狼疮小鼠狼疮性肾炎的研究

目的：　探索过表达NR4A1是否能够缓解狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）的肾炎症状。方法：　通过腹腔注射0.5 mL pristane构建狼疮小鼠模型,分为生理盐水对照（SC）组、pristane对照（PC）组、空载体对照（VC）组及过表达NR4A1治疗（NR4A1）组。第20周尾静脉注射过表达NR4A1的脾脏单核细胞进行治疗。第28周测量小鼠踝关节左右直径。HE染色及半定量评分评估肾脏病理改变,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor α,TNF-α）及抗ds-DNA浓度。荧光定量qPCR检测脾脏NR4A1、Bcl-2基因mRNA表达。结果：　与SC组相比,PC组LN相关活动指标明显升高,踝关节直径[4.69（4.26,5.14）mm,P=0.000]、抗ds-DNA抗体浓度[（173.11±25.49）ng/mL,P=0.000]、肾脏病理评分[2.78（2.68,2.81）,P=0.000]和NR4A1表达（0.40±0.09,P=0.008）明显降低。与PC组、VC组相比,NR4A1组LN活动指标明显改善,踝关节直径[3.80（3.44,4.20）mm,P_PC=0.002,P_VC=0.033]、抗ds-DNA抗体浓度[（51.92±10.91）ng/mL,P_PC=0.008,P_VC=0.025]、肾脏病理评分[1.39（1.30,1.49）,P_PC=0.002,P_VC=0.018]。ELISA结果显示NR4A1组TNF-α浓度[（542.86±108.28）pg/mL]明显低于PC组[（1 779.00±358.40）pg/mL,P=0.008]、VC组[（1 759.71±280.27）pg/mL,P=0.010]。Real-time PCR结果显示NR4A1组Bcl-2基因表达（1.92±0.58）明显高于PC组（0.48±0.20,P=0.000）。结论：　过表达NR4A1缓解LN小鼠LN症状,降低肾炎活动指标,可能涉及NR4A1、TNF-α及Bcl-2之间的相互作用。     

Ghrelin对易损斑块内血管新生和心肌梗死后血管新生的影响及机制研究

目的：　探讨ghrelin对易损斑块内血管新生和心肌梗死后血管新生的影响及机制。方法：　将ApoE^-/-小鼠分为易损斑块组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组。所有ApoE^-/-小鼠均高脂饮食喂养12周诱导动脉粥样硬化易损斑块,构建的动脉粥样硬化易损斑块模型即为易损斑块组。遗传背景相同的C57BL/6J小鼠正常饮食喂养12周,分为正常对照组和单纯心梗组。第8周时,单纯心梗组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组结扎冠状动脉左前降支构建急性心梗模型。急性心梗造模后,ghrelin干预组腹腔注射ghrelin（100 μg/kg,2次/d）,直至第12周实验结束。超声心动图检测各组左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左室短轴缩短率（left ventricular fraction shortening,LVFS）,油红O染色观察主动脉窦粥样斑块面积的百分比,CD31免疫组化染色检测易损斑块内和心梗周边区新生血管生成密度（microvascular density,MVD）,Masson染色检测心肌梗死面积。Real-time PCR和Western blot分别检测各组血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、血管生成素（angiopoietins,Ang）-1/2和络氨酸激酶受体（tyrosine-protein kinase receptor,Tie）-2的表达。结果：　①与单纯心梗组相比,易损斑块+心梗双模型组[（65.518±4.160）%,P=0.000]心梗面积明显增加,LVEF[（58.560±11.900）%,P=0.012]和LVFS[（27.182±7.807）%,P=0.013]降低,心梗周边区MVD（5.800±0.837,P=0.000）减低,VEGF（1.870±0.122,P=0.001）、Ang-1（1.830±0.056,P=0.007）、Ang-2（1.660±0.217,P=0.006）和Tie-2（1.660±0.115,P=0.020）表达降低,ghrelin干预后可明显缩小心梗面积[（39.751±3.039）%,P=0.000],增加易损斑块+心梗双模型组LVEF[（74.679±6.535）%,P=0.013]和LVFS[（37.507±5.210）%,P=0.020）,增加心梗周边区MVD（9.857±1.345,P=0.000）,升高VEGF（3.503±0.384,P=0.004）、Ang-1（3.277±0.186,P=0.017）、Ang-2（3.450±0.187,P=0.000）和Tie-2（3.133±0.139,P=0.009）的表达;②易损斑块组、易损斑块+心梗双模型组和ghrelin干预组主动脉窦粥样斑块面积的百分比、斑块内MVD、斑块内VEGF、Ang-1、Ang-2和Tie-2的基因与表达在3组间无统计学差异,ghrelin对易损斑块合并心梗小鼠斑块内血管新生无影响。结论：　Ghrelin可通过上调VEGF、Ang-1、Ang-2和Tie-2的基因与蛋白表达,促进易损斑块+心梗双模型组小鼠心梗后血管新生,减少心肌梗死面积,稳定和缩小易损斑块。Ghrelin对易损斑块+心梗双模型组小鼠斑块内血管新生无影响。     

高分辨率2D与裸眼3D显示系统在胸腔镜模拟教学中的应用

目的　比较裸眼三维（GF-3D）和高清二维（HD-2D）显示系统在胸腔镜教学中的应用效果。方法　选取2018年至2019年在广州医科大学附属第一医院胸外科的40名没有手术经验的临床医学专业实习生作为研究对象。对其进行1周的胸腔镜培训后,将其分为GF-3D和HD-2D组,并进行3项测试：腔镜下移动物体、切割圆环和缝合打结。针对各个项目的速度和精度进行评价。使用SPSS 25.0进行t检验、Pearson卡方检验或Fisher精确检验。结果　GF-3D组移动物体测试平均时间少于HD-2D组[（63.20±21.11）s vs.（71.15±17.26）s,P=0.212],但差异无统计学意义。GF-3D组切割圆环测试平均时间少于HD-2D组[（112.50±16.67）s vs.（118.15±24.43）s,P=0.410],但差异无统计学意义。GF-3D组缝合线打结测试的平均时间少于HD-2D组[（301.50±32.77）s vs.（341.75± 57.23）s,P=0.019],差异有统计学意义。GF-3D组总体成绩高于HD-2D组[（78.33±5.88）分vs. （72.08±6.83）分,P=0.005],差异有统计学意义。结论　裸眼3D显示系统优于高清2D系统,减少了手术学习曲线,适用于基础教学和技能培训。     

补中益气汤协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预肺腺癌顺铂耐药性的分子机制研究

目的 探讨补中益气汤含药血清协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制研究。方法 采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,Western blot检测正常血清组、顺铂组、siCTNNB1-235组、siCTNNB1-510组、siCTNNB1-547组A549/DDP细胞的β-catenin蛋白的相对表达量;干扰β-catenin后,Western blot检测各组A549/DDP细胞β-catenin和Survivin的蛋白表达量,MTT法检测各组A549/DDP细胞对顺铂的IC₅₀,Annexin V/PI染色法检测各组A549/DDP细胞顺铂诱导的凋亡率。结果 相较于正常血清组（1.00）,siCTNNB1-235组（0.323±0.021）对β-catenin表达抑制率达67%（P=0.000）。RNAi技术沉默β-catenin后,与正常血清组（1.00）相比,补中益气汤联合顺铂组的Survivin（0.247±0.015）和β-catenin（0.257±0.015）蛋白的表达下调更为明显（P=0.000,P=0.000）。IC50和正常血清组（28.330±1.029） μmol/L相比,单独补中益气汤含药血清（20.350±1.155） μmol/L或单独瞬时转染siCTNNB1-235组（15.577±1.535） μmol/L均可降低A549/DDP细胞顺铂的IC₅₀（P=0.000,P=0.000）,2者联合（10.453±0.999） μmol/L使用可进一步降低顺铂的IC₅₀（P=0.000）。与正常血清组（9.130±0.384）%相比,瞬时转染siCTNNB1-235联合顺铂组（64.393±0.244）%和补中益气汤联合顺铂组（70.120±0.400）%的总凋亡率均升高（P=0.000,P=0.000）。结论 补中益气汤含药血清和瞬时转染siβ-catenin在抑制Wnt/β-catenin信号通路改善肺腺癌顺铂耐药性方面具有协同效应,且补中益气汤具有siβ-catenin瞬时转染样效应。     

人工智能辅助系统结合CBL教学在眼科住院医师斜视专业教学中的应用

目的　探讨人工智能（artificial intelligence,AI）辅助系统结合病例教学法（case-based learning,CBL）在眼科住院医师斜视专业教学中的应用。方法　将2020年1月至2021年12月在北京大学人民医院眼科规培的40名眼科住院医师作为研究对象,将其分为对照组和试验组,每组20人。对照组采用传统教学,试验组采用AI辅助系统结合CBL教学。专科培训结束时对两组学生进行理论知识、临床技能、临床思维考核,用问卷调查来评估教学效果。采用SPSS 26.0对数据进行卡方检验、单因素方差分析和独立样本t检验。结果　试验组理论知识考核成绩[（34.10±1.33）分]高于对照组成绩[（33.15±1.35）分]（t=2.24,P=0.031）,临床技能考核成绩[（24.75±1.02）分]高于对照组成绩[（23.60±0.82）分]（t=3.93,P<0.001）,临床思维考核成绩[（24.80±0.77）分]高于对照组成绩[（24.20±0.83）分]（t=2.37,P=0.023）。对教学效果的评估,试验组在提升学习兴趣（t=11.47,P<0.001）,提升临床思维能力（t=9.36,P<0.001）,提升知识与技能水平（t=17.71,P<0.001）,加大知识共享程度（t=31.17,P<0.001）,整体满意度（t=10.60,P<0.001）5方面评分均高于对照组。结论　AI辅助系统结合CBL教学能提高眼科住院医师对斜视疾病的独立诊疗能力,建立正确的临床思维路径,教学效果良好。     

创客教学在消化内镜教学中的应用研究

目的　在消化内镜检查教学中应用创客教学法,以期拓展学生的思维,激发其创新意识,从而获得较好的教学效果,达到提高学生成绩、教学满意度及学习兴趣的目的。方法　选取2020年1月到2021年9月于首都医科大学宣武医院进行临床见习的2个长学制班级的全体学生作为研究对象。1个班全体学生为试验组（SCS创客教学班）,共计55人;另外一个班全体学生为对照组（传统教学组）,共计56人。两组学生于教学前进行摸底考试并进行威廉斯创造力倾向测量表评分;于教学后再进行闭卷考试,并进行威廉斯创造力倾向测量表评分;最后以问卷形式对两组学生进行满意度评分及学习兴趣调查。应用SPSS 23.0软件对数据进行t检验和卡方检验。结果　试验组教学后考试成绩,理论总分（68.11±9.27 vs. 58.66±6.55,t=-6.19,P<0.001）、选择题（21.85±3.94 vs. 18.96±4.59,t=-3.56,P=0.001）、简答题（13.55±3.67 vs. 11.18±3.23,t=-3.61,P<0.001）、简单病例分析（12.67±3.82 vs. 11.14±2.82,t=-2.40,P=0.018）、复杂病例分析（20.04±5.62 vs. 17.38±5.30,t=-2.57,P=0.012）、阅片考试（36.53±7.59 vs. 33.14±7.82,t=-2.31,P=0.023）均高于对照组,差异有统计学意义。试验组威廉斯创造力倾向测量表评分（98.91±9.81 vs. 91.09±10.60,t=-4.03,P<0.001）、满意度评分（6.76±1.78 vs. 5.66±1.91,t=-3.14,P=0.002）、学习兴趣评分（6.49±2.00 vs. 5.41±1.82,t=-2.98,P=0.004）均高于对照组,差异有统计学意义。结论　创客教学法在消化内镜检查教学中的应用,可以培养学生的创新思维,提高医学生对消化内镜检查的理解,诱发他们对消化内镜的学习欲望,还可以提升学生对教学的满意程度。     

帕金森病患者异动症临床特征及与GRIN2B基因多态性的关联性分析

目的 探讨帕金森病患者异动症临床特征及与GRIN2B基因多态性的关联性。方法 自2012年1月~2015年12月,前瞻性收集帕金森患者178例,根据患者是否合并异动症,将患者分为异动症组和对照组,主要观察指标为GRIN2B基因的多态性,次要观察指标为两组患者的主要临床特征。结果 与对照组相比,异动症组患者发病年龄显著降低（46.34±12.32岁vs 54.45±11.35岁,P=0.000）;病程显著延长（8.94±3.21年vs 7.34±2.48年,P=0.000）;服药时间显著延长（69.435±19.43月vs 59.65±11.46月,P=0.000）;左旋多巴剂量显著增高（577.34±248.54mg/d vs 475.87±290.43mg/d,P=0.000）;H-Y分期评分显著增加（3.43±1.19 vs 2.14±0.89,P=0.015）。两组患者临床分型和性别等差异无统计学意义（P=0.596）。GRIN2B基因遗传多态性位点共出现rs34315573、rs7301328、rs1805522、rs1806201、rs1806191和rs1805246共6个多态位点。与对照组相比,异动症组患者rs34315573基因型和rs1806191基因型分布差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者rs7301328基因型、rs1805522基因型、rs1806201基因型和rs1805246基因型分布差异无统计学意义（P>0.05）。结论 帕金森病患者异动症发病具有年轻化、病程长、服药时间长、H-Y评分增加等特点,并与GRIN2B基因多态性相关。     

导师制联合OMP教学在急诊住院医师规范化培训中的应用

目的　探讨导师制联合一分钟教学（OMP,one minute preceptor）在急诊住院医师规范化培训中的应用效果。方法　选取2017年1月至2019年12月在济宁医学院附属枣庄市立医院急诊科进行培训且培训时间≥3个月的规培医师48名作为教学对象,按照随机数字表法将其分为对照组（n=24）和观察组（n=24）。对照组采用传统教学;观察组采用导师制联合OMP教学,即给每名规培医师指派一位导师,按照教学计划展开带教培养。轮转结束后进行出科考试,比较两组之间差异。采用SPSS 22.0软件进行t检验。结果　出科时,观察组与对照组临床技能成绩分别为（47.50±3.91）分与（43.80±6.52）分,两组之间差异有统计学意义（t=2.42,P=0.020）;临床操作技术成绩分别为（80.00±6.51）分与（75.10±6.19）分,两组之间差异有统计学意义（t=2.68,P=0.010）。两组医师自身前后的临床技能成绩和临床操作技术成绩,出科时都比入科时有提高。结论　导师制联合OMP的新型教学法能有效提高急诊规陪医师临床技能和操作技术,值得在临床教学中推广应用。     

印迹基因胰岛素样生长因子-2在胎儿生长发育中的作用

基因组印迹是哺乳动物正常生长发育和行为的基础，一些遗传性疾病和肿瘤的形成与其异常表达相关。胰岛素样生长因子-2(IGF-2)是具有促进胎儿生长发育作用的印迹基因，通过调节胎盘营养转运控制胎儿生长。IGF-2过度表达与新生儿低血糖、巨舌内脏肥大、脐膨出综合征(BWS)相关，父系单亲二倍体、部分三体、印迹丢失是引起IGF-2过度表达的分子机制。辅助生育相关技术可能会引起表遗传改变，影响胎儿发育及未来的成长。     

ADSCs培养观察及rhBMP-2转染对其生长增殖的影响

目的 观察脂肪源性干细胞(ADSCs)体外生长规律,并探讨重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)转染后ADSCs增殖变化情况.方法 用酶消化法从1岁龄贵州小香猪腹壁脂肪组织中获取ADSCs,进行连续传代培养,倒置显微镜下现察其相关生长特性.用细胞消化计数法和四唑盐比色法(MTT)对rhBMP-2转染ADSCs前后生长增殖情况进行比较,计算倍增时间,绘制生长曲线.结果 传代后ADSCs增殖速度比原代有所增快,于第4～6代趋于稳定.细胞形态由多角形、圆形和不规则形逐渐向成纤维细胞样和梭形过渡.rhBMP-2转染后ADSCs群体倍增时间增加8～10h,但对ADSCs生长增殖无明显影响(P<0.05).结论 ADSCs在体外培养至4～6代可获得较稳定状态.并且ADSCs作为宿主细胞被转染rhBMP-2基因后未发生畸变及生长增殖明显改变,说明rhBMP-2基因修饰的ADSCs可以作为携带目的 基因的种子细胞应用于再生医学研究.     

角质细胞生长因子2的优化表达及纯化研究

目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2（keratinocyte growthfactor,KGF-2）的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种层析柱进行分步洗脱,收集目标蛋白,进行电泳分析。结果获得高表达KGF-2工程菌,表达率为29％;用两种层析方法获得电泳纯KGF-2。结论 离子交换层析在纯化过程中具有一定优势。     

siRNA沉默大鼠Robo2对培养DRGs神经元突起生长的影响

目的:观察沉默Robo2基因后对体外DRGs神经元突起生长的影响。方法:构建大鼠pSI H1-H1-copGFP-Robo2si RNA表达质粒,使用慢病毒(lentivirus)包装系统,在293T细胞中包装含Robo2si RNA的慢病毒颗粒,然后转染DRGs神经元。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-FQPCR),Westernblot检测Robo2mRNA和蛋白的表达,显微镜下观察DRGs神经元突起生长情况。结果:RT-FQPCR检测DRGs神经元中Robo2mRNA的表达量,Robo组明显低于正常组,具有显著性差异(P<0.01)。Western blot检测DRGs神经元中Robo2蛋白的表达量,Robo组明显低于正常组,具有显著性差异(P<0.01)。Robo2si RNA转入DRGs神经元的转导率为93.01%,与正常组比较,Robo2si RNA-lenti-virus转导细胞(Robo)组轴突生长明显受到抑制。结论:Robo2蛋白是DRGs神经元轴突生长的重要导向分子,可促进轴突的生长。     

Bcl-2短发夹状RNA对BEL-7402、Caco2细胞的生长抑制作用

目的:研究Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的表达载体对肝癌细胞系BEL-7402和结肠癌细胞系Caco2生长的抑制作用.方法:将Bcl-2 shRNA序列克隆到携带绿色荧光蛋白基因的质粒Pgenesil-1载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的Bcl-2shRNA表达质粒转入BEL-7402、Caco2细胞,同时设立阴性shRNA组、空载体组、脂质体组、空白组作为对照.通过倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察细胞的转染效率,Western印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平,MTT法测定细胞增殖情况.结果:Bcl-2 shRNA转染组、阴性shRNA组、空载体组的转染效率无显著差异.转染Bcl-2 shRNA后BEL-7402、Caco2细胞Bcl-2蛋白表达水平与转染阴性shRNA、空载体组、脂质体组和空白组相比均显著降低(P＜0.05),且Bcl-2 shRNA抑制Caco2细胞Bcl-2蛋白表达比BEL-7402细胞更为明显(P＜0.05).MTT测定显示转染Bcl-2 shRNA载体入BEL-7402、Caco2细胞在72、96 h细胞生长明显受到抑制,分别与转染阴性shRNA、空载体组、脂质体组和空白组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:Bcl-2 shRNA可特异性地抑制BEL-7402、Caco2细胞生长.     

肝纤维化形成过程中大鼠血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-2的动态变化

目的观察大鼠肝纤维化形成过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的动态变化,探讨IGFBP-2与肝纤维化的关系。方法将36只大鼠随机分为2组:正常对照组6只(n=6),模型组30只(n=30)。除正常对照组外,给予大鼠40%CCl4皮下注射,每周2次,共计8周。正常对照组给予相同剂量的油剂皮下注射。模型组在开始注射CCl4后的第2、4、6、8周末分别处死大鼠6只。测定肝功能(ALT)、门静脉压,对肝组织进行常规HE与Masson三色染色,对血清中IGFBP-2采用酶联免疫法测定,并将其与肝纤维化程度进行相关分析。结果与正常对照组比较,2、4、6、8周模型组大鼠血清IGFBP-2水平增高(P<0.01)。模型组大鼠随着造模时间的延长,肝纤维化程度的加重,门静脉压逐渐增高,血清中IGFBP-2的水平逐渐增高,且IGFBP-2水平与肝纤维化程度呈正相关(r=0.874 2,P<0.001)。结论在肝纤维化形成过程中,血清中IGFBP-2的水平逐渐增高,提示其可能与肝纤维化有关。     

血管内皮生长因子和bcl-2在肾母细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨细胞凋亡抑制基因B-淋巴瘤细胞-2(B-cell lymphoma/leuke mia-2,bcl-2)血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾母细胞瘤中的表达及其相互关系.方法:用免疫组织化学和原位杂交方法研究bcl-2和VEGF蛋白及mRNA在17例肾母细胞瘤和7例瘤旁正常肾组织的表达.结果:bcl-2蛋白在肾母细胞瘤组织中的表达(82.4%)高于瘤旁正常肾组织(28.5%);VEGF蛋白在肾母细胞瘤组织中的表达(58.8%)高于瘤旁正常肾组织(14.3%);bel-2 mRNA和VEGF mRNA在肾母细胞瘤的表达率分别为88.2%和82.4%;bcl-2和VEGF的表达之间存在正相关关系(r,=0.633,P＜0.01).结论:bcl-2和VEGF在小儿肾母细胞瘤发生发展中起重要作用.     

c—erbB—2基因对小鼠成纤维细胞生长特性的影响

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２基因对细胞增殖的影响。本实验通过构建ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的表达载体一转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，观察了转染细胞的生长特性。发现其对数生长期提前，群体倍增时间缩短，并且其克隆形成率，软琼脂集落形成能力，及裸鼠致瘤能力均明显高于对照组。     

白藜芦醇抑制HepG2细胞生长和对细胞间隙连接通讯的影响

目的研究白藜芦醇对人肝癌细胞HepG2的生长抑制作用以及对细胞间隙连接通讯（GJIC）的影响。方法利用MTT法观察白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用。流式细胞仪检测细胞周期的时相分布，使用荧光探针5＇-CFDA／AM标记细胞．采用荧光漂白后重恢复技术（FRAP）和共聚焦显微镜技术观察白藜芦醇对HepG2细胞间隙连接通讯的影响。结果不同浓度的白藜芦醇处理细胞不同时间后，HepG2细胞的生长增殖明显受到抑制，抑制率最高达92．1％，各处理组间比较均有显著性差异（F=18．532，P〈0．05）；细胞周期分析显示，白藜芦醇能诱导HepG2细胞在S期停滞．抑制细胞DNA的合成并可诱导细胞凋亡：另外，白藜芦醇有恢复HepG2细胞间隙连接通讯的功能，且随浓度增加而增加。结论白藜芦醇可抑制HepG2细胞增殖，使细胞停滞于S期，并能诱导细胞凋亡；白藜芦醇还有恢复HepG2细胞间隙连接通讯功能的作用，提示此作用可能是白藜芦醇抑制HepG2细胞增殖和抗肿瘤作用的机制之一。     

DOC2抑制对宫颈癌SiHa细胞系的生长

目的:探讨卵巢癌缺失2(DOC2)基因对宫颈癌SiHa细胞系生长的抑制作用. 方法: 采用基因转染技术,将含有全长DOC2cDNA的真核重组表达质粒和空载体质粒(pcDNA3.1)转染到人宫颈癌SiHa细胞系(无DOC2基因的表达)中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响. 结果: 转染DOC2基因的宫颈癌细胞生长受到抑制(P《0.05),其在软琼脂克隆形成能力明显降低(P《0.05). DOC2有使G1期细胞比例增高、S期细胞比例下降的趋势,但SiHa细胞和SiHa-pcDNA3.1细胞之间无显著差异. 结论: DOC2基因能抑制宫颈癌细胞系的增殖.