刺五加皂甙对大鼠血管性痴呆的防治作用

目的:探讨刺五加皂甙对血管性痴呆(vasculardementia,VD)模型鼠学习记忆等认知功能的改善和对海马CA1区神经元的保护作用。方法:实验于2002-05/2003-05在南通大学航海医学研究所完成。选择SD大鼠36只随机分为对照组、模型组、用药组各12只,采用4-血管阻断改良法制备VD大鼠模型,用药组术前1周开始腹腔注射刺五加皂甙100mg/kg,术后再用1周,模型组腹腔注射同量生理盐水。各组作避暗回避试验及透射电镜观察。结果:行为学测试表明造模后1周模型组动物[(3.7±0.8)次]较对照组[(1.5±0.4)次]的探索次数明显增多(P<0.01),而滞留时间[模型组(195±5)s,对照组(995±8)s]显著缩短(P<0.01);用药组[(2.9±0.5)次]与对照组相比探索次数增多(P<0.01),但仍低于模型组(P<0.05),而滞留时间[(263±7)s]与对照组相比明显缩短(P<0.01),但仍高于模型组(P<0.05)。形态学结果表明刺五加皂甙减轻海马CA1区神经元损害。结论:刺五加皂甙能减轻海马脑缺血缺氧后神经元损害,从而改善VD大鼠学习记忆功能。     

重复经颅磁刺激对慢性抑郁小鼠前额叶皮质和海马区P2X7R及GFAP表达的影响

目的观察重复经颅磁刺激(rTMS)对抑郁小鼠前额叶皮质和海马区嘌呤2X7受体(P2X7R)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法将30只C57BL/6小鼠分为对照组(10只)和造模组(20只)。对照组小鼠群居饲养(5只/笼), 造模组小鼠在出生21 d后通过断奶独居(1只/笼)饲养6周制作慢性抑郁小鼠模型。采用随机数字表法将16只制模成功小鼠分为模型组及rTMS组, 每组8只小鼠。rTMS组小鼠给予10 Hz rTMS干预, 每周干预5 d。于rTMS干预4周后观察各组小鼠抑郁样行为改变, 并对比各组小鼠前额叶皮质和海马区P2X7R、GFAP表达变化。结果与对照组比较, 模型组小鼠蔗糖偏好实验(SPT)中糖水偏好量、旷场实验(OFT)中运动距离均显著减少(P<0.05), 悬尾实验(TST)中静止不动时间显著增加(P<0.05), 前额叶皮质和海马区P2X7R表达水平均明显增加(P<0.05), GFAP表达水平则显著下降(P<0.05)。与模型组比较, rTMS组SPT糖水偏好量[(75.11±4.58)% vs(65.14±4.87)%]、OFT运动...     

高压氧对脑小血管病大鼠学习记忆功能及脑源性神经生长因子、乙酰胆碱表达的影响

目的观察高压氧治疗对脑小血管病（CSVD）模型大鼠脑皮质及海马区脑源性神经生长因子(BDNF)及乙酰胆碱(Ach)表达的影响,同时观察治疗前、后大鼠学习记忆功能改善情况,并探讨高压氧治疗CSVD的可能机制。 方法选取健康雄性Wistar大鼠60只,采用颈外动脉注射粒径为48～74μm大鼠同种异体血栓制成CSVD大鼠模型。选用随机数字表法将上述CSVD模型大鼠分为高压氧组、尼膜同组及对照组。高压氧组大鼠于制模12h后给予高压氧治疗,尼膜同组大鼠于制模12h后给予尼膜地平片-混悬液灌胃,对照组大鼠制模后不给予任何特殊干预。各组大鼠分别于制模7d、14d及28d时通过Morris水迷宫实验观察其学习记忆功能改变;于制模28d时采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠脑皮质及海马区BDNF、Ach含量。 结果制模14d、28d时高压氧组大鼠逃避潜伏期［分别为（28.5±6.6）s和（15.8±4.7）s］均显著短于尼膜同组及对照组(P<0.05),穿越平台次数［分别为（3.4±1.2）次/分钟和（4.5±1.9）次/分钟］均较尼膜同组及对照组明显增多(P<0.05);另外制模14d、28d时尼膜同组逃避潜伏期及穿越平台次数亦显著优于对照组(P<0.05)。高压氧组大鼠脑皮质、海马中Ach含量［分别为（175.1±23.5）μg/g和（158.8±25.5）μg/g］及BDNF含量［分别为（105.1±7.9）μg/g和（172.1±23.1）μg/g］均较尼膜同组和对照组明显增多（P<0.05）;尼膜同组脑皮质、海马部位Ach及BDNF含量亦较对照组明显增多（P<0.05）。 结论高压氧干预能促进CSVD大鼠BDNF释放,有助于保护及修复神经元线粒体,维持脑皮质及海马区神经递质Ach处于稳定水平,对改善大鼠学习、记忆功能具有重要作用,其疗效优于尼膜同药物治疗。     

刺五加皂甙对大鼠血管性痴呆的防治作用

目的：探讨刺五加皂甙对血管性痴呆(vascular dementia，VD)模型鼠学习记忆等认知功能的改善和对海马CA1区神经元的保护作用。方法：实验于2002-05／2003-05在南通大学航海医学研究所完成。选择SD大鼠36只随机分为对照组、模型组、用药组各12只，采用4-血管阻断改良法制备VD大鼠模型，用药组术前1周开始腹腔注射刺五加皂甙100mg／kg，术后再用1周，模型组腹腔注射同量生理盐水。各组作避暗回避试验及透射电镜观察。结果：行为学测试表明造模后1周模型组动物[(3.7&;#177;0.8)次]较对照组[(1．5&;#177;0．4)次]的探索次数明显增多(P&;lt;0，01)，而滞留时间[模型组(195&;#177;5)s，对照组(995&;#177;8)s]显著缩短(P&;lt;0．01)；用药组[(2.9&;#177;0．5)次]与对照组相比探索次数增多(P&;lt;0．01)，但仍低于模型组(P&;lt;0．05)，而滞留时间[(263&;#177;7)s]与对照组相比明显缩短(P&;lt;0．01)，但仍高于模型组(P&;lt;0.05)。形态学结果表明刺五加皂甙减轻海马CA1区神经元损害。结论：刺五加皂甙能减轻海马脑缺血缺氧后神经元损害，从而改善VD大鼠学习记忆功能。     

丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠脑超微结构改变及神经丝蛋白表达的影响

目的:观察丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤大鼠脑超微结构及神经丝蛋白(NF)的影响。方法:实验于2005-03/2006-06在新桥医院中心实验室完成。取7日龄健康SD大鼠52只随机分为3组:①丰富环境干预组:20只,采用Rice法建立缺氧缺血性脑损伤模型,予早期抚触(15min/次,2次/d)和丰富环境(2h/次,1次/d)刺激共28d。②缺氧缺血非干预组:20只,同前造模,造模后不干预。③正常对照组:12只,不造模,不干预。饲养至1月龄时各组随机选10只进行Morris水迷宫测试学习记忆功能;行为学测定后处死大鼠取脑,免疫组织化学方法观察海马神经丝蛋白的染色情况,借助自动图像分析系统对其进行定量分析;利用透射电镜观察海马神经元超微结构、神经丝蛋白及突触情况。结果:52只进入结果分析。①隐匿平台逃避潜伏期(学习能力):缺氧缺血非干预组较正常对照组明显延长[(39.98±7.86),(26.12±4.03)s,P<0.001],丰富环境干预组较缺氧缺血非干预组缩短[(29.06±5.11)s,P<0.01],与正常对照组无差异。②跨越平台次数(记忆能力):缺氧缺血非干预组明显少于正常对照组[(2.13±1.33),(4.91±2.01)次,P<0.001],丰富环境干预组多于缺氧缺血非干预组[(4.45±1.59)次,P<0.01],与正常对照组无差异。③缺氧缺血非干预组左侧与右侧脑组织NF-H积分吸光度值之比值明显小于正常对照组和丰富环境干预组(0.398±0.110,0.975±0.011,0.821±0.138,P<0.01),后2组比较无差异。④超微结构显示缺氧缺血非干预组海马神经细胞固缩改变,线粒体肿胀,神经丝数量减少,排列稀疏,突触数量减少;丰富环境干预组海马神经元和突触无明显异常。结论:早期抚触及丰富环境刺激可以促进缺血缺氧的脑损伤恢复,脑组织神经网络重建及脑的可塑性增加是其可能的机制之一。     

可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的作用

目的探讨可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的干预作用。方法雄性SD大鼠28只,8只采用普通饲料喂养者为对照组,20只高脂饲料喂养4周后给予小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型,16只大鼠造模成功并随机分为模型组和干预组各8只。继续饲养12周,干预组给予Cinaciguat7μg/(kg·d)腹腔注射,模型组和对照组大鼠给予等量质量分数0.1%DMSO腹腔注射,疗程均为2周。测定各组大鼠血清空腹血糖、糖化血红蛋白、碱性磷酸酶、钙、磷、一氧化氮和一氧化氮合酶水平,并对胸主动脉行组织病理学检查。结果模型组大鼠血清碱性磷酸酶活性[(886.63±527.08)u/L]明显高于干预组[(564.17±475.89)u/L]和对照组[(139.00±32.29)u/L],干预组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);模型组一氧化氮水平[(43.20±7.49)μmol/L]、一氧化氮合酶活性(12.23±2.32)u/mL]明显低于干预组[(49.18±8.38)μmol/L、(17.43±4.27)u/mL]和对照组[(62.23±10.04)μmol/L、(24.90±5.39)u/mL](P<0.05),干预组低于对照组(P<0.05);干预组和模型组空腹血糖[(24.89±4.79)、(24.60±4.42)mmol/L]及糖化血红蛋白[(11.38±0.61)%、(12.13±0.78)%]水平明显高于对照组[(5.02±0.65)mmol/L、(4.60±0.51)%](P<0.01),模型组与干预组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组、模型组与干预组大鼠血清钙[(1.75±0.17)、(1.89±0.50)、(1.97±0.52)mmol/L]和磷[(2.48±0.12)、(2.85±0.19)、(2.62±0.09)mmol/L]水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);组织病理检查结果显示对照组大鼠胸主动脉内膜连续、光滑,中膜平滑肌细胞走行清晰、无增生;模型组大鼠胸主动脉血管壁增厚,中膜平滑肌细胞增生且排列不规则;干预组大鼠胸主动脉壁较为完整、连续,中膜平滑肌细胞稍有增生,排列较规则,走行无明显异常。结论 Cinaciguat能有效改善2型糖尿病大鼠的抗氧化能力,为2型糖尿病血管并发症干预治疗提供了新思路和依据。     

高脂血症性急性胰腺炎大鼠模型的建立和分析

目的探讨高脂血症性急性胰腺炎(HLP)大鼠模型的建立。方法 32只SD雄性大鼠随机分为4组:正常(N)组,高脂血症(HL)组,非高脂血症性急性胰腺炎(NHLP)组,HLP组,每组8只。N组和HL组分别予以普通饲料和高脂饲料喂养4周后,术中仅轻轻翻动十二指肠和胰腺;NHLP组和HLP组分别以普通饲料和高脂饲料喂养4周后,5%牛磺胆酸溶液逆行胰胆管注射制模。观察各组术后12 h血清淀粉酶(AMS)、甘油三酯(TG)及胰腺病理变化。结果血清TG水平HLP组[(0.64±0.25)mmol/L]明显高于NHLP组[(0.30±0.14)mmol/L,P<0.05]和N组[(0.16±0.03)mmol/L,P<0.01]。血清AMS水平NHLP组[(46.49±27.95)U/L]与HLP组[(60.29±49.53)U/L]明显高于N组[(6.12±2.00)U/L,P<0.01]。NHLP组与HLP组胰腺实质大量坏死伴出血,间质显著充血水肿,大量炎细胞浸润,病理组织学评分NHLP组(9.13±1.55)与HLP组(10.88±1.55)明显高于N组(0.25±0.46)(P均<0.01)。结论高脂饲料喂养联合逆行胰胆管注射制备HLP大鼠模型,具有稳定性高、成活率高等优势,是理想的HLP制模方法。     

环境富集对坐骨神经挤压伤模型小鼠神经再生的影响

目的探讨环境富集对坐骨神经挤压伤模型小鼠神经再生的作用及机制。方法首先对22只C57BL/6小鼠进行坐骨神经挤压建立动物模型, 随后按随机数字表法将模型小鼠分为干预组和对照组, 干预组小鼠置于具备环境富集的鼠笼内进行干预, 对照组置于标准鼠笼中饲养。造模成功2周后, 2组小鼠均行坐骨神经电生理检查和步态分析, 并应用甲苯胺蓝染色观察坐骨神经有髓神经纤维的比例, 采用免疫荧光测定2组坐骨神经中的生长相关蛋白43(GAP43)、髓鞘碱性蛋白(MBP)以及p75神经营养素受体(p75NTR)表达的差异。结果①坐骨神经电生理检测显示, 干预组小鼠坐骨神经复合肌肉动作电位(CMAP)的潜伏期[(1.05±0.04)ms]较对照组[(1.98±0.30)ms]明显缩短(P<0.05), 而其波幅[干预组(10.63±0.90)mV]则明显高于对照组[(6.58±1.25)mV], 且组间差异有统计学意义(P<0.05);②小鼠步态分析显示, 干预组小鼠的平均接触强度[(160.60±20.45)AU]、步幅[(5.11±0.58)cm]和步速[(53.06±7.20)cm/s] 均较对...     

模拟高原低氧对大鼠皮质和海马神经颗粒素表达的影响

目的:分析高原低氧环境对大鼠大脑皮质、海马神经颗粒素表达的影响以及与学习记忆的关系。方法:实验于2005-01/07在中国协和医科大学基础医学院病理生理学系实验室进行。取成年健康雄性Wistar大鼠20只,随机分成对照组和模拟高原低氧组,每组10只。置于模拟海拔5000m高度的低压舱内4周,复制慢性高原低氧动物模型。低氧结束后进行Morris水迷宫实验,测试大鼠空间学习记忆能力的改变。采用反转录-聚合酶链反应和Westernblot方法分别检测皮质和海马中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平的表达。结果:大鼠20只全部进入结果分析,无脱失值。①模拟高原低氧组的逃避潜伏期明显低于对照组,差异有显著性[(32.70±5.01),(51.30±7.11)s,t=6.76,P<0.01]。②神经颗粒素mRNA在大鼠皮质、海马中均有表达。与对照组相比,皮质组织中神经颗粒素mRNA在4周低氧后明显下降,差异有显著性[(1.39±0.19),(0.98±0.20),t=3.351,P<0.01],而海马中组织内神经颗粒素mRNA的水平与对照组接近,差异无显著性[(1.33±0.42),(1.16±0.27),P>0.05]。③两组大鼠皮质,海马的神经颗粒素均有表达,慢性低氧后模拟高原低氧组皮质中神经颗粒素比对照组明显降低,差异有显著性[(96.32±7.50),(57.23±13.41),t=7.307,P<0.01]。而海马中神经颗粒素在两组间未见明显变化[(53.29±8.33),(42.49±19.19)P>0.05]。结论:模拟高原低氧环境使大鼠空间学习记忆能力明显下降,大脑皮质中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平显著降低,而海马中则无明显变化。高原低氧环境下大鼠空间学习记忆能力的下降,可能与皮质中神经颗粒素表达的减少有关。     

胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力及突触素表达的影响

目的:观察胰岛素样生长因子1对痴呆模型大鼠学习记忆能力影响及其对突触素的保护作用。方法:实验于2004-03/2005-06在吉林大学第一医院神经内科实验室完成。实验动物选择Morris水迷宫学习正常的雄性三四个月龄的Wistar大鼠30只,随机分为痴呆治疗组、痴呆对照组和正常对照组,每组10只。采用切断成年Wistar大鼠双侧穹窿海马伞,建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。痴呆模型制备1d后开始侧脑室给药,连续21d,痴呆治疗组给予胰岛素样生长因子110μL(4g/L),痴呆对照组则同时间给予生理盐水10μL。正常对照组不给予处理。利用水迷宫对大鼠学习、记忆能力进行测试,观察潜伏期和跨越平台次数;利用Y电迷宫观察其行为学改变,以尝试次数和再显次数分析指标。所有大鼠在建立模型后21d以40g/L多聚甲醛心脏灌注固定,取脑,连续冠状切片,利用免疫组化及图像分析测定大鼠脑内突触素的表达。每只动物取切片5张,以同张切片胼胝体的吸光度值作为背景,分别选取海马和额叶2个区域测定吸光度值,取其均值。组间比较采用t检验。结果:在实验过程中,痴呆治疗组和痴呆对照组各有1只大鼠死亡,其余动物全部进入结果分析。①痴呆治疗组大鼠的学习记忆成绩优于痴呆对照组,痴呆治疗组潜伏期明显低于痴呆对照组,差异有显著性[(31.02±2.65),(45.32±6.57)s,t=6.056,P<0.01];跨越平台次数明显高于痴呆对照组,差异有显著性[(4.36±1.02),(2.35±0.76)次,t=4.213,P<0.01];尝试次数明显低于痴呆对照组,差异有显著性[(18.67±1.86),(25.16±2.42)次,t=6.382,P<0.01];再显次数明显高于痴呆治疗组,差异有显著性[(6.78±0.53),(3.97±0.45)次,t=12.112,P<0.01]②痴呆治疗组海马突触素的表达量与痴呆对照组相比明显增多,差异有显著性[(23.92±2.76),(10.95±3.05),t=9.460,P<0.01];额叶突触素的表达量与痴呆对照组相比也明显增多,差异有显著性[(17.69±2.34),(6.58±1.02),t=13.055,P<0.01)。痴呆治疗组脑内突触素的表达量没有达到正常对照组水平(P<0.01)结论:胰岛素样生长因子1对中枢胆碱能系统有保护作用,能改善学习记忆能力。     

并步云手训练联合拉伸训练对中老年女性肢体协调能力的影响

目的探讨并步云手训练联合本体感觉神经肌肉促进疗法(PNF)中的拉伸训练对中老年人群肢体协调能力的影响。方法以焦作市城市社区55～65周岁的中老年女性为筛选对象, 从中选取平衡能力较差、无健身习惯且身体健康状态良好的48例中老年女性作为研究对象, 采用随机数字表法将其分为观察组及对照组, 每组24例。对照组受试者在日常活动基础上辅以并步云手习练, 观察组受试者则在并步云手习练结束后辅以PNF拉伸训练, 2组受试者均隔天训练1次, 连续训练3个月。于干预前、干预3个月后对2组受试者肢体协调能力进行评定。结果干预后2组受试者闭目单腿站立时长、平衡木行走时长及15 s象限跳次数均较干预前明显改善(P<0.05);并且观察组闭目单腿站立时长[(5.04±0.55)s]、平衡木行走时长[(4.22±3.30)s]及15 s象限跳次数[(11.12±2.55)次]亦显著优于同期对照组水平(P<0.05)。结论并步云手习练能有效提高中老年人群身体协调能力, 如辅以PNF拉伸训练能进一步改善机体平衡能力及身体灵活度, 对预防老年人群跌倒、提高身体协调能力具有重要意义。     

短期针刺对急性肺损伤大鼠血浆白细胞介素-1β含量及海马c-fos基因表达的影响

目的 探讨针刺对急性肺损伤(ALI)的干预作用及其可能机制.方法 将36只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、假针刺组、针刺组,每组9只.采用经尾静脉注射油酸0.2 ml/kg后4 h注射脂多糖(LPS)2 mg/kg的"二次打击"复制大鼠ALI模型.针刺组于制模前5 d每日针刺大鼠肺俞、足三里穴;假针刺组针刺离穴位5 mm非经非穴处;对照组和模型组不给予任何治疗.于制模后2 h取血检测大鼠动脉血氧分压(PaO2)及血浆白细胞介素-1β(IL-1β)含量;取肺组织进行病理观察及形态学积分测定;取脑组织检测海马CA2～3区c-fos表达.结果 与对照组比较,模型组PaO2[mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa):57.56±5.61比107.22±3.233明显降低(P<0.01),血浆IL-1β含量(ug/L:0.76±0.06比0.25±0.02)、肺组织病理形态学积分(分:12.16±0.82比1.68±0.14)及海马c-fos阳性表达(灰度值:94.22±7.89比189.28±8.45)均明显升高(均P<0.01).针刺组PaO2[(64.56±5.77)mm Hg]改善及血浆IL-1β含量C(0.71±0.05)μβ/L]下降,肺损伤减轻[病理形态学积分(11.58±0.50)分]及海马c-fos阳性表达OX度值129.16±8.73)明显减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 大鼠海马CA2～3区通过c-fos途径参与ALI免疫调节过程;针刺对ALI具有一定的保护作用,其机制可能与降低血浆IL-1β含量、抑制c-fos表达有关.     

高压氧预处理对脊髓损伤大鼠神经元线粒体凋亡通路的影响

目的 研究高压氧预处理(HBO-PC)对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能及线粒体凋亡通路的影响.方法 共选取健康雄性Wistar大鼠36只,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组及高压氧预处理组.高压氧预处理组大鼠经7次高压氧预处理后,采用Allen's法将高压氧预处理组及模型组大鼠制成SCI模型,对照组末给予特殊处理.于制模2周后采用BBB运动功能评分对各组大鼠肢体运动功能进行评定,同时采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脊髓组织内caspase-3、细胞色素C(CYC)、Bak、Bax、Bcl-x及Bc1-2 mRNA表达量.结果 制模2周后发现模型组及高压氧预处理组BBB评分[分别为(6.15±1.24)分和(10.80 ±2.16)分]均较对照组[(21.00 ±0.00)分]明显降低(P＜0.05);并且模型组BBB评分亦显著低于高压氧预处理组(P＜0.05).制模2周后模型组caspase-3 mRNA表达量(2.46 ±0.60)较对照组(1.86±0.53)显著增高(P＜0.05);高压氧预处理组caspase-3 mRNA表达量(1.97 ±0.28)亦较对照组有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05);同时高压氧预处理组caspase-3 mRNA表达量较模型组显著降低(P＜0.05);高压氧预处理组CYC mRNA表达量(1.38±0.22)较对照组(1.98±0.62)及模型组(2.69±0.50)均显著降低(均P＜0.05).高压氧预处理组、模型组Bak mRNA表达量[分别为(2.15±0.78)和(1.93 ±0.61)]均较对照组(1.21 ±0.46)显著增高(P＜0.05).结论 高压氧预处理能改善SCI大鼠肢体运动功能,其治疗机制可能与减弱SCI大鼠神经元线粒体凋亡通路激活程度有关.     

针刺对抑郁症模型大鼠前额皮质单胺类神经递质的影响

目的:观察针刺对抑郁症模型大鼠行为学和前额皮质单胺类神经递质的影响,分析针灸治疗抑郁症可能的作用机制。方法:实验于2003-10/2004-05在南京中医药大学动物实验中心、江苏省针药结合实验室完成。选择Open-Field法评分相近的40只成年SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组、针刺组,每组各10只。应用分养和长期不可预见性中等强度应激造成抑郁症模型。实验第21天,进入治疗阶段。正常组,每笼4只,常规饲养。模型组,孤笼,常规饲养。氟西汀组,按照1.8mg/kg给予氟西汀灌胃,1次/d,连续21d。针刺组,应用32号1.0寸针灸针,百会穴向前斜刺,神庭穴向上斜刺,进针深度约为2mm,内关直刺1mm,三阴交直刺5mm,每穴均匀捻转刺激30s,留针10min,1次/d,连续21d。以Open-Field法对照研究针刺对慢性应激诱导的抑郁症模型大鼠行为学的改变;应用高效液相电化学检测系统对照研究针刺对模型大鼠前额皮质单胺类神经递质的改变。结果:纳入大鼠40只、全部进入结果分析,无脱失。①造模后,模型组和各治疗组大鼠行为学评分显著低于正常组(P<0.01)。②治疗第7天针刺组行为学已接近正常组(P>0.05);治疗21d后,氟西汀组行为学较模型组明显改善(P<0.01),与正常组接近(P>0.05)。③治疗21d后,针刺组大鼠前额皮质内5-羟色胺和去甲肾上腺素含量较模型组明显升高[(18.97±1.52),(13.35±0.69)ng/g;(715.97±23.43)(587.40±23.2)ng/g;P<0.01],去甲肾上腺素含量与正常组接近[(790.38±22.05)ng/g,P>0.05],5-羟色胺尚低于正常组[(23.56±0.82)ng/g,P<0.05];氟西汀组5-羟色胺含量较模型组显著升高[(27.12±1.46)ng/g,P<0.01],去甲肾上腺素含量较模型组变化不大[(535.26±19.70)ng/g,P>0.05]。结论:针刺能够改善抑郁症模型大鼠的行为学异常,起效快,3周疗效与氟西汀相当;针刺改善抑郁症模型大鼠前额皮质单胺类神经递质系统功能的作用机制和规律与氟西汀治疗存在差异。     

慢性应激抑郁模型大鼠海马蛋白激酶A的变化及抗抑郁药物的干预作用

目的研究氟西汀与噻萘普汀对慢性应激抑郁模型大鼠海马蛋白激酶A(PKA)表达的影响。方法将大鼠随机分为抑郁模型组、氟西汀组、噻萘普汀组和对照组。模型组、氟西汀组和噻萘普汀组给予21 d的应激刺激,此期间对照组正常饲养,刺激期间氟西汀组每天灌胃氟西汀(10 mg/kg),噻萘普汀组每天灌胃噻萘普汀(50 mg/kg),模型组和对照组每天灌胃等体积的生理盐水。行为学检测应用开场法和液体消耗实验。采用Western blotting法检测各组大鼠海马PKA的表达情况。结果应激后,模型组水平穿越格数、竖立次数、修饰次数、糖水消耗百分比均显著低于对照组(P<0.01)。应激后氟西汀组水平穿越格数、竖立次数、修饰次数和糖水消耗百分比均高于模型组(P<0.05)。应激后噻萘普汀组糖水消耗百分比高于模型组(P<0.05),水平穿越格数、竖立次数和修饰次数也高于模型组,但无统计学差异。在Western blotting法检测中,模型组大鼠海马PKA的表达水平显著低于对照组(P<0.01);氟西汀组大鼠海马PKA的表达水平高于模型组(P<0.01),与对照组无统计学差异(P>0.05);噻萘普汀组大鼠海马PKA的表达水平显著高于模型组(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.01)。结论氟西汀和噻萘普汀均能逆转慢性应激抑郁模型大鼠海马PKA表达的降低。     

高压氧对成年大鼠脑梗死后神经干细胞增殖及分化的影响

目的探讨高压氧(HBO)干预对大脑中动脉栓塞(MCAO)模型大鼠神经干细胞(NSCs)增殖及分化的影响。 方法采用随机数字表法将72只成年SD雄性大鼠分为高压空气组、常压氧组、高压氧组及模型组。将上述各组大鼠制成MCAO模型大鼠,模型组大鼠于制模后未给予任何特殊处理,高压空气组、常压氧组、高压氧组于制模2 h后分别给予高压空气、常压氧及高压氧干预,每天治疗1次。分别于制模后2 d、3 d、7 d及14 d时采用Western-blot法检测各组大鼠脑缺血侧海马神经巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及微管相关蛋白-2(MAP-2)含量。 结果制模后3 d、7 d、14 d时高压氧组脑缺血侧海马Nestin蛋白表达均较其它各组明显增高(P<0.05),并于制模后3 d时达到峰值(0.55±0.04 );高压氧组制模后7 d时MAP-2表达(1.23±0.10)及制模后14 d时MAP-2表达（0.80±0.04）均较其他各组显著升高(P<0.05);高压氧组GFAP表达在制模后不同时间点均显著低于其它各组水平(P<0.05)。 结论高压氧干预可促进MCAO模型大鼠脑缺血侧海马NSCs增殖及向神经元分化,同时还能抑制NSCs向星形胶质细胞分化。     

异丙酚改善氯胺酮诱发新生大鼠脑损伤的蛋白组学研究

目的探讨异丙酚复合氯胺酮麻醉引起幼年大鼠海马神经元以及认知功能损害后海马组织蛋白组学的变化,揭示海马神经元变化的病理机制,为提高临床麻醉安全提供指导。方法选择出生后7 d幼鼠80只分为生理盐水组(N组),氯胺酮组(K组),异丙酚+氯胺酮组(P+K组)低、高剂量组模拟幼儿麻醉状态,并进行海马组织切片及海马蛋白提取,应用双向电泳和基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF)进行蛋白组学差异研究。结果水迷宫实验提示P组和P+K组术后认知功能明显优于K组;在海马神经元凋亡方面,P+K低剂量组[(10.23±4.82)%]及高剂量组[(6.79±6.48)%]均较K组凋亡指数[(14.98±5.65)%]明显降低(P<0.05),但P+K低剂量组与高剂量组间比较无显著性差异。K组海马组织蛋白浓度[(1.78±0.28)μg/μl]较N组明显下调[(2.11±0.32)μg/μl,P<0.05]。P+K各组[(1.88±0.27)%,(1.93±0.21)%]与N组相比差异无统计学意义。K+P组在6 h检测海马组织蛋白,发现上调蛋白并鉴定为PD1A3、NDUFB10、HSPA8、ATP5JD、PSMA1,下调蛋白为PPIA、PKM2、GFAP、NSE、PPIA、PKM2、GFAP等,21 d后检测结果表达上调蛋白为FUBP3、PRDX5,下调蛋白为GAPDH、AKR1A1、VC、TUBULIN A1 B。结论本实验中蛋白质组学技术初步筛选了异丙酚及氯胺酮麻醉后海马组织蛋白的差异表达,并分析了其在认知功能中的作用,为预防和改善海马神经元变化后认知功能损害提供理论基础。     

左旋谷氨酸单钠致大鼠认知障碍的实验观察

目的:观察左旋谷氨酸单钠毁损下丘脑弓状核大鼠的认知功能,探讨其与下丘脑-垂体-肾上腺轴和中枢氨基酸能神经递质与受体的关系。方法:实验于2001-09/2002-03在河南中医学院动物实验中心和中药研究室进行。选取普通级SD大鼠12只,雌雄各半,作为种鼠供实验室繁殖。选取新生鼠23只,随机分为模型组(n=13)和对照组(n=10),分别于出生后第2,4,6,8,10天进行皮下注射左旋谷氨酸单钠4mg/g和生理盐水,每日1次。28d后离乳,再饲养8周后进行跳台试验和Morris水迷宫实验,分别记录各组大鼠的触电潜伏期,错误反应次数及寻台潜伏期,并计算跨台百分率,主要观察各组大鼠的学习记忆行为。实验结束后,全部大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,心脏取血,采用放免法测定血浆皮质醇、促肾上腺皮质激素。取模型组大鼠8只,对照组大鼠5只,不经灌注固定,冰台上迅速分离大脑,将大脑沿矢状缝分左右半球,左半球用于糖皮质激素受体mRNA原位杂交,右半球采用薄层扫描法测定谷氨酸和γ-氨基丁酸含量,同时取大鼠左侧肾上腺进行苏木精-伊红染色,观察肾上腺组织形态变化。取各组剩余大鼠,用含4%多聚甲醛和0.2%苦味酸的0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PB,pH7.4)灌注固定,采用免疫组化法观察海马γ-氨基丁酸受体和N-甲基-D-天门冬氨酸受体1表达,并应用MotaMorph计算机图象分析系统计算免疫反应物质的光密度,取脑组织切片进行Nissl染色。组间比较采用t检验。结果:各组大鼠全部进入结果分析。①跳台实验观察结果:与对照组比较,模型组大鼠测试触电潜伏期显著缩短(t=4.940,P<0.001),训练期和测验期的错误反应次数显著增加(P<0.001～0.01)。②Morris水迷宫实验观察结果:模型组大鼠寻台潜伏期较对照组明显延长(P<0.01),跨台百分率较对照组明显降低(P<0.01)。③下丘脑-垂体-肾上腺-海马轴的观察:模型组大鼠血浆皮质醇及促肾上腺皮质激素水平均较对照组显著升高(t=2.943～4.013,P<0.001～0.01)。模型组海马糖皮质激素受体mRNA表达增强,阳性染色细胞较对照组明显增多。④中枢氨基酸能神经递质与受体的观察:模型组大鼠脑组织谷氨酸含量较对照组显著降低(t=3.063,P<0.05),γ-氨基丁酸含量及谷氨酸/γ-氨基丁酸值较对照组有降低趋势,与对照组比较,模型组海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体1及γ-氨基丁酸受体免疫反应物质数密度明显降低(t=2.224～3.682,P<0.01～0.05)。⑤模型组大鼠海马Nissl染色显示模型组细胞稀疏、个数减少、有空泡出现,胞浆着色较浅,细胞轮廓不规整。图像分析模型组大鼠光密度较对照组有降低趋势。结论:模型组大鼠有明显学习记忆障碍,其机制与下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进,氨基酸能神经递质与受体异常有关。     

低频经颅磁刺激对匹罗卡品致痫大鼠癫痫发作及海马细胞神经肽Y表达的影响

目的 观察低频经颅磁刺激（LF-TMS）对匹罗卡品（PLO）致痫大鼠皮质脑电图及大鼠海马各区神经肽Y（NPY）表达的影响。方法雄性SD大鼠40只，随机分为对照组（PLO组）、干预组（PLO＋LFTMS组）。各组给予相关干预处理后腹腔注射PLO建立癫痫模型，观察皮质脑电图及海马HE染色、NPY免疫组化染色观察。结果两组间皮质脑电图指标比较，发现磁刺激干预后潜伏期延长、痫波频率及大发作次数降低。HE染色显示，对照组海马各区神经元显著变性、死亡，以海马CA3区明显；干预组海马各区神经元损害减轻。NPY的免疫组化染色显示对照组各时间点海马各区NPY阳性细胞增多，明显高于干预组，差异有统计学意义。结论 LF—TMS不仅可以延迟PLO癫痫点燃的形成．还可以缓解点燃后的癫痫发作程度；LF—TMS可明显影响海马各区NPY阳性细胞数。NPY与癫痫发作程度相关，提示NPY表达与癫痫之间关系紧密，NPY可能具有抗痫和神经保护作用。     

3-甲基腺嘌呤对大鼠新生期惊厥致神经行为损伤的干预

目的 探讨大鼠新生期反复惊厥急性期应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对惊厥所致神经行为损伤的干预作用及机制。方法 实验在苏州大学衰老与神经疾病实验室进行。日龄6d(P6,下同)的Sprague-Dawley大鼠45只随机(随机数字法)分成三组,每组15只,惊厥组在P6吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,持续30 min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;3-MA组惊厥前腹腔注射3 -MA(总量2μL),同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥,方法同惊厥组。三组大鼠于P12进行游泳行为评分测试大鼠神经运动发育,P17进行旷场实验,P43～P49行Morris水迷宫测试大鼠学习记忆功能,于PS0取海马组织,采用免疫印迹技术(Western blot)检测抗凋亡基因Bcl-2及自噬标记蛋白Beclin1的表达。各组行为学指标和蛋白水平采用方差分析进行统计。结果 惊厥后各组大鼠游泳行为测评,各项评分惊厥组明显低于对照组及3-MA组(P＜0.01),旷场实验显示惊厥组延迟时间[(13.33±6.69)8]较对照组[(7.11±2.37)8]和3-MA组[(9.91±4.23)s]显著延长,差异具有统计学意义(F=4.39,P＜0.05);Morris水迷宫测试RS组第4、5天逃避潜伏期较对照组和3-MA组明显延长(P＜0.05)。惊厥组海马Bcl-2表达水平(0.587±0.139)较对照组(0.782±0.083)及3-MA组(0.799±0.163)显著降低,差异具有统计学意义(F=4.71,P＜0.05)。各组Beclin1的表达差异无统计学意义(F =0.27,P＞0.05)。结论 3-MA能显著改善大鼠惊厥后神经行为损伤,并可能与上调海马抗凋亡基因Bcl-2表达有关。