金荞麦提取物体外抗流感病毒作用研究

目的 研究金荞麦提取物的体外抗流感病毒作用。方法 采用血凝试验,考察金荞麦提取物对鸡胚内流感病毒增殖的抑制作用;采用MTT法检测细胞活性,考察金荞麦提取物对流感感染细胞活性的影响。结果 与病毒对照组比较,金荞麦提取物高剂量组（10 mg·mL^-1）、中剂量组（5 mg·mL^-1）均能显著降低鸡胚尿囊液的血凝滴度（P<0.01）,而低剂量组（2.5 mg·mL^-1）则无显著性差异;在0.63~2.50 mg·mL^-1浓度内,金荞麦提取物各剂量组流感感染细胞的活性均明显高于病毒对照组,组间均存在显著性差异（P<0.01）,且病毒抑制率随着药物浓度的增大而增高,呈一定的量效关系,其中金荞麦提取物最大无毒浓度（2.5 mg·mL^-1）对流感病毒的直接抑制率达66.12%。结论 金荞麦提取物具有一定的体外抗流感病毒作用。     

灰树花多糖体外抑菌及抗氧化活性研究

目的 研究灰树花多糖的抑菌及抗氧化活性。方法 采用紫外分光光度法,以D-无水葡萄糖为对照品,测定灰树花提取物中多糖含量;采用纸片扩散法,以头孢哌酮为阳性对照,测量不同浓度灰树花多糖提取物金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径;采用DPPH法和T-AOC试剂盒法,以清除率为指标,研究灰树花多糖的抗氧化活性。结果 灰树花提取物中多糖含量为53.49%;灰树花提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌作用,抑菌圈直径分别为13,11,10 mm;灰树花多糖浓度为0.05~10 mg·mL^-1时,对DPPH自由基具有一定的清除能力,当浓度高于0.5 mg·mL^-1时,开始显示出总抗氧化能力。结论 灰树花多糖具有一定的抑菌和抗氧化能力。     

白及花与块茎石油醚部位成分分析及其生物活性的比较研究

目的 分析白及花和块茎石油醚部位成分及生物活性。方法 以石油醚（60~90℃）为提取溶剂,采用索氏提取法提取白及花和块茎脂溶性成分,采用GC-MS分析其化学成分,通过滤纸片扩散法、CCK8法和分光光度法分别对其进行抑菌、抗肿瘤和α-淀粉酶抑制作用研究,通过检测DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的清除率考察其体外抗氧化活性。结果 白及花和块茎中共鉴定出20种石油醚部位成分,其中花11种,块茎19种,共有成分10种,α-乙酰基-γ-丁内酯（15.20%,21.84%）和苄醇（12.07%,24.10%）为主要成分。白及花中石油醚部位成分的抑菌活性高于块茎,对枯草芽孢杆菌效果最好,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为0.41,0.51 g·L^-1和0.53,0.66 g·L^-1。当质量浓度为5.0 mg·mL^-1时,白及块茎石油醚部位成分对A₅₄₉细胞的抑制率为29.451%,高于花中石油醚部位成分27.621%的抑制率,前者对α-淀粉酶的IC₅₀为1.819 mg·mL^-1,后者的IC₅₀为2.028 mg·mL^-1。两者对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的清除率均随质量浓度的增大而增大,当浓度达到1.0 mg·mL^-1时,前者对ABTS自由基和羟自由基的清除率分别为99.67%和92.22%,高于后者90.07%和38.11%的清除率,后者对DPPH自由基的清除率为31.23%,高于前者18.94%的清除率,两者均低于Vc的清除率。结论 白及花和块茎中石油醚部位成分主要为酯类和醇类,2种石油醚部位成分均具有一定的生物活性,具有潜在的药用价值,并可为白及花的资源开发提供参考。     

衢枳壳不同组分体外降糖活性研究及4种黄酮组分含量分析

目的 研究衢枳壳不同极性组分体外降糖活性,并明确各组分中4种黄酮类化合物的含量。方法 采用系统溶剂法提取与分离衢枳壳中不同极性的黄酮组分,通过体外试验明确各组分对α-葡萄糖苷酶活性和HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。采用Agilent Zorbax SB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.02%磷酸水溶液（20︰80）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长280 nm,柱温35℃,外标法测定衢枳壳各组分中芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量。结果 衢枳壳各组分均具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,抑制强弱顺序为正丁醇组分[IC₅₀：（0.033±0.010） mg·mL^-1] > 甲醇组分[IC₅₀：（0.092±0.006） mg·mL^-1] > 乙酸乙酯组分[IC₅₀：（0.170±0.014） mg·mL^-1] > 氯仿组分[IC₅₀：（0.509±0.070） mg·mL^-1];衢枳壳甲醇组分和正丁醇组分能够显著促进HepG2细胞葡萄糖的消耗,差异具有统计学意义（P<0.05）。含量测定方法经方法学认证,各项参数均符合要求。经分析发现：衢枳壳各组分中均含有芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷等黄酮类化合物,且正丁醇组分中各黄酮成分含量最高。结论 衢枳壳各组分均具有α-葡萄糖苷酶抑制作用,且随着各组分中黄酮类化合物含量增高作用增强。同时,含有较高黄酮类组分含量的衢枳壳组分具有促进HepG2细胞葡萄糖消耗的作用,如甲醇、正丁醇和乙酸乙酯组分。     

番薯藤提取物抗痤疮丙酸杆菌有效部位筛选研究

目的 研究番薯藤提取物对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,并对其有效部位进行筛选。方法 采用固体平板法、试管2倍比稀释法测定番薯藤水、醇提物对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈大小和最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）,采用系统溶剂法对番薯藤醇提物进行梯度提取,分别得到石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层5个不同极性部位,并确定其有效部位及相应的MIC、最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。结果 番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌有较强抑制作用,其MIC为50 mg·mL^-1。其中石油醚部位的抑菌作用最强,MIC为12.5 mg·mL^-1,MBC为25 mg·mL^-1;其次为正丁醇部位,MIC为25 mg·mL^-1,MBC为100 mg·mL^-1。结论 番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌存在体外抑制作用,其有效成分主要集中于石油醚和正丁醇部位。     

基于RBL-2H3与P815细胞体外模型的聚山梨酯80、维生素K1注射剂、注射用两性霉素B脂质体类过敏反应潜在风险评价

目的 基于 RBL-2H3及 P815细胞系,选择 Compound 48/80（C48/80）为阳性药构建类过敏反应的体外评价模型,初步评价聚山梨酯80、维生素K₁注射剂（VK₁I）、注射用两性霉素B脂质体（ABL）导致类过敏反应的潜在风险。方法 应用 CCK-8 法检测 C48/80（10、30、60、100 μg·mL^-1）、聚山梨酯 80（2.5、5.0、10.0、50.0 mg·mL^-1）、VK₁I（0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mg·mL^-1）、ABL（0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mg·mL^-1）对 RBL-2H3、P815 细胞活性的影响,计算半数抑制浓度（IC₅₀）,阳性药及受试物均选择＜IC₅₀浓度进行后续实验;结合中性红染色形态学观察,研究阳性药及受试物的细胞毒性;流式细胞仪检测Annexin V阳性细胞率及Fluo-4AM标记率;ELISA法检测β-氨基己糖苷酶（β-Hex）及组胺释放量。结果 中性红染色结果显示,在C48/80作用下RBL-2H3、P815细胞部分皱缩或者偶有破损,但大部分细胞仍维持完整细胞形态;在聚山梨酯 80、ABL、VK₁I高浓度的作用下,RBL-2H3、P815细胞大部分仍能保持正常形态。C48/80在＜IC₅₀浓度时能够引起较强的细胞脱颗粒反应,模型建立成功。聚山梨酯80、VK₁I在＜IC₅₀浓度时均出现了浓度相关性细胞脱颗粒现象,与对照组比较,2种细胞聚山梨酯80 2.5、5.0 mg·mL^-1组及VK₁I 0.75、1.50、3.00 mg·mL^-1组Annexin V阳性率、Fluo-4AM标记率均显著升高（P＜0.05、0.01）;聚山梨酯 80 2.5、5.0 mg · mL^-1 组及 VK₁I 1.5、3.0 mg·mL^-1组的组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。ABL 组 Annexin V 阳性率浓度相关性升高趋势不明显 ,与对照组比较 ,仅 P815 细胞 ABL 2.00 mg·mL^-1组显著升高（P＜0.05）,且升高幅度不大 ;与对照组比较 ,2种细胞ABL 1、2 mg·mL^-1组的Fluo-4AM标记率和组胺、β-Hex释放量显著升高（P＜0.05、0.01）。结论 聚山梨酯80、VK₁I高浓度具有导致类过敏反应产生风险,ABL 还需进一步研究。     

地榆鞣质提取物对TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞增殖的影响

摘 要 目的： 通过观察地榆鞣质提取物（STE）对生长转化因子（TGF-β₁）诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖的影响,探讨地榆在防治肾间质纤维化方面的作用。方法: 将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,实验分为5组：空白对照组、TGF-β₁组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁）、干预1组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+12.5 μg·mL^-1 STE）、干预2组（5 ng· mL^-1 TGF-β₁+25μg·mL^-1 STE）、干预3组（5 ng·mL^-1 TGF-β₁+50μg·mL^-1 STE）,孵育24 h。在倒置显微镜下观察各组细胞形态的改变,并通过CCK8法测定地榆鞣质对细胞增殖的影响。结果: TGF-β₁ 5 ng·mL^-1能显著诱导人肾小管上皮细胞增殖,并促进其细胞形态向纤维化转变,相比于空白对照组具有显著差异（P<0.05）;但与地榆鞣质提取物（STE）共同作用后,其促进细胞增殖的作用受到一定抑制（P<0.05）,细胞形态也趋于正常,且呈剂量依赖性。结论:地榆鞣质提取物能抑制HK-2细胞的增殖,在一定程度上具有防止肾间质纤维化的作用。     

青天葵甲醇提取物通过ERK信号通路诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的 研究青天葵甲醇提取物（Nervilia fordii methanol extracts，NFME）体外对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法 MTT法检测不同浓度（0，0.25，0.5，1，2，3 mg·mL^-1）的NFME处理CNE-2细胞24，48 h对CNE-2细胞生长抑制率的影响；克隆原形成试验观察NFME对CNE-2细胞克隆形成率的影响；Hoechst凋亡染色观察NFME对CNE-2细胞凋亡的影响；Western blotting测定NFME作用下caspase-3、ERK1/2和c-Raf蛋白磷酸化水平的变化。结果 MTT试验结果显示，与对照组相比，在给药24 h时0.5 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞的增殖（P<0.05），抑制率为12.64%。而在给药48 h时0.25 mg·mL^-1的NFME就能抑制CNE-2细胞增殖（P<0.05），抑制率为22.43%；克隆原形成能力试验表明，0.25 mg·mL^-1的NFME能够抑制CNE-2细胞集落的形成（P<0.05）；Hoechst33258凋亡染色观察到0.25 mg·mL^-1的NFME作用24 h能够观察到CNE-2细胞发生凋亡（P<0.05），凋亡率达到17.91%；Western blotting结果表明0.5 mg·mL^-1的NFME能使CNE-2细胞中caspase-3发生剪切，随着给药浓度增加其剪切作用越明显（P<0.01），同时0.5 mg·mL^-1的NFME能够降低CNE-2细胞中ERK1/2和c-Raf蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 青天葵甲醇提取物能抑制鼻咽癌CNE-2细胞的增殖并诱导其发生凋亡，其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

美洲大蠊抗肝纤维化活性提取物的酶解制备工艺研究

目的 优选中性蛋白酶酶解美洲大蠊脱脂膏制备抗肝纤维化活性提取物的工艺。方法 以美洲大蠊脱脂膏的水解度、活性提取物的得率和体外活性为评价指标,在单因素考察（酶用量、酶解时间、pH值、酶解温度、底物浓度）的基础上,采用L₉（3⁴）正交试验优化中性蛋白酶酶解制备抗肝纤维化活性提取物的工艺。结果 最佳酶解工艺为酶用量0.3%,酶解时间2 h,pH值8.5,酶解温度45℃,底物密度1.07 g·mL^-1。工艺验证试验结果表明,美洲大蠊脱脂膏的水解度为15.8%,活性提取物的得率从0.54%提高到0.72%,其24,48,72 h的IC₅₀值分别为（118.37±3.12）,（115.16±2.48）,（105.00±6.35）μg·mL^-1。结论 研究得到美洲大蠊抗肝纤维化活性提取物的酶解制备工艺,该工艺得率较高,简单可行,为美洲大蠊抗肝纤维化药物的研发奠定基础。     

金莲花黄酮类成分抗菌及抗氧化活性研究

目的 比较研究金莲花总黄酮及其黄酮主成分荭草苷和牡荆苷的体外抗菌活性及抗氧化活性。方法 体外抗菌活性试验采用管碟法对9个菌株（大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、变异链球菌、链霉菌、红酵母、黑曲霉、白色念珠菌）进行体外抑菌圈测定;采用连续稀释法和活菌计数法测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）;分别采用邻苯三酚法-超氧阴离子清除能力测定试验、水杨酸法-羟基自由基清除能力测定试验和DPPH清除能力试验评价3种样品的抗氧化活性差异。结果 在体外抗菌活性试验中,金莲花总黄酮、荭草苷、牡荆苷对革兰阳性菌的抑菌效果明显,对革兰阴性菌和真菌无明显抑菌作用;三种药物对金黄色葡萄球菌也表现出较好的抑菌活性,其抑菌作用强弱为荭草苷=总黄酮>牡荆苷,其中荭草苷和总黄酮的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0.156 25 mg·mL^-1和0.625 mg·mL^-1;三种药物对变异链球菌均表现出较好的抑菌活性,其抑菌作用强弱为荭草苷>总黄酮>牡荆苷,其中荭草苷的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0.156 25 mg·mL^-1和0.625 mg·mL^-1。在抗氧化活性测定中,金莲花总黄酮对三种自由基均表现出较强的清除能力。结论 金莲花总黄酮、荭草苷和牡荆苷对革兰阳性菌表现出明显的抑制作用,也表现出较好的抗氧化活性。荭草苷的杀菌效力及抗氧化活性整体上优于牡荆苷,可能是其清热解毒的主要成分。     

A new homoisoflavan from Caesalpinia sappan

A new homoisoflavan, 7,3′,4′-trihydroxy-3-benzyl-2H-chromene (1), was isolated from the dried heartwood of Caesalpinia sappan L., together with seven known phenolic compounds. The structure of the new compound (1) was determined on the basis of spectroscopic analysis.     

不同产地五倍子体外抗菌作用研究

目的 考察五倍子不同产地（河北曲阳、浙江嘉兴、湖南桑植、陕西西乡、云南凤县）的体外抗菌作用。方法 五倍子醇提浸膏用倍半稀释法稀释成不同浓度药液,采用管碟法测定各产地五倍子的最小抑菌浓度（MIC）。结果 河北、浙江、湖南、陕西、云南所产五倍子醇提浸膏对金黄色葡萄球菌的MIC依次为6.25、1.562 5、1.562 5、3.125、0.781 25 mg/L;对大肠杆菌的MIC依次为3.125、12.5、6.25、6.25、3.125 mg/L;对白色念珠菌的MIC依次为6.25、1.562 5、3.125、1.562 5、3.125 mg/L;对绿脓杆菌的MIC依次为12.5、6.25、6.25、6.25、3.125 mg/L。结论 河北、浙江、陕西、云南、湖南所产五倍子均有抑菌作用,其中云南产五倍子醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌抑菌作用最强,陕西、浙江产五倍子醇提物对白色念球菌的抑菌作用强。     

4种川乌类药材急性毒性的差异性研究

目的 比较同源饮片川乌、黑附片、白附片与天雄之间急性毒性及其所引发毒性表现的差异性。方法 采用急毒实验方法测定小鼠灌胃生川乌和黑附片提取物的半数致死量（LD₅₀）和天雄提取物的药物最大耐受量（MTD）,同时对白附片提取物做限度实验并观察小鼠毒性表现。结果 生川乌和黑附片半数致死量测定结果分别为4.55 g饮片/kg和78.71 g饮片/kg;天雄药物最大耐受量测定结果为34.19 g饮片/kg;白附片提取物以5 g·kg^-1的剂量灌胃小鼠,引起严重毒性反应,但不能引起小鼠死亡。4种饮片引起的毒性表现十分相似,可能累及神经、呼吸和循环等多个系统,不同的是除白附片外,其他3种饮片均可使小鼠发生眼球突出、惊厥甚至死亡反应。结论 4种饮片的急性毒性由大到小依次为生川乌、黑附片、天雄和白附片。虽然其引发的毒性表现十分类似,但是在严重程度上略有差异。     

菘蓝属植物化学成分及药理作用研究进展

菘蓝属植物在中国药用历史悠久，其中菘蓝的根和叶即为板蓝根和大青叶。该属植物化学成分多样，主要包括生物碱类、硫代葡萄糖苷类、木脂素类、黄酮类等，具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗肿瘤、抗炎、免疫增强等药理作用。本文对近40年来国内外有关菘蓝属植物化学成分和药理作用的文献进行系统的总结，为该属植物的进一步研究开发提供参考。     

VKORC1-3673G>A、CYP2C9*3、CYP4F2 rs2108622和CYP2C19*2基因多态性对中国汉族房颤患者华法林维持剂量的影响

目的 探讨VKORC1-3673G>A、CYP2C9^*3、CYP4F2 rs2108622和CYP2C19^*2位点基因多态性对中国汉族房颤患者华法林维持剂量的影响。方法 收集107例服用华法林达维持剂量的汉族房颤患者的血样和临床相关资料,应用PCR-RFLP法检测VKORC1-3673G>A、CYP2C9^*3、CYP4F2 rs2108622和CYP2C19^*2基因型,采用独立样本t检验分析基因型与华法林维持剂量的相关性。多元线性回归建立给药模型,探讨基因多态性对华法林维持剂量的影响。结果 VKORC1-3673G>A、CYP2C9^*3、CYP4F2 rs2108622基因多态性和患者年龄、体质量能解释45.2%的华法林维持剂量差异。CYP2C19^*2基因多态性对本研究人群华法林维持剂量无影响。结论 VKORC1-3673G>A、CYP2C9^*3、CYP4F2 rs2108622基因多态性显著影响中国汉族房颤患者的华法林维持剂量。     

基于体外药效学结合分子对接技术研究穿山龙抗心肌缺血的作用机制

目的 通过液质联用技术、体外药效学及分子对接技术探究穿山龙抗心肌缺血的物质基础和作用机制。方法 利用UPLC-Q TOF-MS技术确定穿山龙醇提物中的主要成分,比较不同质量浓度（40、10、4、0.4、0.004 mg/mL）的穿山龙醇提物对H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤后细胞活力的影响。应用AutoDock软件对潜在药效物质和关键靶点进行分子对接,相关结果采用Cytoscape 3.6.1进行构图和网络拓扑结构分析。结果 从穿山龙的醇提物中鉴定出7个化学成分,并证明穿山龙醇提物对H/R损伤H9c2心肌细胞具有一定的保护作用。筛选出5种（薯蓣皂苷元、薯蓣皂苷、对羟基苄基酒石酸、原薯蓣皂苷、薯蓣次皂苷A）与抗心肌缺血相关的活性成分,5种活性成分的分子对接结果显示潜在的药效物质与关键靶点内皮一氧化氮合酶（NOS）2、NOS3、环氧化酶/细胞色素C氧化酶多肽Ⅱ(COX2)、热休克蛋白（HSP70）对接结果能量低于-8 kcal/mol。结论 穿山龙中的甾体皂苷类成分可能是其治疗心肌缺血的物质基础,穿山龙治疗心肌缺血是多成分与多靶点相互作用的结果。     

鱼腥草不同溶剂提取物的抗病毒活性研究

目的 研究鱼腥草不同溶剂提取物体外抗手足口病毒（enterovirus type 71,EV71）、单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）、呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）、柯萨奇病毒B3型（coxsackie virus type B3,CV-B3）、柯萨奇病毒B5型（coxsackie virus type B5,CV-B5）的活性。方法 采用细胞体外培养技术,建立不同病毒感染模型,用鱼腥草不同溶剂提取物进行治疗,通过细胞融合病变观察法以及MTT比色法检测得到治疗指数（therapeutic index,TI）,以此判定其体外抗病毒活性。结果 体外抗病毒试验结果证明,鱼腥草不同溶剂提取物对HSV-1、EV71抗病毒作用较强,对RSV、CV-B3、CV-B5的效果甚微或无明显作用。鱼腥草醇提物中黄酮类成分含量较高,抗病毒活性相对较高;30%,50%,75%乙醇提取物以及水提醇沉处理沉淀物对HSV-1的TI值分别是81.68,67.23,41.91,32.61,均高于阳性对照阿昔洛韦TI值23.43,显示鱼腥草水醇提取物抗HSV-1的活性较强;75%,50%,30%乙醇提取物对EV71的TI值分别是19.58,20.13,18.84,效果较为显著。结论 研究证实鱼腥草提取物对HSV-1、EV71的抗病毒活性较高,可一定程度为临床应用鱼腥草治疗这2种病毒感染引发的疾病提供参考依据。     

催化菘蓝活性木脂素生物合成的漆酶基因家族生物信息学分析

目的 从转录组数据库中发掘并分析了参与菘蓝落叶松脂素生物合成的关键合成酶之一——漆酶（laccase）的基因序列,并进行生物信息学分析,为以后的功能研究提供可靠依据。方法 利用生物信息学分析软件,从已有菘蓝转录组数据库中寻找漆酶并分析其各项特征,主要包括理化性质、同源性分析、蛋白结构分析和茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后表达特征等分析。结果 菘蓝漆酶基因（Iilacs）中的Iilac3和Iilac5在MeJA诱导下的转录水平与药效成分的积累相一致,推测其可能为参与落叶松脂素合成的潜在的功能基因。结论 通过对菘蓝漆酶进行详细的生物信息学分析,可为今后功能蛋白的筛选和进一步研究其生理生化机制和结构特征打下坚实的基础。     

赤芍药理作用的研究进展

赤芍为毛茛科植物芍药或川赤芍的干燥根,具有清热凉血、通经及清肝消痈的功效。本文通过调研国内杂志及近十年的国外杂志,对赤芍的药理作用及其在中药复方中的应用进行了总结,为其研究开发治疗心脑血管疾病及其他疾病的药物提供有价值的参考。