LPS对体外培养大鼠肺微血管内皮细胞ACE2表达的影响

目的 观察脂多糖(LPS)对体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)血管紧张素转化酶2(ACE2)表达的影响.方法 体外培养大鼠PMVEC,分别使用浓度为10-4、10-3、10-2、10-1 mg/ml的LPS与之孵育24 h,观察量效关系;以浓度为10-2 mg/ml的LPS与之分别孵育3、6、12和24 h,观察时效关系,采用RT-PCR、Western blot方法 检测ACE2表达的变化.结果 与正常对照组相比,各浓度LPS刺激组ACE2表达均显著降低(P<0.05); 除6 h时相点,LPS(10-2 mg/ml)刺激组于不同时相点ACE2表达均显著降低(P<0.05);ACE2表达与LPS刺激的浓度呈负相关.结论 LPS能使体外培养的大鼠PMVEC表达ACE2减少,并与LPS刺激的浓度间呈负相关;除6 h时相点,予10-2 mg/ml浓度LPS刺激大鼠PMVEC,ACE2表达于3、12和24 h均显著降低.ACE2表达下降可能与急性肺损伤(ALI)中PMVEC损伤的发生、发展有关.     

氯沙坦对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响及可能机制

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂氯沙坦在大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的保护作用及可能机制。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+氯沙坦组和LPS+氯沙坦+A779组。制备麻醉状态下静脉注射LPS致大鼠ALI模型,并予氯沙坦或血管紧张素1-7[Ang(1-7)]拮抗剂A779干预。前3组均于注射后1、4、6 h进行观察,后1组于4 h观察,每个时间点观察5只大鼠。BCA法测定肺泡灌洗液和血清蛋白量,苏木素-伊红(HE)对右肺中叶病理染色并评分,ELISA法检测血清AngⅡ、Ang(1-7)变化。结果光镜下可见大鼠出现特征性ALI病理改变。与对照组相比,LPS组血清AngⅡ含量1 h、4 h时升高(P<0.01),血清Ang(1-7)含量1 h时降低、4 h时升高(P均<0.01)。与LPS组相比,LPS+氯沙坦组大鼠肺损伤程度减轻,病理评分下降(P<0.01)。结论氯沙坦主要通过调节Ang(1-7)水平对大鼠内毒素性ALI起保护作用。     

AngⅡ及其受体阻滞剂对急性肺损伤大鼠肺泡液体清除的影响

目的 探讨内源性血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其1型(AT1)受体阻滞剂对脂多糖诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡液体清除的效应.方法 25只SD大鼠分为空白对照组、ALI组及ALI+ZD7155(AT1受体阻滞剂)组.ALI组又按作用时间分为2、4、6h3个亚组.10 mg/kg脂多糖(LPS)腹腔注射诱导ALI大鼠模型.10 mg/kg ZD7155于LPS注射前30 min经腹腔注射.每组或亚组各5只大鼠.观察肺组织病理学改变、肺湿质量/干质量(W/D)比值,ELISA测定血浆及肺组织中AngⅡ水平的变化.在肺泡液体清除(AFC)测定中,活杀25只SD大鼠取肺组织,分为空白对照组、阿米洛利组、ALI组、ALI+ ZD7155组、ALI+ ZD7155+阿米洛利组.每组各5只大鼠肺.伊文思蓝(evans-blue)标记5％清蛋白法测定AFC.结果 ALI 4 h组肺组织W/D较空白对照组显著增加(P＜0.01),ZD7155干预后肺组织W/D较ALI 4 h组显著降低(P＜0.05).随LPS作用时间增加,ALI大鼠模型血浆及肺组织内AngⅡ浓度变化呈现时间依赖性逐渐升高,各时间点组间差异有统计学意义(P＜0.05).阿米洛利组与ALI 4 h模型组AFC均较空白对照组显著降低(P＜0.01),ALI 4 h组AFC高于阿米洛利组(P＜0.05);ALI+ZD7155组AFC高于ALI 4 h组(P＜0.05),但ALI+ZD7155+阿米洛利组AFC降低,与阿米洛利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AngⅡ减弱ALI大鼠AFC;其AT1受体阻滞剂可逆转此病理生理过程.     

鹿红颗粒对心力衰竭大鼠ACE2-Ang(1-7)轴的影响

  目的：评价鹿红颗粒对心肌梗死后心力衰竭(CHF)模型大鼠血浆ACE-Ang Ⅱ轴及ACE2-Ang(1-7)轴的影响。  方法：40只SD大鼠随机分为模型组、假手术组、雅施达组及鹿红颗粒组,以结扎左冠状动脉的方法制备心肌梗死后心力衰竭模型。药物干预8周后记录各组大鼠心脏重量,计算心脏重量与体质量的比值(HW/BW)以及左心室重量指数(LVMI);HE染色观察各组大鼠心肌病理改变;酶免疫分析法检测血浆ACE、ACE2、Ang Ⅱ及Ang(1-7)水平。  结果：与模型组相比,鹿红颗粒组HW/BW及LVMI明显降低(P<0.01),心肌病理改变显著减轻,血浆ACE水平未见明显下降(P>0.05),但ACE2和Ang(1-7)水平明显升高(P<0.01),Ang Ⅱ水平显著降低(P<0.01);与雅施达组比较,鹿红颗粒组ACE2和Ang(1-7)水平明显升高(P<0.01),Ang Ⅱ水平未见明显差异(P>0.05),Ang(1-7)/Ang Ⅱ显著升高(P<0.01)。  结论：鹿红颗粒能显著提高CHF大鼠ACE2-Ang(1-7)轴的水平、降低Ang Ⅱ水平,从而抑制心室重构、减轻心肌损伤。     

多巴胺D_4受体对血管紧张素Ⅱ介导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察多巴胺D4受体对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的血管平滑肌细胞(vascular smoothmuscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)、原代的Wistar-Kyoto(WKY VSMCs)和自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉血管平滑细胞(VSMCs)为研究对象,观察刺激D4受体对AngⅡ促增殖作用的影响以及D4受体特异性阻断剂L745870对该作用的阻断效应。细胞增殖采用MTT和细胞计数方法测定。结果 AngⅡ(10-7mol/L)可促进A10细胞增殖,最大增殖幅度为64%。D4受体激动剂PD168077本身对A10细胞无增殖影响,但D4受体特异激动剂PD168077可抑制AngⅡ(10-7mol/L)介导的血管平滑肌细胞的增殖作用,最大抑制幅度为40%;应用D4受体阻断剂L745870后该抑制作用丧失;D4受体对AngⅡ介导血管增殖的作用在SHR和WKY大鼠的VSMCs之间并无区别。结论 D4受体对AngⅡ介导的血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用,该作用可能在一定程度上抑制了高血压病所伴发的血管平滑肌细胞增殖。     

血管紧张素-(1-7)抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠系膜细胞基质分泌

目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠系膜细胞(GMC)细胞外基质分泌的影响。方法在AngⅡ诱导培养的GMC中,应用Ang-(1-7),通过放射免疫法检测细胞培养上清液中Ⅲ型前胶原(PcⅢ)和透明质酸(HA)的含量,观察GMC细胞外基质分泌情况。分别用非特异性AngⅡ受体拮抗剂[Sar1,Ile8]-AngⅡ和血管紧张素Ⅱ受体2(AT2受体)拮抗剂PD123319与Ang-(1-7)共同培养,了解Ang-(1-7)的受体特点。结果Ang-(1-7)呈剂量依赖性抑制AngⅡ诱导GMC PcⅢ和HA的分泌,其作用可被[Sar1,Ile8]-AngⅡ抑制,PD123319对Ang-(1-7)的上述作用无影响。结论Ang-(1-7)能抑制基础和AngⅡ诱导的GMC细胞外基质分泌,该作用可部分被非特异性AngⅡ受体拮抗剂[Sar1,Ile8]-AngⅡ抑制。     

异丙酚抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖的机制研究

目的:探讨异丙酚(Propofol)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖的机制。方法:用AngⅡ建立诱导新生大鼠CFb纤维化模型。将心肌细胞分为对照组、AngⅡ组和异丙酚组。用流式细胞仪测定各组细胞的周期分布;用ELISA法测定各组细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;用Western Blot法测定各组细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达量;用免疫细胞化学化法测定各组细胞中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)和经典型蛋白激酶Cα亚型(cPKCα)的表达。结果:100μmol/L的异丙酚对AngⅡ诱导的大鼠CFb的增殖抑制效果最显著(P<0.01)。与对照组相比,AngⅡ组细胞G_0/G_1期细胞百分率降低(P<0.01),S期和G_2/M期细胞百分率升高(P<0.01);异丙酚组细胞的G_0/G_1期细胞百分率高于AngⅡ组(P<0.01),S期和G_2/M期细胞百分率低于AngⅡ组(P<0.01)。与对照组相比,AngⅡ组大鼠的CFbⅠ、Ⅲ型胶原含量增加(P<0.01);异丙酚组大鼠的CFbⅠ、Ⅲ型胶原含量低于AngⅡ组(P<0.01)。与对照组相比,AngⅡ组大鼠CFb中TGF-β1的蛋表达升高(P<0.01),异丙酚组大鼠CFb中TGF-β1的表达低于AngⅡ组(P<0.01)。与对照组相比,AngⅡ组大鼠CFb中ERK1/2和cPKCα的表达增加(P<0.01);异丙酚组大鼠CFb中ERK1/2和cPKCα的表达低于AngⅡ组。结论:异丙酚能够抑制AngⅡ诱导的大鼠CFb的增殖和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的增加,其机制与降低细胞中TGF-β1的蛋白表达和抑制ERK1/2、cPKCα通路有关。     

SHR及SHR伴糖尿病大鼠肾皮质RAS研究

目的观察白发性高血压人鼠(SHR)及伴有糖尿病大鼠(SHR-DM)肾皮质血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)mRNA和血管紧张素转换酶(ACE)mRNA的表达,以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾小球系膜细胞增殖的直接作用.方法采用反转录-多聚合链式反应、细胞培养和3H-胸嘧啶核苷掺入技术.结果 1.SHR肾皮质AT1mRNA和ACEmRNA明显高于WKY(WistarKyoto)(P<0.05).2.SHR-DM的AT1mRNA和ACEmRNA与WKY接近,而较SHR明显降低(P<0.01).3.SHR血浆AngⅡ浓度和ACE活性明显低于WKY,SHR-DM与SHR比较血浆AngⅡ存在异常增高.4.AngⅡ对SHR肾小球系膜细胞具有明显刺激增殖的作用,并且呈剂量依赖关系.结论SHR肾皮质局部肾素血管紧张素系统存在过度兴奋状态,AngⅡ有直接参与肾小球结构改变、促进肾小球受损的作用.     

川穹嗪对大鼠心肌肥大JAK-STAT通路作用

目的 了解川穹嗪对大鼠心肌肥大JAK-STAT通路的影响.方法 建立心肌肥大动物模型,40只大鼠随机分为4组,每组10只,分别为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1)、AngⅡ加川穹嗪组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1,川穹嗪50 mg·kg-1·d-1)、AngⅡ加PBS组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1,PBS 50 mg·kg-1·d-1)、对照组(给予生理盐水36 mg·kg-1·d-1),计算心肌肥大指数.培养、鉴定新生大鼠心肌细胞,每天分别给予AngⅡ 1×10-7 mol/L(AngⅡ2组)、AngⅡ 1×10-7 mol/L+川穹嗪1×10-4 mol/L(AngⅡ加川穹嗪2组),以不加药物作为对照2组,培养7 d,应用RT-PCR方法检测各组大鼠心肌细胞心房利钠肽(ANP)相对水平,Western-blot检测心肌肥大信号转导途径分子pJAK2、pJAK1、pSTAT3表达.结果 AngⅡ组与对照组比较,心肌肥大指数明显增高,差异有统计学意义(F=32.675,q=6.25,P<0.01),AngⅡ+川穹嗪组与AngⅡ组相比较,心肌肥大指数明显下降,差异有显著意义(q=5.19,P<0.05).AngⅡ2组与对照2组比较,ANP mRNA表达增加,差异有显著性(F=45.674,q=11.23,P<0.01);AngⅡ+川穹嗪2组与AngⅡ2组比较,ANP mRNA表达减少,差异有显著性(q=7.53,P<0.01).AngⅡ2组加入川穹嗪前后pJAK1、pJAK2、pSTAT蛋白表达量比较,差异有显著性(F=24.456～36.549,q=8.02～10.25,P<0.05、0.01).结论 川穹嗪能通过干扰心肌肥大JAK-STAT信号转导通路抑制心肌肥大.     

贝那普利对肝纤维化大鼠Ang-(1-7)、ACE2及Mas受体mRNA的影响

目的 观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)贝那普利抗大鼠肝纤维化的疗效,研究贝那普利对肝纤维化大鼠肝组织血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]、血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA及Mas受体mRNA的影响.方法 制备四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型,同时应用贝那普利灌胃,共8w.对肝组织进行常规HE及Masson染色,ELISA测定肝匀浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、Ang-(1-7)浓度,计算AngⅡ/Ang-(1-7)比值,实时荧光定量PCR测定肝组织ACE2mRNA和Mas受体mRNA的水平.结果 造模6、8周末,贝那普利治疗组大鼠的肝纤维化程度均较模型组减轻;肝匀浆AngⅡ的浓度较模型组降低(P<0.05),肝匀浆Ang-(1-7)的浓度较模型组增加(P<0.05),肝匀浆AngⅡ/Ang-(1-7)的比值较模型组降低(P<0.05);贝那普利治疗组肝组织ACE2及Mas受体mRNA的水平均较模型组增加(P<0.05).结论 贝那普利具有良好的抗肝纤维化作用,其机制可能与AngⅡ浓度降低,Ang-(1-7)浓度增加,AngⅡ/Ang-(1-7)比值降低有关,亦可能与ACE2和Mas受体表达增加有关.     

血管紧张素受体拮抗剂和转换酶抑制剂与肾病的关系

肾素—血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)是体内调节血压和水电解质平衡的主要系统。近年来,几乎所有的肾脏病模型以及大多数临床研究中均一致证实阻断RAS能延缓肾脏病进展,开发阻断RAS的各种药物不仅为临床治疗提供了崭新的干预手段,也为进一步了解RAS在各种疾病状态下的作用提供了有利的工具。目前投入临床使用的阻断RAS类药物主要有2类:血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI);血管紧张素受体拮抗剂(AT_1RA)。本文对其研究进展综述如下。     

Benefits of angiotensin converting enzyme inhibition and angiotensin II receptor antagonists in hypertension

It is through blood pressure lowering that reductions in cardiovascular morbidity and mortality are achieved. The treatment of hypertension patients should also focus on prevention and management of cardiovascular complications, not merely on achieving a target level of blood pressure. In making treatment decisions it is appropriate to assess patients for the presence or absence of risk factors and/or clinical cardiovascular disease. Clinicians should strive to use the least intrusive means possible to achieve goal blood pressure and the treatment regiment should be individualized for each patient. The review has illustrated specific clinical conditions where the use of an hypertensive agent that inhibits the renin-angiotensin system may offer added benefit to the patient while producing the needed anti-hypertensive effects.     

Role of angiotensin Ⅱ and angiotensin Ⅱ receptors in vascular smooth muscle cell migration in vitro

ObjectiveTo determine the biotic effects of angiotensin Ⅱ (Ang Ⅱ) on the migration of rat smooth muscle cells (VSMCs) and investigate the mechanisms involved in the development of vascular injury. Methods VSMCs isolated from aortic media of Wistar rats and cultured by the modified explant method were adopted. In the presence and absence of Ang Ⅱ, the expression of Ang Ⅱ receptor (ATR) and reorganization of the actin cytoskeleton and focal adhesion of VSMCs were studied by an immunocytochemistry technique and fluorocytochemistry technique. Migration assays were performed with a modified Boyden’s chamber. The effects of AT(1)R antagonist (CV- 11974), AT2R antagonist (PD123319) on the aforementioned target were studied. Results VSMCs migration was stimulated by adding Ang Ⅱ. The dynamic reorganization of actin cytoskeleton and focal adhesions may be an important mechanism by which Ang Ⅱ facilitates VSMCs motility. The expression of AT(1)R in VSMCs could be upregulated initially after treatment with Ang Ⅱ, then decreased gradually. The expression of AT(1)R was downregulated by AT(1)R antagonists. The effect of Ang Ⅱ on VSMCs migration was mediated by AT(1)R, while AT2R had no significant effect. Conclusions The dynamic reorganization of focal adhesions and the actin cytoskeleton is required for Ang Ⅱ- induced VSMCs migration. This effect is mediated by AT(1)R.     

阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征患者肾素、血管紧张素水平的研究

目的:探讨阻塞性睡眠暂停低通气综合征(OSAHS)患者血液中的肾素、血管紧张素水平异常和高血压之间关系。方法:选取住院接收治疗的100例患者,将患者随机分成两组,观察组患者伴有高血压,共50例,对比组非OSAHS患者,共有50例。对两组患者均采取晨起觉醒时抽静脉血2ml,用放射免疫法检测肾素、血管紧张素,分析采集数据,通过样本结果的分析、比较两组患者检测结果的差异性。结果:经过检验发现观察组患者血浆肾素、血管紧张素水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:OSAHS伴有高血压患者,肾素、血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活,睡眠觉醒、OSA可导致患者交感神经的兴奋,导致RAAS系统的激活,释放的儿茶酚胺、肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮可导致患者血压的上升。     

原发性高血压患者血清部分血管活性肽的测定及其临床意义

目的 :探讨原发性高血压 (EH)患者血清血管紧张素I(AI)、血管紧张素II(AII)、心钠素(ANF)和醛固酮 (ALD)水平的变化及其临床意义。方法 :应用放射免疫法测定了 70例原发性高血压(EH)患者血清血管紧张素I(AI)、血管紧张素II(AII)、心钠素 (ANF)和醛固酮 (ALD)水平 ,并与 30例非高血压患者进行对照研究。结果 :原发性高血压患者血清AI(2 .2 30± 0 .30 4ug/L)和ALD(142 .98± 14.0 5ng/L)显著高于对照组 (1.2 4 5± 0 .16 6ug/L ,5 4 .2 0± 4 .336ng/L) (t=2 .0 5 96 ,P <0 .0 5 ;t=4 .0 70 3,P <0 .0 1) ,但AII(42 .976± 3.4 5 7ng/Lvs 4 0 .4 97± 3.5 72ng/L)和ANF(0 .4 16 4± 0 .0 2 6 9ug/Lvs 0 .395 7± 0 .0 311ug/L)无显著差异 (P均 >0 .0 5 )。EH患者中 ,I、II、III期组间四者血清水平的方差检验无显著差异(P均 >0 .0 5 ) ,2 9例合并心脑血管并发症者与 4 1例无心脑血管并发症者组间四者也无明显差异 (p均>0 .0 5 ) ;AI与AII、ALD与AII间呈显著正相关 (r=0 .5 13,p <0 .0 1;r=0 .2 70 ,P <0 .0 5 ) ,但AI与ANF、AI与ALD、AII与ANF、ANF与ALD间无显著差异 (r =0 .0 31,r=0 .0 39,r =0 .0 4 4 ,r=0 .115 ;P均 >0 .0 5 ) ;AI、AII、ALD均与平均动脉压呈正相关 (r=0 .4 172 ,0 .4 4 18,0 .5 12 4     

钙离子,血管紧张素Ⅱ受体在血管紧张素Ⅱ促心肌细胞蛋白质…

通过＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入量的测定与ＲＮＡ狭线杂交技术，初步探讨血管紧张素Ⅱ受体，Ｃａ＾２＋在血管紧张素Ⅱ刺激乳鼠心肌细胞蛋白质合成中的作用，并观察血管紧张素Ⅱ对原癌基因ｃ－ｆｏｓ表达，结果发现培养液中加入钙通道阻断剂（ｖｅｒａｐａｍｉｌ），细胞外钙螯合剂（ＥＧＴＡ），肌浆网钙释放抑制剂（ｄａｎｔｒｏｌｅｎｅ）和细胞内钙螯合剂（Ｆｕｒａ－２／ＡＭ）可使血管紧张素Ⅱ介导的＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入量较单独加血管     

绝经后骨质疏松症与血管紧张素II的相关因素分析

目的：探讨血管紧张素II对骨质疏松症患者与社区正常人群骨质疏松与骨质疏松性骨折风险的相关性。方法：对骨质疏松症患者与社区正常人群实施双能X线骨密度测定,并采用酶联免疫吸附试验进行血管紧张素II的测定。进一步通过统计学分析对相关性进行了验证。结果：骨质疏松患者骨密度水平与血25羟维生素D水平和血管紧张素II水平相关,骨质疏松患者骨密度低、且骨折风险高于对照组。单因素分析显示血管紧张素II影响骨质疏松患者的骨密度与骨折风险。结论：进一步深入研究肾素血管紧张素系统相关组分对骨质疏松发病机制中的作用对疾病预防和治疗有着深远意义。     

ACEI联合ARB对心力衰竭患者安全性的Meta分析

目的 血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)联合血管紧张素受体拮抗剂(ARB)对心力衰竭患者安全性分析.方法 计算机检索Embase、PubMed、CoChrane图书馆、维普、中国知网数据库.按照纳入与排除标准选择文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后,采用Revman5.3软件进行Meta分析.结果 对11篇随机对照试验(RCT)的18 160例患者进行了Meta分析.对照组为ACEI常规治疗,试验组为ACEI+ARB联合治疗.接受联合治疗不良反应显著增加,其中低血压风险增加1.1％(WMD=1.91,95％CI:1.37～2.66,P＜0.01,I2=22％),高血钾0.6％(WMD=4.17,95％CI:2.31～7.53,P=0.02,I2=56％);加重肾功能损害差异无统计学意义(WMD=2.73,95％CI:0.76～9.77,P=0.12,I2=84％),咳嗽无显著性差异(WMD=0.84,95％CI:0.65～1.09,P=0.18,I2=0％).结论 ARB类药物与ACEI类药物联用治疗心力衰竭应注意观察不良反应.