维生素E对烧伤焦痂脂类引起肝线粒体呼吸功能障碍的保护作用

烧伤焦痂脂类组分D_1可抑制离体大鼠肝线粒体呼吸控制率(RCR)、ADP/O、第3态呼吸及ATP产生率,刺激第4态呼吸。预先加入维生素E(Vit.E)可非常显著地防止D_1对线粒体呼吸功能的抑制。后加Vit.E没有保护作用。D_1经热处理可非常显著地降低其对线粒体呼吸功能的抑制作用。氢过氧化枯烯(CHP)可非常显著地抑制线粒体呼吸功能。Vit.E可显著地防止较低浓度的CHP对线粒体RCR的抑制。还可使正常线粒体中以及加入D_1、HD_1和CHP,后线粒体中丙二醛含量显著减少。Vit.E为作用肯定的抗氧化剂,它的保护作用提示D_1和CHP极可能通过脂质过氧化作用这一共同途径损害线粒体功能。     

Klotho蛋白减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞系H9C2损伤

目的研究Klotho蛋白对低氧-复氧诱导的心肌H9C2细胞系损伤的保护作用及其机制。方法将H9C2心肌细胞分为对照组、低氧/复氧组(1%O_2低氧6 h, 5%CO_2以及95%空气培养箱中复氧2 h)和Klotho蛋白(10μg/mL)干预组。通过酶标仪间接测定细胞内钙离子([Ca~(2+)]_i)水平;CCK8法和TUNEL法分别检测细胞活性及细胞凋亡;分光光度法检测细胞中钠ATP酶(Na~+/K~+-ATPase,NKA)和反向模式钠/钙交换体(Na~+/Ca~(2+)-exchange,NCX)的活性。结果体外培养的H9C2细胞低氧/复氧(6 h/2 h)处理后可明显降低H9C2细胞活性(P0.05);增加细胞内Ca~(2+)水平和凋亡率(P0.05);降低细胞中Na~+/K~+-ATPase的活性(P0.05);增加反向模式Na~+/Ca~(2+)交换体的活性(P0.05);10μg/mL Klotho蛋白处理可明显减轻上述损伤。结论 Klotho蛋白可减轻低氧/复氧诱导下的H9C2细胞内钙超载,最终减少该细胞系细胞的凋亡。     

内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积、钠钾离子及其Na~(+)-K~(+)-ATP酶活性的影响

本实验以氚水和Na_2~(35)SO_4为标记物,观察了内毒素对兔骨骼肌细胞外液容积(ECV)、Na~+、K~+含量以及(Na~+-K~+)-ATP酶活性的影响。实验结果显示,动物静注内毒素(0.5mg/kg)后10小时骨骼肌ECV、Na~+、K~+含量和(Na~+-K~+)-ATP酶活性均无显著变化;但血K~+浓度自内毒素注射后3小时即有显著下降。     

钙对心肌ATP酶的损害及镁的保护作用

本工作在大鼠心肌肌膜观察到,Mg~(2+)为心肌Na~+-K~+-ATP酶激活所不可缺少的因素,当Mg~(2+)浓度在0～6mM时,Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶活性与其密切相关;当超过8 mM时,ATP酶总活性不变,但Na~+-K~+-ATP酶/Mg~(2+)-ATP酶之比值增高。高浓度Ca~(2+)对于Na~+-K~+-ATP酶及Mg~(2+)-ATP酶均具有抑制作用,而提高Mg~(2+)浓度可部分地拮抗高Ca~(2+)的损伤作用。     

镁对缺血再灌注心肌线粒体合成ATP能力的影响

我们曾经观察到心肌缺血再灌注过程中心肌线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性降低,Ca~(2+)大量沉积于线粒体内.含Mg~(2+)溶液灌流对此具有逆转作用。心肌线粒体是心肌细胞进行氧化磷酸化、合成ATP的场所,大量的钙盐沉积,有可能抑制ATP的合成,因此,我们进一步观察含Mg~(2+)溶液灌注对缺血再灌注心肌线粒体合成ATP的影响。实验采用Wistar大鼠离体等容收缩心脏,行Langendorff灌流,常规K-H液预灌流30分钟行低灌流缺血(0.2ml/min,60分钟后,常规K-H液再灌)注30分钟.根据缺血期准注K-H液中Mg~(2+)浓度不同,实验分为0、1.2及15μmol三组(n均为5)。灌流结束后差速离心分离心肌线粒体,加入含有底物ADP     

缺血等因素对大鼠心肌线粒体Ca^2＋转运的影响

本研究检测了体外缺血等因素对心肌线粒体Ca~(2+)转运的影响。结果表明,缺血明显抑制线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性及~(45)Ca摄取率。缺血10分钟时,线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性开始下降,40分钟时显著降低,~(45)Ca摄取率的变化也呈类似趋势。去甲肾上腺素及cAMP对线粒体Ca~(2+)-ATP酶活性,~(45)Ca摄取率无任何影响。无机磷对线粒体Ca~(2+)-ATP酶有轻微的抑制作用,二磷酸腺苷对谚酶活性有明显抑制作用,其IC_(50)值为2.5mmol/L。     

细胞钠／钙交换可能参与高血压的发病机制

当前不论从组织水平,细胞水平还是亚细胞水平均证实血管平滑肌(VSM)细胞膜上存在着Na/Ca交换这一胞内Ca~(2+)调节机制。它可以利用Na~+的跨膜电化学梯度(g_(Na~+)来逆向转运Ca~(2+)。视Na~(2+)与Ca~(2+)电化学梯度的不同,它既可以介导Ca~(2+)进入细胞也可以将Ca~(2+)转运出细胞。 VSM细胞Ca~(2+)代谢的异常是高血压发病的一个重要原因。那么这一异常是否与Na/Ca交换有关呢?答案似乎是肯定的。在高血压病人的红细胞,自发性高血压大鼠(SHR)的红细胞或VSM细胞中Na~+与Ca~(2+)的含量均比正常对照明显增高。后者看来与Na~+,K~+-ATPase的抑制有关,因为不少证据显示高血压病人或动物血液中一种可以抑制Na~+,K~+-ATPase的内源性洋地黄类物质(endogenous digitalis)的水平升高。用高血压患者去蛋白     

精氨酸加压素对慢性肾衰大鼠心功能及其心肌细胞钠-钾-ATP酶活力的影响

用SD大鼠制作慢性肾衰(CRF)动物模型,观察其血浆与心肌精氨酸加压素(AVP)含量的变化;CRF大鼠静脉分别注射AVP及其抗血清,观察其对平均动脉压、左心室压峰值和心肌细胞钠-钾-ATP酶(Na~+,K~+-ATP酶)活力的影响。结果表明,CRF~+大鼠血浆及心肌AVP含量与血肌酐水平同步增高;静脉注射AVP标准品,可使心肌Na~+,K~+-ATP酶活力明显降低,并加重心功能指标的异常变化;而给予AVP抗血清,则可改善心功能,对心肌有明显的保护作用。提示ATP含量异常增高所引起的Na~+,K~+-ATP酶泵转运动力学损害,可能参与CRF时心功能不全的病理过程。     

烧伤中分子对豚鼠心肌线粒体膜流动性的影响

生物膜流动性的改变,可以影响物质转运,能量代谢等许多功能, 为了研究烧伤血浆中分子(BNNS)对心脏的抑制作用机理,我们观察了BMMS和正常中分子(NMMS)对正常豚鼠心肌线粒体膜流动性的影响,并和35％体表111度烧伤的豚鼠心肌线粒体膜流动性变化进行了对比,实验用DPH作荧光探剂,以荧光偏振度p值和各向异性r值为指标,结果发现:与正常豚鼠心肌线粒体相比,烧伤豚鼠心肌线粒     

高钙对烧伤早期豚鼠离体心脏固有收缩性的影响

为了探讨烧伤早期心肌固有收缩力降低的机制,本实验观察了35％体表面积Ⅲ度烧伤后8小时,灌流豚鼠离体心脏对高钙溶液(含Cacl_2 3.2mmol/L台氏液)的反应及对Ca~(2+)的消耗量。结果表明,烧伤组在高钙液灌流情况下,左心室内压的±dp/dtmax、心室肌细胞动作电位幅度,最大去极化速率.复极化50％的时程缩短程度均低于对照组(P<0.05);对常钙或高钙灌流液中Ca~(2+)的交换量,烧伤组也显著低于对照组(P<0.01)。提示烧伤早期心肌细胞对Ca~(2+)的摄取、利用,心肌细胞电位对Ca~(2+)的反应均低于正常,这可能是此期心肌固有收缩性和舒张功能显著降低的重要原因之一。     

肾阳虚证患者红细胞LPO、SOD和ATP酶活性的变化

目的 :探讨肾阳虚证患者红细胞LPO、SOD和ATP酶活性的特点及其意义。方法 :观察 19例肾阳虚证患者和 2 1例正常人红细胞LPO、SOD和红细胞膜Na+ K+ ATP酶、Mg2 + ATP酶、Ca2 + ATP酶、Ca2 + Mg2 + ATP酶活性的变化。结果 :与对照组比较 ,肾阳虚证患者红细胞LPO含量升高 (P <0 .0 1) ,红细胞SOD活性降低 (P <0 .0 1) ;红细胞膜Na+ K+ ATP酶活性显著升高 (P <0 .0 1) ,而Mg2 + ATP酶活性变化无显著性差异 ,Ca2 + ATP酶活性升高 (P <0 .0 1) ,Ca2 + Mg2 + ATP酶活性也显著升高 (P <0 .0 1)。结论 :肾阳虚证患者红细胞内脂质过氧化反应增强 ,而抗氧化能力降低 ,红细胞膜Na+ K+ ATP酶、Ca2 + ATP酶和Ca2 + Mg2 + ATP酶活性升高 ;本研究为理解肾阳虚证的病理生理基础提供了初步实验依据     

慢性多相性应激对老龄鼠心肌脂质过氧化和超微结构的影响

目的：探讨长期心理应激在老龄鼠心肌脂质过氧化形成和心肌超微结构损务中的作用。方法：观察经为期６周的多相性应激源（限制、旋转、拥挤）刺激后，青龄鼠（１．５月龄）和老龄鼠（１５月龄（心肌脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）活性，以及心肌天门冬酸转氨酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）活性的变化，观察电镜下心肌超微结构的改变。结果     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:结扎冠状动脉左前降支10min再灌15min复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型,描记标准肢体Ⅱ导联心电图,测定心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性及丙二醛(MDA)含量,电镜观察心肌线粒体改变。结果:参麦注射液使再灌注性心律失常的发生率低于模型组、持续时间较短,心肌组织匀浆中SOD、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性高于模型组,MDA的含量低于模型组,心肌线粒体损伤轻于模型组。结论:参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有明显的防治作用,其机制与减轻氧自由基及钙超载损伤有关。     

严重烧伤对大鼠肠上皮细胞线粒体呼吸功能的影响

为研究严重烧伤对大鼠肠上皮细胞线粒体呼吸功能的影响及其机制，采用30％体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型，观察烧伤后线粒体Ⅲ态呼吸(ST3)、Ⅳ态呼吸(ST4)、呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P／0)、肠道氧摄取率(Oext)及肠粘膜血流量(IMBF)的变化。结果表明：烧伤后大鼠肠上皮细胞线粒体ST3、RCR、P／O及肠组织Oext和IMBF均显著降低。与伤前相比，最大降幅度分别为42．06％、42.15％、30．94％、59．46％和51．73％(P＜0．01)，而ST4明显高于伤前。相关分析显示，IMBF同RCR、Oext和P／0呈显著正相关(rl＝0.92，P＜0．01；r2＝0.96，P＜0.01;r1＝0．91，P＜0．01)。本实验显示：严重烧伤后肠上皮细胞线粒体呼吸功能受损，氧化磷酸化失耦联，肠道氧摄取率降低，其发生机制与伤后肠粘膜血流量大幅下降有关。     

白细胞及其释放的氧自由基在活化补体导致急性肺损伤中的作用

作首用白细胞抗体,观察了酵母多糖活化的血浆(ZAP)分别对白细胞数正常(n=7)和减少(n=7)的山羊肺淋巴中脂质过氧化物(LPO)及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的影响,及其与肺损伤的关系。ZAP导致肺淋巴LPO含量由2.26±0.03nmol/ml增至3.26±0.09nmol/ml,SOD活性由258.10±4.53u/ml升至354.07±13.27u/ml,同时引起通透性肺损伤。而GSH-px活性则由189.34±4.16u/ml降为184.59±5.54u/ml。白细胞减少组山羊肺损伤程度较轻,LPO量增加不明显。实验结果提示:白细胞及其产生的自由基参与ZAP肺损伤过程。     

一氧化氮合酶激活参与烧伤后Ca~(2 )介导的心肌线粒体损伤

目的 :探讨线粒体一氧化氮合酶 (mtNOS)在严重烧伤早期心肌线粒体损害中的作用。方法 :复制30 %TBSAⅢ°烧伤大鼠模型 ,取正常及伤后 1、3、6、12、2 4h大鼠心肌分离线粒体 ,测其呼吸功能、Ca2 浓度 ([Ca2 ]m)及细胞色素c氧化酶、mtNOS活性。结果 :①伤后 1h心肌线粒体呼吸控制率 (RCR)显著高于正常组 ,但 3、6、12、2 4h明显低于正常组 ,Ⅲ态呼吸速率 (ST3 )变化与RCR平行 ,ST4 仅于伤后 3h明显升高 ;②伤后各时点 [Ca2 ]m 均明显高于正常组 ,尤以 3、6h为甚 ,而mtNOS活性于伤后 3、6、12、2 4h显著高于对照组 ,细胞色素c氧化酶活性于伤后 3、6、12、2 4h显著低于正常组 ;③伤后mtNOS活性与 [Ca2 ]m 呈明显正相关 ,相关系数为 0 8945 (P <0 0 5 ) ,RCR与mtNOS活性呈显著负相关 ,相关系数为 - 0 934 7(P <0 0 5 )。结论 :伤后 [Ca2 ]m 升高激活mtNOS ,可能参与严重烧伤早期心肌线粒体损害。     

Effect of Ligustrazine and Shenmai Injection on ATPase and free radical metabolism in the aged rats with myocardial injury after brain ischemia/reperfusion

Effect of Ligustrazine and Shenmai Injection on ATPase and free radical metabolism in the aged rats with myocardial injury after brain ischemia/reperfusion     

川芎嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

实验观察了川芎嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤时心脏血流动力学、血清中和心肌组织中氧自由基和脂质过氧化物的影响。川芎嗪保护组与非保护组比较显示，①左室内压峰值（ＬＶＳＰ）明显升高（Ｐ＜０．０５）、左室内压上升最大速率（ＬＶ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ）和左室内压下降最大速率（ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ）均升高非常显著（Ｐ＜０．０１）；②血清中丙二醛（ＭＤＡ）明显降低（Ｐ＜０．０５），而谷胱甘肽过氧化物酶／脂质过氧化物（ＧＳＨ－ＰＸ／ＬＰＯ）升高非常明显（Ｐ＜０．０１）；③缺血再灌注损伤区心肌组织中ＭＤＡ显著降低，并伴随超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和ＧＳＨ－ＰＸ／ＬＰＯ显著升高（均Ｐ＜０．０５）。表明川芎嗪可通过提高对氧自由基的清除及拮抗脂质过氧化反应而保护缺血再灌注损伤的心肌。     

糖尿病大鼠心肌MDA含量、SOD和Na￣ -K￣ -ATP酶活性的变化

实验用四氧嘧啶破坏Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺诱发糖尿病模型，观察糖尿病人鼠心肌组织ＭＤＡ含量，ＳＯＤ和Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的变化以及氧自由基清除剂（ＶｉｔＥ．亚硒酸钠）对糖尿病大鼠心肌的保护作用。结果表明：（１）糖尿病大鼠心肌组织ＭＤＡ含量显著增加（Ｐ＜０．０５），而心肌细胞膜上Ｎａ＋－Ｋ＋一ＡＴＰ酶的活性显著下降（Ｐ＜０．０１）．（２）ＶｉｔＥ和亚硒酸钠能显著降低糖尿病大鼠心肌组织ＭＤＡ含量，并能提高ＳＯＤ和Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。以上结果说明糖尿病大鼠心肌组织的脂质过氧化反应可能是导致心肌细胞膜上Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性下降的原因之一     

一氧化氮合酶激活参与烧伤后Ca2+介导的心肌线粒体损伤

目的:探讨线粒体一氧化氮合酶(mtNOS)在严重烧伤早期心肌线粒体损害中的作用。方法:复制30%TBSAⅢ°烧伤大鼠模型,取正常及伤后1、3、6、12、24h大鼠心肌分离线粒体,测其呼吸功能、Ca²⁺浓度(_m)及细胞色素c氧化酶、mtNOS活性。结果:①伤后1h心肌线粒体呼吸控制率(RCR)显著高于正常组,但3、6、12、24h明显低于正常组,Ⅲ态呼吸速率(ST₃)变化与RCR平行,ST₄仅于伤后3h明显升高;②伤后各时点_m均明显高于正常组,尤以3、6h为甚,而mtNOS活性于伤后3、6、12、24h显著高于对照组,细胞色素c氧化酶活性于伤后3、6、12、24h显著低于正常组;③伤后mtNOS活性与_m呈明显正相关,相关系数为0.8945(P＜0.05),RCR与mtNOS活性呈显著负相关,相关系数为-0.9347(P＜0.05)。结论:伤后_m升高激活mtNOS,可能参与严重烧伤早期心肌线粒体损害。