血管紧张素Ⅱ1型受体和瘤医院自身抗体检测方法及临床意义

目的 建立抗血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1-受体)自身抗体和抗α1-肾上腺素能受体(α1-受体)自身抗体的间接酶联免疫吸附法(ELISA),并探讨这两种抗体与高血压的关系.方法 以合成的AT1-受体和α1-受体细胞外第二环功能表位肽段(AT1-165～191和α1-192～218位氨基酸序列)作抗原,建立ELISA方法 ,检测降压未达标组98例、降压达标组96例患者和40名正常人血清中抗AT1-受体和α1-受体自身抗体.结果 阳性参考血液批内和批间变异导数分别为0.066、0.072和0.097、0.101,用抗原吸收后,吸光度(A)值分别降低2.5倍和2.3倍,98例降压未达标高血压患者中抗AT1-受体自身抗体和抗α1-受体自身抗体阳性率分别为41.8%,36.7%,明显高于降压达标组患者(10.42%,13.54%)和正常血压组(7.5%,5%),P＜0.01.结论 抗AT1-受体自身抗体和抗α1-受体自身抗体检测的特异性和敏感性高,操作简便,有助于临床开展高血压病的免疫学检测.     

高血压抗血管抗体检测的临床意义

目的：探讨抗血管自身抗体在高血压发病中的价值。方法：收集了设备同人154例以及正常血压对照40例作为研究对象，以人工合成AT1受体，α1－受体胞外第二环多肽片段为抗原，ELISA法检测入选病人及对照组血清中的抗AT1受体，α1－受体抗体等抗血管自身抗体，分析抗血管抗体在不同高血压亚组中的差异及抗体与高血压的关系。结果：抗体阳性病人在重度及难治性高血压组明显高于一般高血压病人和正常对照组，结论：抗AT1受体和α1－受体自身抗体可能参与了高血压，尤其是重度高血压和难治性高血压的发病，检测抗AT1受体和α1－受体自身抗体有助于高血压的诊断和药物选择。     

扩张型心肌病患者血清中抗β受体抗体的研究

应用免疫转印法研究20例扩张型心肌病(DCM）患者血清中抗心肌抗体，发11例患者抗心肌细胞膜66.47ku肽类抗体阳性，20例正常人血清均为阴性（P＜0.01）。Betaloc（倍他乐克）抑制试验发现,Betaloc可以抑制该抗体介导的心肌细胞毒性反应。本文提示抗心肌细胞膜66.47ku肽类抗体是抗心肌β受体抗体，用免疫转印法检测抗心肌β受体抗击体，对DCM的诊断具有重要价值，Betaloc对DCM患者心肌可能具有保护作用。     

心脏病患儿抗心肌β-肾上腺素能受体抗体的测定

目的探讨抗心肌β-肾上腺素能受体(简称β-受体)抗体对小儿心脏病的诊断价值。方法运用免疫印转法检测了30例病毒性心肌炎(VMC),14例扩张型心肌病(DCM),22例先天性心脏病(CHD),10例风湿性心脏病(RHD)患儿和25例正常对照组(NC)血浆抗β-受体抗体水平。结果VMC和DCM患几中抗β-受体抗体的阳性率显著高于CHD、RHD和NC组(P＜0.01)。抗β-受体抗体诊断VMC和DCM的灵敏度为80％,特异度为98％。结论小儿心脏病的鉴别诊断中抗β-受体抗体的测定有重要价值,可作为小儿VMC和DCM的特异性诊断指标。     

抗体阳性与抗体阴性的自身免疫性脑炎患者临床特征比较

目的比较自身免疫性脑炎(AE)待查患者中,抗体阳性(确诊)的AE患者和抗体阴性(可能)的AE患者之间的临床特征及辅助检查差异。方法回顾性分析2017年3月至2018年12月于中国科学技术大学附属第一医院诊断为AE待查的患者56例,所有患者的脑脊液和血清进行AE相关抗体[抗N-甲基-D-天冬氨酸受体抗体(NMDAR)、抗α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体抗体(AMPAR)、抗γ-氨基丁酸B受体抗体(GABABR)、抗富亮氨酸胶质瘤失活蛋白1抗体(LGI1)和抗接触素相关蛋白2抗体(CASPR2)]检测。根据抗体检测结果分为抗体阳性的AE患者和抗体阴性的AE患者,其中抗体阳性的AE患者31例,抗体阴性的AE患者25例。比较分析两组患者的临床特征和辅助检查结果的差异,以及疾病严重程度和治疗的差异。结果 31例抗体阳性的患者中,抗NMDA脑炎20例(65%),抗GABABR脑炎9例(29%),抗LGI1脑炎2例(6%)。抗体阴性的AE患者静脉滴注免疫球蛋白(IVIG)的使用率低于抗体阳性的AE组。两组患者的性别、年龄、前驱症状、神经系统症状、头颅磁共振表现、脑电图结果、脑脊液压力、脑脊液细胞数及脑脊液蛋白水平的差异均无统计学意义(P均> 0. 05),两者的入住ICU率、最高mRS评分、出院日mRS评分差异无统计学意义(P均> 0. 05)。结论 AE患者中抗体阴性的并不少见,抗体阴性的AE患者临床表现与辅助检查跟抗体阳性的AE无显著性差异,对该类患者进行临床表现和辅助检查分析是必要的。     

重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体和抗突触前膜抗体的检测

应用β-银环蛇毒素(B-BGT)特异结合突触前膜和。α-银环蛇毒素(α-BGT)特异结合乙酰胆碱受体的包被检测板,以ABC-ELISA测定血清抗突触前膜抗体(PrMab)及抗乙酰胆碱受体抗体(AchRab)。共检测131份血清,其中正常人71例,非重症肌无力患者20例,重症肌无力患者40例。结果:①正常人全部阴性.②非重症肌无力患者中,只有一例两种抗体阳性。③40例重症肌无力中,33例抗体阳性,单一抗体阳性15例,两种抗体均阳性18例,PrMab阳性者24例(60%),AehRab阳性者27例(67.5%)。提示重症肌无力患者的抗乙酰胆碱受体抗体和抗突触前膜抗体检测,可作为一项免疫学诊断指标,有临床实用价值。     

抗血管紧张素Ⅱ1受体和α1肾上腺素受体抗体

目的 观察原发性高血压患者血清抗血管紧张素Ⅱ1受体(抗ATl受体)和α1肾上腺素受体自身抗体(抗α1受体抗体)对高血压患者心脏重构的影响.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)对553例原发性高血压患者进行血清抗α1受体和抗AT1受体抗体检测并记录所有患者的超声心动图检查结果.比较不同滴度组血清抗体对心脏重构的影响.结果 553例高血压病患者血清抗α1-受体和抗AT1受体抗体阳性率分别为32.3%(179/553),42.3%(234/553).抗α1受体抗体1:40(滴度)阳性组左心房扩大比率明显高于阴性组(P=0.021);≥1:80阳性组左心室扩大比率明显高于阴性组(P=0.006).抗AT1受体抗体1:40阳性组右心房扩大比率明显高于阴性组(P=0.011);≥1:80阳性组左心室扩大比率明显高于阴性组(P=0.004).双抗阳性组左心室和右心房扩大比率明显高于双抗阴性组(P分别为0.006和0.044).结论 抗α1-受体和AT1受体抗体与高血压病患者心脏扩大有关,可能是导致高血压病患者心脏重构的重要因素之一,且两种抗体可能有相互促进作用.     

献血者O型血清抗-A、抗-B完全抗体与不完全抗体效价的调查分析

目的 调查O型血清中抗-A、抗-B抗体效价浓度，分析其在临床输血中的意义。方法 用部分中和后抗球蛋白法及盐水法检测100例O型献血者的完全与不完全血型抗体效价。结果 100例O型供血者中，IgM抗-A抗体效价在1：64以上占37例，IgM抗-B抗体效价在1：64以上42例。因此，当输注O型全血或血浆时，约40％或每5单位(1000ml)就有2单位的抗-A、抗-B抗体效价超过1：64。尽管A型、B型人的血中分别含有A或B抗原可以中和部分IgM抗体。含有IgG的抗-AB抗体也不能被中和。结论 上述结果提示，O型血浆最好是输给同型血受体，不要输给异型血受体；另外，O型的母亲怀孕其他血型胎儿时，母亲体内的不完全抗体可以通过胎盘引起新生儿溶血病，提示有必要对孕妇做产前检查。     

抗血管紧张素Ⅱ1型受体抗体与冠状动脉粥样硬化性心脏病关系研究

目的:探讨抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体1型(AT1受体)自身抗体与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的关系.方法:80例患者用酶联免疫吸附法检测血清抗AT1受体自身抗体,分为抗AT1受体自身抗体阳性组和抗AT1受体自身抗体阴性组,采用Judkin法作冠状动脉造影检查.结果:46例抗AT1受体自身抗体阳性,34例阴性,在抗AT1受体抗体阳性组中32例冠脉造影至少1支血管狭窄≥50%,抗AT1受体自身抗体阴性组中12例冠脉造影至少1支血管狭窄≥50%,抗AT1受体自身抗体阳性组狭窄病变例数显著高于阴性组(P＜0.01).结论:抗AT1受体自身抗体阳性是冠心病的危险因素之一,对冠心病有一定的预测价值.     

扩张型心肌病患者血清中抗β受体抗体的研究

应用免疫转印法研究２０例扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清中抗心肌抗体，发现１１例患者抗心肌细胞膜６６．４７ｋｕ肽类抗体阳性，２０例正常人血清均为阴性（Ｐ＜０．０１）。Ｂｅｔａｌｏｃ（倍他乐克）抑制试验发现，Ｂｅｔａｌｏｃ可以抑制该抗体介导的心肌细胞毒性反应。本文提示抗心肌细胞膜６６．４７ｋｕ肽类抗体是抗心肌β受体抗体，用免疫转印法检测抗心肌β受体抗体，对ＤＣＭ的诊断具有重要价值，Ｂｅｔａｌｏｃ对ＤＣ     

抗β2—受体自身抗体在心肌梗死急性期的动态变化

目的:了解抗β2-受体的自身抗体在急性心肌梗死(AMI)时的变化规律.方法:以合成的人心脏β2-受体细胞外第二环表位肽段172-197氨基酸序列作为抗原,应用酶联免疫吸附(ELISA)方法,检测41例AMI患者,发病24小时、7天、2～4周时,血清中抗β2-受体自身抗体的阳性率,并与61例正常人的检测结果进行对比.结果:心肌梗死患者急性期抗β2-受体自身抗体的阳性率显著高于对照组(P＜0.05);心肌梗死发病24小时时抗β2-受体自身抗体的阳性率(29.3%)明显低于发病2～4周时(56.1%)的检测结果(P＜0.05);心肌梗死急性期心功能killip-1级者与killip-2级者比较,抗β2-受体自身抗体的阳性率无显著性差异.结论:抗β2-受体自身抗体存在于AMI患者血清中,且在发病2～4周内逐渐升高.该抗体的产生与心肌梗死急性期心功能状态无明显的相关性.     

上皮生长因子及其抗体对人癌细胞系生长的影响

本研究观察了上皮生长因子(EGF)抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对3个目建的人胰腺癌细胞系(PC-1,PC-2,PC-3)和3个其它人癌细胞系(肺腺癌LETP,乳腺癌BCP37和胃腺癌SGL7901)生长的影响。结果表明:EGF仅对PC-1和LETP2个细胞系有轻度刺激生长的作用,对其它4个细胞系无明显作用。在有EGF存在的条件下,抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对PC-1,LETP和SGL7901 3个细胞系有生长抑制作用。 用Northern核酸杂交技术研究表明这6个人癌细胞系中均有EGF受体mRNA的表达。结果表明:虽然这些细胞系中均有EGF受体的基因表达,但不一定对外源性EGF处理有反应。     

原发性高血压与心脏β2、α1及AT1受体自身抗体的关系

目的探讨抗G-蛋白偶联型β2、α1及AT1受体的自身抗体在原发性高血压病程中的分布情况。方法应用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,以细胞外第二环表位肽段的合成肽作为抗原,检测50例高血压心脏病、40例单纯高血压和40例正常人血清中抗G-蛋白偶联家族中β2、α1和AT1受体的自身抗体。结果高血压心脏病患者血清中抗G-蛋白偶联型β2、α1和AT1受体自身抗体的阳性率明显高于单纯高血压和正常组(P<0.05);高血压心脏病自身抗体阳性的平均几何滴度与单纯性高血压比较无明显差异(P>0.05),但两组阳性抗体的平均几何滴度均明显高于正常组。高血压心脏病抗β2受体自身抗体阳性患者中,81.0%同时具有α1受体的自身抗体,76.2%同时具有AT1受体的自身抗体,52.4%存在上述3种受体的自身抗体。结论抗G-蛋白偶联型β2、α1及AT1受体的自身抗体参与原发性高血压的病理生理过程,可能与心肌和血管重构有关。     

抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体死亡受体5嵌合抗体的构建及其真核表达

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株。采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性。结果获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%。结论抗DR5嵌合抗体anti-DR5mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础。     

单克隆与多克隆双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体试剂盒的研制

采用抗白细胞介素2受体(IL-2R)的单克隆与多克隆抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,建立了高特异性及高灵敏度的双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)。结果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测得兔抗人IL-2R多克隆抗体效价达1:10~4,免疫双向扩散法测得羊抗兔抗体效价高达1:256。本试剂盒检测sIL-2R的特异性强,灵敏度为100U/ml,在28C存放一年,稳定性不变。此方法操作简单,适用于临床和基础研究。     

间接免疫荧光法与ELISA检测抗核抗体、抗双链DNA抗体的比对分析

目的 探讨间接免疫荧光法(IIFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗核抗体(ANA)和抗双链DNA(ds-DNA)抗体的异同.方法 抽取确诊或疑为自身免疫性疾病患者血清125例,同时采用IIFA法和ELISA法检测 ANA 82例,抗ds-DNA抗体检测57例,其中14例同时检测ANA和抗ds-DNA抗体.对两种方法 检测结果 不符者采用免疫印迹法复查抗可溶性核抗原(ENA).结果 82例 ANA阳性率IIFA法与ELISA法分别为87.8%和73.17%,差别有统计学意义(P<0.01);57例血清中抗ds-DNA抗体检测阳性率IIFA法与ELISA法分别为77.19%和71.93%,差别无统计学意义(P>0.05).采用不同cutoff值时两种方法 符合率比较,ANA、抗ds-DNA抗体检测结果 差别均有统计学意义(P<0.01).两法对一些稀有核型ANA检测符合率较低,而抗ds-DNA抗体的符合率在不同核型上没有差异.ANA检测以1:100为cutoff滴度,抗ds-DNA抗体以弱阳性为cutoff值时,两种方法 可获得较高的符合率,但在检测滴度1:100 ANA、弱阳性抗ds-DNA抗体时两种方法 存在明显的不一致.结论 IIFA法检测总ANA、抗ds-DNA抗体的敏感性均高于ELISA法, IIFA法作为ANA的筛查方法 ,阳性标本再进行ELISA法检测,可在获得荧光核型信息同时观察抗体滴度的变化情况,并且更快捷经济.两种或多种不同方法 学原理的实验互相佐证,有助于减少实验误差.     

肺心病患者M2受体抗体检测及意义

目的:检测肺心病患者M2受体的自身抗体并探讨M2受体自身抗体在肺心病发病中的作用及其与右心结构的关系.方法:用SA-ELISA法检测110例肺心病病人和100名健康人血清中抗M2受体的自身抗体.结果:肺心病组病人血清M2受体的自身抗体的阳性率及平均几何滴度[48.18%,80(1.846±0.351)]均高于对照组[13%,40(1.602±0.369)](P<0.05).肺心病组中M2受体的自身抗体阴性组、阳性组比较表现为:血氧分压(PaO2)呈逐渐降低趋势,二氧化碳分压(PaCO2)、右室流出道内径、右室内径呈逐渐增高趋势P<0.05).结论:M2受体的自身抗体可能与肺心病的发病过程密切相关,M2受体的自身抗体可能与肺心病发病过程中的心脏损害特别是右心扩大有关.     

不孕不育妇女血清中抗心磷脂抗体、抗β_2糖蛋白1抗体和抗精子抗体的检测价值

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)、抗β2糖蛋白1抗体(抗β2-GP1抗体)以及抗精子抗体(AsAb)在女性不孕不育患者中的检测价值。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法检测102例女性不孕不育患者血清中ACA、抗β2-GP1抗体和AsAb。结果:女性不孕不育患者AsAb阳性率为35.2%,其阳性率明显高于对照组(P<0.05);ACA总阳性率为31.4%,其中ACA-IgG、ACA-IgM和ACA-IgA抗体阳性率分别为24.5%、14.7%和5.8%;抗β2-GP1抗体的总阳性率为29.4%,其中抗β2-GP1-IgG、抗β2-GP1-IgM和抗β2-GP1-IgA抗体阳性率分别为21.5%、12.7%和3.9%。ACA和抗β2-GP1抗体的IgG、IgM阳性率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACA、抗β2-GP1抗体和AsAb是引起免疫性不孕不育症的重要原因,其检测有助于免疫性不孕不育症的诊断。     

CIE辅助检测ENA抗体

抗ENA抗体是针对核内可提取性核抗原(Extractable Nuelear Antigen，ENA)的一种自身抗体，有10余种。近年国内应用的免疫印迹法(Immunohtting，IBT)可检测抗U1RNP、抗sm、抗SSA、抗SSB、抗Rib、抗Scl-70和抗Jo-1等7种抗ENA抗体。敏感性和特异性均优于对流免疫法(CIE)。但CIE可检出上述抗体以外的ENA抗体，可作为风湿病的实验室辅助诊断方法。现将149例风湿病患IBT和CIE检测结果报告如下。     

抗乙酰胆碱受体单链抗体的纯化

[目的 ]纯化抗乙酰胆碱受体单链抗体 ,为测定其特异性准备材料 .[方法 ]将大肠杆菌表达的单链抗体 (含有 6xHis及c myc标记肽 )经Ni nitrilotriaceticacid(Ni NTA)纯化 ,以十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳和应用鼠抗c myc单克隆抗体的免疫印迹试验鉴定纯化产物 ,并根据吸光度值测定表达产物的含量 .[结果 ]在纯化产物中发现大小约为 36KD的单链抗体 ,杂质蛋白带较少 ,表达量约为30 μg/L .[结论 ]用Ni NTA纯化带有 6xHis标记肽的单链抗体的方法简单、纯度高 ,以大肠杆菌表达抗乙酰胆碱受体单链抗体时产量低 .