蛋白质-核酸紫外交联法（UV-crossling of protein to nucleic acid）

一种检测DNA结合蛋白及其分子量的方法。其原理是：在体内，蛋白质与DNA形成结合物是非共价键结合。这种结合物若在体外用紫外线照射，DNA分子中的嘧啶碱基与蛋白质分子中的多种氨基酸残基(如半胱氨酸、丝氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和蛋氨酸等)之间可形成共价交联。如果DNA预先经过标记，与DNA结合蛋白进行结合反应并经紫外线照射，然后用DNase将未结合蛋白质的DNA部分酶解掉，剩下DNA结合蛋白．DNA共价结合复合物，经变性凝胶电泳分离和自显影即可显示DNA结合蛋白存在的位置并与标准蛋白对照确定其分子量。     

不同品种早稻糙米蛋白质和氨基酸组成研究

目的:研究安徽省12个品种早稻糙米的蛋白质和氨基酸含量及其组成特性。方法:通过化学分析评价不同品种早稻糙米蛋白质的营养价值。结果:12种早稻糙米蛋白质含量平均为9.19%,其中谷蛋白占总蛋白的76.70%,是主要的蛋白组分;其次是清蛋白,占总蛋白的11.80%;醇溶谷蛋白含量最少,仅为4.30%。氨基酸分析结果显示,12种早稻糙米中谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸和亮氨酸含量丰富,而胱氨酸、蛋氨酸、组氨酸和色氨酸含量较少。赖氨酸和苏氨酸分别是第1和第2限制性氨基酸。必需氨基酸与总氨基酸的比值均在55%以上。结论:与WHO模式相比,早稻糙米蛋白质具有较好的氨基酸组成,是一种优质蛋白质。     

高迁移率族蛋白B1对人乳头瘤病毒重组腺病毒载体疫苗免疫效果的影响

目的：评价高迁移率族蛋白B1（HMGB1）分子对接种HPV16型重组腺病毒载体疫苗实验小鼠免疫应答和抗肿瘤生物学效应的影响。方法通过TC-1细胞移植诱导建立小鼠肿瘤模型,在接种HPV16型重组腺病毒载体疫苗的同时,给予外源性HMGB1及其特异性拮抗剂HMGB1 A box注射,进行肿瘤抑制试验、肿瘤细胞挑战实验、特异性IFNγ的诱导检测。结果肿瘤抑制试验表明,与单独接种不同剂量疫苗组相比,注射HMGB1后小鼠成瘤率显著提高（2/10 vs 9/10, P<0.05）;而注射了A-box则减低了小鼠成瘤率（7/10 vs 1/10, P<0.05）。TC-1肿瘤细胞挑战试验显示,10只先接种疫苗的小鼠中有8只免受TC-1肿瘤细胞的攻击,而HMGB1仅能保护2只,且小鼠成瘤时间提前,肿瘤更大,同时HMGB1还使疫苗诱导特异性IFNγ的能力显著降低。结论 HMGB1分子可以削弱HPV16型重组腺病毒载体疫苗在小鼠模型上的免疫效果,而其拮抗剂A box蛋白具有一定程度增强作用。     

鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸及NMDA受体表达的影响

目的观察鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAAs)及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响。方法采用Alzet微泵背部埋植法建立大鼠鱼藤酮慢性中毒模型,应用高效液相色谱法(HPLC)检测鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸(glutamate,Glu)和天门冬氨酸(aspartic acid,Asp)浓度,RT-PCR技术观察NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B基因表达的变化。结果与正常对照组比较,鱼藤酮染毒大鼠中脑纹状体兴奋性氨基酸浓度明显升高,NMDA受体功能亚基和调节亚基基因表达异常。表现为2.0 mg/kg与4.0mg/kg鱼藤酮染毒组NR1亚基表达明显上调(P<0.05),NR2A亚基mRNA表达亦显著升高(P<0.01),而NR2B基因表达在2.0 mg/kg鱼藤酮染毒组未见明显改变。结论鱼藤酮染毒可致中脑纹状体EAAs水平升高,NMDA受体结构功能发生改变,从而诱导兴奋毒性损伤的产生。     

高迁移率族蛋白B1在子宫内膜癌中的研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在多种肿瘤组织中均有较高水平的表达,其与肿瘤细胞的增殖、分化、迁移及凋亡关系密切。由此看来,干扰HMGB1基因表达可有效抑制肿瘤细胞的增殖,这有望成为抗肿瘤治疗的新靶点。子宫内膜癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率有上升趋势。本文将对近年来HMGB1在子宫内膜癌发生、发展、预后中的研究进展进行综述。     

中医门诊治疗室空气细菌监测与分析 FREE

目的了解中医门诊治疗室之间空气细菌菌落数差异及引起该差异的原因。方法将中医门诊4间治疗室按其作用功能分为A、B两组,A组1、2号系针灸治疗室（设为A1、A2）,B组3、4号系推拿、按摩治疗室（设为B1、B2）。下午治疗结束后进行空气采样培养,比较组内和组间细菌菌落数。结果各治疗室细菌数：A1为(231.83±66.80)CFU/m3,A2为(236.17±53.07)CFU/m3,B1为(546.00±78.19)CFU/m3,B2为(528.67±71.38)CFU/m3;A、B两组组内两间治疗室细菌菌落总数差异均无显著性（t分别为0.25、0.80,均P＞0.05）,而A、B两组间细菌菌落总数差异有高度显著性（t＝14.93,P＜0.01）。结论针灸治疗室空气未经消毒时的细菌数符合卫生学标准,与针灸时药艾条熏烧有关,建议可免除空气紫外线、化学消毒剂消毒。     

小资料

种属间印迹 (Zooblot) 　用Southern印迹法检测某一种属的DNA探针与来自多个种属基因组DNA杂交的活性即叫种属间印迹或“动物园杂交”。用此法可以评估一段DNA序列 ,特别是一段编码序列在进化中的保守程度和种间关系蛋白质 核酸紫外交联法 (UV crosslinkingofproteintonucleicacid) 　一种检测DNA结合蛋白及其分子量的方法。其原理是 :在体内 ,蛋白质与DNA形成结合物是非共价键结合。这种结合物若在体外用紫外线照射 ,DNA分子中的嘧啶碱基与蛋白质分子中的多种氨基酸残基 (如半胱氨酸、丝氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、色氨酸、…     

miR-216a-5p在HMGB1介导的表皮葡萄球菌感染致腹膜透析相关腹膜炎中的作用

目的探讨miR-216a-5p在高迁移率蛋白B1(HMGB1)介导的表皮葡萄球菌感染致小鼠腹膜透析相关腹膜炎(PDAP)中的作用及机制。方法选取健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、感染组、感染+HMGB1抑制剂组,收集腹腔积液及腹膜组织分别进行白细胞计数、HE和免疫组织染色;Real-time PCR和Western Blot检测白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因素-α(TNF-α)、HMGB1、核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子抑制蛋白(I-κB)的mRNA和蛋白表达水平;生信预测发现,miR-216a-5p可能与HMGB1结合,参与其诱导的PDAP的发生,并构建感染+miR-216a-5p mimics组小鼠,通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216a-5p和HMGB1的关系,采用Real-time PCR、Western Blot、免疫组织染色检测HMGB1的表达变化。结果与对照组相比,感染组小鼠腹腔积液白细胞计数增多,炎性浸润明显,IL-1α、IL-6、TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均升高(均P0.05);HMGB1抑制剂(甘草素)干预后,小鼠腹腔积液白细胞计数下降,炎性浸润改善,IL-1α、IL-6、 TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。感染组小鼠NF-κB表达高于对照组,I-κB表达低于对照组;HMGB1抑制剂干预后NF-κB表达降低,I-κB表达升高(均P0.05)。Real-time PCR结果证实,与对照组相比,miR-216a-5p的含量在感染组中显著减少;双荧光素酶报告基因检测提示,miR-216a-5p可直接作用于HMGB1的3’UTR区;与感染组相比,感染+miR-216a-5p mimics组小鼠中HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降(均P0.05)。结论 HMGB1在表皮葡萄球菌感染致小鼠PDAP中发挥重要作用,抑制HMGB1可改善小鼠炎症反应,miR-216a-5p可通过靶向HMGB1参与表皮葡萄球菌感染致PDAP的发生。     

旋毛虫53kDa ES抗原蛋白二级结构及B细胞表位预测

目的　分析旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白二级结构及B细胞表位。方法　应用生物信息分析软件DNASTAR和Anthep ro5 .0 ,按照Kyte -Doolittle氨基酸亲水性标准对旋毛虫 5 3kDaES抗原的亲水性基序、二级结构及B细胞表位进行分析预测。结果　在旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白中 ,第 1 9- 2 5、4 0 - 5 1、6 1 - 6 7、99- 1 0 5、1 1 1 - 1 1 9、1 2 6 - 1 34、1 37- 1 5 2、1 79- 1 85、1 91 - 2 0 0、2 1 9- 2 38、2 6 1 - 2 6 7、2 81 - 2 95、31 2 - 32 3、331 - 343、36 7- 372、2 90 - 393位氨基酸残基具有较强的抗原性 ,第 1 9- 2 5、4 0 - 5 1、6 1 -6 7、99- 1 0 5、1 1 1 - 1 1 9、1 2 6 - 1 34、1 37- 1 5 2、1 79- 1 85、1 91 - 2 0 0、2 1 9- 2 38、2 6 1 - 2 6 7、2 81 - 2 95、31 2 - 32 3、331 - 343、36 7- 372、390- 393位氨基酸残基可能是B细胞的表位。结论　对旋毛虫 5 3kDaES抗原蛋白和B细胞表位的分析为研制旋毛虫病新的诊断抗原奠定了基础     

脂多糖促进肺癌A549细胞表达HMGB1

目的 探讨脂多糖（LPS）促进肺癌A549细胞表达高迁移率族蛋白B1（HMGB1）机制及意义。方法 体外培养肺癌A549细胞,分组：A组（对照组）,B组（100 ng/ml LPS）,C组（150 ng/ml LPS）,D组（200ng/ml LPS）,培养12 h、24 h、48 h、72 h后,Western blot检测肺癌A549细胞HMGB1蛋白表达,ELISA检测细胞上清液HMGB1浓度。结果 Western blot、ELISA检测示HMGBl蛋白表达及浓度在A、B、C、D四组中逐渐增强（P〈0.05）;培养12 h、24 h、48 h、72 h有显著差异（P〈0.05）。结论 LPS促进肺癌A549细胞表达HMGB1,有时间-量效关系,为临床防治肺癌提供了新思维。     

990株临床非发酵菌的种群分布及耐药谱分析 FREE

目的了解某院临床标本分离的非发酵菌菌种分布及耐药谱,为临床用药提供依据。方法回顾性分析该院2004年1月-2008年12月临床各科室送检标本分离的990株非发酵菌资料。结果990株非发酵菌分为11个菌属,其中以不动杆菌属细菌最多,占43.43%（430/990）;假单胞菌属和窄食单胞菌属次之,分别为34.75%(344/990)和10.71%(106/990)。分离最多的前4种菌依次为铜绿假单胞菌（29.19%）、洛菲不动杆菌(20.61%)、醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合种(13.74%)和嗜麦芽窄食单胞菌(10.71%)。标本中以痰液分离菌数最多,占79.80%(790/990),其次为咽拭子7.88%（78/990）、体液6.87%(68/990)。5年来,铜绿假单胞菌对替卡西林、头孢西丁、头孢噻肟、亚胺培南、奈替米星、复方磺胺甲口恶唑、培氟沙星、庆大霉素、呋喃妥因和妥布霉素的耐药率变化显著（P＜0.005或P＜0.05）,耐药率＜30%的抗菌药物有头孢他啶和亚胺培南;不动杆菌属对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、妥布霉素和复方磺胺甲口恶唑的耐药率变化显著（P＜0.005或P＜0.05）,耐药率＜30%的抗菌药物有替卡西林、亚胺培南和奈替米星。结论非发酵菌为医院感染的主要病原菌,对常用抗菌药物的耐药率高,且多重耐药现象严重,应定期监测细菌变迁和耐药性变化,指导临床合理用药。     

美国感染病学会、美国药师学会、感染病药师学会共同推荐的万古霉素治疗指南 FREE

关于万古霉素目标血药浓度达标及如何进行调整已讨论多年。根据有效血药浓度监测出万古霉素血药谷浓度和调整的初始浓度,两者均高于其最低抑菌浓度（MIC）和避免可能的耳毒性或肾毒性等副作用的浓度。前期很多研究由于缺乏设计良好的随机临床评估或缺乏某血药浓度与患者预后间的确切关系的明确资料,由此导致了监测力度不够或不监测以及如何进行剂量调整的争论。     

2008年美国医疗机构消毒灭菌指南节译（Ⅱ） ——医疗机构环境表面的清洁与消毒 FREE

美国疾病控制与预防中心2008版《医疗机构消毒灭菌指南》已出版,本指南最终目标是通过适当选择消毒灭菌方法,减少医院感染的发生。以下节选关于医疗机构环境表面的清洁与消毒内容,每条建议均根据科学证据、基本原理、实用性和联邦法律制定。其建议分级系统如下。     

2008年美国医疗机构消毒灭菌指南节译（Ⅲ） ——消毒灭菌方法选择 FREE

美国疾病控制与预防中心2008版《医疗机构消毒灭菌指南》已出版,该指南最终目标是通过选择适当的消毒灭菌方法,减少医院感染的发生。以下节选消毒灭菌方法的选择建议（表1）。     

重症肝病合并医院真菌感染60例临床分析 FREE

目的探讨重症肝病患者医院真菌感染的临床特点。方法采用回顾性调查方法对 60例重症肝病合并医院真菌感染患者的临床资料及相关因素进行分析。结果同期住院重症肝病患者485例,其中60例(12.37%)发生医院真菌感染83例次(17.11%)。感染部位以肠道为主,占50.60%;其次为口腔(25.30%)、下呼吸道(9.64%)、腹腔(7.23%)、泌尿道(4.82%)和血液(2.41%)。 感染菌种以白假丝酵母菌为主,占61.67%;其次为近平滑假丝酵母菌,占16.67% 。60例重症肝病合并医院真菌感染者中死亡34例(56.67%),与真菌感染直接相关2例(3.33%);而未发生真菌感染的60例对照者中死亡19例(31.67%),两组病死率差异有高度显著性(χ2＝7.60,Ｐ<0.01)。结论重症肝病患者发生医院真菌感染预后差,病死率极高。预防和治疗医院真菌感染需采取综合措施。     

美国 CLSI抗菌药物敏感试验操作标准(2010年版)部分变更内容 FREE

2010年美国临床实验室标准化研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）更新了M100－S20文件,现将其中主要更新内容作简要介绍,供临床微生物学检验工作者在常规工作中参考。     

667例骨科手术切口目标监测与干预效果评价 FREE

目的 了解引起骨科手术切口感染的因素,采取有效措施预防与控制骨科手术切口感染。方法 分2个阶段对在洁净手术室进行的骨科手术切口进行监测,第1阶段即2008年3月1日-12月31日（调查阶段）,主要调查感染情况及相关因素;第2阶段即2009年1月1日-5月31日（干预阶段）,根据前阶段的调查结果对可干预的相关因素进行干预。比较两阶段的感染率。结果 调查阶段的手术切口感染率为5.07%（23/454）,干预阶段的手术切口感染率为1.41%（3/213）,干预阶段切口感染率显著降低（χ2=4.25,P＜0.05 ）。结论 加强洁净手术室的管理、保证手术器械及用物灭菌质量、围手术期合理使用抗菌药物、正确进行外科手消毒、严格执行换药操作规程、提高医护人员感染控制意识等干预措施可有效预防与控制骨科手术切口感染。     

医院感染发展趋势与防范策略 FREE

医院感染伴随医院产生,无论是在发展中国家还是在发达国家,都是当前医院管理中的难题。医院感染不仅威胁患者的健康和生命,同时也影响医院的医疗质量,阻碍高新技术的开展,延长住院时间和增加医疗费用,给患者、医院和国家造成巨大经济损失。加强医院感染研究,有效预防与控制医院感染势在必行。     

一种医院感染监测系统的设计与应用 FREE

目的 开发医院感染监测软件（HIMS）,有效监控医院感染。方法结合医院的实际需求,设计一种医院感染监测系统,并与软件公司合作,开发相应的HIMS,将其嵌入医院信息系统中。结果 该系统在医院感染监测工作中得到具体应用,发挥了实时监控、预警报告的作用,取得良好效果。结论 该系统能较好地满足医院感染监测的各项基本功能需求,达到了预期效果。     

胃肠道手术部位感染目标性监测效果评价 FREE

目的 了解不同监测方法下胃肠道手术部位医院感染发病情况,为降低感染率,制定感染控制措施提供依据。方法 比较某院2007年7月-2008年6月（实施目标性监测前,对照组）及2008年7月-2009年6月（实施目标性监测后,监测组）行开腹胃肠道手术患者的手术部位感染情况。结果 对照组手术部位感染率为12.30%,监测组下降至7.00%,两组比较,感染率差异有显著性（χ2=3.98,P＜0.05）。结论 采用目标性监测方法能有效降低医院感染率。