用大白鼠乳鼠原代肺细胞直接从病人血清中分离流行性出血热病毒

<正> 1983年流行性出血热(简称 EHF)流行季节,我们在流行区采集发病2～5天以内的急性期病人血清,用大白鼠乳鼠原代肺细胞(简称 RL)同样分离到 EHF 病毒。方法:将典型 EHF 病人急性期血液按常规方法分离血清,各取0.5ml 接种 RL 单层细胞青霉素小瓶,37℃吸附2小时,     

传染病的现状与展望(下)

三、流行性出血热(EHF) 主要流行于欧、亚洲。我国为流行区之一,且疫区有逐渐扩大的趋势,值得注意。病原学自1978年南朝鲜李镐汪从黑线姬鼠分离到EHF病毒以后,不少国家均分离成功。1981年以来,我国学者也从疫区黑线姬鼠肺组织分离到几株能稳定传代的EHF病毒,并在A_(549)人肺癌传代细胞和Vero、E_6非洲绿猴肾传代细胞中适应成功。以后又有人用A_(549)、Vero、E_6细胞从病人血清分离到EHF病毒。国内并有人用免疫电镜技术首次观察到病毒形态,并提出此病毒可能属布尼亚病毒科的一个新属。本病毒为RNA病毒,约100～200nm,不耐酸和乙醚,不耐热,甲醛、戊二醛及紫外线均可将其灭活。流行病学本病的宿主动物属于总鼠科的鼠科和仓鼠科中的一些种类。鼠科中主要是姬线属、家鼠     

从黑线姬鼠肝组织分离流行性出血热病毒J28B株的初步鉴定

继Lee HW 等(1978)采用非疫区黑线姬鼠传代及用间接免疫荧光技术(IFAT)作指标,分离到朝鲜出血热(KHF)病毒后,French 等(1981)又成功地将其适应到人肺癌传代细胞A549细胞系。近年来,我国学者应用上述方法已从EHF 疫区的黑线姬鼠及褐家鼠肺脏和病人血中分离到EHF 相关病毒或有关因子。但迄今,从本病宿主动物肝脏、特别是用细胞培养直接从肝脏分离EHF 病毒,尚未见报导。最近,我们用     

首次从汉中地区褐家鼠分离出流行性出血热病毒及其抗原性鉴定

应用细胞培养技术和免疫荧光(IF)检查方法,从汉中地区褐家鼠分离出EHF 病毒R_6、R_(10)株。分离的病毒能在鼠体和细胞两个不同宿主系统连续稳定传代;检查10份确诊的EHF 病人双份血清,抗体滴度均有4倍以上增高;病毒抗原能与EHF病人阳性血清、兔抗KHFV76-118株免疫血清及多个单克隆抗体(M_cAb)反应,而不能与正常人和非出血热病人血清反应;兔抗KHFV76-118株免疫血清能阻断病毒株抗原同EHFM_cAb4E_7的阳性反应,抗呼肠弧病毒Ⅰ～Ⅲ免疫血清、抗类环状病毒免疫血清、抗CMV 免疫血清和抗HSV 免疫血清均无此阻断作用;用感染的VeroE_(-6)细胞作超薄切片,电镜下观察到大小约100nm 典型病毒颗粒;M_cAb 型别鉴定试验确定为EHFV野鼠型毒株。     

流行性出血热病毒Vero-E6细胞病变株的分离和鉴定

从EHF患者血清中分离到8株EHF病毒,在E 6细胞中传代适应过程中,发现有5株EHF病毒分别在第4～10代出现规律的细胞病变(CPE),对其中两个CPE株(HFN-04和-19)进行了一系列特异性鉴定试验。实验结果表明:(1)病毒的CPE发展与病毒增殖动态完全一致;(2)CPE株的主要生物学和理化性状均符合EHF病毒;(3)用CPE株病毒感染细胞抗原片检测EHF患者双份血清,其恢复期血清抗体均呈4倍以上增高反应;(4)病毒的CPE可被患者血清及EHF、KHF免疫血清所中和,不能被正常兔血清和Reo病毒1—3型多价血清所中和;(5)CPE株病毒感染的E_6细胞几乎能完全吸收EHF患者血清及EHF、KHF抗血清中的特异性抗体;(6)CPE株病毒感染鼠脑悬液与EHF病毒A9株McAb25-1致敏血球呈阳性血凝反应。据此,首次证实了EHF病毒至少有部分毒株能引起E_6细胞规律性CPE。EHF病毒CPE株的发现为EHF的诊断和防治工作提供了有利条件。     

应用EHF-A549细胞抗原片检测流行性出血热抗体的初步报告

以往检测流行性出血热(EHF)抗体采用的间接兔疫荧光试验是以KHF-A549细胞作为底物的。最近,我国已分离成功流行性出血热病毒,并可在A549细胞中传代。本文应用国产EHF-A549细胞涂片检查本地区EHF病人血清特异性抗体。检测结果与临床诊断符合率较高,急性期测IgM,阳性率为84.4％;恢复期测定IgG,阳性率为90.6％。由此认为国产抗原片更适宜于检测本国EHF患者的血清抗体。     

流行性出血热病原体在A-549细胞中的繁殖及其特性检查

从黑线姬鼠肺分离并传至第8代的EHF相关抗原A9和A10,能在A-549细胞中繁殖、传代。用A-549细胞抗原检查160份血清,76份EHF恢复期血清中72份免疫荧光反应阳性,57份正常人和非EHF病人血清56份阴性,27例EHF病人双份血清抗体滴度均有4倍以上升高;KHF病毒抗血清显若阻断EHF相关抗原同EHF病人血清的阳性反应,呼肠孤病毒多价抗血清和类似环状病毒抗血清均无此阻断作用;编码血清双盲法检查获得可重复的预期结果。结果表明,EHF的A-549细胞抗原和鼠肺抗原血清学特性一致,同为EHF病毒,并与KHF病毒相近或相同。汉坦病毒在形态学上与我们分离的类似环状病毒相似,但后者与EHF病人血清无明显关系。     

流行性出血热病毒人血清株的分离与特异性检查

<正> 我们用1981年凤台县冬季发病的流行性出血热(EHF)病人急性期(发病5天内)血清,以常量(每链霉素瓶0.1ml)接种A—549细胞,从5份血清中分离到一株EHF相关因子(S_2).为了考核其可重复性,又将液氮中保存的原始血清,按上量接种A—549细胞,亦获阳性结果。S_2株经系统检查,确认是EHF病毒。     

我省首次从长尾鼩鼱、褐家鼠、黄胸鼠以及流行性出血热(EHF)患者血清中分离出EHF病毒

1984年10月至85年4月,作者等在达县地区采集各种鼠肺标本共646份,用 Vero E—6细胞,从长尾鼩鼱肺中分离 EHF 病毒1株,褐家鼠肺中分离2株,黄胸鼠肺中分离1株;在南充地区采集 EHF 急性期患者血清中分离5株。已稳定传代4～5代,用 EHF 单克隆抗体(McAb25—1),A_9家兔免疫血清及患者恢复期血     

流行性出血热病毒在细胞培养中的传代适应

作者以非疫区黑线姬鼠为实验动物,自疫区黑线姬鼠肺组织分离出三株流行性出血热(EHF)病毒,并使之在绿猴肾传代细胞(Vero,E6纯化系)及人肺癌细胞(A549) 中进行传代,均于第2～3代开始查见对EHF恢复期患者血清的免疫荧光反应,至第5代基本稳定适应。实验结果表明,E6细胞及 A549细胞对 EHF病毒的传代适应均比较敏感。E6适应株的病毒滴度均在10~5(TCID_(50)/ml)以上。用感染E6细胞及A549细胞病毒抗原检查EHF     

流行性出血热病毒湖南株-79的分离和研究

用A-549细胞首次从湖南疫区流行性出血热(EHF)病人血中分离出两株病毒(湖南株79和湖南株103),其中湖南株79经鉴定为EHF病毒,类似野鼠型,但其抗原性不同于我国已分出的病毒株,有其抗原特异性,可能是一株新的EHF 病毒株。     

不同流行区流行性出血热病人血清电泳分析

用等电聚焦电泳分析流行性出血热(EHF)血清,发现EHF R_(22)毒株免疫兔血清和家鼠型EHF病人血清中有一特异的等电点(pI4.9蛋白),而30例野鼠型EHF病人血清,EHF陈株病毒免疫兔血清以及50份正常人血清皆没有此种蛋白,但部分肝炎病人和红斑狼疮病人血清中亦有p14.9蛋白,表明p14.9蛋白不是家鼠型EHF病人特有,若仅对EHF血清而言,pI4.9蛋白可能是抗家鼠型EHF病毒成份。     

从病人血清中分离的一株流行性出血热病毒的鉴定

<正> 从流行性出血热(EHF)患者急性期血清中,分离出一株能传代的相关病原因子.可通过除菌滤膜,在A—549细胞中不产生病变,以感染细胞作抗原,用朝鲜出血热(KHF)抗原检查为阳性的EHF患者血清,以间接免疫荧光法作效价滴定,两种抗原测定的结果基本一致.12例EHF患者双份血清测定的结果,11例     

用小白鼠乳鼠直接从湖北疫区黑线姬鼠分离到流行性出血热病毒及其鉴定

经间接免疫荧光法检查证实能与EHF病人恢复期血清起特异反应的黑线姬鼠肺标本,直接经脑内接种2～5日龄乳小鼠,结果分离到一株能在乳鼠体内增殖传代的EHF相关因子(HA_(1018)株)。经EHF单克隆抗体检查及排除呼肠孤病毒存在的可能性,证明HA_(1018)株是流行性出血热病毒。应用乳小白鼠直接从疫区黑线姬鼠分离EHF病毒是一个经济简便的途径,受染的小白鼠可作为模型动物。     

从流行性出血热患者血清中分离病毒的研究

应用Vero—E_6细胞从流行性出血热(EHF)患者血清中分离出两株病毒,经初步鉴定表明:病毒不耐酸,对脂溶剂敏感,不被5—碘脱氧脲嘧啶核苷所抑制,属RNA病毒;所分离病毒与流行性出血热病毒(EHFV)抗血清和EHF患者血清做间接免疫荧光抗体法试验(IFA)均为阳性,其感染性可被EHF恢复期病人血清中和;将该病毒感染细胞做超薄切片在电镜下查到EHF病毒颗粒。     

肾综合征出血热在中国的特点与研究进展

肾综合征出血热(HFRS),又称流行性出血热(EHF),下称出血热,是一种烈性的病毒性传染病,中国为重疫区,分布广泛,流行于27个省,自三十年代出血热发生在中国以来,学者们一直在努力不懈的研究,近年有较大的突破,获得多方面的进展,现分述如下:1　病原学近年来已取得了重大突破,南朝鲜李镐汪于1978年用非疫区黑线姬鼠首次分离到可传代的朝鲜出血热病毒,代表株为76株～118株。美国Fram-ch等最先将HFRS病毒76株～118株适应到人体肺癌传代细胞系(As49)增殖,随后Mccormick等又将该毒株适应到狨猴肾(Vero-E6)细胞中[1],我国于1981年也成功的分离…     

流行性出血热病原学和宿主动物的研究

流行性出血热(EHF)是对我国人民健康和生产危害较大的急性传染病,涉及20余省市,全国约一半人口受其威胁,一些非疫区的省市近年也相继出现病例,有的大城市还发生过暴发流行。为加强这项研究,1980年中国医学科学院成立了出血热研究领导小组,加强了院内外大协作,经过两年的努力在病原学研究上取得了突破性的进展。 1.EHF病毒在A_(549)细胞中适应传代成功。用黑线姬鼠分离并传至第8代EHF病毒(A_(809,A_(8010)已在A_(549)细胞中适应传代成功,这是我国首次证实的EHF     

细胞传代的流行性出血热(EHF)病毒对人的病原性

用传代细胞分离和传代的EHF 相关病毒或相关因子都是用免疫学方法证明它们同EHF 关系密切。它们与流行性出血热的病原学关系,即能否引起人体罹患EHF,至今未见报导。本实验室发生的实验室意外感染细胞传代的EHF 病毒,引起实验人员发生典型重症EHF,为解决这一问题提供了事实依据,现将其发生经过报告如下。     

四川省流行性出血热病毒的首次分离与鉴定

一九六○年,四川省南充地区经临床和病理学证实有流行性出血热(EHF)流行,二十余年来,疫区不断扩大,故对 EHF 病毒株的分离工作已刻不容缓。国内外学者先后用黑线姬鼠、大自鼠和细胞培养方法分离和适应传代病毒获得成功,为我省EHF 防治工作提供了经验。我们采用间接荧光抗体法(IFAT)检查了疫区黑线姬鼠     

流行性出血热(EHF)病毒的抗原性研究

<正> 流行性出血热(EHF)的病原研究,近年来进展较快。我国不仅从疫区黑线姬鼠和褐家鼠体内分离出EHF病毒,而且从病人血清中,直接应用A—549细胞分离病毒亦获成功。最近洪涛等证实,三种不同来源的病毒,在形态上是一致的。但我国各地发生的EHF,不仅临床症状表现轻重不一,其流行特