吗啡诱发条件性位置偏爱激活时大鼠伏隔核前额叶皮层p-CREB、c-Fos的变化

目的 探讨吗啡诱发条件性位置偏爱激活时大鼠伏隔核、前额叶皮层磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phospho-cAMP response element binding protein,p-CREB)和c-Fos表达的变化.方法 以剂量递增法连续皮下注射(SC)吗啡6d建立大鼠条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)模型,第7天用生理盐水替代吗啡训练大鼠10d,使形成的cPP逐渐消退,单次SC 4mg·kg-1吗啡激发已消退的CPP.采用免疫组化技术测定吗啡激发CPP重现时大鼠伏隔核、前额叶皮层p-CREB和c-Fos的变化.结果 (1)吗啡可使大鼠产生CPP效应,吗啡4mg·kg-1可使已消失的CPP效应激活;(2)与对照组相比吗啡诱发的CPP激活时大鼠伏隔核、前额叶皮层p-CREB(161.18±5.37,179.75±7.68)和c-Fos(176.63±8.42,185.11±5.61)的表达增加,与NS组比较差异有显著性(P＜0.05).结论 伏隔核、前额叶皮层p-CREB和c-Fos蛋白表达参与了吗啡的CPP重现.     

逍遥散对肝郁脾虚证模型大鼠中枢GluR1、GluR2表达的影响

目的 观察慢性束缚应激大鼠海马及杏仁核谷氨酸受体1(GluR1)、谷氨酸受体2(GluR2)表达的变化及逍遥散对其的影响.方法 雄性SD大鼠30只,按体重随机分为3组,每组10只:A组,正常对照组;B组,模型组;C组,逍遥散组.B、C组以慢性束缚方法制作应激模型,A组散养于各自饲养箱.自造模第1天开始,C组每日在束缚前1 h灌服逍遥散有效组分悬液;A、B组灌服等量蒸馏水.造模21 d结束后,各组大鼠麻醉后灌注取脑,冰冻切片后行GluR1、GluR2免疫组织化学染色.结果 模型组的GluR1在海马CA1和DG区表达增多;GluR2在CA1、CA3和DG区表达下降;GluR1和GluR2在基底外侧杏仁核(BLA)区均无明显变化.逍遥散可下调GluR1阳性细胞及免疫阳性物表达,上调GluR2阳性细胞数及免疫阳性物表达.结论 肝郁脾虚证模型大鼠α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体亚基GluR1和GluR2在海马的表达趋势不同;海马CA1区可能是肝郁脾虚证模型大鼠突触可塑性的最敏感部位;逍遥散对GluR1和GluR2表达的调节呈现出区域选择性、时相性和双向调节作用.     

80 Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱行为形成的影响

目的:探讨80 Hz电刺激伏隔核对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱形成的影响.方法:雄性SD大鼠30只,随机分为吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组、正常对照组,每组各10只.3组大鼠分别在不同条件下进行条件性位置偏爱实验,其中吗啡-刺激组、吗啡-假刺激组分别进行预测试、手术、训练、刺激、测试5个阶段实验,正常对照组进行预测试、手术、训练、测试4个阶段实验;在训练阶段,吗啡-刺激组和吗啡-假刺激组每天交替注射吗啡和生理盐水各1次,正常对照组每天注射2次生理盐水;在刺激阶段,吗啡-刺激组采用80 Hz电刺激伏隔核,吗啡-假刺激组不刺激伏隔核.分别记录预测试和测试阶段3组大鼠在白箱内平均停留时间,并给予比较.结果:吗啡-假刺激组训练后,在白箱内平均停留时间明显长于训练前和同期的正常对照组(P＜0.01),吗啡诱导的心理依赖模型建立成功.吗啡-刺激组在伏隔核刺激条件下完成条件性位置偏爱训练后,在白箱停留时间长于吗啡-假刺激组(P＜0.01),表明电刺激伏隔核显著强化了大鼠的觅药行为.结论:80 Hz电刺激大鼠双侧伏隔核可明显地促进吗啡诱导的位置偏爱行为的形成,表明该频率电刺激可强化吗啡诱导的心理依赖.     

左旋延胡索乙素对吗啡条件性位置偏爱大鼠伏核NR1蛋白表达的影响

目的研究左旋延胡索乙素(l-tetrahydropalmatine,l-THP)对吗啡诱发条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)大鼠伏核(nucleus accumbens,NAc)中N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基(NR1)表达改变的影响。方法大鼠随机分组,即正常对照组、模型CPP组、生理盐水治疗组及l-THP低(0.94 mg/kg)、中(1.88 mg/kg)和高(3.76 mg/kg)治疗组。正常对照组皮下注射等量生理盐水外,剩余各组大鼠采用颈背部皮下剂量递增法注射吗啡(起始剂量10 mg/kg,每天递增10 mg/kg,至注射10 d时为100 mg/kg),经CPP训练10 d,末次训练后48 h进行CPP检测确认CPP模型成功。各治疗组大鼠灌胃给药,每天1次,连续治疗6 d后进行CPP检测,之后处死大鼠并采用脑立体定位仪取大鼠NAc脑组织,利用Western Blot方法检测NR1基因的蛋白表达。结果经CCP检测,模型组大鼠在白箱(吗啡伴药箱)停留时间,与生理盐水组比较明显延长(P<0.05),而经l-THP 1.88和3.76 mg/kg治疗后,停留时间恢复至正常对照组水平。Western Blot检测到CPP大鼠NAc核团NR1的蛋白表达较正常对照组显著增加(P<0.01),l-THP 1.88和3.76 mg/kg治疗后,NR1蛋白表达被逆转。结论在大鼠吗啡精神依赖过程中l-THP可显著抑制NAc核团中NR1蛋白表达的增加,这一作用可能是l-THP加速大鼠吗啡CPP效应消退的机制之一。     

环境激发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠海马PSD-95的蛋白和DNA表达

目的：检测吗啡条件性位置偏爱（conditioned place preference，CPP）重现大鼠海马区突触后致密质-95（PSD-95）的蛋白和DNA表达，观察PSD-95对吗啡成瘾记忆的影响。方法：建立大鼠吗啡CPP模型，自然消退后，通过环境来诱发CPP的重现，应用免疫组化和RT-PCR的方法，观察吗啡CPP重现组大鼠海马区PSD-95的表达，并与吗啡CPP消退组，生理盐水对照组进行比较。结果：吗啡CPP环境激发组，吗啡CPP消退组与生理盐水对照组相比，以及吗啡CPP环境激发组与吗啡CPP消退组相比，海马区PSD-95的表达明显降低，差异具有高度显著性（P〈0．01）。结论：吗啡CPP重现和消退大鼠海马区PSD-95表达明显降低，海马区PSD-95可能未参与成瘾记忆。     

SD大鼠吗啡条件性位置偏爱易感性差异的内侧前额皮质多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制

目的:通过研究高低吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)易感性大鼠内侧前额皮质区(mPFC)的多巴胺D2受体和多巴胺转运体差异,以探讨吗啡精神依赖易感性差异的多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制.方法:160只雄性大鼠随机分为实验组(n=130)和对照组(n=30).建立大鼠吗啡CPP动物模型,根据吗啡处理后CPP值将大鼠分为高、中、低偏爱组.其中高、低偏爱组大鼠进入以下研究.分另q于末次注射后3 h,72 h和第14天处死高偏爱组、低偏爱组和对照组各8只大鼠,利用组织原位杂交技术检测mPFC脑区多巴胺D2受体(dopamine D2 recepter,D2R)mRNA和多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)mRNA的表达.结果:高偏爱组、低偏爱组和对照组的CPP预测试值无统计学差异(P=0.470);CPP训练后,末次注射后3 h、末次注射后72 h和第14天,高偏爱组的CPP值与预测试值的差值均高于低偏爱组(P=0.000).mPFC的D2R mRNA灰度值:末次用药后3 h,72 h和第14天,高偏爱组(125.43±2.90～142.92±3.32)均高于低偏爱组(122.25±2.20～136.67 ±5.39)(P=0.000).DAT mRNA灰度值:末次注射后3 h,高偏爱组(157.00±3.55)高于低偏爱组(150.69±3.12)(P=0.000);在末次注射后72 h,高偏爱组(145.15±3.69)高于低偏爱组(138.84±3.99)(P=0.000);在末次注射后第14天,高偏爱组、低偏爱组及对照组的mPFC区DATmRNA灰度值无统计学差异(P=0.458).结论:mPFC的D2R mRNA和DAT mRNA低表达可能与吗啡高易感性有关.     

SD大鼠吗啡条件性位置偏爱易感性差异的内侧前额皮质多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制

OBJECTIVE: To investigate the expression of dopamine D2 receptors (D2R) and dopamine transportors (DAT) located in the medial prefrontal contex (mPFC) in high and low conditioned place preference (CPP) rats, and to unveil the possible mechanism leading to different CPP susceptibilities. METHODS: One hundred and sixty male Sprague-Dawley rats were randomly assigned into an experiment group (n = 130) and a control group (n = 30). The experiment group was re-classified into 2 groups according to CPP values:high preference group (HP group) and low preference group (LP group). According to the execution time-points after the last administration, the HP and LP group was classified into a 3-hour group (3 h), a 72-hour group (J3d), and a 14-day group (J14d), respectively. At 3 hours, 72 hours, and 14 days after the final injection, rats were killed and cardio-perfused, and the brains were removed and sliced up coronarily. The mRNA levels of D2R and DAT in mPFC were determined with in situ hybridization. RESULTS: There were no significant differences of pretest scores staying at the non-preference chamber among the groups(P = 0.470). However, the test scores of the CPP time stayed at pretest natural preference in the HP group were significantly higher than those of the LP group(P = 0.000). In 3h, J3d, and J14d groups,the expressions of D2R mRNA in the HP group (125.43 +/- 2.90 approximately 142.92 +/- 3.32) were lower than those of LP group (122.25 +/- 2.20 approximately 136.67 +/-5.39) (P = 0.000). In 3h and J3d,the expressions of DAT mRNA in the HP group (157.00 +/- 3.55 approximately 145.15 +/- 3.69) were significantly lower than those of the LP group (150.69 +/- 3.12 approximately 138.84 +/- 3.99) (P = 0.000). In J14d, there were no differences among 3 groups in mPFC (P = 0.458). CONCLUSION: D2R and DAT may be correlated closely and underlie the different susceptibilities to morphine induced CPP.     

毁损伏隔核对吗啡给药大鼠条件性位置偏爱与脑功能的影响

目的：探讨双侧毁损伏隔核对吗啡给药大鼠条件性位置及大鼠脑功能的影响。方法：6-羟多巴胺注射毁损大鼠双侧伏隔棱，以条件性位置偏爱实验评价伏隔核对大鼠的影响；以Morris水迷宫实验评价对空间学习记忆功能的影响。结果：在条件性位置偏爱实验中，单纯给药组与毁损给药蛆、单纯毁损组、对照组相比较存在显著差异（P〈0．05）。在自然戒断状态下。单纯给药组条件性位置偏爱先增加后减少。水迷宫实验毁损组与对照组相比，毁损前后自身对照均无明显差异（P〉0．05）。结论：伏隔核中的多巴胺系统在精神依赖（大鼠表现为条件性住置偏爱）形成过程中起关键性作用。     

电针对吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应的作用研究

目的　观察电针是否能够消除吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应 ,探讨电针控制戒断后焦虑症状的神经生物机制是否与苯甲二氮卓结合抑制因子 (DBI) m RNA表达有关。方法　 2 4只 SD大鼠建立条件性位置偏爱模型后 ,随机分为正常对照组、吗啡依赖组和电针干预组 ,予以电针干预 ,干预后第 5 d和第 10 d,检测条件性位置偏爱 ,并处死大鼠 ,提取脑内 RNA,进行 RT- PCR。结果　第 5 d和第 10 d检测结果显示电针干预组偏爱时间明显减少 ,与吗啡依赖组比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ,电针干预组 DBI m RNA表达明显少于吗啡依赖组 (P<0 .0 5 ) ,而正常对照组与电针干预组没有统计学差异。结论　电针能消除吗啡依赖大鼠的条件性位置偏爱效应 ,其控制戒断后焦虑症状的神经生物机制可能与电针影响 DBI m RNA表达相关。     

吗啡条件性位置偏爱易感性差异的内侧前额皮质多巴胺D2受体和多巴胺转运体机制

目的 通过研究高低吗啡条件性位置偏爱(CPP)易感性大鼠内侧前额皮质区(mPFC)的多巴胺D2受体(D2R)和多巴胺转运体(DAT)表达差异,以探讨吗啡精神依赖易感性差异的D2R和DAT机制.方法 160只雄性大鼠随机分为实验组130只和对照组30只.建立大鼠吗啡CPP动物模型,根据吗啡处理后CPP值将大鼠分为高、中、低偏爱组.其中高、低偏爱组大鼠进入以下研究.分别于末次注射后3h,72h和第14天各处死高偏爱组、低偏爱组和对照组各8只,利用组织原位杂交技术检测mPFC脑区D2RmRNA和DAT mRNA的表达.结果 ①高偏爱组、低偏爱组和对照组的CPP预测试值差异无显著性(P＞0.05);CPP训练后,末次注射后3h、72h和第14天,高偏爱组的CPP值与预测试的差值均高于低偏爱组(P＜0.01).②mPFC的D2R mRNA灰度值:末次用药后3 h、72h和第14天,高偏爱组[(125.43±2.90)～(142.92±3.32)]、低偏爱组[(122.25±2.20)～(136.67±5.39)],两两比较高偏爱组的D2R mRNA灰度值均高于低偏爱组(P＜0.01);③DAT mRNA灰度值:末次注射后3h,高偏爱组灰度值(157.00±3.55)高于低偏爱组(150.69±3.12),差异有显著性(t=7.564,P:0.000);在末次注射后72 h,高偏爱组灰度值(145.15±3.69)高于低偏爱组灰度值(138.84±3.99),差异有显著性(P＜0.01);在末次注射后第14天,高偏爱组、低偏爱组及对照组的mPFC区DAT mRNA灰度值差异无显著性(P＞0.05).结论 mPFC的D2R mRNA表达低下可能与吗啡高易感性有关;mPFC的DAT mRNA表达低下可能与吗啡高易感性有关.     

伏隔核与腹侧被盖区毁损对药物诱导大鼠吗啡觅药行为的影响

目的:研究定向毁损伏隔核(nucleusaccumbens, NAc)与腹侧被盖区(ventraltegmentalarea,VTA)对药物诱导 戒断大鼠吗啡觅药行为的影响,分析NAc和VTA在大鼠成瘾 行为中的作用.方法:雄性SD大鼠通过吗啡强化形成条件性 位置偏爱后,使用直流电分别毁损NAc与VTA.15d后给予 sc吗啡诱导大鼠恢复位置偏爱行为,测量并比较毁损组与对 照组的位置偏爱得分.结果:NAc毁损组和与VTA毁损组大 鼠在注射吗啡诱导下未恢复对吗啡的条件性位置偏爱[NAc 毁损组(471±52)s,NAc对照组(673±53)s;VTA毁损组 (482±49)s,VTA对照组(700±46)s].结论:毁损NAc和 VTA能阻断注射吗啡诱导戒断大鼠恢复觅药行为.在成瘾药 物诱导戒断动物觅药行为中,NAc和VTA起重要作用.     

慢性吗啡给药诱导大鼠地点偏好和被盖腹侧区酪氨酸羟化酶同步变化

目的：探讨药物依赖行为和酪氨酸羟化酶在成瘾过程中的相互关系．方法：建立大鼠条件性地点偏好模型，使用免疫印迹法在整个成瘾过程中对腹侧被盖区和伏隔核内的酪氨酸羟化酶免疫反应性进行监测．结果：大鼠地点偏好和腹侧被盖区酪氨酸羟化酶水平均在实验第3日发生剧烈变化，之后表现出相似的变化趋势．结论：动物成瘾行为与酪氨酸羟化酶的变化密切相关，酪氨酸羟化酶的调节可能是吗啡成瘾的分子基础．     

海洛因诱导条件性位置偏爱大鼠颞叶联络皮层遥测脑电的分析

目的：分析海洛因诱导条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)大鼠颞叶联络皮层(temporal association cortex,TeA)脑电变化与觅药行为产生的关系。方法：运用大鼠脑立体定位技术对TeA区进行电极埋藏,通 过CPP视频系统结合脑电无线遥测技术,分别实时记录手术对照组(n=10)、海洛因诱导CPP组(n=20)大鼠TeA区黑、白 箱停留状态、黑-白箱穿梭和白-黑箱穿梭时脑电变化,分析其各脑电波百分比差异。结果：与手术对照组比较,海洛 因诱导CPP组大鼠在黑、白箱停留状态,左、右侧TeA区θ波百分比显著增加(P<0.05,P<0.01);大鼠黑-白箱、白-黑箱 穿梭时,海洛因诱导CPP组左、右侧TeA区δ波百分比显著减少(P<0.01),β波百分比显著增加(P<0.01),尤其表现为β2 波显著增加(P<0.05,P<0.01)。与海洛因诱导CPP组大鼠黑箱停留状态比较,黑-白箱穿梭时右侧TeA区θ波百分比显著 减少,β波百分比显著增加,尤其以β2波增加明显(P<0.01);与海洛因诱导CPP组大鼠白箱停留状态比较,白-黑箱穿 梭时右侧TeA区θ波百分比显著减少(P<0.01),但β波差异无统计学意义(P>0.05)。结论：海洛因诱导CPP大鼠右侧TeA 区快波(β,β2)频率增加,伴有θ波频率的相应减少,可能与海洛因诱导CPP大鼠觅药行为产生有关。     

丹参有效部位对吗啡依赖性小鼠位置偏爱效应的影响

目的观察丹参脂溶性有效部位对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱效应的影响,并对丹参有效部位进行初步鉴定。方法隔天分别sc吗啡和生理盐水,共6d,引起小鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。在训练阶段sc吗啡前30minip不同剂量的丹参脂溶性有效部位。建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)鉴定丹参脂溶性有效部位的主要成分。结果吗啡模型组小鼠在伴药箱停留时间明显延长,丹参脂溶性有效部位(40mg/kg)可使小鼠在伴药箱停留时间显著缩短(P<0.01)。经RP-HPLC法初步鉴定丹参脂溶性有效部位的主要成分为隐丹参酮。结论丹参脂溶性有效部位(隐丹参酮)能在一定程度上抑制吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱效应的形成。     

不同消退方法对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱行为的影响

目的：比较采用不同的消退方法对吗啡诱导条件性位置偏爱（CPP）的消退及随后小剂量药物诱发点燃的影响。方法小鼠采用交替隔日皮下注射吗啡（10 mg/kg）或等容量生理盐水后在伴药箱或非伴药箱训练共8 d,即接受吗啡和生理盐水训练共4个轮次,使小鼠形成CPP。采用不同的消退方法使小鼠CPP熄灭。方案1：自然消退。小鼠吗啡CPP形成后不做任何处理,待21 d后,每隔7 d进行1次测试,观察其消退程度。方案2：测试消退。小鼠吗啡CPP形成第2天起,每日进行1次消退测试观察其消退程度;方案3：训练消退。小鼠吗啡CPP形成第2天起,用生理盐水代替吗啡,小鼠每日分别在伴药箱和非伴药箱完成一轮训练,每训练2轮测试1次,观察其消退程度。待各组完全消退后间隔2～7 d,皮下注射5 mg/kg吗啡对小鼠CPP进行重建测试。结果吗啡处理诱导小鼠出现显著的CPP效应,自然消退组在CPP形成后第28天仍保持CPP行为,第35天CPP效应消失。消退测试6次,训练熄灭4轮均使得CPP效应消退。以上3种方案消退的小鼠均可被5 mg/kg的吗啡点燃。结论吗啡诱导的小鼠CPP模型可维持28 d以上（自然消退）,测试及训练消退的方法均可加速其消退,且5 mg/kg吗啡可诱导各组CPP效应的重建。     

Inhibition of the reinstatement of morphine-induced place preference in rats by high-frequency stimulation of the bilateral nucleus accumbens

Background Opiate addiction remains intractable in a large percentage of patients,and relapse is the biggest hurdle to recovery.Many studies have identified a central role of the nucleus accumbens (NAc...