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1.
具有肝转移倾向的结肠癌细胞亚系的筛选与鉴定   总被引:8,自引:2,他引:6  
目的 筛选人结肠癌SW480细胞中具有特定肝脏转移倾向的亚克隆,比较它与母系生物学特性的差异,为结肠癌肝转移机制的研究提供基本的实验材料.方法 采用外科原位接种、组织块细胞培养法从裸鼠体内获得SW480细胞系中具有肝脏转移倾向的亚克隆SW480/M5;体内体外实验验证它与母系细胞在生物学特性上的差异.结果 体内实验证明SW480具有广泛转移的潜能,而SW480/M5细胞只具有向肝脏转移的潜能;SW480/M5细胞原位瘤的质量较SW480细胞大且皮下瘤生长速度较快:体外实验证明SW480/M5细胞的克隆形成能力,体外增殖能力、体外运动及侵袭能力较SW480细胞强,而对FN的粘附能力较SW480细胞弱.结论 从结肠癌细胞系SW480中筛选出的细胞亚系SW480/M5转移方向明确,是结肠癌肝转移机制研究的理想细胞模型.  相似文献   

2.
目的 建立整体可视化结肠癌原位动物模型及转移模型,实时观察结肠癌发展、转移的规律.方法 将pEGFP-N1表达质粒转染入人结肠癌细胞株SW480中,建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)的结肠癌细胞株SW480/EGFP;裸鼠皮下接种SW480/EGFP细胞,利用肿瘤细胞表达EGFP的特点,借助整体荧光成像系统,并利用IPP5.0软件采集、分析结肠癌细胞发出的荧光信号,实时观察结肠癌细胞在裸鼠皮下的生长情况;利用结肠癌外科原位手术移植方法建立结肠癌原位及转移动物模型,应用病理学方法对结肠癌原位及转移动物模型进行评价和鉴定.结果 结肠癌细胞SW480/EGFP稳定、高效表达EGFP.皮下接种SW480/EGFP细胞后,可以在动物活体外实时观察肿瘤的皮下生长情况,并进行定量分析;利用外科原位移植的方法建立的结肠癌原位动物模型,成功率达到100%.手术后2周,裸鼠结肠原位成瘤未发现有转移情况,手术后6周,75%裸鼠发生了腹腔转移,50%发生了肝转移.通过病理学方法验证了可视化模型的可靠性.结论 整体可视化结肠癌动物原位及转移模型是研究结肠癌发展及转移的可靠有效的观察模型.  相似文献   

3.
目的 研究EZH2特异性shRNA对人结肠癌细胞株SW480细胞的抑制作用和化疗药物5-FU对其干预作用的影响。方法 体外将EZH2特异性shRNA表达载体转染SW480细胞,RT-PCR和Western blotting检测细胞EZH2 mRNA及蛋白的表达,M TT法检测细胞增殖活性;将靶向EZH2的shRNA表达的SW480细胞接种于裸鼠,5-FU对其进行干预,RT-PCR检测瘤组织EZH2 mRNA的表达。结果 与阴性对照组相比,基因沉默组EZH2 mRNA表达明显降低(P<0.01),EZH2蛋白表达明显降低(P<0.05);与空白对照组相比,基因沉默组细胞生长受到明显抑制(P<0.05);接种于裸鼠后,与正常组相比,5-FU基因沉默组与基因沉默组瘤组织体积、质量、EZH2 mRNA的表达均明显降低(P<0.01),与基因沉默组相比,5-FU基因沉默组EZH2 mRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论 靶向EZH2的shRNA表达在体外及体内均可显著抑制SW480细胞EZH2 mRNA和蛋白表达及细胞生长;5-FU能显著抑制体内EZH2基因沉默的SW480细胞EZH2 mRNA的表达。  相似文献   

4.
目的观察二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌SW 480细胞增殖的抑制作用。方法实验分DADS处理组和未处理组。MTT法、集落形成实验检测细胞增殖活性,光镜和电镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测周期分布,免疫细胞化学检测增殖细胞核(PCNA)表达改变。结果MTT和集落形成实验显示DADS作用SW 480细胞后,细胞生长抑制率呈浓度、时间依赖性增加,而集落形成率显著降低;组织学显示处理组细胞异型性降低,核质比下降,细胞器丰富;流式细胞仪分析显示DADS明显将细胞周期阻滞于G2/M期,且呈剂量依赖关系;免疫细胞化学显示处理组较未处理组细胞PCNA蛋白表达明显减弱(P<0.05)。结论DADS可体外抑制人结肠癌SW 480细胞增殖,使癌细胞阻滞于G2/M期,可能与下调PCNA蛋白的表达有关。  相似文献   

5.
目的探讨SU11248对结肠癌细胞系SW480中趋化因子受体CXCR4表达的影响。方法采用RT—PCR技术和免疫细胞化学染色法检测结肠癌细胞系SW480细胞中CXCR4 mRNA和蛋白的表达。采用MTT法检测SU11248对SW480细胞增殖的影响。用Westernblot检测SU11248作用后CXCR4蛋白及相关的信号调控分子的表达。结果SW480细胞中CXCR4 mRNA和蛋白呈阳性表达;SU11248对SW480细胞增殖和CXCR4表达有明显抑制作用;SU11248对调控CXCR4表达的相关的信号通路有抑制作用。结论SU11248可抑制结肠癌细胞增殖,降低CXCR4在结肠癌的表达。  相似文献   

6.
目的 观察肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)与其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)在结肠癌细胞SW480中的表达及其对裸鼠移植瘤生长的影响.方法 结肠癌细胞系SW480脂质体法稳定转染TWEAK反义寡核苷酸(ASODN)、错义寡核苷酸(SCODN)分别培养;采用四唑盐比色试验(MTT)法检测肿瘤细胞增殖情况,RT-PCR法检测TWEAK及Fn14 mRNA的表达情况,细胞免疫荧光法检测细胞中的TWEAK及Fn14蛋白的表达;分别将空白对照组、LF对照组、ASODN组、SCODN组肿瘤细胞注射裸鼠皮下,观测各组裸鼠移植瘤体积、相对肿瘤增殖率,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡指数;免疫印迹法检测肿瘤组织血管生长因子(VEGF)C、D的表达.结果 空白对照组、LF对照组、SCODN组之间结肠癌肿瘤细胞的增殖情况及裸鼠移植瘤体积、肿瘤相对增殖率及肿瘤凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05);与上述3组相比,ASODN组肿瘤细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),TWEAK与其受体Fn14 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),裸鼠移植瘤体积、相对肿瘤增殖率明显降低(P<0.05),肿瘤凋亡指数无明显变化(P>0.05),而VEGF-C、D蛋白表达量显著降低.结论 抑制TWEAK表达可能通过抑制VEGF的表达抑制结肠癌细胞及移植瘤增殖.  相似文献   

7.
目的:研究在结肠癌细胞系中Hrs与凋亡及增殖的关系。方法在结肠癌细胞系HCT?116和SW?480中下调Hrs蛋白表达,通过Incucyte、MTT法、软琼脂试验、FACS检测细胞凋亡与增殖情况。结果下调Hrs表达后,结肠癌细胞系HCT?116和SW?480凋亡明显增加,增殖及细胞活性均显著受到抑制。结论 Hrs与结肠癌细胞凋亡密切相关。  相似文献   

8.
目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽VBMDMP的抗人结肠癌作用。方法:体外培养人结肠癌细胞系(SW480)细胞和中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1)细胞,采用MTT比色法检测重组VBMDMP对SW480细胞选择性抑制增殖作用;胎盼蓝染色细胞计数法检测重组VBMDMP对SW480细胞和CHO-K1细胞生长曲线的影响;人结肠癌(SW480)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验观测重组VBMDMP体内抗人结肠癌作用。结果:重组血管基膜衍生多功能肽具有选择性抑制体外培养人结肠癌细胞系SW480细胞增殖和生长作用,呈剂量依赖性。而对CHO-K1细胞的增殖活性影响小。重组血管基膜衍生多功能肽对SW480细胞裸鼠异种移植瘤生长具有显著抑制作用,呈剂量依赖性。1 mg/kg、5 mg/kg和10 mg/kg重组VBMDMP的肿瘤生长抑制率分别为:63%,79%和83%;瘤重抑制率分别为:62%,66%和75%。其中10 mg/kg重组VBMDMP的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率均接近100 mg/kg环磷酰胺(CTX),高于20 mg/kg血管生成抑制剂烟曲霉素衍生物TNP-470。结论:重组血管基膜衍生多功能肽对人结肠癌细胞增殖和生长具有显著抑制作用。  相似文献   

9.
目的:观察胸苷激酶/丙氧鸟苷(thymidine kinase/ganciclovior, TK/GCV)、胞嘧啶脱氨酶/5 氟胞嘧啶(cytosine deaminase/5 fluorocytosine, CD/5 Fc)双自杀基因系统对人结肠癌的治疗效果。方法:采用培养细胞移植法,将人结肠癌细胞系SW480接种于裸鼠背部皮下,建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型,将32只裸鼠随机分为4组:对照组、TK/GCV组、CD/5 Fc组、TK CD联合治疗组,每组8只,TK CD采用逆转录病毒介导,采用瘤体内直接注射法,同时腹腔注射GCV、5 Fc治疗,观察各组小鼠的生存状况及肿瘤体积、瘤重、肿瘤生长抑制率、常规病理、生存期等指标,比较观察各治疗组的治疗效果及对荷瘤裸鼠存活的影响。结果:成功构建了SW480皮下移植瘤动物模型。各治疗组裸鼠人结肠癌移植瘤的生长均受到显著抑制,裸鼠存活期显著延长,联合基因治疗组效果更好,TK/GCV与CD/5 Fc有交互协同作用。结论:TK/GCV与CD/5 Fc对人结肠癌SW480细胞有明显抑制作用,TK/GCV、CD/5 Fc双自杀基因系统效果更强。  相似文献   

10.
二烯丙基二硫对结肠癌SW480细胞系生长影响的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的观察二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌SW480细胞系生长的抑制作用。方法体外细胞培养,用MTT法、集落形成试验进行观察,体内移植瘤抑制试验采用裸鼠移植瘤模型。结果用不同浓度DADS(30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL,60μg/mL,70μg/mL)处理SW480细胞48小时后,测得细胞生长抑制率为23.8%、43.7%、49.7%、60.9%、66.0%,该药的I%约为50μg/mL;用不同浓度DADS(20μg/mL,30μg/mL,40μg/mL,50μg/mL)处理SW480细胞lO天后,集落形成抑制率为48.7%、56.5%、61.6%、76.2%,IC50为20—30μg/mL之间;以30mg/kgDADS对SW480细胞裸鼠移植瘤进行实验,测得瘤重抑制率为62.86%,电镜检查可见结肠癌SW480细胞有早期凋亡改变。结论DADS对结肠癌SW480细胞系生长具有明显抑制作用。  相似文献   

11.
陈瑞新  徐青  于秀  陈玉泉  沈洪薰 《郧阳医学院学报》2006,25(6):343-345,348,F0003
目的:建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,研究复方参七汤对裸鼠肝转移模型的影响。方法:采用BALB/C裸鼠,Ls174 t人大肠癌细胞株,脾脏切除脾脏种植法建立裸鼠肝转移模型。给予复方参七汤颗粒饲料喂养,观察体态及肿瘤生长情况;采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测裸鼠循环血中CK20 mRNA表达;标本作病理组织学检查。结果:①脾脏切除脾脏种植法建立裸鼠结肠癌肝转移模型的成功率为100%,病理组织学证实肝转移癌细胞呈人结肠癌低分化腺癌特征;②实验组裸鼠肿瘤数目及重量明显低于对照组,P<0.05;③实验组裸鼠肝转移血中CK20 mRNA表达为0.398±0.143,明显低于对照组0.518±0.090,P<0.05。结论:复方参七汤可显著降低肝转移裸鼠血中CK20 mRNA表达,抑制裸鼠结肠癌肝转移的发生及发展,可作为大肠癌术后预防复发和肝转移治疗的手段之一。  相似文献   

12.
目的研究卡介苗联合树突状细胞(DC)及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对BALB/c裸鼠结肠癌肝转移的抑制作用。方法 60只BALB/c裸鼠腹腔内注射人结肠癌细胞株SW480建立结肠癌肝脏转移模型,随机分为对照组、DC-CIK组、卡介苗联合DC-CIK组(联合组),每组20只。联合组建模后第2天,鼠尾静脉注射卡介苗(12.5 mg/kg),隔日1次,共15次,并注射DC-CIK细胞免疫治疗,每周2次,共8次,DC-CIK组只注射DC-CIK细胞,对照组注射等量生理盐水。建模后30 d处死裸鼠,测量各组裸鼠原发灶的大小、肝转移瘤的数量,运用细胞角蛋白-18(CK-18)免疫组化单克隆抗体检测转移瘤组织来源;检测肿瘤转移灶的凋亡指数(AI)、肿瘤转移灶微血管密度(MVD)和血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度。结果各组脾脏的原发灶体积平均数分别为:对照组1.272 cm^3,DC-CIK组1.096 cm^3,联合组0.859 cm^3;与DC-CIK组、对照组比较,联合组脾脏原发灶体积明显缩小(P均〈0.05)。各组肝转移肿瘤为结肠腺癌CK-18(+);联合组肝转移瘤数量明显少于对照组和DC-CIK组(P均〈0.05)。联合组肿瘤转移灶AI高于DC-CIK组、对照组(P均〈0.05),血清VEGF浓度、MVD计数均明显低于DC-CIK组、对照组(P均〈0.05)。结论卡介苗联合DC-CIK细胞或单独应用DC-CIK细胞均能明显抑制裸鼠结肠癌生长及肝转移,但卡介苗联合DC-CIK细胞的肿瘤抑制效果更好。  相似文献   

13.
人前列腺癌骨转移动物模型的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的建立人前列腺癌裸鼠骨转移动物模型。方法采用人前列腺癌细胞系PC-3细胞悬液,分别通过胫骨髓腔注射、左心室注射及尾静脉注射3种方法接种于裸鼠体内,定期进行影像学观测;8~16周后处死动物行病理切片检查,观察骨转移情况。结果经影像学检查和病理组织学鉴定,PC-3细胞经胫骨髓腔注射后,该组裸鼠于第2周出现骨转移表现,转移率为100%(7/7);左心室注射后,至第12周影像学检测到骨转移率为28.6%(2/7),处死动物后经病理学检查骨转移率为42.9%(3/7);而尾静脉注射组影像学和组织病理学检查均未见骨转移(0/7)。结论胫骨髓腔注射和左心室注射两种方法均能在短期内建立人前列腺癌骨转移动物模型。  相似文献   

14.
目的:观察雷公藤甲素对人胰腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用,探讨其作用的分子机制。方法:选择健康BALB/c裸鼠于右后肢皮肤移植人胰腺癌SW1990细胞,建立裸鼠荷瘤模型,将建模成功的裸鼠分为模型组、吉西他滨组和雷公藤甲素组,每组10只,另选10只健康裸鼠作为对照组。测量各组SW1990胰腺癌荷瘤裸鼠体质量,取肿瘤组织称质量,计算肿瘤抑制率;采用免疫组织化学法检测各组裸鼠胰腺组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达情况;采用Western blotting法检测各组裸鼠胰腺组织中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-9和Caspase-3表达水平。结果:与吉西他滨组比较,雷公藤甲素组SW1990胰腺癌的肿瘤抑制率明显升高(P<0.05)。HE染色观察,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺癌肿瘤细胞增殖受到抑制。免疫组织化学检测,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺组织中Bcl-2表达水平和Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与模型组比较,雷公藤甲素组裸鼠胰腺组织中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:雷公藤甲素能抑制裸鼠肿瘤组织的生长,其机制可能与抑制胰腺肿瘤组织中Bcl-2的激活、促进Bax的表达、降低Bcl-2/Bax的比值、促使Caspase-9和Caspase-3激活及诱导胰腺癌移植瘤细胞凋亡有关。  相似文献   

15.
目的建立人结肠癌HT-29裸鼠肝转移模型,检测肝脏组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达。方法Balb/c裸鼠30只,腹腔内注射戊巴比妥麻醉,经脾脏注入人结肠癌HT-29细胞悬液,并切除脾脏,建立裸鼠肝转移模型。处死动物后观察肿瘤生长情况,并作病理学检查;采用RT-PCR方法检测裸鼠肝脏组织中hTERT mRNA的表达。结果30只裸鼠均发生人结肠癌肝转移,肝转移率100%,病理学证实肝转移发生,肝脏组织中hTERTmRNA表达阳性。结论脾种植HT-29细胞建立人结肠癌裸鼠肝转移模型,肝脏组织中hTERTmRNA阳性表达,提示hTERT在结肠癌肝转移早期诊治中的意义。  相似文献   

16.
目的:研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,阐明RNA干涉技术在卵巢癌生物治疗领域中的作用。方法:应用人卵巢癌细胞系SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:对照组(生理盐水)、空质粒对照组及重组质粒组(pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3)。应用电子穿孔仪将质粒转入裸鼠移植瘤内,观察重组质粒注射后第7、14、21和28天各组裸鼠皮下移植瘤体积变化。利用Western blotting检测重组质粒对STAT3蛋白表达的影响,采用HE及TUNEL染色方法观察肿瘤组织形态变化及细胞凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,与2个对照组比较,重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。重组质粒组瘤体内STAT3及CyclinD1、VEGF、survivin、c-myc蛋白表达明显低于2个对照组(P<0.01)。HE染色显示,重组质粒组肿瘤细胞出现大片细胞坏死,2个对照组肿瘤细胞以正常形态居多。TUNEL染色显示,重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡,2个对照组几乎均为TUNEL阴性反应细胞。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人卵巢癌细胞SKOV3裸鼠皮下移植瘤的生长。  相似文献   

17.
目的探讨重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA对胰腺癌细胞BxPC-3裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用.方法建立人原发性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为4组:(1)肿瘤对照组,未作任何处理;(2)空载组,即pSilencer4.1-CMV neo空质粒组;(3)T1组,即重组质粒pSilencer4.1-CMV neo-hTERT1-siRNA组;(4)T2组,即重组质粒pSilencer4.1-CMVneo-hTERT2-siRNA组).荷瘤裸鼠分组处理30d后,检测移植瘤体积及瘤重,HE染色光镜观察各组裸鼠皮下移植瘤及各脏器组织形态学,电镜观测各组移植瘤组织超微结构变化.结果 T1组及T2组肿瘤体积及瘤重均明显小于肿瘤对照组和空载组(P〈0.01).T1组、T2组移植瘤组织癌细胞密度减少,部分癌巢发生程度不等片状坏死.T1组和T2组BxPC-3细胞超微结构发生了明显变化,细胞表面微绒毛减少或消失,部分线粒体肿胀,同时见胞质密度增加,可见凋亡小体.结论重组质粒T1和T2均能在裸鼠体内有效抑制BxPC-3胰腺癌细胞皮下移植瘤的生长,促进胰腺癌细胞凋亡,具有体内抗胰腺癌的作用。  相似文献   

18.
三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移的抑制作用   总被引:5,自引:3,他引:2  
马丹  葛海燕 《重庆医学》2003,32(2):145-146
目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人结肠癌裸鼠肝转多的影响及其作用机制。方法 BALA/C-nu/nu裸鼠经脾脏接种人结肠腺癌LS-174T细胞建立人结肠癌裸鼠肝转移模型后,随机分为实验组和对照组,分别经尾静脉注射As2O3和生理盐水,观察各组生存期、肝转移结节的数目、大小,以及血清、腹水中癌胚抗原(CEA)的含量和转移癌细胞周期。结果 与对照组相比,As2O3可明显延长荷瘤鼠生存期,抑制肝转移,治疗组血清和腹水中CEA水平均低于对照组,转移癌细胞周期中G0/G1期比例上升,S期比例下降。结论 三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移有明显的抑制作用。  相似文献   

19.
两种大肠癌细胞株小鼠肝转移模型的建立及比较   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 建立人、鼠大肠癌细胞肝转移动物模型,为研究大肠癌肝转移机制及筛选、评估抗转移药物提供工具.方法 选取鼠大肠癌细胞株CT26和人大肠癌细胞株LoVo,分别接种于Balb/c小鼠及裸鼠脾脏内,观察其成瘤情况、肝脏转移率及生存期,并对两种模型进行初步比较.结果 两种细胞株均能复制出大肠癌肝转移动物模型,病理结果证实肝转移肿瘤符合典型的低分化腺癌特征.CT26细胞在免疫功能完整的小鼠体内,仍具有良好的成瘤性和转移率,较LoVo细胞建立的裸鼠肝转移模型转移率更高,成瘤时间更短.结论 成功复制出两种人鼠大肠癌细胞株肝转移动物模型,均能较好模拟大肠癌体内肝转移过程.  相似文献   

20.
目的探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌移植瘤生长和浸润转移的抑制作用,以及其与nm23H1表达变化的关系。方法将18只造模成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,每组6只:BPS缓冲液对照Ⅰ组,空质粒Ⅱ组,IL-24重组质粒Ⅲ组。观察各组裸鼠饮食、体重等一般状况,记录各组裸鼠移植瘤体积、绘制生长曲线。观察裸鼠肿瘤附近淋巴结转移情况,实验结束后根据瘤体重量计算肿瘤抑制率。应用RT-PCR法检测移植瘤IL-24的表达,并用免疫组化法nm23H1蛋白表达变化。结果基因重组质粒pDC316-hIL-24在裸鼠体内转染成功,且有明显的抑瘤效果,抑瘤率为42.9%,与对照组、空质粒组差异有统计学意义(P〈0.05)。IL-24重组质粒组肿瘤淋巴结转移较其他组少,差异有显著性(P〈0.05)。免疫组化结果显示,IL-24组的转移抑制基因nm23H1蛋白表达明显增多,与其余2组比较差异有统计学意义(P〈0.001)。结论重组质粒pDC316-hIL-24能明显抑制宫颈癌裸鼠肿瘤模型的生长,并可能通过上调nm23H1的表达发挥抗肿瘤生长和浸润转移的作用。  相似文献   

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