P43基因在造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断中的应用

目的 建立快速、特异、敏感诊断造血干细胞移植(HSCT)患弓形虫感染情况的DNA检测方法，并讨论其临床意义。方法 利用ELISA和PCR方法对56例造血干细胞移植受及20例正常供同时进行检测。结果 检测造血干细胞移植受56例，PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原，阳性各为10及7例；其阳性率分别为17．86％和14．3％。作为阴性对照的20名正常同时进行弓形虫的检测，其结果均为阴性。结论 体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点，可以作为造血干细胞移植患弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。     

异基因造血干细胞移植受者CMV检测方法的比较

目的:比较异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后早期有效检测巨细胞病毒(CMV)激活感染的方法。方法:分别应用荧光定量PCR和ELISA试剂盒检测57名allo-HSCT受者642份标本的血浆DNA负荷量和血清IgM抗体。结果:IgM抗体和DNA定量的阳性检出率为35.51%(228/642)和13.08%(84/642),连续阳性病例和临床诊断的符合率分别为33.33%(9/24)和87.5%(21/24),IgM抗体阳性检出率明显低于DNA定量,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光定量PCR检测allo-HSCT受者CMV早期感染可靠、简便快速,值得临床推广使用。     

肝、肾移植术后受者人巨细胞病毒巢式PCR检测

目的 探讨巢式PCR（Nest PCR)检测器官移植术后受体人巨细胞病毒（HCMV）DNA，并与传统ELISA法作方法学对照。方法 巢式PCR针对HCMV AD169株IEA基因设计内外两对引物，对59例肝、肾移植术后受体（肝移植27例、肾移植32例）血、尿标本进行HCMV DNA检测。分离血清作ELISA检测IgG、IgM。结果 血液Nest PCR阳性率肝移植62.9%，肾移植46.8%；ELISA法阳性率：IgG35.5%,IgM27.1%,IgG IgM18.6%，IgM阳性标本（16例）DNA检测皆为阳性，6例IgG、IgM皆阴性标本DNA检测仍为阳性。结论 巢式PCR是一种敏感特异、简便快速诊断HCVM感染的方法，灵敏度及特异性高于传统ELISA，能弥补ELISA的假阴性，更适用于临床检测器官移植术后HCMV感染。     

造血干细胞移植受者免疫抑制治疗 与巨细胞病毒感染的关系

目的：探讨异基因造血干细胞移植(HSCT)术后免疫抑制治疗个体外周血中巨细胞病毒(CMV)脱氧核糖核酸( DNA)与免疫抑制剂环孢素A(CsA)血药浓度变化的关系,并评价其潜在的临床应用价值。方法：选择行异基因HSCT的32例患者进行回顾性分析。移植前采用更昔洛韦预防CMV感染。移植后应用核酸扩增(PCR)荧光检测法定期进行CMV DNA监测。根据CMV DNA检测结果将患者分为CMV DNA阴性组和CMV DNA阳性组。用酶放大免疫技术（EMIT）定期监测CsA血药浓度,分析CMV DNA与CsA血药浓度的关系。结果：异基因造血干细胞患者CMV感染率为53.13%(17/32);DNA阳性组的CsA血药浓度明显高于CMV DNA阴性组（P＜0.05）;通过ROC曲线得出异基因干细胞移植患者使用CsA药物第7,14,21天时曲线下面积与0.5比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,分别对应的血药浓度为203.15, 215.55和302.65 ng/mL。结论：免疫抑制药物浓度可影响CMV DNA的动态变化,CsA血药浓度偏高可能是导致造血干细胞移植受者移植后对CMV易感的原因之一,适时监测CsA血药浓度对指导临床用药有一定的辅助价值。     

异基因造血干细胞移植患者发生感染的相关因素

目的 对异基因造血干细胞移植患者发生感染的相关因素进行探讨。方法 采用回顾性研究，收集2019年1月至2022年10月于郑州大学附属肿瘤医院/河南省肿瘤医院行异基因造血干细胞移植的124例患者的临床资料，依据随访3个月期间是否发生感染将病历资料分为感染组(30例)与未感染组(94例)。由研究者设计一般资料调查表，收集患者一般资料及临床资料。对两组患者一般资料及临床资料进行分析，并采用多因素logistic回归分析异基因造血干细胞移植患者发生感染的相关因素。结果 两组患者性别、年龄、体重指数、住院时间、原发病类型、供者类型、干细胞来源、移植前白细胞计数、移植前中性粒细胞百分比对比，差异无统计学意义(P>0.05);感染组受供者人类白细胞抗原(HLA)相合率低于未感染组，发生急性移植物抗宿主反应(GVHD)、乙肝表面抗体(HBsAb)阳性的百分数大于未感染组；经多因素logistic回归分析显示，发生GVHD、HBsAb阳性为异基因造血干细胞移植患者发生感染的独立危险因素(OR=20.314、93.024,P<0.05),受供者HLA相合率高为阻碍异基因造血干细胞移植患者发生感...     

异基因造血干细胞移植后结核感染的临床特征分析

目的 分析异基因造血干细胞移植后发生结核感染的患者的临床特征、易感因素及转归,探讨其临床诊治经验.方法 收集7例在第二军医大学长海医院血液科行异基因造血干细胞移植后诊断为结核患者的发病时间、症状、实验室检查、影像、治疗及转归情况,总结其临床特点和规律.结果 第二军医大学长海医院血液科自2004年起共进行异基因造血干细胞移植481例,其中7例患者移植后并发结核感染,女性2例、男性5例,平均年龄为(31.3±9.6)岁,移植后结核的发病率为1.46％.7例患者中肺结核5例(血行播散型2例)、结核性胸膜炎1例、结核性脑膜炎2例、膀胱结核1例.临床表现多样化,包括发热、咳嗽、尿路刺激症状、头痛.有急/慢性移植物抗宿主病病史1例,慢性移植物抗宿主病病史2例.7例患者发病后结核菌素试验(PPD)、结核抗体检测均阴性,有3例外周血结核T细胞斑点检测(T-SPOT)阳性,其中1例肺泡灌洗液涂片抗酸染色阳性.1例行膀胱镜活检病理示炎性肉芽肿,1例行肺穿刺活检病理示肉芽肿性炎症伴凝固性坏死.影像学表现:肺部CT表现为斑片状影3例,粟粒状结节影2例,胸腔积液1例;合并真菌感染1例.经抗结核治疗后临床治愈6例,死亡1例,有效率85.7％.结论 异基因造血干细胞移植患者出现感染症状时需警惕结核的发生,早期进行筛查,避免误诊、漏诊.早期诊断并及时予以正规抗结核治疗可以取得较理想的疗效.     

非血缘异基因造血干细胞移植的死因分析

目的分析非血缘异基因造血干细胞移植术后的死亡原因。方法对45例接受非血缘异基因造血干细胞移植治疗的恶性血液病患者的临床资料进行回顾性分析。结果随访结束时,生存25例,死亡20例,预期3年总生存(OS)和无病生存(DFS)率分别为55.6%和48.8%;死亡原因分别为疾病复发7例,急性移植物抗宿主病(GVHD)3例,肺部真菌感染5例,间质性肺炎5例。结论疾病复发、感染、间质性肺炎及GVHD是非血缘异基因造血干细胞移植的主要死因。     

异基因外周血造血干细胞移植后早期感染的防治

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植早期感染的防治方法。方法对采用异基因外周血造血干细胞移植治疗的97例患者临床资料进行回顾性分析。结果97例患者移植后早期感染率为92.8%(90/97)。首次感染的发生时间为移植后9 d内,中位时间为第6天,高峰时间移植后4~7 d,均在中性粒细胞绝对计数>0.5×109/L出现的时间之前,感染持续时间为3~10 d。感染部位最常见为口咽部、肠道。结论造血干细胞移植后早期感染多发生在粒细胞缺乏期,口咽、消化道是最常见感染部位。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病

目的：用外周血代替骨髓进行异基因造血干细胞移植治疗急性白血病。方法：采用Ｇ－ＣＳＦ动员与患者配型相合供者的外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ），用血细胞分离机采集ＰＢＳＣ后，对２例急性白血病患者进行移植。结果：移植后２例患者的造血功能恢复迅速，白细胞计数＞ｌ．０×ｌ０￣９／Ｌ。时间分别为＋ｌ４ｄ和＋１５ｄ，血小板计数＞２０×１０￣９／Ｌ。时间分别为＋９和＋８ｄ。染色体分析或ＡＢＯ血型检测证实均为供者型。结论：异基因外周血造血干细胞移植作为一种新的造血干细胞移植方法可以部分取代异基因骨髓移植。     

不同方法检测造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的研究

[目的]探讨造血干细胞移植后检测巨细胞病毒(CMV)感染的有效方法。[方法]分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法、荧光定量PCR(FQ-PCR)、间接免疫荧光法(IFA)检测11名干细胞移植受者,96份标本的血清IgM抗体、血浆DNA负荷量和外周血白细胞PP65抗原。[结果]ELISA、FQ-PCR和IFA的阳性检出率分别为15.63%、34.38%、36.46%。ELISA的阳性检出率明显低于FQ-PCR和IFA法。IFA与FQ-PCR两种检测方法对CMV感染的测定结果具有良好的一致性(kappa值为0.818)。[结论]IFA和FQ-PCR是检测造血干细胞移植受者CMV早期感染较为敏感的指标,具有良好的临床应用价值。     

孕妇及新生儿巨细胞病毒感染的分子生物学诊断

目的 :建立套式聚合酶链反应 ( n PCR)检测人巨细胞病毒 ( HCMV)。方法 :建立套式 PCR检测 HCMV DNA,同时结合病毒分离检测临床标本。结果 :在 2 3例新生儿肝炎综合征患儿中 ,10例病毒分离及套式 PCR均阳性 ;1例病毒分离阴性 ,但套式 PCR阳性。对 58例妊娠早期孕妇血标本进行检测 ,套式 PCR阳性率为 9% ,病毒分离阳性率则为 7%。结论 :套式 PCR是一种临床检测HCMV的快速有效手段。     

氟康唑与伊曲康唑预防造血干细胞移植真菌感染的效果

目的比较异基因造血干细胞移植患者应用氟康唑和伊曲康唑预防侵袭性真菌感染的疗效。方法回顾分析115例异基因造血干细胞移植患者,其中应用氟康唑60例,伊曲康唑55例,比较两组患者侵袭性真菌感染的发生转归情况。结果氟康唑组和伊曲康唑组侵袭性真菌感染的发生率分别为8.3%和5.5%,二者差异无统计学意义（P=0.719）,发生部位都以肺部为主,中位发生时间无明显差异;伊曲康唑副反应较大（P=0.038）。结论氟康唑与伊曲康唑预防异基因造血干细胞移植早期侵袭性真菌感染效果相近,氟康唑成本低、副作用少,更适合应用于异基因造血干细胞移植早期真菌感染的预防。     

移植前肺部感染对造血干细胞移植疗效的影响

目的观察移植前肺部感染对血液病造血干细胞移植疗效的影响。方法回顾性分析1999年8月-2012年3月我院21例血液病患者造血干细胞移植前出现肺部感染经治疗后接受造血干细胞移植的疗效,其中急性淋巴细胞白血病7例、急性非淋巴细胞白血病10例、骨髓增生异常综合征2例、急性再生障碍性贫血2例。接受异基因造血干细胞移植20例,1例接受自体造血干细胞移植。移植前肺部感染均为深部真菌感染或混合感染,抗真菌治疗后病灶消失或缩小至稳定时进行移植,肺部还有残存病症移植期间持续抗真菌治疗,病灶消失的预处理后给予抗真菌次级预防。结果 21例移植后28 d骨髓均增生活跃,骨髓像完全缓解,其中异基因造血干细胞移植嵌合体均为100%供者型。移植后14例未出现新的肺部感染,其中1例因白血病复发死亡;7例肺部感染加重,考虑为侵袭性深部真菌感染,经抗真菌治疗1~2个月后痊愈2例,显效3例;肺部感染恶化死亡2例,其中1例白血病复发。结论肺部感染的血液病患者经有效抗感染治疗,依然可以行造血干细胞移植;肺部真菌感染对造血干细胞移植成功率无明显影响。     

巨细胞病毒感染对重型β-地中海贫血儿童异基因造血干细胞移植后早期T细胞亚群的影响

目的探讨巨细胞病毒(CMV)对儿童重型β-地中海贫血(地贫)儿童异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后180 d外周血T细胞亚群的变化。方法对我院儿科造血干细胞移植中心2010年1月～2011年1月儿童重型地贫Allo-HSCT 35例病例半年后的T细胞亚群进行分析,比较有CMV(13例)和无CMV感染组(22例)在造血干细胞移植后早期T细胞的变化。结果半年内有CMV组CD8+比率高于无CMV感染组,但CD4+比率低。在CMV感染组伴随CD8+CD28+细胞比率降低,CD8+CD28-细胞比率和CD8+比率升高,同时发现CD8+与CD8+CD28-细胞比率呈线性相关性。结论重型β-地中海贫血儿童在异基因造血干细胞移植后,CMV感染后会导致CD8+CD28-细胞堆积,是构成CD8+细胞升高的主因,且两者比率呈线性相关。     

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒检测的探讨

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)活动性感染的有效检测方法。方法分别应用普通PCR、巢式PCR、流式细胞仪同步检测13例allo-HSCT后患者117份外周血标本的CMV DNA和pp65抗原。结果普通PCR 检测阳性率为44．4％,巢式PCR检测阳性率为24．8％,流式细胞仪检测阳性率为30．8%。临床活动性感染率为27．4％。普通PCR 检测阳性率与临床活动性感染率之间无明显相关性(r=0．207,P>0．05)。巢式PCR和流式细胞仪的阳性检出率之间的差异无统计学意义(P>0．05),它们和临床活动性感染有明显的相关性(r分别为0．518和0．529,P<0．05)。结论巢式PCR检测CMV DNA和流式细胞仪检测pp65抗原可用于allo-HSCT后CMV活动性感染的诊断。     

造血干细胞移植后淋巴细胞增殖性疾病1例报道并文献复习

目的提高对移植后淋巴细胞增殖性疾病（PTLD）的认识。方法报道1例淋巴瘤白血病患者在Bu/Cy/ATG方案预处理后行无关供者异基因外周血造血干细胞移植。结果移植后3个月发生PTLD,经及时给予免疫抑制剂减量、美罗华及抗病毒治疗后,患者病情好转,但最终因合并严重肺部感染、病情加重放弃治疗。结论PTLD是造血干细胞和实体器官移植后的一种少见但致命的并发症,如有可疑PTLD应尽早行局部淋巴结病理组织活检、EBV定量PCR血清检测或病理组织EBV-DNA检测,及早诊断,及时治疗。     

器官移植术后受者人巨细胞病毒的PCR检测

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３０例器官移植受者血、尿标本进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ检测。结果显示，１６例ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率５３．３％。提示ＰＣＲ是一种敏感特异、简便快速、能早期诊断ＨＣＭＶ感染的方法，适用于监视器官移植病人术后ＨＣＭＶ感染。     

活体长爪沙鼠幽门螺杆菌检测方法的建立

目的应用巢式PCR方法通过胃液活体检测长爪沙鼠幽门螺杆菌感染,从而建立可以持续监测长爪沙鼠幽门螺杆菌感染的检测技术。方法体外培养幽门螺杆菌并接种至长爪沙鼠体内,在感染后第10周使用普通PCR方法检测长爪沙鼠胃液,使用巢式PCR方法对长爪沙鼠胃液、胃组织、十二指肠内容物、结肠粪便进行检测;同时还利用快速尿素酶试验和血清ELISA方法等对比分析巢式PCR方法的准确性,上述PCR产物均经过测序验证。结果普通PCR方法检测胃液、巢式PCR方法检测胃液、胃组织、十二指肠内容物,结肠粪便以及快速尿素酶试验、血清ELISA检测方法检验结果阳性率分别为30%、100%、100%、90%、10%、100%和0%。比较不同检测方法的检测结果发现,胃液巢式PCR、胃组织巢式PCR和快速尿素酶试验均有100%的检测率,普通PCR检测胃液的方法、结肠粪便巢式PCR方法及血清学ELISA检测方法检测率均比较低。结论胃液巢式PCR检测方法由于其特异性、准确性及灵敏性较高等特点可以用于长爪沙鼠幽门螺杆菌的长期检测,特别是对于预防和治疗幽门螺杆菌感染的实验具有重要价值。