硒对氟斑牙发生的拮抗作用及其对Beclin1表达的影响

目的 研究硒对小鼠氟斑牙发生的拮抗作用,并检测其对自噬相关基因Beclin1表达的影响。方法 将36只2月龄费城癌症研究所（institute of cancer research, ICR）雄鼠,随机分为3组,每组12只,建立饮水型氟斑牙模型,用亚硒酸钠（Na2SeO3）进行干预,具体分组为： 对照组（ddH2O）、氟化钠组（200mg/L NaF）、硒组（2mg/L Na2SeO3+200mg/L NaF）,喂养8周后,观察氟斑牙发生情况,记录其长度并计算小鼠下颌切牙增长率;分离下颌骨后,进行micro-CT扫描,测量小鼠切牙唇侧硬组织厚度;H-E染色观察成釉细胞的变化,免疫组化方法检测Beclin1的表达。结果 氟化钠组氟斑牙检出率为100%,表现为小鼠切牙白垩色改变;硒组未发现明显氟斑牙症状,形态与色泽介于正常与极轻度之间;micro-CT结果显示,氟化钠组切牙唇侧硬组织厚度比对照组薄,硒组介于两者之间(P<0.01);H-E 结果显示,氟化钠组成釉细胞排列紊乱,极性消失;而对照组与硒拮抗组成釉细胞呈栅栏状,排列整齐规则;免疫组化结果显示,3组中成釉细胞从分泌期到成熟期Beclin1的阳性表达均呈逐渐增强的表达趋势,且Beclin1在氟化钠组表达明显强于正常组,硒组介于两者之间。结论 2mg/L硒离子浓度对氟斑牙的发生有一定拮抗作用;其作用机制可能是通过抑制成釉细胞自噬的发生,进而减轻过量氟对小鼠切牙毒性影响。     

氟作用下小鼠切牙成釉细胞的结构改变

目的观察氟作用下小鼠切牙成釉细胞结构的变化,探讨其改变在氟牙症形成过程中的作用。方法建立小鼠氟牙症模型。通过透射电镜观察成釉细胞的超微结构的变化。结果透射电镜示实验组成釉细胞细胞器减少,线粒体肿胀,Tome突极不规则或消失,釉质变薄。结论氟影响成釉细胞超微结构,继而导致其功能异常,与氟牙症形成有相关性。     

氟化物作用下小鼠切牙成釉细胞中胞内转导信号Smad4分布与表达的变化

目的 :观察不同程度的氟中毒对小鼠切牙成釉器中 Smad4表达、分布的影响 ,探讨氟斑牙的形成细胞内机制。方法 :分别用饮水加 5 0 mg/ L Na F、1 0 0 mg/ L Na F建立小鼠慢性氟中毒模型 ,SABC免疫组化法检测小鼠切牙成釉器细胞内 Smad4的分布与表达。结果 :在分泌前期和分泌期 ,两实验组切牙成釉细胞中 Smad4的表达均明显低于对照组。结论 :氟化物可能通过抑制对成釉细胞中 Smad4的表达来干扰其正常分化和行使功能     

鼠切牙牙胚发育晚期Shh及其受体的基因表达

目的 :观察信号分子Shh及其受体Ptc1、Ptc2在小鼠下颌切牙牙胚形态发育晚期的基因表达 ,以探讨Shh信号路径在细胞分化中的作用。方法 :制备昆明小鼠下颌切牙形态发育晚期标本 (E18.5～P 1.5 ) ,常规HE染色观察组织形态。以Shh、Ptc1、Ptc2cDNA为模板体外转录合成地高辛标记的cRNA探针 ,原位杂交法分析Shh、Ptc1、Ptc2mRNA在牙胚中的表达与分布。结果 :Shh与Ptc2mRNA表达方式相近 ,在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞和中间层细胞呈阳性表达。Ptc1mRNA在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞、中间层细胞及成牙本质细胞均呈阳性表达。结论 :在切牙牙胚形态发育晚期 ,Shh可能通过自分泌途径和旁分泌途径 ,参与了唇侧成釉细胞和成牙本质细胞分化。     

氟对小鼠成釉细胞Bcl-2及Bax表达影响的实验研究

目的 :通过研究氟对小鼠牙齿发育中凋亡抑制基因 Bcl- 2及 Bax表达的影响 ,探讨氟在牙齿发育中对成釉细胞的作用机制。方法 :给小鼠饮水中加入不同浓度的氟建立小鼠氟斑牙模型 ,采用 HE染色及免疫组化的方法观察氟对成釉细胞的影响 ,采用图像分析技术对免疫组化结果进行量化分析。结果 :给氟组小鼠 Bcl- 2及 Bax蛋白表达均明显下调。结论 :氟可能通过抑制 Bcl- 2及 Bax的表达而诱导细胞凋亡 ,从而影响釉质发育     

过量氟对大鼠切牙成釉细胞和成牙本质细胞中Bag-1表达的影响

目的研究过量氟对凋亡抑制基因Bag-1(Bcl-2相互作用蛋白1)蛋白表达的影响。方法选取20只健康Wistar大鼠,随机分为对照组和实验组。对照组正常饮水,实验组饲以含F-浓度100mg/L的氟化水。8周后处死动物,利用HE染色和免疫组化技术观察过量氟对大鼠切牙形态及Bag-1表达的影响。结果实验组大鼠切牙釉基质形成紊乱,成釉细胞和成牙本质细胞Bag-1蛋白表达明显低于对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论过量氟可抑制成釉细胞和成牙本质细胞中Bag-1的表达,影响釉质发育的调控机制,最终导致牙齿发育异常。     

三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较

目的 比较3种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果,为选择合适的染色方法提供参考。方法 选取出生后第5、7、14、21天的ICR小鼠,制备小鼠下颌第一磨牙冠状切片,采用H-E染色、Masson染色法和Gomori染色法进行组织形态学研究,比较染色结果。结果 在小鼠出生后第5天（PN5）至PN7为牙根发育起始阶段,H-E染色显示： 成牙本质细胞、成釉细胞及上皮根鞘细胞形态最为清晰;Masson染色法显示： 图片色彩鲜艳,牙釉质、牙本质及前期牙本质间层次分明;Gomori染色方法显示： 细胞核呈单一的蓝黑色,但软、硬组织对比度不佳。从PN14小鼠牙齿开始萌出到PN21牙根发育基本完成阶段,H-E染色显示： 成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜成纤维细胞形态最为清晰;Masson染色法显示： 牙骨质与牙槽骨间的胶原纤维排列规则,牙槽骨形态清晰;而Gomori染色效果总体不佳。结论 在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期,3种染色方法各有优势。H-E染色适用于各类细胞形态的观察,Masson染色适用于牙体硬组织及骨组织的观察,Gomori染色法总体效果不佳。     

砖茶型氟中毒大鼠的氟斑牙

为观察砖茶型氟中毒动物的切牙改变，用氟浓度２４５ｍｇ·Ｌ－１砖茶水喂饲大白鼠，９０天后成功复制出砖茶型氟中毒的动物模型。肉眼检查切牙显示，饮砖茶大鼠与阳性对照组均患有氟斑牙。体视显微镜、扫描电镜及电子能谱仪的观察结果证实高浓度砖茶水可导致氟斑牙     

砖茶型氟中毒大鼠的氟斑牙

为观察砖茶型氟中毒动物的切牙改变，用氟浓度２４５ｍｇ·Ｌ＾－１砖茶水喂饲大白鼠，９０天后成功复制出砖茶型氟中毒的动物模型。肉眼检查切牙显示，饮砖茶大鼠与阳性对照组均患有氟斑牙。体视显微镜、扫描电镜及电子能谱仪的观察结果证实高浓度砖茶水可导致氟斑牙。     

中间层细胞增殖与凋亡在釉质形成中的作用

目的检测小鼠牙釉质形成过程中中间层细胞的增殖与凋亡的表达情况,探讨细胞增殖与凋亡在釉质形成过程中的作用。方法制备出生后1、3、5、7、9、15和17天发育阶段的BALA/C小鼠牙胚的石蜡标本,采用SP免疫组织化学技术及原位末端标记法观察中间层细胞及成釉细胞分化各阶段细胞增殖及凋亡的表达情况。结果釉质形成早期,中间层细胞、成釉细胞均呈PCNA阳性表达,且两者在同期表达强弱程度上具有一致性,随着牙冠发育的完成,PCNA的表达减弱;凋亡在分化各期的成釉细胞中皆有表达,尤其在成熟期成釉细胞中表达明显增强,中间层细胞中可散见凋亡现象。结论细胞增殖与凋亡是牙齿正常发育所必需的重要调控机制,中间层细胞与成釉细胞间的增殖与凋亡在时空表达强弱程度变化上具有一致性,具有一定"量"的变化相关性,提示中间层细胞在釉质形态的正常发育过程中起到一定的调控作用。     

慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮TGF-beta1表达的影响

目的 :观察慢性氟中毒对小鼠切牙胚内釉上皮表达 TGF- beta1的影响 ,探讨TGF- beta1在氟牙症发生机制中的作用。方法 :给小鼠分别喂以含 0、5 0、1 0 0 ppm Na F的饮水 ,6周后免疫组化观察结果。结果 :图像分析显示加氟组 TGF- beta1的表达水平低于空白组。结论 :氟可能通过抑制 TGF- beta1的表达干扰内釉上皮的分化和基质分泌 ,导致氟牙症的发生。     

钕/钇铝石榴石（Nd：YAG）激光辅助治疗氟斑牙的临床应用研究

目的 探讨Nd：YAG（钕/钇铝石榴石）激光辅助治疗氟斑牙的临床效果.方法 将患着色型氟斑牙的患者分为轻度、中度、重度3组,每组选择27例,应用Nd：YAG激光辅助进行牙齿漂白治疗,记录漂白治疗前后牙齿色阶改变情况、患者对漂白效果的满意度、术中术后有无疼痛、是否发生口腔黏膜灼伤.结果 81例氟斑牙患者治疗前后患牙色阶比较差异有统计学意义﹙P＜0.05﹚,漂白效果显著,且不因性别、年龄、着色程度不同而影响疗效;81例患者术中疼痛发生率42.0%,术后24 h疼痛发生率9.9%,黏膜灼伤发生率23.5%,患者对漂白效果的满意率为92.6%.结论应用Nd：YAG激光辅助治疗氟斑牙,不破坏牙体组织.     

氟对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠的毒性作用及其对糖尿病进程的影响

目的:观察给予氟(F-)后糖尿病大鼠切牙的病理性改变以及氟对糖尿病大鼠生理指标的影响,阐明氟在糖尿病进程中的作用。方法:雄性Wistar大鼠54只,按体质量平均分成对照组、10mg·kg-1·d-1氟组和20mg·kg-1·d-1氟组,每组18只;按相应剂量灌胃给氟4周后,每组随机选12只,一次性腹腔注射50mg·kg-1体质量剂量的STZ,复制大鼠1型糖尿病模型(分别为STZ对照组、10 mg F-+STZ组和20mg F-+STZ组),与每组剩余6只大鼠(分别为正常对照组、10mg F-组和20mg F-组)同时继续给氟饲养4周(STZ对照组和正常对照组不给氟)。实验周期内用电子天平每周测量1次大鼠体质量;便携式血糖仪每周测量1次大鼠血糖;利用数码相机对大鼠牙齿的渐进性变化进行拍照;实验结束前采用腹腔注射胰岛素进行糖耐量实验(ITT),观察大鼠胰岛素的敏感性。结果:10mg F-和20mg F-组大鼠切牙面逐渐由棕黄色转向淡黄色,着色不匀,部分区域有白色不透光改变,牙面粗糙,呈现氟斑牙病变;与正常对照组比较,单纯氟中毒大鼠体质量无变化。腹腔注射STZ后的3组大鼠体质量均呈下降的趋势,20mg F-组降幅最大,但与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);腹腔注射STZ后各组大鼠血糖明显上升,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),20mg F-+STZ组大鼠血糖水平最高,但与STZ对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ITT结果,20mg F-组大鼠腹腔注射胰岛素0.5、1和2h时血糖水平显著高于正常对照组(P<0.05),而10mg F-组大鼠血糖水平虽高于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高剂量氟可短期内引起大鼠氟斑牙,并加剧糖尿病引起的大鼠体质量下降和血糖升高,明显降低大鼠胰岛素敏感性。     

砷氟联合中毒和单纯氟中毒患者的口腔疾病情况

本文报道了奎屯地区60例砷氟中毒患者及111例单纯氟中毒患者的口腔疾病情况。单纯氟中毒患者中龋齿和牙周病患病率较低,而氟牙症的患病率较高。氟牙症和龋齿的病情呈反比关系。砷氟联合中毒患者中龋齿和牙周病的患病率较高,而氟牙症的患病率较低。     

氟斑牙脱色后再矿化的临床研究

对３５例氟斑牙病人９５颗牙齿进行脱色后再矿化治疗,将全部病例分成两组,Ａ组用氟离子导入再矿化;Ｂ组行唾源性自然再矿化,同时在脱色前后及复查时测牙髓活力．结果：脱色处理后的氟斑牙和本身矿化不全者均可发生再矿化,唾源性再矿化需要一定的时间,而局部用氟可加速再矿化修复．因此,建议脱色后最好用离子导入式或局部涂氟,以促进再矿化修复     

氟对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠的毒性作用及其对糖尿病进程的影响

目的：观察给予氟(F－)后糖尿病大鼠切牙的病理性改变以及氟对糖尿病大鼠生理指标的影响,阐明氟在糖尿病进程中的作用。方法：雄性Wistar大鼠54只,按体质量平均分成对照组、10 mg/kg/d氟组和20 mg/kg/d 氟组,每组18只;按相应剂量灌胃给氟4周后,每组随机选12只,一次性腹腔注射50 mg?kg-1体质量剂量的STZ,复制大鼠1型糖尿病模型(分别为STZ对照组、10 mg F－+STZ组和20 mg F－+STZ组),与每组剩余6只大鼠(分别为正常对照组、10 mg F－组和20 mg F－组)同时继续给氟饲养4周(STZ对照组和正常对照组不给氟)。实验周期内用电子天平每周测量1次大鼠体质量;便携式血糖仪每周测量1次大鼠血糖;利用数码相机对大鼠牙齿的渐进性变化进行拍照;实验结束前采用腹腔注射胰岛素进行糖耐量实验（ITT）,观察大鼠胰岛素的敏感性。结果：10 mg F－和20 mg F－组大鼠切牙面逐渐由棕黄色转向淡黄色,着色不匀,部分区域有白色不透光改变,牙面粗糙,呈现氟斑牙病变;与正常对照组比较,单纯氟中毒大鼠体质量无变化。腹腔注射STZ后的3组大鼠体质量均呈下降的趋势,20 mg F－组降幅最大,但与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）;腹腔注射STZ后各组大鼠血糖明显上升,与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）,20 mg F－+STZ组大鼠血糖水平最高,但与STZ对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。ITT结果,20 mg F－组大鼠腹腔注射胰岛素0.5、1和2 h时血糖水平显著高于正常对照组（P<0.05）,而10 mg F－组大鼠血糖水平虽高于正常对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：高剂量氟可短期内引起大鼠氟斑牙,并加剧糖尿病引起的大鼠体质量下降和血糖升高,明显降低大鼠胰岛素敏感性。     

细胞增殖和DNA损伤在大鼠氟斑牙形成中的作用研究

目的:研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞增殖和DNA损伤的影响.方法:给雄性SD大鼠饮用含10,50,100 mg/L NaF的高氟水60 d和90 d,制备氟斑牙模型.用流式细胞术检测大鼠切牙细胞增殖周期的变化,用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤.结果:雄性SD大鼠饮用含50,100 mg/L NaF的高氟水60...