体外观察紫杉醇对肝癌HepG2细胞生长的影响

目的：观察微管稳定剂紫杉醇对肝癌HepG2细胞的作用。方法：检测紫杉醇对HepG2细胞作用的效应和剂量效应，在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化；用流式细胞仪分析细胞周期的改变。结果：随着作用时间及药物浓度的增加，紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制作用就越明显。70μmol/L紫杉醇作用72h，细胞生长抑制率达80％，形态学及流式细胞仪分析显示S期及G2／M期阻滞和细胞凋亡。结论：紫杉醇诱发的人肝癌细胞的凋亡与细胞DNA合成期及分裂期阻滞密切相关，这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

紫杉醇诱导食管癌细胞凋亡

目的：研究紫杉醇对食管细胞生长抑制及诱导凋亡的作用。方法：应用ＭＴＴ分析法，形态学观察，琼脂糖凝胶电泳，流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Ｅｃａ１０９进行了检测和观察。     

紫杉醇对人卵巢癌细胞凋亡的影响

目的 :探讨紫杉醇 (PTX)对人卵巢细胞凋亡的影响。方法 :应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪、活细胞视频观察和蛋白印迹免疫法进行检测和观察。结果 :癌细胞在PTX作用下 ,首先表现为G2 /M期阻滞 ,一定时间后出现细胞凋亡。凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质凝聚或断裂。细胞DNA裂解片段呈现典型的“阶梯状”排列的条带。凋亡抑制基因Bcl- 2在细胞凋亡过程中呈低表达并发生修饰反应 ,而调亡诱发基因Bax先呈高表达后表达降低。结论 :PTX诱发人卵巢癌细胞的凋亡与细胞分裂阻滞密切相关 ,Bcl- 2和Bax在PTX引起人卵巢癌细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

紫杉醇诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的：探讨紫杉醇抑制ＨｅＬａ细胞生长的机制。方法；经荧光染色，电镜观察细胞形态，ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果：紫杉醇作用２４ｈ经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色，作用４８ｈ细胞被染色红色，电镜观察可见细胞变小，染色质浓缩并产生凋亡小体，ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ未见明显的梯形条带，流式细胞仪检测紫杉醇作用２４ｈ细胞凋亡。结论；紫杉醇可诱导细胞凋亡，也可直接杀伤ＨｅＬａ细胞，而且以后者为主     

紫杉醇诱导人胃癌MGC803细胞凋亡作用研究

目的:研究胃癌发生过程中原位细胞凋亡活动以及紫杉醇对人胃癌细胞系MGC803诱导细胞凋亡的作用。方法:用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测了胃癌MGC803细胞凋亡,用紫杉醇处理培养胃癌细胞MGC803、显微镜下进行观察并且进行琼脂糖电泳,流式细胞仪检测细胞周期分布和端粒体酶活性检测。结果:癌旁对照组原位凋亡细胞增多,紫杉醇处理胃癌细胞可以诱导细胞产生典型的细胞凋亡变化。DNA发生断裂,琼脂糖电泳产生梯形条带,细胞阻滞于G2/M期,端粒体酶活性下降。结论:在体内肿瘤细胞凋亡降低,细胞分裂可加快,癌旁对照中细胞凋亡增多,体外紫杉醇可以诱导胃癌细胞系MGC803凋亡。     

紫杉醇诱导成骨肉瘤细胞凋亡

目的：探讨紫杉醇对成骨肉瘤细胞的杀伤作用及机制。方法：应用形态学观察，MTT分析法，DNA梯状电泳，流式细胞术检测术，研究紫杉醇对成骨肉瘤细胞系SOSP-9607的细胞毒效应。结果：紫杉醇作用后成骨肉瘤细胞形态改变明显，存活率明显下降。形态学观察，DNA梯状电泳，流式细胞术检测术证实紫杉醇可诱导成骨肉瘤凋亡。结论：紫杉醇在体外对成骨肉瘤细胞株SOSP-9607有较强的杀伤作用，并且这种作用主要是通过诱导凋亡实现的。     

紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡对Bcl-2基因家族的影响

,而此凋亡可能与Bad的表达上调和Bcl-2基因表达下调有关,而与Bax和Bcl-xl的表达无关.     

紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究紫杉醇对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法 0．001－1μmol/L的紫杉醇处理SGC7901细胞后,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率,通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量TRAP－银染法测定端粒酶活性变化。结果 不同浓度的紫杉醇对胃癌细胞均有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性,光镜及流式细胞术分析表明,0．01μmol/L的紫杉醇处理后24h,细胞即出现明显的凋亡形态特征及凋亡峰,对端粒酶活性的同步检测结果显示,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且随紫杉醇浓度增大,抑制作用逐渐增强,24h酶活性即显著受抑制,72h变为阴性。结论 紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一,端粒酶可作为肿瘤化疗的敏感性指标。     

紫杉醇纳米微粒对人胃癌细胞MGC803增殖和凋亡影响的研究

目的观察不同浓度（紫杉醇）PA纳米微粒在不同时间段对人胃癌MGC803细胞生长和凋亡的影响。方法应用MTF法测定不同浓度的PA纳米微粒、PA和5-FU对MGC803细胞分别在0、6、12、24、48、60、72h的细胞生长抑制率。流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性。结果MTT法显示不同浓度的PA纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖（16μg／mL作用72h时的抑制率达69％）,并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示PA纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于G2M期,16μg／mL作用48h明显,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降。结论PA纳米微粒可诱导人胃癌细胞MGC803发生凋亡且具有控释效应,可延长药物对胃癌细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变PA成分的生物学活性。     

OSTP增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用

目的 研究卵巢癌特异性结合肽（OSTP）及联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞生长及凋亡的影响.方法 体外培养卵巢癌A2780细胞,随机分为4组：溶剂对照组（1640和0.1％ DMSO组）、OSTP组、紫杉醇组、OSTP联合紫杉醇组.采用四甲基偶氮唑盐（MTT法）检测OSTP对A2780细胞生长的影响;用Annexin-V-FITC和PI双染法标记A2780细胞,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测OSTP以不同浓度作用于卵巢癌A2780细胞时,可对该细胞的生长起到抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.应用流式细胞技术检测细胞凋亡发现：不同浓度的OSTP（20、40、80、160、320μmol/L）对A2780细胞的凋亡率分别7.88％、8.348％、8.727％、9.393％和10.68％,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）,提示OSTP可诱导细胞凋亡.OSTP和紫杉醇联合应用,在不同的预处理组（加OSTP80μ mol/L 0、3、6、12h）后再加紫杉醇10μmol/L作用48h,结果发现细胞凋亡率分别是39.40％、53.09％、48.18％和45.62％,均高于OSTP和紫杉醇单独用药及两者的凋亡率相加值,且差异有统计学意义（P ＜0.001）.提示OSTP能增强紫杉醇诱导的卵巢癌A2780细胞凋亡作用.结论 OSTP对卵巢癌A2780细胞有生长抑制及凋亡作用,尤其是OSTP能增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,对于探讨和开发OSTP作为靶向化疗增敏剂治疗卵巢癌有良好的应用前景.     

奥沙利铂对 K562细胞体外生长的影响

目的:观察奥沙利铂对人白血病K562细胞的作用.方法:检测奥沙利铂对K562细胞作用的时间效应和剂量效应,在电镜下观察奥沙利铂作用后细胞形态变化;用流式细胞仪分析细胞周期的改变.结果:随着作用时间及药物浓度的增加,奥沙利铂对K562细胞的增殖抑制作用就越明显.0.016mmol/L奥沙利铂作用72h,K562细胞生长抑制率达85%,形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡.结论:奥沙利铂诱发的人白血病细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关.     

紫杉醇体外对人卵巢癌细胞的影响

目的探讨国产紫杉醇体外对人卵巢癌HO8910细胞凋亡的作用。方法MTT染色法测定HO8910细胞的生长,用流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。结果紫杉醇与HO8910细胞抑制作用呈浓度依赖关系,IC50=16．66umol／L。人卵巢癌细胞在紫杉醇作用下,没有出现明显凋亡。细胞分裂阻滞在G2M期。结论紫杉醇能有效抑制HO8910细胞生长,但是没有引起细胞凋亡。     

毫米波照射对人肝癌细胞株BEL 7404凋亡的影响

目的　研究 35 .8GHz毫米波照射能否诱导人肝癌细胞株BEL 74 0 4凋亡及其可能的机制。方法　选取BEL 74 0 4人肝癌细胞体外培养 ,随机分为 4组 ,采用荧光显微镜和电镜观察细胞核的变化 ;采用免疫印迹法检测半胱氨酸蛋白酶 (caspase) 3的底物多聚腺苷酸核糖基化聚合酶 (PARP)被剪切的比例。结果　BEL74 0 4细胞经毫米波照射后诱发的细胞死亡具有细胞凋亡的形态学特征 ,其中毫米波和 5 氟脲嘧啶 (5 Fu)联合组细胞凋亡比例增高 ;免疫印迹分析对照组中相对分子质量为 116× 10 3 的PARP几乎完全保持完整 ,经毫米波或 5 FU处理过的BEL74 0 4细胞中 ,116× 10 3 的PARP被切割成相对分子质量为 85× 10 3 的肽段 ,其中以毫米波和 5 Fu联合组被剪切的PARP比例最高。结论　毫米波照射可诱导BEL74 0 4肝癌细胞凋亡 ,与 5 Fu联合使用可明显诱导肝癌细胞凋亡     

丁酸钠对人绒毛膜癌JAR细胞生长抑制作用及其机制的实验研究

目的:探讨丁酸钠对人绒毛膜癌JAR细胞生长抑制作用及其可能机制。方法:通过流式细胞仪定量分析细胞周期分布及细胞凋亡;并采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测丁酸钠对Fas蛋白表达水平的影响。结果:丁酸钠对JAR细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖关系(P<0.05);丁酸钠组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01);随着丁酸钠浓度升高,Fas蛋白的表达水平逐步升高(P<0.05)。结论:丁酸钠可以抑制人绒毛膜癌JAR细胞的生长和诱导其凋亡,其机制可能与Fas蛋白的高表达有关。     

肝癌患者锌指蛋白281的表达水平及其对肝癌细胞增殖凋亡的影响

目的探讨肝癌患者锌指蛋白281(ZNF 281)的表达水平,并分析其对人肝癌细胞Hep G2增殖和凋亡的影响。方法收集河南大学第一附属医院2014年1月至2017年1月经手术切除后病理切片证实的肝癌标本82例及癌旁正常组织标本50例,采用免疫组化法检测肝癌和癌旁正常肝组织标本中ZNF 281蛋白表达情况,并分析ZNF 281阳性表达与临床病理参数[性别、年龄、肿瘤直径、国际恶性肿瘤分期(TNM分期)、淋巴结转移、甲胎蛋白(AFP)]的关系;采用荧光定量PCR检测上述组织中ZNF 281mRNA的表达情况;采用沉默RNA(siRNA) ZNF 281转染人肝癌细胞Hep G2,根据转染情况分为空白对照组(正常培养的Hep G2)、阴性对照组[转染ZNF 281基因非特异性沉默RNA(siRNA)干扰组]、siRNA ZNF 281组[转染ZNF 281基因特异性siRNA干扰组],并用荧光定量PCR检测转染后Hep G2细胞中ZNF 281 mRNA的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染后细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果肝癌组织中ZNF 281 mRNA的相对表达量高于正常肝组织(P <0. 05);肝癌组织ZNF 281蛋白阳性表达率为74. 39%,高于癌旁正常肝组织的18. 0%(P <0. 05),且ZNF 281蛋白阳性表达患者肿瘤直径> 5 cm,TNM为Ⅲ～Ⅳ期,淋巴结转移比例分别为65. 57%、73. 77%、45. 90%,高于ZNF 281蛋白表达阴性的38. 10%、38. 10%、14. 29%(P <0. 05)。siRNA ZNF281组Hep G2细胞中ZNF 281 mRAN表达量低于空白对照组和阴性对照组(P <0. 05); siRNA ZNF 281组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均高于空白对照组和阴性对照组(P <0. 05);空白对照组和阴性对照组Hep G2细胞中ZNF 281 mRAN表达量及细胞生长抑制率和细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论肝癌组织中ZNF 281蛋白及其RNA均呈高表达;沉默ZNF 281基因可抑制人肝癌细胞Hep G2增殖,诱导其凋亡。     

Study on Taxol in Inhibiting Human Leukemia Cell Proliferation andInducing Apoptosis

Objective: To explore the effects of Taxol in inhibiting human leukemia k562 cell proliferation and inducing apoptosis in vitro. Methods: Human leukemia K562 cells were treated with Taxol of different concentrations for 12-72 hrs. Cell proliferation was evaluated by MTT assay and morphological changes of apoptosis were examined by microscopy. Cell apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and DNA gel electrophoresis. Results: Growth of K562 cells was inhibited by Taxol with an IC50 value of 0. 84μg/ml. Typical nuclear condensation and apoptosis bodies were observed as early as 24 hrs after a 0.5μg/ml Taxol treatment; Apoptotic rate of the Taxol-treated K562 cells increased from 3.7% to 24.0% in 24 hrs. No DNA ladder was observed by DNA gel electrophoresis. Conclusion: Taxol could inhibit K562 cell growth and induce apoptosis in vitro.     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞凋亡及相关分子机制研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞凋亡时,细胞周期及细胞周期调节蛋白的变化,探讨As2O3抗肝癌作用的分子机制.方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率;透射电镜观察细胞形态变化及细胞凋亡情况;免疫细胞化学检测cyclinD1、cyclinA、p21蛋白的表达.结果:As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G0/G1、S期,与对照组比较,Aa2O3在诱导SMMC-7721细胞发生凋亡的同时,p21蛋白的表达水平显著增高(对照组1.128;As2O3组:3.794),cyclinD1、cyclinA蛋白的表达水平明显下降(对照组:3.647,2.833;As2O3组:1.133,1.179).结论:As2O3能干扰细胞周期的进程,诱导SMMC-7721细胞凋亡.其作用机制与上调p21蛋白及下调cyclinD1、cyclinA蛋白的表达有关.     

Rh_2诱导PC-3M细胞凋亡及对新基因GRIM-19表达的影响

目的:研究人参单体皂甙Rh2对PC-3M细胞株(激素非依赖性人前列腺癌细胞)的致凋亡作用及对新基因GRIM-19表达的影响。方法:采用吖啶橙染色观察其对PC-3M胞的促凋亡作用;RT-PCR和Westernblot方法分别检测用药后PC-3M细胞GRIM-19mRNA和蛋白的表达。结果:不同剂量的Rh2作用于PC-3M细胞24h吖啶橙染色结果呈阳性;RT-PCR结果与Westernblot结果相一致,Rh2随浓度的增加GRIM-19mRNA和蛋白表达逐渐增强,Rh2中低剂量组与对照组比较差异显著(P<0.05),Rh2高剂量组GRIM-19表达与对照组比较差异十分显著(P<0.01)。结论:Rh2诱导PC-3M细胞凋亡与上调GRIM-19基因和蛋白表达有关,其表达强度呈剂量依赖性。     

10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2生长增殖的抑制作用

目的:探讨10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2生长增殖的影响.方法:分别用不同浓度10-HCPT作用QGY和HepG2细胞48h和相同浓度作用不同时间,以MTT法检测细胞生长指数(GI),软琼脂克隆形成试验检测细胞克隆形成率.结果:10～360μg/ml和30～360μg/ml 10-HCPT分别作用QGY和HepG2细胞48h后,均有显著性生长抑制作用(P＜0.05),且呈量效依赖关系.100μg/ml 10-HCPT作用24h、36、48和72h对两种细胞均具有显著性抑制作用(P＜0.05).实验组两种细胞克隆形成率较对照组均显著降低(P＜0.05).结论:10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2体外生长增殖均具有抑制作用.     

发酵液中紫杉醇的萃取工艺研究

目的 研究发酵液中紫杉醇的萃取工艺.方法 通过高效液相色谱含量测定法比较了多种有机溶剂萃取紫杉醇的效果.结果 将发酵液过滤得菌丝反复冻融在研钵中研碎,按菌丝重量和加入甲醇体积1：10的比例（g：mL）进行甲醇搅拌提取,过滤后得甲醇提取清液;再将甲醇提取清液与发酵液滤去菌丝后得清液合并,合并液中加入1倍体积二氯甲烷,每次萃取4 h、萃取3次,紫杉醇萃取率最高.结论 筛选出了发酵液中紫杉醇的最佳萃取工艺.