参山固体饮料对人结直肠癌细胞HT-29增殖和迁移的影响

目的:探讨药食同源药膳产品参山固体饮料在体外对人结直肠癌HT-29细胞增殖、迁移的影响。方法:①将不同质量浓度的参山固体饮料、参山固体饮料中药总组分及参山固体饮料真菌总组分分别体外作用于人结直肠癌HT-29细胞,采用CCK-8法检测其对HT-29细胞增殖的影响。②将不同质量浓度的参山固体饮料(5、10、20 g·L~(-1))作用于人结直肠癌HT-29细胞,倒置显微镜观察HT-29细胞形态变化。③将人结直肠癌HT-29细胞分为对照组、参山固体饮料10 g·L~(-1)组,干预后采用Transwell小室迁移实验和细胞划痕实验检测HT-29细胞的迁移能力。结果:①与对照组和参山固体饮料真菌总组分组比较,参山固体饮料及参山固体饮料中药总组分能显著抑制HT-29细胞增殖,其IC_(50)值分别为11.382 g·L~(-1)、2.882 g·L~(-1);②与对照组比较,形态学观察发现参山固体饮料组HT-29细胞密度明显减小;③参山固体饮料干预后,HT-29细胞的迁移能力减弱(P<0.05)。结论:参山固体饮料及参山固体饮料中药总组分可以显著抑制人结直肠癌HT-29细胞增殖;参山固体饮料对人结直肠癌HT-29细胞迁移具有抑制作用。     

参山固体饮料对人结直肠癌细胞HT-29增殖和迁移的影响

目的:探讨药食同源药膳产品参山固体饮料在体外对人结直肠癌HT-29细胞增殖、迁移的影响。方法:①将不同质量浓度的参山固体饮料、参山固体饮料中药总组分及参山固体饮料真菌总组分分别体外作用于人结直肠癌HT-29细胞,采用CCK-8法检测其对HT-29细胞增殖的影响。②将不同质量浓度的参山固体饮料(5、10、20 g·L~(-1))作用于人结直肠癌HT-29细胞,倒置显微镜观察HT-29细胞形态变化。③将人结直肠癌HT-29细胞分为对照组、参山固体饮料10 g·L~(-1)组,干预后采用Transwell小室迁移实验和细胞划痕实验检测HT-29细胞的迁移能力。结果:①与对照组和参山固体饮料真菌总组分组比较,参山固体饮料及参山固体饮料中药总组分能显著抑制HT-29细胞增殖,其IC_(50)值分别为11.382 g·L~(-1)、2.882 g·L~(-1);②与对照组比较,形态学观察发现参山固体饮料组HT-29细胞密度明显减小;③参山固体饮料干预后,HT-29细胞的迁移能力减弱(P0.05)。结论:参山固体饮料及参山固体饮料中药总组分可以显著抑制人结直肠癌HT-29细胞增殖;参山固体饮料对人结直肠癌HT-29细胞迁移具有抑制作用。     

MiR-182在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞迁移能力的影响

目的 检测miR-182在结直肠癌中的表达情况及与临床病理参数的关系,探讨其对结直肠癌细胞迁移能力的影响。方法 实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测86例患者结直肠癌与对应癌旁组织中miR-182的表达情况,分析其与结直肠癌临床病理参数之间的关系。体外用miR-182 mimics和阴性对照转染结直肠癌HT-29细胞,将实验分为miR-182组、阴性对照组和空白组,transwell小室实验观察 miR-182对HT-29细胞迁移能力的影响。结果 MiR-182在结直肠癌的表达显著高于癌旁(P<0.001),其表达水平与患者的浸润程度(P=0.028)、淋巴结转移(P=0.003)、远处转移(P=0.006)和临床分期(P=0.005)密切相关, 而与年龄、性别、肿瘤类型、肿瘤大小和分化程度无相关性(P均>0.05)。体外实验进一步表明,miR-182过表达的HT-29细胞迁移数显著高于阴性对照组和空白组(P均<0.05)。结论 MiR-182在结直肠癌中高表达且与肿瘤的转移及进展有关,体外能增强结直肠癌细胞的迁移能力,提示miR-182可作为预防和治疗结直肠癌转移的潜在靶点。     

内皮素3基因对结直肠癌LoVo细胞迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制.方法 实时荧光定量PCR检测EDN3 mRNA在人结直肠癌组织及对应癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB) mRNA在结直肠癌细胞(CaC02、LoVo、HT-29)中的表达情况.将包装过载体pCDH-CMV-MCS-EFl-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞LoVo,MTS、克隆形成法、划痕法、Transwell检测EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变.Western blot检测LoVo中p-ERK1/2和t-ERK 1/2蛋白改变.结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低.表达EDN3基因的重组载体成功感染至LoVo细胞.MTS和克隆实验结果显示,实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P＞0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P＜0.01).Western blot检测结果显示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P＜0.01).结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌LoVo细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关.     

ORP8对结直肠癌DLD-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 观察和分析氧化固醇结合蛋白相关蛋白8(ORP8)蛋白对人结直肠癌DLD-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探究其影响机制.方法 通过在结直肠癌DLD-1细胞中转染ORP8表达质粒或特异性沉默siRNA上调和下调ORP8的表达,采用CCK-8、Transwell实验检测干扰或过表达ORP8对DLD-1细胞增殖...     

过表达MicroRNA-612对SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨miR-612过表达对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 选择宫颈癌SiHa细胞,利用Lipofectamine2000分别将miR-612模拟物、miR-612 NC转染至SiHa细胞,并分为miR-612 mimic组、miR-612 mimic-NC组和空白对照组。采用qRT-PCR法检测各组SiHa细胞miR-612的表达水平;CCK-8法以及流式细胞术分别检测各组细胞的增殖情况和细胞周期;细胞划痕实验以及Transwell实验分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力。结果 与miR-612 mimic-NC组和空白对照组比较,miR-612 mimic组miR-612的表达水平增高(P均<0.05),提示转染成功。转染48 h后,miR-612 mimic组在各时段的增殖活性较其他两组明显降低(P均<0.05);miR-612 mimic组G0/G1期细胞的比例较其他两组增加(P均<0.05),S期细胞的比例较其他两组减少(P<0.05);miR-612 mimic组的相对划痕宽度较其他两组增加(P均<0.05),细胞侵袭数目较其他...     

GRP78对结直肠癌细胞RKO增殖的影响

目的探讨葡萄糖调节蛋白78（GRP78）对结直肠癌细胞RKO增殖的影响。方法通过脂质体2000将靶向GRP78的质粒转入RKO细胞,Western—blot方法检测GRP78在RKO细胞中的表达,CCK-8方法检测细胞的增殖能力。结果转染后,与对照组相比,RKO细胞GRP78蛋白表达明显降低（F=115．17,q=5．41、15．29,P〈0．05）;同时,RKO细胞的增殖水平也明显降低（F=45．60,q=11．16、12．17,P〈0．05）。结论GRP78体外可促进结直肠癌增殖。     

过表达LncRNA-MEG3对肠癌细胞Lovo增殖活性的影响

目的用PCR扩增长链非编码RNA-MEG3,构建MEG3真核表达载体,将重组质粒转染人肠癌细胞Lovo,观察MEG3含量改变对Lovo细胞增殖活性的影响。方法用293细胞提取人总RNA,反转录制备cDNA,PCR扩增MEG3基因并构建克隆,阳离子脂质体法转染重组质粒至Lovo细胞,转染后48 h通过荧光标记物GFP观察细胞转染效率。RealTime-PCR检测转染后细胞内MEG3含量变化。CCK-8检测肿瘤细胞对数生长期基因干预对于增殖活性的影响。结果成功获取了MEG3基因并构建了重组表达载体;成功转染Lovo细胞,转染后48 h,细胞转染效率约为60%;转染后细胞内MEG3含量明显升高,与空质粒转染组比较,相对含量上升约6.8倍,差异有统计学意义（P〈0.01）;外源MEG3的高表达可抑制Lovo细胞增殖活性,基因干预后48、72 h,与未转染组及转染对照组细胞比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 LncRNA-MEG3可显著抑制Lovo细胞增殖活性。     

自噬抑制剂3-MA对结直肠癌细胞Jagged-1蛋白表达及其增殖的影响

目的:探索自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine 3-MA)对结直肠腺癌细胞Jagged-1蛋白表达及其增殖活性的影响。方法:实验分为对照组和3-MA药物组(5 mmol/L),利用CCK-8法检测细胞活性;用Annexin/PI双染法检测细胞凋亡率;采用免疫组化和Western blot检测Jagged-1蛋白在两组中的表达差异。结果:Western blot及免疫组化结果表明:3-MA作用后,与对照组比较,结直肠腺癌细胞内Jagged-1蛋白的表达显著被抑制(P<0.05);3-MA作用后,结直肠腺癌细胞增殖率为(85.23%±5.61%),与对照组增值率比较具有显著差异(P<0.05);3-MA作用后,结直肠腺癌细胞凋亡率为(11%±4.3%),与对照组凋亡率(4.5%±2.1%)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:3-MA可能通过抑制结直肠腺癌细胞中Jagged-1蛋白表达和结直肠腺癌细胞增殖、促进凋亡,从而发挥抗肿瘤生物学作用。     

抑制B7-H4表达对结直肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其机制

探讨抑制B7-H4表达对结直肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和迁移的影响,阐明B7-H4在结直肠癌发生发展中的作用。     

Galectin-3在结直肠癌中的表达及其对肠癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在结直肠癌中的表达及其对肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响。方法:采用Semi-quantitative RT-PCR和组织芯片免疫组化染色技术检测结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织和邻近正常肠粘膜组织中Galectin-3 mRNA和蛋白的表达情况。构建Lv-Galectin-3-EGFP表达载体和psi Lv-U6-Galectin-3 RNA干扰载体,分别转染SW480细胞,分别利用CCK-8试剂盒和Hoechst染色法观察Galectin-3的表达状态对肠癌细胞株增殖和凋亡的影响。结果:Galectin-3在结直肠癌组织和淋巴结转移癌组织中的表达水平显著高于邻近正常肠粘膜组织(P<0.01)。Galectin-3与结直肠癌患者的临床分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移等参数相关。体外细胞实验显示,上调Galectin-3表达可以促进肠癌细胞株的增殖,抑制其凋亡。结论:Galectin-3的表达上调参与结直肠癌的进展。     

光甘草定对结直肠癌细胞RKO增殖和凋亡的影响

目的 研究光甘草定(Gla)对人结直肠癌细胞株RKO增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 选取RKO细胞为研究对象,采用MTT比色法测定Gla对RKO细胞增殖的影响,通过Hoechst 33258染色检测RKO细胞凋亡情况;Western blot法检测RKO细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)、半胱天冬氨酸蛋白酶-9前体(Procaspase-9)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果 Gla抑制RKO细胞的增殖,并呈浓度与时间依赖性(P<0.05);Gla能调节MAPK信号通路JNK1/2,p38磷酸化的水平;Gla可诱导RKO细胞凋亡,下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Procaspase-9的表达水平(P<0.05),上调Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),而Caspase-8蛋白水平在各组变化均不明显.结论 Gla能抑制结直肠癌RKO细胞的增殖,并通过下调Bcl-2/Bax的比值诱导凋亡,其可能与MAPK信号通路的激活有关.     

HYALl基因过表达对乳腺癌细胞迁移能力和血管生成能力及增殖的影响

目的探讨透明质酸酶HYALl基因过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7和ZR-75-30的迁移能力和血管生成能力以及增殖的影响。方法应用双室联合培养技术，建立体外肿瘤侵袭和血管生成模型，观察过表达HYALl基因对乳腺癌细胞穿透ECMgel和诱导血管内皮细胞形成血管能力的影响；应用MTT和流式细胞术检测细胞的增殖能力变化。结果过表达HYALl基因的乳腺癌细胞MCF-7和ZR-75-30（实验组）穿透ECM的能力以及诱导血管生成的能力均强于对照组（P〈0．05）；但是，过表达HYALl基因的乳腺癌细胞增殖能力与对照组比较没有明显差异（P〉0．05）。结论过表达HYALl基因能促进人乳腺癌细胞在体外侵袭和诱导血管生成，但是对乳腺癌细胞的增殖没有影响。     

健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探究健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法从人结肠癌Lovo细胞株中获得结直肠癌干细胞,细胞表面标记物双标法流式检测鉴定结直肠癌干细胞。制备低、中、高剂量的含药血清,设立低、中、高剂量组,正常组及对照组。采用CCK-8法及Transwell实验观察健脾消癌方对结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果流式细胞术结果显示微球体细胞大量表达CD133、CD44,并较贴壁细胞多。CCK-8法及Transwell实验结果发现低、中、高剂量组细胞较正常组及对照组细胞增殖、迁移及侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组细胞较中、低细胞增殖能力减弱,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组较低剂量组迁移及侵袭能力减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论健脾消癌方可抑制结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭的能力,且高剂量组抑制作用明显,可通过降低癌细胞增长能力,减少癌细胞扩散抑制结肠癌的发展。     

胰岛素样生长因子Ⅱ表达与结直肠癌细胞的增殖和凋亡

目的 :探讨胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )表达水平与结直肠癌细胞增殖、凋亡 (程序性死亡 )的关系及其意义。　方法 :结直肠腺癌患者 36例 ,术前纤维结肠镜直视下采集癌和正常结直肠粘膜组织标本。以RT PCR法检测IGF ⅡmRNA。S P法检测IGF Ⅱ ,多媒体图文分析系统定量阳性染色区灰度值。S P法检测增殖细胞核抗原(PCNA) ,计算PCNA标记指数。TUNEL法检测凋亡细胞 ,计算凋亡指数。　结果 :结直肠癌组织中IGF ⅡmR NA表达值 (0 .6 5± 0 .17)显著高于正常粘膜 (0 .4 7± 0 .2 2 )。IGF Ⅱ蛋白水平 (2 0 .2 9± 8.0 4 )亦显著高于正常粘膜(13.81± 5 .86 ) ,二者呈良好线性相关 (r =0 .74 74 ,P <0 .0 1)。IGF Ⅱ灰度值与PCNA标记指数、凋亡指数高低亦显著相关。　结论 :结直肠癌组织中IGF Ⅱ高表达能影响癌细胞的生物学特性 ,可能有助于判断患者的预后     

过表达KLF7对食管鳞状癌细胞的增殖和迁移的影响

目的 探索Kruppel-like factor 7(KLF7)对食管鳞癌细胞Eca109细胞增殖、迁移和周期的影响。方法 利用生物信息学方法研究KLF7在食管鳞癌组织中的表达模式及其与患者预后、病理分级的关系。利用Real-time PCR、Western blot与细胞免疫荧光技术研究食管鳞癌细胞中KLF7的表达模式与亚细胞定位。利用KLF7过表达质粒(pcDNA-3.10-KLF7)细胞转染实现KLF7在Eca109食管鳞癌细胞中过表达。采用平板克隆计数和CCK-8检测研究细胞增殖能力,利用Transwell研究细胞迁移能力,利用流式细胞术检测细胞周期。结果 KLF7在食管癌组织和细胞中均有表达,其表达水平与患者病理分级显著相关(P<0.05),与患者生存率无显著相关性。食管癌细胞系(Eca109和EC9706)中KLF7的表达水平显著高于正常食管上皮细胞(Het-1A,P<0.05),并且Het-1A细胞中KLF7高表达于细胞质和细胞核,而2种食管癌细胞Eca109和EC9706中KLF7仅高表达于细胞核,在Eca109细胞中过表达KLF7后改变细胞周期、促进细胞的...     

miR-9过表达对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨miR-9对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:慢病毒悬液感染鼻咽癌C666-1细胞,流式细胞仪分选并鉴定,获得表达miR-9的C666-1细胞及对照细胞,应用体外划痕实验、Transwell侵袭实验分析miR-9对鼻咽癌C666-1细胞体外迁移、侵袭能力的影响。结果:制作划痕12h后,穿越划痕的C666-1/miR-9细胞数(47.167±2.552)显著少于C666-1/PLVTHM细胞(95.917±3.118)(t=41.912,P<0.01);接种12h后,穿透基质胶的C666-1/miR-9细胞数(32.667±3.257)显著少于C666-1/PLVTHM细胞(81.833±4.366)(t=31.270,P<0.01)。结论:miR-9过表达能抑制鼻咽癌细胞的体外迁移和侵袭能力,在鼻咽癌中发挥抑癌作用。