上皮钙黏蛋白和连环蛋白120在鼻咽癌组织中的表达及相关性研究

目的：研究鼻咽癌组织中上皮钙黏蛋白（E-caol）和连环蛋白120（P^120ctn）的表达情况,探讨它们的相关性及与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学二步法,检测经4％甲醛固定,石蜡包埋的56例鼻咽癌标本和15例正常鼻咽黏膜上皮标本中Ecad、P^120ctn的表达情况。结果：56例鼻咽癌组织中Ecad、P^120ctn异常表达率分别为64．29％、67．86％,主要表现为细胞膜表达减弱,细胞膜表达减弱伴细胞胞质表达;15例对照组正常鼻咽黏膜上皮Ecad、P^120ctn异常表达率均为6．67％,均差异有统计学意义（P〈0．01）。鼻咽癌组织中E-cad、P^120ctn在低分化癌组的异常表达率（71．43％、85．71％）明显高于高中分化癌组（42．86％,36．29％）;在有颈部淋巴结转移组的异常表达率（80．00％、85．00％）明显高于无颈部淋巴结转移组（52．78V0、58．33％）;在Ⅲ～Ⅳ期鼻咽癌组的异常表达率（76．92％、84．62％）明显高于I～Ⅱ期鼻咽癌组（46．66％、53．33％）;均差异有统计学意义（P〈20．05）。E—cad与P^120ctn在56例鼻咽癌组织中共同表达和共同异常表达分别为12例和30例,有显著一致性,呈正相关（r=0．5217,P〈0．01）。结论：Ecad与P^120ctn的异常表达与鼻咽癌的分化程度、临床分期、颈部淋巴结转移密切相关。它们共同参与鼻咽癌发生、发展、浸润及转移过程。     

抑癌基因PTEN、P^21wafl在鼻咽癌中的表达及意义

目的：探讨抑癌基因PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome10)，P^21wafl在鼻咽癌发病中的作用及其与EB病毒的关系。方法：分别应用免疫组化(SP)染色法检测鼻咽癌组，慢性鼻咽炎组，鼻咽部不典型增生或癌前状态组中PTEN、P21wafl的表达及分布情况。结果：慢性鼻咽炎组PTEN蛋白阳性表达率(20／25，80．0％)高于不典型增生或癌前状态组(8／11，72．7％)及鼻咽癌组(32／78．41．0％)。Ⅰ～Ⅱ期鼻咽癌PTEN蛋白阳性表达高于Ⅱ～Ⅳ期。慢性鼻咽炎组P^21wafl蛋白阳性表达率(6／25，24．0％)低于不典型增生或癌前状态组(4／11，36．4％)和鼻咽癌组(60／78，76．9％)。Ⅰ～Ⅱ期鼻咽癌P^21wafl蛋白阳性表达率低于Ⅲ～Ⅳ期，发生淋巴结转移鼻咽癌组P^21wafl阳性表达率高于无淋巴结转移组的阳性表达率。结论：PTEN的失活或降低与鼻咽癌发生及临床分期有关，是鼻咽癌发生发展的早期事件。P^21wafl蛋白表达增多与鼻咽癌发生及发展进程、临床分期、淋巴结转移有关，可能是鼻咽癌发生、发展过程中的晚期事件。     

环氧化酶-2蛋白在鼻咽癌组织中的表达

目的 探讨环氧化酶-2（COX-2）蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测45例鼻咽癌组织及20例鼻咽黏膜不典型增生组织中COX-2的表达。结果 鼻咽癌组织中COX-2蛋白阳性表达率为71．1%（32／45），鼻咽黏膜不典型增生中COX-2蛋白阳性表达率为10．0%（2／20），两者比较差异具有统计学意义（P〈0．001）。结论 COX-2蛋白在鼻咽癌组织中表达增高，表明COX-2可能在鼻咽癌的发生发展中起重要的作用。     

COX-2、PCNA及p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的：研究COX-2、PCNA及p53的基因产物在鼻咽癌组织中的表达及与其生物学行为和生存率之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌及30例正常鼻咽组织中COX-2、PCNA 及p53的蛋白表达水平。结果:（1） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 及p53阳性表达率分别为90％、75％和68％ ,明显高于正常鼻咽组织;（2） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA及p53的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.05);（3） COX-2、PCNA及p53的表达密切相关;（4） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 阳性表达和生存率呈负相关,是鼻咽癌复发的显著预后因素。结论:鼻咽癌组织中COX-2、PCNA表达水平明显上调,与鼻咽癌的发生发展及预后不良有关,免疫组化检测COX-2、PCNA表达可用以判断鼻咽癌患者的预后。     

喉癌组织Rb、P^53、C—myc和HPV基因测定及意义

采用PCR技术检测了33例喉癌及4例正常喉组织Rb、P^53、C-myc、HPV基因的异常状况，结果：P^53基因突变率为69．69％（23／23）（P＜0．01），Rb基因突变率为48．48％（16／33）（P＜0．01），C－myc基因扩增率58．62％（17／29）（P＜0．01），HPV阳性率为72．72％（24／33）（P＜0．01）。结合病毒感染和重度吸烟探讨发生喉癌因素的相互关系。研究表明：HPV感染和吸烟与C－myc基因激活和Rb、P^53基因突变失活有关，是导致喉癌发生发展的的多因素、多基因、多阶段的相互作用。     

鼻咽癌中环氧化酶-2和潜伏膜蛋白-1的表达和相互关系的初步研究

目的：探讨鼻咽癌组织中的环氧化酶2（COX-2）、潜伏膜蛋白-1（LMP1）的表达情况,同时分析了两者之间的关系。方法：53例鼻咽癌活检标本,8例鼻咽部慢性炎症常规石蜡切片标本作为对照组,用SP免疫组织化学法检测COX-2、LMP1的表达,采用sPsS12．0统计软件对实验数据进行统计。结果：在鼻咽癌组织中,COX-2阳性表达率为71．70％（38／5a）;LMPI阳性表达率为66．04％（35／53）。COX2、LMP1的表达在颈部淋巴结转移组中均明显高于无颈部淋巴结转移组（P％O．05）,但在年龄、性别、病理类型、临床分期的分组中均差异无统计学意义（均P〉0．05）。在鼻咽癌组织中,LMP1和COX-2的表达存在正相关（7—0．797,P〈0．01）。结论：COX-2、LMP1在鼻咽癌组织中均有表达。COX2、LMP1在鼻咽癌中的表达和鼻咽癌颈淋巴结转移存在显著相关性,但和年龄、性别、病理类型、临床分期无相关性。COX-2和LMP1在鼻咽癌组织中的表达呈正相关。LMP1可能通过多途径上调COX-2的表达,从而促进鼻咽癌颈部淋巴结转移。     

中耳胆脂瘤组织中的Ras蛋白的表达及病理意义

目的观察Ras蛋白在继发性中耳胆脂瘤组织中的表达活性及其病理意义。方法32例胆脂瘤上皮标本和12例正常面部表皮标本，免疫组织化学法（SP法）分别检NRas蛋白表达水平，并应用HPIAL-2000高分辨图象分析系统进行半定量分析，比较不同组织中的Ras活性表达差异。结果Ras蛋白的免疫阳性染色物呈棕黄色颗粒。在胆脂瘤上皮细胞，阳性反应物位于胞膜者28例（28／32）；同时位于胞膜、胞浆者2例（2／32）；仅存在于胞浆者2例（2／32）。在正常表皮细胞，阳性反应物主要位于胞膜，以基底层细胞着色为主。两组的阳性反应物平均吸光度（A值）分别为0．826和0．438，组间差异具有统计学意义（P〈0．001）。结论继发性中耳胆脂瘤上皮组织中Ras蛋白的表达活性明显升高，提示胆脂瘤上皮具有高度的增殖活性。     

转录组-芯片数据联合分析鉴定鼻咽癌发生潜在关键信号通路和调节基因

目的　本文主要探究鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma，NPC）发生的潜在关键基因和信号通路。方法  通过GEO数据库中2个转录组测序数据以及1个芯片数据，总计包括57例鼻咽癌数据和9个正常对照组数据，筛选出差异表达的基因，再进行GO和KEGG等分析。结果　筛选得到580个共有上调表达基因，52个共有下调表达基因。上调基因主要与表皮、腺体和皮肤等与上皮发育相关的信号通路有关。下调基因主要与白细胞凋亡过程的负调控、Notch信号通路等有关。利用蛋白互作网络筛选，结果显示这些关键蛋白主要与G-蛋白耦合受体信号通路，趋化因子传导信号通路等有关。结论　通过联合分析转录组和芯片数据，发现了与鼻咽癌的发生有关的信号通路和关键基因，为鉴定鼻咽癌的发生发展提供了重要依据。     

EB病毒基因BARF1在鼻咽癌中的表达及其意义

目的 EB病毒与鼻咽癌(特别是低分化鳞癌)密切相关。BARF1基因是EBV裂解期中的早期基因，本研究通过检测BARF1基因在鼻咽癌组织中的表达，希望能进一步揭示EB病毒与鼻咽癌的关系及致癌的可能机制。方法 对经病理确诊的47例鼻咽低分化鳞癌病人分别取癌组织、癌旁组织及相对正常鼻咽黏膜和13例其他头颈部恶性肿瘤癌组织及8例正常人鼻咽黏膜组织(均证实有EB病毒潜伏感染)，采用巢式-PCR技术检测BARF1在这些组织中的表达情况。结果 鼻咽癌组织BARF1基因表达率为91．5％(43／47)，其中39例相对强表达，4例弱表达；癌旁组织BARF1基因表达率为46．8％(22／47)，其中儿例相对强表达，儿例弱表达；相对正常黏膜BARF1基因表达率为6．4％(3／47)，3例均为弱表达；携带EB病毒的其他头颈部恶性肿瘤组织、正常人鼻咽黏膜组织均未检测到：BARY1基因表达。结论 从相对正常鼻咽黏膜到癌旁组织再到鼻咽癌组织BARF1基因的表达趋势为从不表达到表达，从弱表达到强表达。说明EB病毒与鼻咽癌的发生确实存在密切相关性；提示启动BARF1基因的表达有可能是EB病毒致鼻咽癌的重要条件之一。     

蛋白酪氨酸磷酸酶基因启动子过甲基化与喉癌的关系

目的：探讨蛋白酪氨酸磷酸酶（PTEN）基因启动子过甲基化与喉癌的关系。方法：采用过甲基化特异性PCR和RT-PCR法分析喉癌（喉癌组）及正常喉组织（对照组）PTEN基因启动子过甲基化及其mRNA表达情况。结果：喉癌组有16例（40．0％）PTEN基因启动子过甲基化;对照组未发现过甲基化。对照组PTEN基因mRNA的高、中、低表达率及阴性率分别为77．8％（7／9）、22．2％（2／9）、0和0,淋巴结转移组分别为26．7％（4／15）、33．3％（5／15）、26．7％（4／15）和13．3％（2／15）,两组比较,PTEN mRNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）。病理高分化PTEN基因mRNA高、中、低表达率及阴性率分别为60．0％（6／10）、30．0％（3／10）、10．0％（1／10）和0,病理低分化mRNA分别为16．7％（2／12）、25．0％（3／12）、41．7％（5／12）和16．7％（2／12）,两者比较,其mRNA表达差异有统计学意义（P〈O．05）。PTEN基因在喉癌组织中,mRNA呈现低表达的10例中有7例（70．0％）出现启动子过甲基化,mRNA呈现高表达的17例中仅有4例（23．5％）出现启动子过甲基化;PTEN基因mRNA高表达与低表达在启动子过甲基化率的差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：PTEN基因启动子过甲基化是该基因在喉癌中失活的原因之一,PTEN基因表达下降与喉癌淋巴结转移及病理低分化有关。     

bcl-2、P 5 3基因及Epstein-Barr病毒在鼻咽癌中的表达

目的探讨鼻咽癌组织中p53、bcl-2、EBV表达情况及与主要临床指标间关系.方法免疫组化检测p53、bcl-2蛋白,多聚酶链反应(PCR)检测EBV.结果慢性炎性组织中p53、bcl-2及EBV阳性率分别为7.7%、23.1%和7.7%,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(分别为75.9%、88.9%和87.0%)(P<0.01).三者在鼻咽癌组织中共同阳性率为72.2%,p53、bcl-2明显正相关(r＝0.78,P<0.01).鼻咽癌伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.0%)明显高于无颈淋巴结转移组(58.3%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为92.9%、78.9%和100%)均明显高于临床I期(38.5%)(P<0.01),且表达强度有增加的趋势.结论p53、bcl-2及EBV可作为鼻咽癌早期诊断的辅助指标之一,p53阳性的鼻咽癌患者较易发生颈淋巴结转移,随着鼻咽癌病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,三者在鼻咽癌发生发展中起着重要作用.     

鼻咽癌组织中bcl-2基因断裂和bcl-2蛋白表达的检测及意义

为探讨ｂｌｃ－２基因与鼻咽癌发生的关系，采用分子原位杂交和免疫组化技术，检测４１例鼻咽癌组织中ｂｃｌ－２基因的两个断裂热点和蛋白表达。结果：４１例鼻咽癌发生ｂｃｌ－２基因表裂者４例，阳性率为９．８％，３４例出现ｂｃｌ－２蛋白阳性表达，阳性率为８２．９％；鼻咽良性病变阴性。ｂｃｌ－２基因断裂和蛋白表达与鼻咽癌组织学分级间无明显关系；ｂｃｌ－２蛋白表达与ｂｃｌ－２基因断裂间无相对应关系。提示：ｂｃｌ－     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

鼻咽癌组织中PI3Kp85的异常表达

目的 通过检测PI3Kp85在鼻咽癌组织及鼻咽部慢性炎症组织中的表达情况,探讨它们在鼻咽癌发生、发展过程中的作用。方法 采用免疫组织化学SP法检测PI3Kp85在57例鼻咽癌和20例鼻咽部黏膜慢性炎症组织中的表达情况,应用Image-ProPlus图像分析软件测定免疫组化图像的平均光密度（mean optical density, MOD）,运用SPSS13.0软件进行统计学分析,观察其与鼻咽癌临床病理特征之间的关系。结果 PI3Kp85在鼻咽癌组织的阳性表达率为78.95％,而在鼻咽部慢性炎症组织中的阳性表达率为45.00％,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。PI3Kp85表达与临床分期、淋巴结转移、原发病灶大小及患者年龄、性别均无相关性（P＞0.05）。结论 PI3Kp85蛋白表达可能与鼻咽癌的发生有关。     

抑癌基因p16,p21及p53在鼻咽癌的表达

目的：观察抑癌基因ｐ１６,ｐ２１及ｐ５３在鼻咽癌（ＮＰＣ）的表达,探讨其与ＮＰＣ的发生发展及预后的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法检测了１１６例ＮＰＣ组织和１５例无瘤鼻咽（ＮＰ）组织的ｐ１６,ｐ２１及ｐ５３基因的表达情况。     

p15和p27蛋白在鼻咽癌中的表达及其相关意义

目的研究周期素依赖激酶蛋白质类p15和p27蛋白在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）组织中的表达,探讨它们之间的关系与NPC生物学行为及预后的相关性。方法应用免疫组织化学EnVision两步法检测43例NPC组织和21例鼻咽黏膜慢性炎症组织,即非癌鼻咽组织（non-tumor nasopharyngeal,NP）中p15和p27表达水平。结果①NPC组织中p15和p27阳性表达率分别为65.1%和69.7%,与NP组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;②p15和p27蛋白在NPC中的表达与NPC临床分期、淋巴结转移、脑神经侵犯及治疗后5年生存率无关（P〉0.05）;③p15、p27阳性表达之间有相关性（P〈0.05）。结论p15蛋白和p27蛋白的表达缺失对NPC的发生起一定作用。     

Ki-67、p53和VEGF在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Ki-67、p53和VEGF在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法选择2015年1月至2020年7月在我院初诊的鼻咽癌患者90例为观察组,选择同期50例在我院就诊的鼻咽黏膜慢性炎症患者为对照组。通过免疫组化检测两组鼻咽组织中Ki-67、p53和VEGF的表达,并探讨三个免疫组化指标与临床病理特征之间的关系。结果(1)鼻咽癌组织中Ki-67、p53、VEGF阳性表达均明显高于鼻咽部炎症组(P<0.05)。(2)鼻咽癌组织中Ki-67、p53、VEGF阳性表达与患者的性别、年龄等病理因素没有相关性(P>0.05),与病理分型、颈部淋巴结转移以及临床分期具有密切相关性(P<0.05)。(3)Ki-67、p53、VEGF三者在鼻咽癌组织中的表达相互之间均呈正相关(P<0.05)。结论Ki-67、p53和VEGF与鼻咽癌的发生和发展有密切相关性,三者的检测对鼻咽癌的诊断及治疗具有重要的参考价值。     

Bcl—2,Bax蛋白产物在鼻咽癌中的表达,分布及意义

目的：探讨Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白产物在鼻咽癌组织中的表达情况。方法：应用免疫组化技术Ｓ－Ｐ法,对４２例ＮＰＣ和１０例正常鼻咽粘膜组织标本,进行了调亡相关基因Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白产物检测。结果：（１）在正常鼻咽粘膜中,Ｂｃｌ－２蛋白主要分布在基底层细胞,而Ｂａｘ蛋白分布在基底层以上细胞;（２）在ＮＰＣ组织中,Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白产物表达阳性率为８５．７％和８３％,且Ｂｃｌ－２蛋白表达与ＢＰＣ颈淋     

EB病毒LMP2A在鼻咽癌患者肿瘤组织中的表达及意义

目的：观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2A(LMP2A)在鼻咽癌(NPC)患者肿瘤组织中的表达,探讨采用LMP2A作为靶抗原进行NPC免疫治疗的可行性。方法：采用SP免疫组织化学方法,检测40例NPC组织及38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本LMP2A的表达。结果：40例NPC标本中36例LMP2A表达阳性(90．0％);LMP2A的表达与NPC病理分化程度无明显相关性。38例鼻咽黏膜慢性炎症组织标本中33例LMP2A阴性反应,5例阳性反应。鼻咽黏膜慢性炎组织与NPC组织中LMP2A阳性表达率间差异存在统计学意义。结论：在不同病理分化程度的NPC肿瘤组织中LMP2A均可广泛表达,在正常鼻咽组织细胞中基本不表达。采用LMP2A作为靶抗原诱导机体特异性细胞免疫反应杀伤NPC肿瘤细胞具一定可行性。     

增殖细胞核抗原和p53基因在鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的:通过免疫组织化学方法检测鼻咽癌(NPC)患者增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因表达,分析其与主要临床指标间的关系。方法:免疫组织化学检测鼻咽活检组织中PCNA、p53蛋白表达,并比较与分析两者和NPC临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中p53阳性率为9.5%,明显低于NPC组织中的阳性率(76.3%)(P<0.01)。NPC伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.9%)明显高于无颈淋巴结转移组(57.7%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为93.3%、80.0%和100.0%)均明显高于临床Ⅰ期(40.0%)(均P<0.01),且表达强度有增加的趋势。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,NPC伴颈淋巴结转移组中PCNAPI之Ⅰ级所占比例较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义,NPC组织中PCNA表达与p53表达显著相关(P<0.01)。结论:p53蛋白可作为NPC较好的肿瘤标记物,p53阳性的NPC患者较易发生颈淋巴结转移,随着NPC病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,PCNAPI可反映NPC的增殖状况,可能与预后相关。